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甲壳动物CHH家族神经激素结构和功能研究进展 被引量:16
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作者 王在照 相建海 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期175-180,共6页
关键词 甲壳动物 神经激素 甲壳动物高血糖激素 性腺抑制激素 蜕皮抑制激素 大颚器官抑制激素
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中华绒螯蟹高血糖激素基因的克隆和分子结构解析 被引量:4
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作者 王艳华 张亦陈 +3 位作者 孙妍 刘逸尘 耿绪云 孙金生 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期987-993,共7页
为深入研究中华绒螯蟹高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)基因的结构与功能,首次从中华绒螯蟹眼柄中克隆得到高血糖激素基因的全长cDNA序列(Ers-CHH,GenBank登录号:JX485664)。序列及分子结构分析结果显示:Ers-CHH基因全... 为深入研究中华绒螯蟹高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)基因的结构与功能,首次从中华绒螯蟹眼柄中克隆得到高血糖激素基因的全长cDNA序列(Ers-CHH,GenBank登录号:JX485664)。序列及分子结构分析结果显示:Ers-CHH基因全长585 bp,ORF区为453 bp,编码150个氨基酸,N端30个氨基酸为预测的信号肽区域,其后为42个氨基酸的前体相关肽和78个氨基酸的成熟肽。其成熟肽区具有典型的CHH家族结构域,包括3个二硫键C7-C43、C23-C39、C26-C52和4个α螺旋(alpha-helix),但不具有β折叠结构(beta-sheet)。Ers-CHH成熟肽氨基酸序列与溪蟹相比有92%的相似性;其三维结构与其它物种CHH三维结构比较结果显示,4个α螺旋所处的位置及所含氨基酸的相似性较高。与中华绒螯蟹MIH相比,CHH序列前段缺少一个螺旋,但其4个α螺旋的位置及氨基酸数目与MIH的α2-α5螺旋高度一致,空间结构也基本相同,这可能是两种激素功能部分重叠的分子基础。上述结果为进一步研究CHH在中华绒螯蟹生长发育及能量代谢过程中的调节机制和人工控制甲壳动物生长代谢提供了重要信息。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 高血糖激素 克隆 分子结构
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斑节对虾2种高血糖激素家族基因的基因组序列分析和表达研究 被引量:3
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作者 吴勉之 杨丽诗 +4 位作者 周发林 黄建华 姜松 杨其彬 江世贵 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期27-36,共10页
在斑节对虾(Penaeus monodon)体内新发现了2种高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)家族基因Pm CHH和Pm HHLPP。基因组分析结果显示,其均具有CHH-Ⅰ型基因基本的"信号肽-CPRPKR/ER/RR-成熟肽"结构,且与已报道的C... 在斑节对虾(Penaeus monodon)体内新发现了2种高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)家族基因Pm CHH和Pm HHLPP。基因组分析结果显示,其均具有CHH-Ⅰ型基因基本的"信号肽-CPRPKR/ER/RR-成熟肽"结构,且与已报道的CHHs基因的基因组结构相似;聚类分析结果显示,尽管Pm CHH和Pm HHLPP与多个CHHs基因序列相似性超过50%(最高达99%),但与其聚为一支的基因均不是CHH-Ⅰ型基因;生物信息学分析结果显示,Pm CHH和Pm HHLPP的转录起始位点"A"及其核心启动子区域分别位于开放阅读框(ORF)上游的99 bp和190 bp,同时在预测其空间结构后发现,两者的三维结构中均含有4个α螺旋构型;组织表达结果显示,2个基因均在肠中有较高的表达量,而Pm CHH在鳃、Pm HHLPP在眼柄中表达量也较高,但在肝胰腺和肌肉中表达量较低;幼体发育阶段表达结果显示,2个基因在无节幼体Ⅲ~Ⅳ期、溞状幼体Ⅰ期和糠虾幼体期表达量均有较大波动,与代谢强度呈弱相关关系。根据其一级结构的特征和相关表达情况,可推测Pm CHH和Pm HHLPP均为CHHs家族基因。 展开更多
