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Methylomonas Z201 细胞在戊二醛活化DEAE纤维素上的共价固定化 被引量:3
1
作者 夏仕文 尉迟力 +1 位作者 沈润南 李树本 《分子催化》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第4期273-277,共5页
以戊二醛活化的DEAE纤维素为载体,采用共价键法固定化MethylomonasZ201细胞.固定化细胞催化丙烯环氧化的最优细胞/载体比为32mg干重细胞/(gDEAE纤维素),最适pH值和最适温度分别为7.8和3... 以戊二醛活化的DEAE纤维素为载体,采用共价键法固定化MethylomonasZ201细胞.固定化细胞催化丙烯环氧化的最优细胞/载体比为32mg干重细胞/(gDEAE纤维素),最适pH值和最适温度分别为7.8和35℃.用纯氧代替空气作为氧源,分别使游离和固定化细胞的MMO活性提高了8%和35%.外源性电子给体甲酸钠对固定化细胞MMO活性的激发作用小于游离细胞.失活动力学分析结果表明,固定化细胞的稳定性高于游离细胞. 展开更多
关键词 甲烷 单加氧酶 共价固定化 细胞固定化 催化
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共价固定乙肝表面抗体电容型免疫传感器研究
2
作者 甘贤雪 许泽宏 王丽 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2006年第5期611-615,共5页
利用硫脲中的硫原子和金之间强的共价效应,以及氨基与醛基的键合作用,将乙肝表面抗体(HBsAb)牢牢的固定在金电极表面。同时通过十二硫醇封闭电极,从而制得高灵敏、高稳定电容型乙肝表面抗原(HBsAg)免疫传感器。通过交流阻抗技术... 利用硫脲中的硫原子和金之间强的共价效应,以及氨基与醛基的键合作用,将乙肝表面抗体(HBsAb)牢牢的固定在金电极表面。同时通过十二硫醇封闭电极,从而制得高灵敏、高稳定电容型乙肝表面抗原(HBsAg)免疫传感器。通过交流阻抗技术考察了溶液pS值和离子强度对电极性能的影响。结果表明:该免疫传感器操作简便,易于再生。电容响应与乙肝表面抗原浓度在7.5-750ng·mL^-1范围内呈线性关系,检出限为1.9ng/mL。 展开更多
关键词 共价键合 电容型免疫传感器 乙肝
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生物活性高分子微球 被引量:10
3
作者 闫翠娥 徐章煌 +1 位作者 程时远 封麟先 《高分子材料科学与工程》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第1期1-4,共4页
综述了生物活性物质在功能高分子微球上的固定化研究进展,着重阐述共价结合法的最新进展———定向共价结合;功能高分子微球的制备、表征;以及生物活性高分子微球的性质、应用等。
关键词 高分子微球 生物活性物质 共价固定 固定化
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硅胶表面牛血清白蛋白分子印迹聚合物的制备及分子识别性能 被引量:13
4
作者 周艳梅 徐文国 童爱军 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1551-1554,共4页
报道了以氨丙基硅胶为载体,将其表面醛基化后通过亚胺键共价键合牛血清白蛋白,再用两种硅烷化试剂氨丙基三乙氧基硅烷和正辛基三甲氧基硅烷进行聚合,合成表面印迹牛血清白蛋白分子印迹聚合物的方法。本方法以共价键印迹蛋白质,用草酸洗... 报道了以氨丙基硅胶为载体,将其表面醛基化后通过亚胺键共价键合牛血清白蛋白,再用两种硅烷化试剂氨丙基三乙氧基硅烷和正辛基三甲氧基硅烷进行聚合,合成表面印迹牛血清白蛋白分子印迹聚合物的方法。本方法以共价键印迹蛋白质,用草酸洗脱。表面印迹有利于大分子蛋白质向印迹位点的扩散和再结合,合成的印迹聚合物对牛血清白蛋白的吸附率达44.5%,而其它蛋白的吸附率小于17%,显示对模板蛋白具有特异吸附能力。 展开更多
关键词 表面分子印迹 共价键合 硅胶 牛血清白蛋白
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用于寡核苷酸芯片制备载体的醛基载玻片的制备方法优化及性质研究 被引量:12
5
作者 邹宗亮 王升启 王志清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期498-502,共5页
优化了醛基载玻片的制备方法 ,探讨了醛基修饰载玻片固定寡核苷酸探针的性质。研究发现氨基硅烷试剂的浓度是影响载玻片荧光背景的主要因素 ;2 %氨基化试剂处理 16min、戊二醛处理 30min可以得到荧光背景较低、固定效果较好的醛基载玻... 优化了醛基载玻片的制备方法 ,探讨了醛基修饰载玻片固定寡核苷酸探针的性质。研究发现氨基硅烷试剂的浓度是影响载玻片荧光背景的主要因素 ;2 %氨基化试剂处理 16min、戊二醛处理 30min可以得到荧光背景较低、固定效果较好的醛基载玻片。寡核苷酸固定过程中 ,末端氨基修饰没有明显的特异性 ,但是可以提高被固定探针的杂交容量。在较低的浓度 (小于 10 μmol L)时 ,探针的浓度与杂交信号趋近线性关系 ,浓度为 2 0 μmol 展开更多
