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cry3A和vhb基因在转基因马铃薯中的表达 被引量:16
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作者 周壮志 周永刚 +2 位作者 何朝族 莽克强 田颖川 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期741-745,共5页
分别构建了含cry3A和cry3A +vhb基因的植物表达载体 pBCry3A和pBC3 Vhb,并通过根癌农杆菌介导转化了马铃薯 .对转化再生植株进行PCR和DNA印迹分析表明 ,外源基因已整合到马铃薯基因组中 ,且连续三代无性繁殖后转基因仍存在 .ELISA分析表... 分别构建了含cry3A和cry3A +vhb基因的植物表达载体 pBCry3A和pBC3 Vhb,并通过根癌农杆菌介导转化了马铃薯 .对转化再生植株进行PCR和DNA印迹分析表明 ,外源基因已整合到马铃薯基因组中 ,且连续三代无性繁殖后转基因仍存在 .ELISA分析表明cry3A基因在转基因植株中得到了高效表达 ,在单转cry3A植株中最高表达量达0 1% ,转cry3A与vhb双基因株系中为 0 0 6 5 % .水涝试验显示 ,转双基因且vhbmRNA的RT PCR呈阳性的马铃薯植株 ,对低氧胁迫有较好的耐受性 。 展开更多
关键词 cry3A VHB 基因 转基因技术 马铃薯 表达 抗性
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抗光肩星天牛苏云金芽胞杆菌Bt886菌株的分离及对毒蛋白编码基因的初步鉴定 被引量:9
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作者 陈军 杜孟芳 +2 位作者 尹新明 王学聘 卢孟柱 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期138-142,共5页
从拟谷盗虫尸中分离到一株对鞘翅目害虫光肩星天牛幼虫毒杀作用明显的Bt菌株Bt886。幼虫死亡率高达 6 0 % ,存活者生长明显受到抑制。经过晶体形态特征和杀虫谱分析 ,初步确认该菌株属于cry3类。比较cry3类基因的保守序列 ,利用一对cry... 从拟谷盗虫尸中分离到一株对鞘翅目害虫光肩星天牛幼虫毒杀作用明显的Bt菌株Bt886。幼虫死亡率高达 6 0 % ,存活者生长明显受到抑制。经过晶体形态特征和杀虫谱分析 ,初步确认该菌株属于cry3类。比较cry3类基因的保守序列 ,利用一对cry3特异引物成功地从Bt886菌株中克隆到了一段基因片段并克隆至pGEM -T载体上。测序分析发现该片段与cry3Aa1基因具有很高的同源性 ,确定来自毒蛋白编码基因。Southern杂交分析表明该基因位于该菌株的质粒上。 展开更多
关键词 光肩星天牛 苏云金芽胞杆菌 Bt886菌株 分离 毒蛋白编码基因 cry3基因 林木蛀干害虫 微生物杀虫剂
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3个抗虫耐盐基因载体对烟草的遗传转化及表达分析 被引量:4
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作者 肖丹丹 张旭 +5 位作者 任亚超 王桂英 左力辉 董研 杨敏生 王进茂 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期166-173,共8页
病虫害和土壤盐渍化是影响烟草生长发育的重要因素,转基因技术已成为改善这一现状的有效手段。本研究将部分改造的Bt基因Cry1Ac基因、Cry3A基因及NTHK1基因构建在同一载体上,利用农杆菌介导法转化野生烟草植株。经PCR检测,获得10个转基... 病虫害和土壤盐渍化是影响烟草生长发育的重要因素,转基因技术已成为改善这一现状的有效手段。本研究将部分改造的Bt基因Cry1Ac基因、Cry3A基因及NTHK1基因构建在同一载体上,利用农杆菌介导法转化野生烟草植株。经PCR检测,获得10个转基因株系。经荧光定量PCR检测,Cry1Ac基因表达量在104~10~5数量级,1号转录丰度1.58×10~5为最高,而Cry3A基因表达量在10~5~10~6数量级,10号转录丰度1.34×10~6为最高;10个转基因株系双Bt基因均得到表达且存在表达差异,而对照烟草没有Bt基因表达。经ELISA检测,转基因烟草Cry1Ac蛋白平均表达量为150.441 ng/g,变化在0.86~201.74 ng/g;Cry3A蛋白平均表达量为1 192.592 ng/g,变化在23.33~2413.47 ng/g。经过对烟草斜纹夜蛾的虫试,初步证明转基因植株获得了抗虫性。组培苗耐盐试验表明,不同盐浓度条件下,转基因株系的分化状况优于对照。证明抗虫耐盐多基因的一次性转化,可提高烟草的抗虫能力和耐盐性。 展开更多
关键词 烟草 cry1AC基因 cry3A基因 NTHK1基因 多基因表达
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Bt杀虫基因在桑粒肩天牛幼虫肠道内生优势菌中的转化研究 被引量:5
4
作者 何伟 王中康 +3 位作者 陈金华 李强 曹月青 殷幼平 《氨基酸和生物资源》 CAS 2008年第3期5-10,共6页