关键词 斑节对虾 甲壳动物高血糖激素 基因组结构 表达分析 幼体发育
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墨吉明对虾高血糖激素基因FmCHH-I的分子鉴定和表达特征 被引量:2
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作者 雷易果 陈兆明 王伟 《广东海洋大学学报》 CAS 北大核心 2022年第5期38-44,共7页
【目的】研究墨吉明对虾(Fenneropenaeus merguiensis)高血糖激素基因Fm CHH-I的分子特征和表达规律。【方法】根据转录组信息设计特异性引物,克隆FmCHH-I基因序列,并利用生物信息学手段预测其氨基酸和蛋白结构。采用实时荧光定量PCR方... 【目的】研究墨吉明对虾(Fenneropenaeus merguiensis)高血糖激素基因Fm CHH-I的分子特征和表达规律。【方法】根据转录组信息设计特异性引物,克隆FmCHH-I基因序列,并利用生物信息学手段预测其氨基酸和蛋白结构。采用实时荧光定量PCR方法分析该基因在不同组织中和卵巢发育不同时期的表达情况,以及切除单侧眼柄对其表达的影响。【结果与结论】成功克隆墨吉明对虾高血糖激素基因FmCHH-I的序列。该基因cDNA全长599 bp,开放阅读框(ORF)长为369 bp,编码123个氨基酸。蛋白序列的1~20位包含一个信号肽,随后有一段由26个氨基酸组成的前导肽,末端为成熟肽,包含74个氨基酸以及6个半胱氨酸残基。FmCHH-I基因与斑节对虾(Penaeus monodon)CHH-I基因同源性最高(91.53%),与欧洲龙虾(Homarus gammarus)CHH-I基因同源性最低(43.86%)。系统发育分析表明,FmCHH-I与斑节对虾聚在一起,与对虾科物种聚为一支。FmCHH-I在眼柄中的表达量最高,在肝胰腺、肠道中也有表达。FmCHH-I在性腺未发育期和性腺成熟期雌性对虾眼柄中的表达量无显著差异(P>0.05),但切除眼柄后,卵巢中FmCHH-I的表达量显著上调(P<0.01)。 展开更多
关键词 墨吉明对虾 高血糖激素 CHH神经肽 基因表达
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口虾蛄高血糖激素基因全长cDNA的克隆及表达分析 被引量:1
5
作者 刘海映 张秀芹 +6 位作者 隋宥珍 李宏俊 邢坤 姜玉声 杨贵福 陈雷 张娜 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期98-109,共12页
本文首次采用RACE技术获得口虾蛄(Oratosquilla oratoria)眼柄部高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)基因cDNA全长序列,共2 421bp,5′UTR长度为180bp,3′UTR为1 821bp,开放阅读框(ORF)长420bp,编码139个氨基酸。预测蛋白... 本文首次采用RACE技术获得口虾蛄(Oratosquilla oratoria)眼柄部高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)基因cDNA全长序列,共2 421bp,5′UTR长度为180bp,3′UTR为1 821bp,开放阅读框(ORF)长420bp,编码139个氨基酸。预测蛋白二级结构α-螺旋23.74%,延伸链占23.02%,无规则卷曲占53.24%,预测分子量为15.47kD,等电点(pI)为7.049。CHH成熟肽包含6个CHH家族中位置保守的Cys残基,C端为GK,推断为ES型CHH基因。聚类分析表明:口虾蛄CHH和十足目CHH聚为同一个分支的两亚群,具有较近的亲缘关系。荧光定量PCR分析结果表明,CHH基因在肠中表达量最高,在眼柄、触角中有较高的表达量,在肌肉中表达量相对较低,在卵巢中表达最低,而在精巢中不表达。 展开更多
关键词 口虾蛄 高血糖激素CHH 分子克隆 荧光定量PCR 表达分析
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中华绒螯蟹类浮舰蛋白基因Esflol的克隆和组织表达分析
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作者 庄翠珩 孙金生 +4 位作者 张亦陈 田金泽 耿绪云 朱丽娜 李冉 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1773-1779,共7页