关键词 寡核苷酸芯片 共价交联 玻璃 醛基修饰 载体 载玻片 制备 优化
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醋酸纤维素膜为基础的葡萄糖生物传感器的研制 被引量:6
6
作者 王顺光 吉鑫松 袁中一 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期260-265,共6页
采用共价法将酶固定在醋酸纤维素膜上,方法简便易行,制造的酶膜稳定,比活力高。同时采用该方法制备了葡萄糖氧化酶酶膜,与氧电极组装成测定葡萄糖的生物传感器,线性范围为50~800mg/dl,仪器工作的最适pH为6.0,最适温度为40℃。将该膜与... 采用共价法将酶固定在醋酸纤维素膜上,方法简便易行,制造的酶膜稳定,比活力高。同时采用该方法制备了葡萄糖氧化酶酶膜,与氧电极组装成测定葡萄糖的生物传感器,线性范围为50~800mg/dl,仪器工作的最适pH为6.0,最适温度为40℃。将该膜与过氧化氢电极组装得到的传感器具有以下特性:线性范围为10~200mg/dl,最适pH为6.0,测定结果与酶试制盒有良好相关性。 展开更多
关键词 葡萄糖 生物传感器 醋酸纤维素膜 研制
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多酶共固定化的研究进展 被引量:7
7
作者 王金丹 张光亚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期469-480,共12页
固定化酶技术是现代生物催化的核心技术。过去几十年里,固定化酶技术的研究主要集中在单酶固定化。近年来,多酶共固定化由于具有可增加反应的局部浓度、提高反应收率等优点而得到研究者的广泛关注。本文根据国内外研究现状并结合本实验... 固定化酶技术是现代生物催化的核心技术。过去几十年里,固定化酶技术的研究主要集中在单酶固定化。近年来,多酶共固定化由于具有可增加反应的局部浓度、提高反应收率等优点而得到研究者的广泛关注。本文根据国内外研究现状并结合本实验研究从多酶非特异性共价共固定化、非特异性非共价共固定化、非共价包埋固定化以及位点特异性固定化四个方面阐述多酶固定化方法的研究进展,并分析和展望了其在工业上的应用前景。 展开更多
关键词 多酶共固定化 共价固定化 非共价固定化 包埋固定化 特异性固定化
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以乙二胺为手臂分子制备的DNA修饰电极及其伏安性能 被引量:6
8
作者 焦奎 徐桂云 +1 位作者 张旭志 米春华 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期841-843,F012,共4页
Carboxyl was formed on the surface of glassy carbon electrode(GCE) by electrochemical oxidation. Ethylenediamine(En) was used as the arm molecule to link carboxyl with dsDNA using 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-car... Carboxyl was formed on the surface of glassy carbon electrode(GCE) by electrochemical oxidation. Ethylenediamine(En) was used as the arm molecule to link carboxyl with dsDNA using 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide hydrochloride(EDC) and N-hydroxysuccinimide(NHS) as the activators to prepare dsDNA modified electrode(dsDNA/En/GCE). It was shown that dsDNA could be covalently immobilized on the surface of GCE. ssDNA modified electrode(ssDNA/En/GCE) was obtained via the thermal denaturation of dsDNA/En/GCE. The dsDNA/En/GCE and ssDNA/En/GCE were characterized by voltammetry with methylene blue(MB) as the indicator. The results indicated that the currents of the redox peaks of MB at ssDNA/En/GCE were larger than those at dsDNA/En/GCE, and the currents of the redox peaks at En/GCE were the smallest. The peak-currents of MB at the DNA modified electrode had good reproducibility after multi-denaturation and hybridization cycles. 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸(DNA) 乙二胺 共价固定 伏安法 亚甲基蓝