桑粒肩天牛(Apriona germariHope,Ag)幼虫是一种营钻蛀性生活的重要林业害虫,通过传统纯培养、生理生化鉴定和16SrDNA分子生物学分析等方法分离、鉴定出其肠道优势内生菌溶血葡萄球菌(Staphylococcus haem olyticus,S.haem olytic-us)A... 桑粒肩天牛(Apriona germariHope,Ag)幼虫是一种营钻蛀性生活的重要林业害虫,通过传统纯培养、生理生化鉴定和16SrDNA分子生物学分析等方法分离、鉴定出其肠道优势内生菌溶血葡萄球菌(Staphylococcus haem olyticus,S.haem olytic-us)Ag06菌株和人葡萄球菌(Staphylococcus hom is)Ag08菌株。从中筛选菌株S.haem olyticusAg06进行质粒消除后作为出发菌株,利用电转化技术将含有对鞘翅目昆虫具专一性毒力B t杀虫基因cry3A的Escherichia coli-Bacillus thuringiensis穿梭表达质粒pHT305 a和pHT7911分别转入其中。经质粒稳定性试验、转化子生长特性测试等分析,结果显示cry3A基因已经成功转入Ag幼虫的优势内生菌溶血葡萄球菌中。 展开更多
关键词 桑粒肩天牛幼虫 肠道内生优势菌 BT杀虫基因 cry3A 转化
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Obtaining High Pest_resistant Transgenic Upland Cotton Cultivars Carrying cry1Ac3 Gene Driven by Chimeric OM Promoter 被引量:5
5
作者 陈宛新 肖桂芳 朱祯 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第8期963-970,共8页
Hypocotyl segments from aseptic seedlings of two important cultivars of upland cotton ( Gossypium hirsutum L.) in Northwest China, 'Xinluzao_1', 'Jinmian_7', 'Jinmian_12' and 'Jihe_321&#... Hypocotyl segments from aseptic seedlings of two important cultivars of upland cotton ( Gossypium hirsutum L.) in Northwest China, 'Xinluzao_1', 'Jinmian_7', 'Jinmian_12' and 'Jihe_321' were transformed respectively by two efficient plant expression plasmids pBinMoBc and pBinoBc via Agrobacterium tumefaciens . In pBinMoBc, cry 1Ac3 gene, which encodes the Bt toxin, is under the control of chimeric OM promoter. In pBinoBc, it is under control of CaMV 35S promoter. After co_cultivation with Agrobacterium tumefimpfaciens LBA4404 (containing pBinMoBc or pBinoBc), kanamycin_resistant selection, somatic embryos were induced and regenerated plants were obtained. Then the regenerated plantlets were grafted to untransformed stocks in greenhouse to produce descendants. The integration of cry 1Ac3 gene and its expression in T 2 generation of transgenic cotton plants were confirmed by Southern hybridization and Western blotting. The analyses of insect bioassay indicated that the transgenic plants of both constructions have significant resistance to the larvae of cotton bollworm ( Heliothis armigera ) and that cry 1Ac3 gene driven by chimeric OM promoter could endue T 2 generation cotton with high pest_resistant ability, implicating that it has a profound application in genetic engineering to breed new pest_resistant cotton varieties. 展开更多
关键词 upland cotton insect_resistant cotton transgenic plant Agrobacterium tumefaciens cry 1Ac3 gene chimeric promoter
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苏云金芽孢杆菌新疆分离株cry3基因的克隆和序列分析 被引量:2