为了解甲壳动物高血糖激素如何调节中华绒螯蟹体内的血糖水平,实验前期进行了转录组和表达谱分析,最终选取Esflol作为研究对象。根据转录组数据提示,结合RACE方法首次从中华绒螯蟹肝胰腺组织中克隆得到Esflol基因并进行了序列及组织表... 为了解甲壳动物高血糖激素如何调节中华绒螯蟹体内的血糖水平,实验前期进行了转录组和表达谱分析,最终选取Esflol作为研究对象。根据转录组数据提示,结合RACE方法首次从中华绒螯蟹肝胰腺组织中克隆得到Esflol基因并进行了序列及组织表达分析。结果显示Esflol基因开放阅读框(ORF)1 281 bp,编码426个氨基酸,具有典型的SPFH超家族和PHB结构域,不含信号肽序列。多重序列比对分析表明,Esflol氨基酸序列与中华绒螯蟹flotillin-1相似度最高,达到57%。荧光定量PCR结果显示成熟中华绒螯蟹Esflol基因在肝胰腺组织中的表达量最高,其次为肌肉,另外在心脏、鳃、肠道、胸神经节和胃中均有一定量表达,在脑中表达量较低。上述实验结果为下一步继续研究中华绒螯蟹糖代谢的生理机制奠定了基础,也为其他养殖类甲壳动物糖类代谢的研究提供了重要参考。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 甲壳动物高血糖激素 浮舰蛋白 组织表达
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青虾高血糖激素基因全长cDNA序列的克隆及表达分析 被引量:11
7
作者 金舒博 王宁 +5 位作者 乔慧 傅洪拓 吴滟 龚永生 蒋速飞 熊贻伟 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期82-92,共11页
本研究首次克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)高血糖激素(crustacean hyperglycemic homone,CHH)基因全长cDNA序列,并使用荧光定量PCR技术首次检测了CHH基因在青虾不同组织中的表达。青虾CHH基因cDNA全长1 017 bp,包括241 bp的5′UT... 本研究首次克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)高血糖激素(crustacean hyperglycemic homone,CHH)基因全长cDNA序列,并使用荧光定量PCR技术首次检测了CHH基因在青虾不同组织中的表达。青虾CHH基因cDNA全长1 017 bp,包括241 bp的5′UTR,408 bp的开放阅读框(ORF),355 bp的3′UTR,开放阅读框编码135个氨基酸。成熟肽包含6个CHH家族中位置保守的Cys残基。青虾CHH成熟肽C端为GK,确定为ES型CHH基因。蛋白相似度比对显示,所分离的青虾CHH被归为CHH家族I型肽。系统进化树分析表明,青虾CHH多肽与罗氏沼虾聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示,CHH基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量由高到依次为眼柄、精巢、腹神经节、脑、肠、肝、心脏、卵巢。以卵巢为参照其表达量设为1时,眼柄与精巢CHH基因表达量分别为卵巢的500倍和250倍,由此推测CHH基因可能与雄性生殖过程相关。 展开更多
关键词 青虾 ES型高血糖激素 CDNA 定量PCR
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拟穴青蟹(Scylla paramamosain)两种Ⅰ型高血糖激素基因全长cDNA的克隆及组织表达分析 被引量:4
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作者 舒妙安 张龙韬 +3 位作者 周宇芳 胡杭娇 徐宾朋 郭晓令 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期695-701,共7页
采用RT-PCR及RACE技术,从拟穴青蟹眼柄组织中克隆了两种Ⅰ型高血糖激素CHH基因(分别命名为C1与C2)cDNA全序列。序列分析结果表明:C1基因全长1859bp,开放阅读框长420bp,编码139个氨基酸,分子量为15.326kDa,等电点为5.540;C2基因全长1739... 采用RT-PCR及RACE技术,从拟穴青蟹眼柄组织中克隆了两种Ⅰ型高血糖激素CHH基因(分别命名为C1与C2)cDNA全序列。序列分析结果表明:C1基因全长1859bp,开放阅读框长420bp,编码139个氨基酸,分子量为15.326kDa,等电点为5.540;C2基因全长1739bp,开放阅读框长426bp,编码141个氨基酸,分子量为15.621kDa,等电点为7.618。与其它物种CHH氨基酸序列进行同源性比较分析显示,拟穴青蟹CHH基因与榄绿青蟹CHH基因同源性最高(92%),依次为日本鲟(80%)、三疣梭子蟹(78%)。聚类分析表明,拟穴青蟹CHH氨基酸序列与榄绿青蟹和日本鲟紧密聚为一支。经荧光定量检测,拟穴青蟹CHH基因在眼柄、肝胰腺、心脏、肠中表达量较高,鳃、胃中表达量很少,肌肉中表达极少。盐度骤变试验结果表明:盐度胁迫24h后,C2的表达量是C1的30倍以上;C2基因盐度5时与对照组的表达量差异不显著(P>0.05),盐度15时差异显著(P<0.05),盐度22、25、30时差异极显著(P<0.01);盐度变化越大,C2的表达量越大。上述结果为进一步深入研究CHH基因的功能及调控机理奠定基础。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 高血糖激素CHH 基因克隆 表达分析