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Covalentimmobilization of oligoDNA on the surface of magnetic nanoparticles and surface-enhanced Raman scattering study 被引量:4
9
作者 SHENHeba1 WANGYoubao +1 位作者 YANGHaifeng JIANGJisen 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2003年第24期2698-2702,共5页
The DNA magnetic nanoparticles are poten-tially useful in isolating and purifying DNA or RNA, direct-ing-target-medicines, the development of DNA biosensors and biochips. Surface functionalized magnetic nanoparticles ... The DNA magnetic nanoparticles are poten-tially useful in isolating and purifying DNA or RNA, direct-ing-target-medicines, the development of DNA biosensors and biochips. Surface functionalized magnetic nanoparticles with monodispersed shape and size were prepared by coating nano-sized g-Fe2O3 with silica in reverse microemulsion, and then thiol-compounds were immobilized onto the magnetic nanoparticles. After immobilizing oligoDNA modified with thiol-disulfide on the surface of the fictionalized magnetic nanoparticles, we obtained DNA-magnetic nanoparticles. The efficiency of the single-linking probes loading at the surfaces of magnetic nanoparticles was examined via hy-bridization experiment. Surface-enhanced Raman scattering methods were also effectively applied to observing the immobilization and hybridization processes mentioned above. The results demonstrated oligoDNA being availably connected to the surface of the magnetic nanoparticles. 展开更多
关键词 共价固定 DNA 磁性纳米粒子 RAMAN散射 RNA 纳米生物技术
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酶定向固定化方法及应用的研究进展 被引量:6
10
作者 李存存 张光亚 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第10期2467-2474,共8页
传统固定化方法常会导致酶活性大幅度下降,回收率较低,而酶定向固定由于固定化后可完全暴露其活性部位,因而可以保持较高的酶活回收率。本文主要综述了定向固定化酶的两种方法,分别为共价定向固定和非共价定向固定。其中非共价定向固定... 传统固定化方法常会导致酶活性大幅度下降,回收率较低,而酶定向固定由于固定化后可完全暴露其活性部位,因而可以保持较高的酶活回收率。本文主要综述了定向固定化酶的两种方法,分别为共价定向固定和非共价定向固定。其中非共价定向固定化主要是抗体与抗原、亲和素/链霉亲和素和生物素以及组氨酸标签与Co2+/Ni2+之间的亲和作用;共价定向固定化主要是通过半胱氨酸残基上的巯基与载体作用。简述了其在生物传感器、分子识别、酶生物燃料电池及酶纯化方面的应用。最后指出今后的主要研究方向为探索新的定向固定化标签以降低对酶活性部位的影响,应用新的载体以提高固定化酶酶活回收率,优化固定化过程及简化固定化步骤等。 展开更多
关键词 定向固定化酶 亲和标签 共价固定
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功能化氯球共价固载硅钨酸催化制备月桂酸单甘酯工艺研究