6
作者 顾爱星 张桦 +4 位作者 张翠芳 张璐 高微 颜君 艾山江.艾则孜 《新疆农业大学学报》 CAS 北大核心 2011年第2期156-160,共5页
从新疆天山北坡土壤及昆虫上分离到的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株对鞘翅目害虫具有高毒力,其总DNA约为15 kb,以此为模板,并设计特异引物,扩增出800 bp和550 bp DNA片段,将回收的片段与pBS-T质粒连接,转化大肠杆菌... 从新疆天山北坡土壤及昆虫上分离到的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株对鞘翅目害虫具有高毒力,其总DNA约为15 kb,以此为模板,并设计特异引物,扩增出800 bp和550 bp DNA片段,将回收的片段与pBS-T质粒连接,转化大肠杆菌(Escherichia coli),用蓝白斑法筛选,将阳性克隆子(1号-5,700 bp左右、G4号-3,500 bp左右、G4号-4,720 bp左右)测序,与GenBank中已知的序列进行比对,结果表明1号-5与cry3基因家族的杀虫蛋白基因序列同源性可达84%~100%。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 cry3基因 转化 序列分析
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转化cry3A基因对苏云金芽孢杆菌YBT-803-1生长特性的影响 被引量:2
7
作者 乐超银 邵伟 +1 位作者 徐世谨 喻子牛 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期6-7,25,共3页
将携带基因cry3A的质粒通过电脉冲法转入苏云金芽孢杆菌野生菌株YBT 80 3 1后 ,对该菌的生长产生了一定的影响。结果表明 ,转入cry3A基因后 ,转化子BMBY 0 0 3的生长速度与出发菌株YBT 80 3 1相比虽无明显变化 ,但产生杀虫晶体蛋白的时... 将携带基因cry3A的质粒通过电脉冲法转入苏云金芽孢杆菌野生菌株YBT 80 3 1后 ,对该菌的生长产生了一定的影响。结果表明 ,转入cry3A基因后 ,转化子BMBY 0 0 3的生长速度与出发菌株YBT 80 3 1相比虽无明显变化 ,但产生杀虫晶体蛋白的时间较出发菌株延迟 6~ 8h ,且最适温度提高为 33℃ ,而对葡萄糖等 14种碳源和谷氨酸等 12种氮源的利用能力与出发菌株无明显差异。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 基因cry3A 转化子 生长特性
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转双Bt基因欧洲黑杨毒蛋白季节变化及抗虫性分析
8
作者 张骐 王进茂 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2021年第4期27-33,共7页
利用美国白蛾和柳蓝叶甲对转Cry1Ac-Cry3A-BADH-MtlD基因欧洲黑杨进行抗虫性筛选,对筛选出具有双高抗虫性的5个转基因株系进行外源基因PCR检测,利用酶联免疫吸附法(ELISA)对5个转基因株系叶片Bt毒蛋白含量进行检测,分析5个转基因株系叶... 利用美国白蛾和柳蓝叶甲对转Cry1Ac-Cry3A-BADH-MtlD基因欧洲黑杨进行抗虫性筛选,对筛选出具有双高抗虫性的5个转基因株系进行外源基因PCR检测,利用酶联免疫吸附法(ELISA)对5个转基因株系叶片Bt毒蛋白含量进行检测,分析5个转基因株系叶片中2个Bt基因在生长季节不同时期的表达情况,对其差异进行分析;检测转基因株系对不同虫龄美国白蛾和柳蓝叶甲的抗性。结果表明:(1)初步筛选出5个高抗虫性的转基因株系1号、7号、9号、11号和12号,其对美国白蛾和柳蓝叶甲1龄幼虫致死率均超过90%以上;(2)PCR检测结果表明5个转基因株系叶片中均检测Cry1Ac-Cry3A基因条带,而对照则未检测到,证明外源基因均已插入到受体杨树基因组中;(3)转基因株系均检测到Bt毒蛋白,而对照则未检测出。从6月至10月,转基因株系叶片中Cry1Ac毒蛋白的表达量总体呈上升趋势,但在6月、7月略有下降;Cry3A毒蛋白的表达量从6月至10月总体呈下降趋势;(4)美国白蛾和柳蓝叶甲随虫龄的增大致死率呈下降趋势,不同转基因株系间抗虫性存在显著差异。 展开更多
关键词 欧洲黑杨 抗虫性筛选 cry1AC基因 cry3A基因
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抗虫转基因银河杨的生长特性和抗虫性 被引量:1
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作者 陈虞超 张丽 +3 位作者 巩檑 甘晓燕 石磊 宋玉霞 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期138-141,共4页
以非转基因银河杨(Populus alba×Populus hopeiensis)为对照,对抗虫转基因银河杨抗虫基因Cry3A的稳定性,转基因银河杨的物候期、生长状况和抗虫性进行研究。结果发现,Cry3A基因整合稳定,在根、茎、叶中RNA和蛋白水平均有表达,不同... 以非转基因银河杨(Populus alba×Populus hopeiensis)为对照,对抗虫转基因银河杨抗虫基因Cry3A的稳定性,转基因银河杨的物候期、生长状况和抗虫性进行研究。结果发现,Cry3A基因整合稳定,在根、茎、叶中RNA和蛋白水平均有表达,不同组织中Bt蛋白水平差异显著,茎中Bt蛋白水平最高。抗虫转基因银河杨的物候期、生长状况未发生显著变化,但表现出显著的抗虫性。 展开更多
