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环戊酮和环己酮的微生物降解途径、相关酶和基因研究进展 被引量:12
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作者 姚燕来 闵航 吕振华 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期445-448,共4页
简略介绍了环戊酮和环己酮的应用及危害,综述了目前国内外在环戊酮和环己酮微生物降解方面的研究进展.具体介绍了环戊酮和环己酮降解代谢的过程及其相关的酶类和编码这些酶的基因,重点阐述了环戊酮1,2-单加氧酶和环己酮1,2-单加氧酶及... 简略介绍了环戊酮和环己酮的应用及危害,综述了目前国内外在环戊酮和环己酮微生物降解方面的研究进展.具体介绍了环戊酮和环己酮降解代谢的过程及其相关的酶类和编码这些酶的基因,重点阐述了环戊酮1,2-单加氧酶和环己酮1,2-单加氧酶及其编码基因. 展开更多
关键词 环戊酮 环己酮 微生物降解 1 2-单加氧酶
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硫化物的生物氧化成手性亚砜 被引量:7
2
作者 姜标 黄浩 +1 位作者 罗军 李祖义 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1542-1547,共6页
描述了硫化物不对称生物氧化成手性亚砜,主要为氯过氧化物酶、环己酮单氧酶催化有机硫化物氧化成具有光学活性的亚砜的两条酶促反应途径.
关键词 硫氧化物 氯过氧化物酶 环己酮单氧酶
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Baeyer-Villiger单加氧酶非保守Hinge影响酶的催化活性和立体选择性 被引量:1
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作者 梁秋玲 吴胜 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期361-374,共14页
Baeyer-Villiger单加氧酶是一种重要的生物催化剂,可用于合成一系列有价值的酯和内酯化合物。通过序列比对和晶体结构分析推测连接NADPH结构域和FAD结构域的一段非保守Hinge可能在酶对底物识别和催化氧化过程中扮演着重要角色。在以环... Baeyer-Villiger单加氧酶是一种重要的生物催化剂,可用于合成一系列有价值的酯和内酯化合物。通过序列比对和晶体结构分析推测连接NADPH结构域和FAD结构域的一段非保守Hinge可能在酶对底物识别和催化氧化过程中扮演着重要角色。在以环己酮单加氧酶为模型的研究中发现,对该Hinge结构进行同源序列替换得到的突变体几乎完全丧失了催化活性,证明了其整体水平的重要性。丙氨酸扫描突变揭示其中一些位点对酶的功能有显著影响:K153位点的改变使酶的活性下降,立体选择性却更优化;L143位点的改变对酶的活性影响较小,却降低了立体选择性;L144位点的改变则同时大幅度削弱酶的活性和立体选择性。将同样的方法运用在苯丙酮单加氧酶中,我们得到了相似的结论,证明这些位点的重要功能在Baeyer-Villiger单加氧酶家族中有一定的普遍性。这一研究增进了对Baeyer-Villiger单加氧酶的结构与功能关系的认识,有助于底物结合口袋的精确描述和Baeyer-Villiger单加氧酶催化图景的进一步细化,对未来相关的理性设计和定向改造研究提供了借鉴。 展开更多
关键词 Baeyer-Villiger单加氧酶 环己酮单加氧酶 同源替换 丙氨酸扫描突变
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赤红球菌JDM312株环己酮单加氧酶基因的克隆和序列分析 被引量:1
4
作者 彭哲慧 许大奎 +1 位作者 王静芳 吾鲁木汗.那孜尔别克 《吉首大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第3期82-85,共4页
应用PCR从赤红球菌JDM312株基因组DNA中扩增出chnB基因序列,构建pUC18-chnB重组质粒,转化大肠杆菌DH5α,并对插入片段进行测序,用Clustal X和Mega 3.1软件对测定DNA序列进行相似性和系统发育分析.结果显示:扩增得到的chnB基因大小为1 62... 应用PCR从赤红球菌JDM312株基因组DNA中扩增出chnB基因序列,构建pUC18-chnB重组质粒,转化大肠杆菌DH5α,并对插入片段进行测序,用Clustal X和Mega 3.1软件对测定DNA序列进行相似性和系统发育分析.结果显示:扩增得到的chnB基因大小为1 623 bp,编码由542个氨基酸残基构成的多肽,与已报道不同细菌属菌种chnB基因核苷酸序列的相似性为85%~98%,其中与红球菌Phi2株的亲缘关系最近. 展开更多