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中国对虾3种Ⅱ型CHH家族神经肽基因的克隆及序列分析 被引量:1
9
作者 王在照 相建海 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第10期961-966,共6页
根据中国对虾蜕皮抑制激素的全长cDNA序列设计引物 ,以中国对虾基因组DNA为模板 ,采用PCR等技术分别得到 3个扩增产物 :NP1、NP2和NP3,长度分别是 5 4 0bp、6 0 1bp和 82 6bp。NP1和NP2均由 2个外显子和 1个内含子组成 ,NP3由 3个外显子... 根据中国对虾蜕皮抑制激素的全长cDNA序列设计引物 ,以中国对虾基因组DNA为模板 ,采用PCR等技术分别得到 3个扩增产物 :NP1、NP2和NP3,长度分别是 5 4 0bp、6 0 1bp和 82 6bp。NP1和NP2均由 2个外显子和 1个内含子组成 ,NP3由 3个外显子和 2个内含子组成。序列分析表明 ,NP1、NP2和NP3是中国对虾Ⅱ型CHH家族神经肽的基因片段。NP1、NP2和NP3的外显子分别与斑节对虾的神经肽Pem SGP C2、Pem SGP C1及中国对虾FenchMIH的mRNA相似性最高 ,同源性分别为 91 5 %、92 8%、88 9%。由此可以推测NP3是中国对虾MIH的基因序列 。 展开更多
关键词 中国对虾 Ⅱ型CHH家族神经肽
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Heavy metal stress induced hyperglycemia in blue swimmer crab, Portunus pelagicus
10
作者 SARAVANAN R. SUGUMAR V. BEEMA MAHIN M.I. 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2018年第5期47-53,共7页
The study was to find out the effect of cadmium and mercury on levels of hemolymph glucose, crustacean hyperglycemic hormone(CHH) and hepatopancreas glycogen in the blue swimmer crab Portunus pelagicus. The experime... The study was to find out the effect of cadmium and mercury on levels of hemolymph glucose, crustacean hyperglycemic hormone(CHH) and hepatopancreas glycogen in the blue swimmer crab Portunus pelagicus. The experiments were performed in both intact and eyestalk ablated crabs. Quantification of CHH was done by the indirect ELISA with the aid of primary anti-Carcinus maenas-CHH antibody. Higher glucose concentration was observed on exposure to 8×10^–6 of cadmium((825.6±5.42) μg/m L) and 6×10^–6 of mercury((90.5±6.25) μg/m L)after 48 h and 24 h respectively. Higher level of hemolymph glucose was observed in eyestalk intact crabs on exposure to cadmium and mercury than eyestalk ablated crabs. Decrease in the levels of CHH was observed in both eyestalk intact and ablated crabs on heavy metal exposure. Decline of the hepatopancreas glycogen level was also witnessed with the exposure to heavy metal, which validated its utilization in the production of glucose. Thus this study brings to light, the variations in hemolymph glucose, CHH and hepatopancreas glycogen on heavy metal stress. These carbohydrate metabolites can be used as biomarkers in assessing heavy metal contamination in water bodies. 展开更多