关键词 抗虫转基因银河杨 cry3A基因 物候期 生长状况 抗虫性
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Transgenic Date Palm Containing Endotoxin Cry3Aa Gene
10
作者 Awatef Mahmoud Badr-Elden Ibrahim Abd El-Maksoud Ibrahim +3 位作者 Hamdy Ahmed Emaral Mahdia Farid Gabr Ahmed Abbas Nower Tamer Mahfouz Abd Elaziem 《Journal of Agricultural Science and Technology(A)》 2017年第4期246-257,共12页
Date palm, like all other crops, is very sensitive to the injury by many insect pests, which may lead to the death of the affected plant and causes decrease in yield. In the present study, an efficient Agrobacterium f... Date palm, like all other crops, is very sensitive to the injury by many insect pests, which may lead to the death of the affected plant and causes decrease in yield. In the present study, an efficient Agrobacterium for genetic transformation was successfully achieved for well known date palm (Phoenix dactylifera L.) cv. Medjool and Khalas using callus as explant. Embryogenic callus were recorded 100% mortality when cultured on MS medium containing 100 mg/L kanamycin with different cultivars, thus it was chosen for the selection of transformed explants. Embryogenic callus of Medjool and Khalas were incubated with Agrobacterium tumefaciens strain LBA 4404 for 0.5, 1, 2, 4 and 24 h on LB medium. After the incubation periods, embryogenic callus was transferred to MS medium with 0.1 mg/L NAA, 0.05 mg/L BA, 250 mg/L carbenicillin and 100 mg/L kanamycin for detection of transgenic embryogenic callus. Polymerase chain reaction (PCR) was used for the rapid screening of Cry3Aa gene. For screening, total genomic DNA was isolated from transformants. Using primer specific to Cry3Aa gene (forward and reverse), a PCR product with a size of about 2,000 bp was amplified when all nucleic acid from the transformants were utilized as templates. PCR analysis confirmed the appearance of the transgene of 2,000 bp in one individual plantlet. Presence and integration of foreign Cry3Aa gene in regenerated kanamycin resistant embryogenic callus was also confirmed by Southern blot hybridization. It was found that one transgenic embryogenic callus for both Medjool and Khalas showed a single copy of gene integration. These results signify the successful transfer of Cry3Aa gene into date palm plant. 展开更多
关键词 Date palm Agrobacterium tumefaciens cry3Aa gene Southern blot analysis transformation.