关键词 赤红球菌 环己酮降单加氧酶 克隆 序列分析
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环己酮单加氧酶的克隆表达及酶学性质分析 被引量:1
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作者 翟晓红 陈振明 《杭州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第5期397-402,共6页
为研究鞘氨醇杆菌中环己酮单加氧酶的催化特性,从N.aromaticivorans DSM 12444基因组DNA克隆表达了一个编码环己酮单加氧酶的基因chmo,并分析了该基因产物的酶学性质.该基因全长1650bp,编码550个氨基酸,理论分子量为61.6kDa.将携带此基... 为研究鞘氨醇杆菌中环己酮单加氧酶的催化特性,从N.aromaticivorans DSM 12444基因组DNA克隆表达了一个编码环己酮单加氧酶的基因chmo,并分析了该基因产物的酶学性质.该基因全长1650bp,编码550个氨基酸,理论分子量为61.6kDa.将携带此基因的重组质粒pET28a-chmo转入E.coli BL21(DE3)后,获得了62kDa左右的表达产物.重组环己酮单加氧酶(CHMO)能氧化芳香族硫醚及其衍生物、链式硫醚、其他硫醚和酮类等底物,以2-氯乙基苯基硫醚为底物时活力最高(25.65U/mg).CHMO最适反应温度和pH分别为55℃和8.87,倾向于利用NADPH作辅酶.上述结果表明,重组CHMO是一个新型的环己酮单加氧酶,推测其与硫醚及酮类物质的氧化降解有关. 展开更多
关键词 环己酮单加氧酶 鞘氨醇杆菌 优化表达 酶学性质
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环己胺的微生物代谢及相关氧化酶的研究进展
6
作者 李存治 高俊宏 +3 位作者 刘志永 王鸿 范小琳 闫达中 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2017年第6期560-563,共4页
环己胺氧化酶属于一种胺氧化酶,目前仅对动植物体内的胺氧化酶进行了系统研究,但对于不同微生物来源的环己胺氧化酶了解不够广泛。在微生物代谢途径中,参与上游代谢的基因具有丰富的多样性,而参与下游代谢途径的基因模块在不同的微生物... 环己胺氧化酶属于一种胺氧化酶,目前仅对动植物体内的胺氧化酶进行了系统研究,但对于不同微生物来源的环己胺氧化酶了解不够广泛。在微生物代谢途径中,参与上游代谢的基因具有丰富的多样性,而参与下游代谢途径的基因模块在不同的微生物中相对保守。因此,研究微生物代谢环己胺的关键是探讨催化环己胺生成环己酮的环己胺氧化酶的催化机制。该文综述了目前国内外微生物降解环己胺的研究进展,介绍了环己酮单加氧酶和环己胺氧化酶在有机胺的微生物代谢途径研究中的作用,并对其潜在应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 环己胺 环己胺氧化酶 BREVIBACTERIUM oxydans IH-35A PSEUDOMONAS plecoglossicida NyZ12 环己酮单加氧酶
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赤红球菌JDM312环己酮单加氧酶的原核表达及检测
7
作者 彭哲慧 龚凤娟 +1 位作者 刘丹丹 吾鲁木汗.那孜尔别克 《吉首大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第4期88-91,共4页
通过酶切法从重组质粒pUC18-chnB中得到编码环己酮单加氧酶的chnB基因序列,将其定向插入原核表达载体pQE30中,构建重组质粒pQE30-chnB,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达目的蛋白,用SDS-PAGE电泳检测表达产物.测序结果表明chnB基因大小为1... 通过酶切法从重组质粒pUC18-chnB中得到编码环己酮单加氧酶的chnB基因序列,将其定向插入原核表达载体pQE30中,构建重组质粒pQE30-chnB,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达目的蛋白,用SDS-PAGE电泳检测表达产物.测序结果表明chnB基因大小为1 623bp,编码由540个氨基酸残基构成的多肽.SDS-PAGE结果显示,表达分子量约为60kDa的带有6×His标签的环己酮单加氧酶,与预期分子量相符,表明成功构建出原核表达质粒并实现了目的蛋白表达,为进一步开展环己酮单加氧酶活性研究奠定了基础. 展开更多
关键词 赤红球菌 环己酮单加氧酶 chnB基因 原核表达
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