关键词 crustacean hyperglycemic hormone cadmium mercury decapod crustaceans blue swimmer crab
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日本蟳高血糖激素基因的克隆与表达分析 被引量:1
11
作者 汤洁 朱冬发 +2 位作者 崔晓雨 谢熙 邱锡尔 《生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第4期10-14,共5页
通过RACE技术克隆获得日本蟳Charybdis japonica高血糖激素基因(CjCHH)全长cDNA序列;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析该基因的组织差异性表达;利用原核表达技术获得CjCHH重组蛋白。序列分析表明:CjCHH cDNA全长1754 bp,包含1... 通过RACE技术克隆获得日本蟳Charybdis japonica高血糖激素基因(CjCHH)全长cDNA序列;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析该基因的组织差异性表达;利用原核表达技术获得CjCHH重组蛋白。序列分析表明:CjCHH cDNA全长1754 bp,包含111bp的5’末端非编码区(UTR),423 bp的开放阅读框(ORF),以及1236 bp的3’UTR,该基因可编码140个氨基酸。序列比对结果显示:CjCHH的成熟肽序列与其它甲壳动物CHH的一致性为41%~88%。系统进化树显示:CjCHH与其它梭子蟹科的CHH聚在一起,这与日本蟳所处的分类地位一致。组织差异性表达研究显示:CjCHH在检测的10个组织中均有表达,其中眼柄中表达量最高,肠和Y-器次之,其余组织表达量较低。成功构建了CjCHH重组表达质粒pET-CHH,并在大肠杆菌(Escherichia coli)中获得了高效表达,重组蛋白的相对分子量约11 kDa,与预测的相对分子质量大小相一致,表达水平在5 h的IPTG诱导过程中呈现上升趋势。 展开更多
关键词 日本蟳 高血糖激素 CDNA克隆 组织表达 原核表达
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红螯螯虾CHH2基因的表达特征及其在卵巢发育中的功能
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作者 陈乐然 郑建波 +7 位作者 贾永义 迟美丽 李飞 程顺 刘士力 刘一诺 蒋文枰 顾志敏 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期33-40,共8页
为研究高血糖激素基因(CHH)在红螯螯虾卵巢发育中的作用,基于转录组学数据鉴定到红螯螯虾CHH2基因序列,并对其基本特性进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了CHH2在红螯螯虾不同组织和卵巢发育阶段的表达情况。结果表... 为研究高血糖激素基因(CHH)在红螯螯虾卵巢发育中的作用,基于转录组学数据鉴定到红螯螯虾CHH2基因序列,并对其基本特性进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了CHH2在红螯螯虾不同组织和卵巢发育阶段的表达情况。结果表明,CHH蛋白在甲壳类物种中高度保守,同源性高达66.84%。qRT-PCR结果表明,在红螯螯虾的肝胰腺中几乎检测不到CHH2表达,在其他组织均有表达,包括肌肉、鳃、肠、心,且在卵巢中的表达水平最高;另外,CHH2在卵巢发育各个时期(未发育、发育期、快速发育期、成熟期)均有表达,表达水平先升高后降低,在卵巢发育成熟期表达水平最低。此外,在切除单侧眼柄和雌二醇活体注射的红螯螯虾卵巢中,CHH2表达水平显著降低。通过注射体外合成CHH2-dsRNA对红螯螯虾进行RNAi干扰试验,结果显示,卵巢发育重要标记卵黄蛋白原基因(VTG)表达水平显著上升。综上所述,CHH2可能负调控红螯螯虾卵巢发育,研究结果为进一步开发基于RNAi的促性腺成熟技术奠定理论基础。 展开更多
关键词 红螯螯虾 高血糖激素基因2(CHH2) RNAI 卵巢发育 卵黄蛋白原
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