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对鞘翅目害虫高毒力Bt基因cry3Aa7的分离克隆及表达研究 被引量:25
11
作者 张杰 宋福平 +3 位作者 李长友 陈中义 檀建新 黄大昉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期650-653,共4页
从国内分离的对鞘翅目叶甲科害虫高毒力的Bt菌株中克隆了 3.0kbcry3Aa基因大片段 ,完成了该片段的亚克隆和全序列测定。该基因编码区为 1932bps,编码的蛋白质由 6 4 4个氨基酸残基组成 ,分子量 73.1ku ,等电点为 pH5 .16 5 ,为弱酸性蛋... 从国内分离的对鞘翅目叶甲科害虫高毒力的Bt菌株中克隆了 3.0kbcry3Aa基因大片段 ,完成了该片段的亚克隆和全序列测定。该基因编码区为 1932bps,编码的蛋白质由 6 4 4个氨基酸残基组成 ,分子量 73.1ku ,等电点为 pH5 .16 5 ,为弱酸性蛋白。该蛋白中Ser、Leu、Thr含量最高 ,分别为 8.2 2 %、8.0 7%和 7.76 %。通过穿梭载体将该基因导入Bt无晶体突变株中 ,获得工程菌Biot2 0 5。cry3Aa7基因在其中能正常表达 ,并形成扁方形晶体。工程菌Biot2 0 5对榆蓝叶甲 (Pyrrhaltaaenescens)校正死亡率为 86 .2 1%。该基因序列已在EMBL、GenBank中登记 ,并被国际Bt δ 内毒素基因命名委员会正式命名为cry3Aa7。 展开更多
关键词 鞘翅目害虫 高毒力Bt基因 cry3Aα7 分离 克隆 表达 杀虫活性
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苏云金芽孢杆菌沉默基因cry2Ab3在大肠杆菌中表达及杀虫活性研究 被引量:10
12
作者 陈中义 李长友 +2 位作者 刘加宝 张杰 黄大昉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期561-566,共6页
对苏云金芽孢杆菌C0 0 2菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT3 1 5 2Ab进行亚克隆和序列测定 ,在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3。序列分析表明该基因含有芽孢杆菌特异的RBS序列 ,但没有功能性启动子 ,为沉默基因。... 对苏云金芽孢杆菌C0 0 2菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT3 1 5 2Ab进行亚克隆和序列测定 ,在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3。序列分析表明该基因含有芽孢杆菌特异的RBS序列 ,但没有功能性启动子 ,为沉默基因。根据大肠杆菌T7表达载体pET 2 1b克隆位点和cry2Ab3开放阅读框架 (ORF)两端序列 ,设计合成一对特异引物L2ab5和L2ab3 ,高保真PCR扩增获得cry2Ab3完整ORF ,经酶切、连接构建了重组表达质粒pET 2Ab3。表达质粒导入大肠杆菌BL2 1 (DE3 ) ,IPTG诱导后 ,SDS PAGE电泳证实了cry2Ab3的表达。生物测定显示诱导培养物对棉铃虫初孵幼虫和小菜蛾二龄幼虫具有杀虫活性 ,能明显抑制二化螟二龄幼虫生长 ,但对甜菜夜蛾和玉米螟没有明显活性。进一步提取Cry2Ab3蛋白 ,生测结果表明其对棉铃虫LC50 为 3 2 5 5 μg g。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 沉默基因 cry2Ab3 大肠杆菌 表达 杀虫活性
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转cry1Ac+cry2Ab基因棉与转cry1Ac+EPSPS基因棉荒地的生存竞争能力 被引量:10
13
作者 张兴华 田绍仁 +2 位作者 张天玉 李捷 乔艳艳 《生物安全学报》 2012年第2期119-124,共6页
【背景】此研究为"十二五"转基因生物新品种培育国家项目中创建新的转基因棉花品种环境安全评价技术而设。【方法】以转双价双Bt抗虫基因(cry1Ac+cry2Ab)棉和转双价抗虫、抗除草剂基因(cry1Ac+EPSPS)棉为观察品种,非转基因棉... 【背景】此研究为"十二五"转基因生物新品种培育国家项目中创建新的转基因棉花品种环境安全评价技术而设。【方法】以转双价双Bt抗虫基因(cry1Ac+cry2Ab)棉和转双价抗虫、抗除草剂基因(cry1Ac+EPSPS)棉为观察品种,非转基因棉赣棉11号为对照品种,在荒地用撒播和3cm深度播种2种方式,于2011年5月~2012年3月对棉花出苗率、株高、生育进程、棉吐絮瓣数、絮瓣脱落率、自生苗等生存竞争能力进行比较,检测、评价其杂草化的风险,并探讨、验证检测技术的可行性。【结果】在荒地条件下,以2种方式播种的转cry1Ac+cry2Ab基因棉和转cry1Ac+EPSPS基因棉与非转基因棉相比,上述各项指标的竞争能力总体上未表现显著优势。【结论与意义】转cry1Ac+cry2Ab基因棉和转cry1Ac+EPSPS基因棉在荒地条件下生长无杂草化风险。同时,研究证明,在荒地自然生态条件下,可以采用撒播和3cm深度播种方法检测新的转基因棉花品种在生存竞争能力上的杂草化风险,在测评上有互为参照效应,为定性评价新的转基因棉花品种的杂草化风险提供了保障。 展开更多