11
作者 郏俊浩 曾智炜 +5 位作者 任佳益 王婕 蒋佳睿 赵孙超 唐秀娟 韩晓祥 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期114-120,共7页
以氯球为载体,经哌嗪功能化后通过共价固载方式与硅钨酸作用制备哌嗪改性氯球固载硅钨酸催化剂,借助FT-IR、XPS、XRD和31 P-MAS NMR等技术手段对催化剂结构及酸性能进行表征,同时探究该催化剂在月桂酸(LA)与甘油(GL)选择性酯化制备月桂... 以氯球为载体,经哌嗪功能化后通过共价固载方式与硅钨酸作用制备哌嗪改性氯球固载硅钨酸催化剂,借助FT-IR、XPS、XRD和31 P-MAS NMR等技术手段对催化剂结构及酸性能进行表征,同时探究该催化剂在月桂酸(LA)与甘油(GL)选择性酯化制备月桂酸单甘脂(GML)反应中的催化性能。研究表明,固载型催化剂[CPPI]2 H 2 SiW 12 O 40具有较好的LA转化率和最好的GML产率。催化剂适宜的Br nsted酸性及“假液相”特性是该催化剂具有高活性的原因。在GL/LA物质的量比5∶1,催化剂质量分数5%,反应时间2 h,反应温度423 K条件下GML平均产率为79.5%。 展开更多
关键词 共价固载 硅钨酸 月桂酸单甘酯
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葡萄糖氧化酶的有机相共价固定化 被引量:6
12
作者 周涛 朱雄军 +2 位作者 苏建华 姚冬生 刘大岭 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期476-487,共12页
将葡萄糖氧化酶(GOD)在最适pH条件下冻干后,以戊二醛活化的壳聚糖为载体,分别在传统水相和1,4-二氧六环、乙醚、乙醇三种不同的有机相中进行共价固定化。通过比较水相固定化酶和有机相固定化酶的酶比活力、酶学性质及酶动力学参数,考察... 将葡萄糖氧化酶(GOD)在最适pH条件下冻干后,以戊二醛活化的壳聚糖为载体,分别在传统水相和1,4-二氧六环、乙醚、乙醇三种不同的有机相中进行共价固定化。通过比较水相固定化酶和有机相固定化酶的酶比活力、酶学性质及酶动力学参数,考察酶在有机相中的刚性特质对酶在共价固定化过程中保持酶活力的影响。结果表明,戊二醛浓度为0.1%、加酶量为80 mg/1 g载体、含水1.6%的1,4-二氧六环有机相固定化GOD与水相共价固定化GOD相比,酶比活力提高2.9倍,有效酶活回收率提高3倍;在连续使用7次后,1,4-二氧六环有机相固定化GOD的酶活力仍为相应水相固定化酶的3倍。在酶动力学参数方面,不论是表观米氏常数,最大反应速度还是转换数,1,4-二氧六环有机相固定化的GOD(Kmapp=5.63 mmol/L,Vmax=1.70μmol/(min.mgGOD),Kcat=0.304 s-1)都优于水相共价固定化GOD(Kmapp=7.33 mmol/L,Vmax=1.02μmol/(min.mg GOD),Kcat=0.221 s-1)。因此,相比于传统水相,GOD在合适的有机相中进行共价固定化可以获得具有更高酶活力和更优催化性质的固定化酶。该发现可能为酶蛋白在共价固定化时因构象改变而丢失生物活性的问题提供解决途径。 展开更多
关键词 葡萄糖氧化酶 共价固定化 有机介质 酶比活
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以聚丙烯腈纤维为载体制备工业用固定化PGA的基本条件 被引量:2
13
作者 鲜海军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期582-586,共5页
以聚丙烯腈纤维为载体 ,共价结合制备工业生产应用的固定化青霉素酰化酶。经过测定 ,获得了制备固定化酶的基本条件 :对部分酸水解聚丙烯腈纤维进行霍夫曼重排反应溶液中的次氯酸钠浓度为 4%~ 16 % (v/v) ;用含戊二醛的溶液对经过霍夫... 以聚丙烯腈纤维为载体 ,共价结合制备工业生产应用的固定化青霉素酰化酶。经过测定 ,获得了制备固定化酶的基本条件 :对部分酸水解聚丙烯腈纤维进行霍夫曼重排反应溶液中的次氯酸钠浓度为 4%~ 16 % (v/v) ;用含戊二醛的溶液对经过霍夫曼重排反应的水解纤维进行活化反应溶液的pH为 6 5~ 8 5 ,最适 pH7 0 ;活化反应时间为 10min ;活化纤维中醛基含量为 12 5 0 μmol/g以上 ;酶与活化纤维连接反应溶液的最适pH值为 6 5~ 7 0 ;反应时间为 10min。在酶与活化纤维的连接反应溶液中加入竞争性抑制剂 苯乙酸 ,对酶活力具有保护作用 ,能提高酶活力的固定化效率。在酶与活化纤维的连接反应溶液中剩余的游离酶经吸附、洗涤和浓缩后 ,可以再用于制备固定化酶。变性固定化酶经再生活化后作为载体固定化新的酶液 ,也能制备出较好的固定化酶。 展开更多
关键词 青霉素酰化酶 共价固定化 巨大芽孢杆菌 废载体 再利用 聚丙烯腈纤维
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拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶同源建模及共价固定化 被引量:5
14
作者 华承伟 于江傲 +1 位作者 谢凤珍 陈晓静 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期252-256,共5页