关键词 双价双Bt抗虫基因棉 cry1Ac+cry2Ab基因 双价抗虫 抗除草剂基因棉 5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因 生存竞争能力 杂草化风险
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741杨双Bt基因的遗传转化及转基因株系的抗虫性 被引量:8
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作者 王桂英 杨敏生 +2 位作者 霍雪梅 王艳平 李珊珊 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期42-49,共8页
以含有Cry3Aa基因的重组质粒pBCC3为基础,利用PCR和DNA重组技术,从pBCC3中克隆出抗虫基因Cry3Aa,将其正向插入载体pCAMBIA1305的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成pCAMBIA1305-Cry3Aa植物表达载体,并导入根癌农杆菌EHA105。采用农杆... 以含有Cry3Aa基因的重组质粒pBCC3为基础,利用PCR和DNA重组技术,从pBCC3中克隆出抗虫基因Cry3Aa,将其正向插入载体pCAMBIA1305的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成pCAMBIA1305-Cry3Aa植物表达载体,并导入根癌农杆菌EHA105。采用农杆菌介导的遗传转化法,将Cry3Aa基因转入已转Cry1Ac+API基因的741毛白杨无性系pB29中,获得转双Bt基因的741杨。在含潮霉素的培养基中进行多次继代筛选,获得抗性稳定的无性系9个,编号为pCCA1—pCCA9。采用特异引物分别对转基因植株进行PCR检测,结果显示Cry1Ac基因稳定存在于pB29中,Cry3Aa基因已整合到各无性系的基因组DNA中。ELISA毒蛋白检测,转基因株系都有Cry1Ac和Cry3Aa杀虫蛋白表达。用转基因植株叶片进行柳蓝叶甲(鞘翅目)和美国白蛾(鳞翅目)室内饲虫试验结果表明,转基因植株具有双抗性。根据对测试昆虫的致死率划分高中低3个抗性水平,其中pCCA2,pCCA5,pCCA6,pCCA9具有双高抗;pCCA3,pCCA4和pCCA7对柳蓝叶甲表现出中、低抗性,对美国白蛾则高抗;而pCCA1表现对美国白蛾的极低抗性,对柳蓝叶甲则高抗。 展开更多
关键词 载体构建 cry1AC基因 cry3Aa基因 双Bt741杨 抗虫性
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转cry1Ab/vip3H基因水稻对非靶标害虫褐飞虱连续多代生长发育与繁殖的影响 被引量:10
15
作者 陈洋 田俊策 +2 位作者 彭于发 郭予元 叶恭银 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期490-497,共8页
实验室条件下,转cry1Ab/vip3H基因水稻G6H1对褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育与繁殖的继代效应评价结果表明,不论是在苗期或是成株期,在各水稻品种上连续饲喂褐飞虱4代后,该虫各代的生长发育和繁殖参数都没有受到水稻品种的显著影响,... 实验室条件下,转cry1Ab/vip3H基因水稻G6H1对褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育与繁殖的继代效应评价结果表明,不论是在苗期或是成株期,在各水稻品种上连续饲喂褐飞虱4代后,该虫各代的生长发育和繁殖参数都没有受到水稻品种的显著影响,即不论是在第1代、第2代还是第4代,取食G6H1与取食其非转基因亲本Xiushui 110相比,褐飞虱若虫的发育时间、成虫寿命和产卵量都没有显著差异。同时,2008年和2009年的田间调查结果表明,G6H1和Xiushui 110稻田间褐飞虱的若虫、成虫和成若虫总密度均无显著差异。 展开更多
关键词 cry1Ab/vip3H基因 转基因水稻 褐飞虱 安全性评价
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转cry2Ab4和vip3Aa11基因烟草对小地老虎杀虫效果研究 被引量:8
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作者 高川 郎志宏 +4 位作者 朱莉 宋福平 张永军 张杰 黄大昉 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期42-48,共7页
小地老虎严重危害农业生产,通过转基因技术提高作物对小地老虎的杀虫效果是一条切实可行的途径。cry2Ab4和vip3Aa11是从苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)中克隆到的两个杀虫基因。分别构建了pCS2Ab和pCSvip3A两种植物表达载体... 小地老虎严重危害农业生产,通过转基因技术提高作物对小地老虎的杀虫效果是一条切实可行的途径。cry2Ab4和vip3Aa11是从苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)中克隆到的两个杀虫基因。分别构建了pCS2Ab和pCSvip3A两种植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草(Nicotiana tabacum L.)NC89,并得到32株和35株阳性转基因植株。通过对其进行RT-PCR分析、Western杂交分子检测证实两种外源基因在烟草植株中可以正常表达。人工饲喂初龄小地老虎幼虫,对两种转基因植株进行生物活性检测,结果显示饲喂转基因叶片的小地老虎幼虫死亡率在82%以上,抗虫能力比对照显著提高,转vip3A植株抗虫效果优于转cry2Ab植株。 展开更多
关键词 cry2Ab基因 vip3Aa基因 转基因烟草 小地老虎
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苏云金芽胞杆菌sigK基因插入失活突变体的特点及其对cry3A基因启动子活性的影响 被引量:3
17
作者 杜立新 魏娟 +4 位作者 韩丽丽 陈榛 张杰 宋福平 黄大昉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1177-1184,共8页
【目的】构建苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)sigK基因插入失活突变体,分析突变体特点并明确其对cry3A基因启动子的影响。【方法】采用同源重组技术在苏云金芽胞杆菌HD-73菌株sigK基因中插入卡那霉素抗性基因,构建了sig... 【目的】构建苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)sigK基因插入失活突变体,分析突变体特点并明确其对cry3A基因启动子的影响。【方法】采用同源重组技术在苏云金芽胞杆菌HD-73菌株sigK基因中插入卡那霉素抗性基因,构建了sigK基因插入失活突变体。通过生长曲线测定、扫描电子显微镜观察晶体、芽胞形成情况和芽胞计数及SDS-PAGE等方法分析了突变体的特点;构建了遗传恢复菌株对上述性状进行了功能验证;利用启动子融合lacZ技术检测了cry3A基因启动子的转录活性。【结果】获得了苏云金芽胞杆菌HD-73菌株sigK基因突变体,生长曲线测定表明,突变体较出发菌株在稳定期后期生长较慢;扫描电子显微镜观察和芽胞计数分析显示,突变体丧失了形成芽胞和晶体的能力;SDS-PAGE分析表明突变体中伴胞晶体蛋白的表达量明显低于出发菌株和恢复菌株。利用载体pHT315携带sigK基因及其启动子在突变株中表达,所获得的遗传恢复菌株恢复了突变株产生芽胞和晶体的能力;sigK基因的突变可以提高cry3A基因启动子在产胞后期的转录活性,对cry3A启动子指导的Cry蛋白表达量没有显著影响。【结论】本研究证明sigK基因为苏云金芽胞杆菌芽胞形成所必需,并影响伴胞晶体蛋白的产量;sigK基因功能的丧失有利于cry3A基因启动子在产胞后期的转录。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 sigK基因突变体 cry3A基因启动子 芽胞形成
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转双价抗虫抗除草剂基因(Cry1Ac+EPSPS)棉与非转基因棉生物学特性差异的研究 被引量:2
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作者 张兴华 田绍仁 +3 位作者 张天玉 李捷 杨兆光 乔艳艳 《江西农业学报》 CAS 2012年第4期12-16,共5页
以双价抗虫抗除草剂基因(Cry1Ac+EPSPS)棉为观察品种,非转基因棉赣棉11号为对照品种,进行了棉花生育性状、产量性状等的比较和评价研究。结果表明:与对照品种相比,双价抗虫抗除草剂基因棉在成铃至吐絮期株高增长显著(超速6.6~9.1 cm);... 以双价抗虫抗除草剂基因(Cry1Ac+EPSPS)棉为观察品种,非转基因棉赣棉11号为对照品种,进行了棉花生育性状、产量性状等的比较和评价研究。结果表明:与对照品种相比,双价抗虫抗除草剂基因棉在成铃至吐絮期株高增长显著(超速6.6~9.1 cm);在盛铃期之前成铃变缓极显著(少10.7个铃);花铃期至盛铃期果枝层生成慢显著(少1层);果枝角度变大极显著(大2.1°);主茎节距拉长极显著(长0.6 cm);叶色加深显著;衣分率降低极显著(低1.7%);籽指升高极显著(高1.77 g);纤维整齐度指数升高显著(高1.325%);纺纱均匀指数增加显著(增7.5);籽棉、皮棉、霜前籽棉、霜前皮棉均减产极显著。初步评价:双价抗虫抗除草剂基因棉的生育性状、产量性状较差,纤维纺纱性状较好,推广种植性较差。 展开更多
关键词 双价抗虫抗除草剂基因棉 苏云金芽孢杆菌cry1Ac基因 5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因 生物学特性
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