采用同源建模的方法构建拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶的三维结构。通过对其活性位点及表面氨基酸残基侧链的分析,利用氨基载体Sepabeads EC-HA共价固定化葡聚糖酶,优化固定化条件,比较固定化酶与游离酶的酶学参数。结果表明:m(酶粉):m(载体... 采用同源建模的方法构建拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶的三维结构。通过对其活性位点及表面氨基酸残基侧链的分析,利用氨基载体Sepabeads EC-HA共价固定化葡聚糖酶,优化固定化条件,比较固定化酶与游离酶的酶学参数。结果表明:m(酶粉):m(载体)=1.2:1、温度40~45℃、固定化时间8h,固定化效果最好。蛋白结合率可达91.7%,酶活回收率达87.6%,固定化酶最适温度、热稳定性、pH值稳定性和批次使用稳定性均得到明显提高。 展开更多
关键词 β-1 3(4)-葡聚糖酶 同源建模 共价固定化
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椰壳活性炭共价固载钯离子有机配合物催化剂的制备与应用 被引量:4
15
作者 项双龙 杨小俊 +1 位作者 张育莲 熊春荣 《分子催化》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期55-62,共8页
采用椰壳活性炭为载体,通过20%HNO3氧化处理,Boehm滴定表明活性炭表面羟基含量达0.376 mmol/g.之后分别接枝(MeO)3Si(CH2)3NH2和(MeO)3Si(CH2)3Cl,并成功合成了两种不同类型的含氮双齿配体用来配合钯离子,以FT-IR、XPS、1H NMR、ICP及N... 采用椰壳活性炭为载体,通过20%HNO3氧化处理,Boehm滴定表明活性炭表面羟基含量达0.376 mmol/g.之后分别接枝(MeO)3Si(CH2)3NH2和(MeO)3Si(CH2)3Cl,并成功合成了两种不同类型的含氮双齿配体用来配合钯离子,以FT-IR、XPS、1H NMR、ICP及N2吸附-脱附等手段表征了催化剂制备过程中的各种中间体.在高压反应釜中以苯酚氧化羰基化反应考察了所制催化剂的催化性能.结果表明,在100℃,7.0 MPa及p(CO)/p(O2)=10/1下,二氯甲烷为溶剂,以环庚二胺配体配合的钯离子为催化剂,苯酚转化率及产物碳酸二苯酯(DPC)选择性分别为11.91%、86.82%,对于双氰基配体配合的催化剂,苯酚转化率及产物DPC选择性分别为6.22%及81.02%. 展开更多
关键词 椰壳活性炭 共价固载 钯离子有机配合物 氧化羰基化 碳酸二苯酯
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荧光光谱成像在生物芯片蛋白量化分析中的应用研究 被引量:4
16
作者 朝克夫 张友林 +4 位作者 孔祥贵 李冰 曾庆辉 宋凯 孙雅娟 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1603-1607,共5页
采用荧光光谱成像并结合椭圆偏振技术研究了3-氨基3-乙氧基硅烷(APTES)修饰及其与戊二醛(APTES-Glu)共同修饰的两种不同表面上固定的羊抗人抗体活性和数量及其荧光免疫结合。研究结果表明:应用荧光光谱成像在APTES-Glu表面上检测到的FIT... 采用荧光光谱成像并结合椭圆偏振技术研究了3-氨基3-乙氧基硅烷(APTES)修饰及其与戊二醛(APTES-Glu)共同修饰的两种不同表面上固定的羊抗人抗体活性和数量及其荧光免疫结合。研究结果表明:应用荧光光谱成像在APTES-Glu表面上检测到的FITC标记人血清蛋白分子的数量为APTES表面结合的2.8倍,而应用椭圆偏振技术在前者表面上检测到的FITC标记人血清蛋白分子的数量为后者表面上的2.2倍。这个结果说明:在荧光免疫检测中,荧光光谱成像完全可用于分析不同表面固定蛋白的免疫活性和半定量的检测。 展开更多
关键词 荧光光谱成像 椭圆偏振 共价固定 免疫活性
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牛血清蛋白分子印迹聚合物的制备及分子识别性能 被引量:4
17
作者 袁士芳 王硕 +1 位作者 邓启良 方国臻 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第1期134-137,126,共5页
本文报道了以活化硅球为支撑载体,将其表面用3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)和戊二醛进行修饰,通过醛基共价健和牛血清蛋白(BSA),同时以丙烯酰胺(AAm)为单体,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)为交联剂,在水相体系中合成对BSA具有较高选择性... 本文报道了以活化硅球为支撑载体,将其表面用3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)和戊二醛进行修饰,通过醛基共价健和牛血清蛋白(BSA),同时以丙烯酰胺(AAm)为单体,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)为交联剂,在水相体系中合成对BSA具有较高选择性的新型分子印迹聚合物。通过对合成的聚合物进行平衡结合,吸附动力学和选择性的三个表征实验发现,该聚合物对BSA具有选择性高、传质速度和结合平衡速度快等诸多优点,并通过Langmuir方程分析,证明平衡结合中吸附容量(Q)与初始浓度(C)的一致性,并呈良好的线性关系,印迹聚合物的饱和吸附容量Qmax为28.98 mg/g。 展开更多
关键词 分子印迹 共价健和 牛血清蛋白 活化硅球
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水分荧光光纤化学传感器 被引量:2
18
作者 刘万俊 贺萍 刘万卉 《光谱实验室》 CAS CSCD 2000年第3期262-265,共4页
将具有溶致变色特性的 4'- N,N-二甲氨基黄酮基团与聚丙烯酰胺膜基体一起共价固定化在石英玻片上 ,制成了测定水的光导纤维化学传感器。传感是基于水对膜的荧光有强的猝灭作用。文中提出了猝灭方程。传感器具有好的可逆性和稳定性 ... 将具有溶致变色特性的 4'- N,N-二甲氨基黄酮基团与聚丙烯酰胺膜基体一起共价固定化在石英玻片上 ,制成了测定水的光导纤维化学传感器。传感是基于水对膜的荧光有强的猝灭作用。文中提出了猝灭方程。传感器具有好的可逆性和稳定性 ,重复测定含水 4.0 0 %和 1 6 .0 %的乙醇样品的相对标准偏差分别为 0 .33%和 0 .6 0 % ,这说明传感器还具有好的重现性。传感器用于 95 %乙醇中水分的含量测定 ,结果与气相色谱法一致。 展开更多
关键词 光纤化学传感器 水含量 测定 荧光光谱
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“构象记忆”的辣根过氧化物酶的微水相共价固定化 被引量:3
19
作者 蔡奕璇 陈俊华 +1 位作者 姚冬生 刘大岭 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1969-1975,共7页
本研究利用酶在微水溶剂中的"构象记忆"特性,以壳聚糖微球为载体,以辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)为研究对象,将HRP于活性构象下冻干"固定"后,在二氧六环:水=99:1(V/V)微水介质中与载体进行共价交联... 本研究利用酶在微水溶剂中的"构象记忆"特性,以壳聚糖微球为载体,以辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)为研究对象,将HRP于活性构象下冻干"固定"后,在二氧六环:水=99:1(V/V)微水介质中与载体进行共价交联,同时与传统水介质中共价交联固定化的HRP进行比较。结果发现,两种介质中固定化HRP的最适温度都提高到60°C,最适pH均为6.5,而微水相中固定的酶活力损失较低,酶活比传统水相中固定的酶高6倍以上;70°C保温30min后,微水相中固定的酶保留75.42%的活力,而水相中固定的HRP仅存15.4%的活力;微水相中固定的HRP具有更好的操作稳定性和热稳定性,60°C下连续操作5次之后,微水相固定的HRP保留77.69%的酶活,而水相固定的HRP仅存16.67%的酶活;微水相中固定的HRP在苯酚的去除中表现得更具优势;微水相中共价交联制备的CS-HRP-SWCNTs/Au酶修饰电极对H2O2的响应信号比水相中共价固定的酶电极强2.5倍,灵敏度更高。本研究表明利用酶的"构象记忆"在微水介质中进行共价交联是固定化酶的一种可行方法,所制备的固定化酶具有更优良的性质。 展开更多
关键词 构象记忆 微水介质 共价固定 辣根过氧化物酶
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枯草芽孢杆菌芽孢表面展示外源功能蛋白的应用 被引量:3
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作者 冯杰 王振华 潘康成 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期3893-3898,共6页
枯草芽孢杆菌是一种好氧的可直接用于人和动物的益生菌菌种,在不利条件下可以被诱导产生芽孢。芽孢具有特殊的构造及独特的生理特征,研究者们发现枯草芽孢杆菌芽孢是酶和免疫原等外源性功能蛋白的理想的锚定载体,以枯草芽孢杆菌芽孢衣... 枯草芽孢杆菌是一种好氧的可直接用于人和动物的益生菌菌种,在不利条件下可以被诱导产生芽孢。芽孢具有特殊的构造及独特的生理特征,研究者们发现枯草芽孢杆菌芽孢是酶和免疫原等外源性功能蛋白的理想的锚定载体,以枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白作为分子载体,直接利用芽孢吸附作用和共价固定等方法使外源蛋白锚定在芽孢表面。目前已有多种酶蛋白、抗原蛋白和其他功能蛋白成功展示在枯草芽孢杆菌芽孢表面。本文主要对枯草芽孢杆菌芽孢结构及芽孢表面展示外源蛋白技术的策略和应用前景进行阐述。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 芽孢表面展示 共价固定 载体
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