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不同化学形式的铜对仔猪生长、消化和胴体组成的影响 被引量:26
1
作者 许梓荣 吴新民 《动物营养学报》 CAS CSCD 1999年第3期29-35,共7页
180头“杜长大”仔猪(21.34±0.44kg),按试验要求分为6组,分别饲喂添加5mg/kg、50mg/kg、240mg/kg无机铜(硫酸铜)、50mg/kg酪蛋白铜、50mg/kg奶蛋白铜和50mg/kg大... 180头“杜长大”仔猪(21.34±0.44kg),按试验要求分为6组,分别饲喂添加5mg/kg、50mg/kg、240mg/kg无机铜(硫酸铜)、50mg/kg酪蛋白铜、50mg/kg奶蛋白铜和50mg/kg大豆蛋白铜的饲粮,试验为期30天。结果表明:①饲粮中添加不同化学形式的铜均提高了日增重,降低了料重比,其中以50mg/kg酪蛋白铜组最佳,日增重比对照组(5mg/kg硫酸铜)提高了13.6%(P<0.05),料重比下降了9.5%,其次为240mg/kg无机铜组,日增重提高了12.5%(P<0.05),料重比下降了8.3%(P<0.05)。②添加不同化学形式铜均提高了日粮粗脂肪消化率,其中以240mg/kg无机铜组最为显著,较对照组提高了31.0%(P<0.05),其次为50mg/kg酪蛋白铜组,提高了29.1%(P<0.05),但是添加无机铜(硫酸铜)和蛋白铜对干物质和粗蛋白表观消化率均无明显影响。③添加铜对仔猪胴体组成无明显影响,但240mg/kg无机铜组和酪蛋白铜组肌肉失水率略有升高,色泽呈下降趋势。④240mg/kg无机铜组和50mg/kg酪蛋白铜组的脑铜含量显著升高,分别较对照组提高了33.1? 展开更多
关键词 硫酸铜 蛋白铜 仔猪 生长性能 胴体组成
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不同化学形式铜对仔猪生长的影响及其作用机理探讨 被引量:13
2
作者 夏枚生 《浙江农业学报》 CSCD 2000年第5期254-258,共5页
18 0头杜长大三元杂交仔猪 ,按饲养试验要求分为 6组 (每组 3个重复 ) ,分别饲以添加不同化学形式和剂量铜的相同饲粮 ,进行了为期 30d的饲养试验 ,研究它们对仔猪生长性能的影响 ,并通过取样分析 ,对其作用机理进行了探讨。结果表明 :... 18 0头杜长大三元杂交仔猪 ,按饲养试验要求分为 6组 (每组 3个重复 ) ,分别饲以添加不同化学形式和剂量铜的相同饲粮 ,进行了为期 30d的饲养试验 ,研究它们对仔猪生长性能的影响 ,并通过取样分析 ,对其作用机理进行了探讨。结果表明 :饲粮中添加不同化学形式铜盐均促进了仔猪生长 ,其中以 50mg/kg酪蛋白铜和 2 4 0mg/kg硫酸铜效果最为显著 ,日增重较对照组分别提高了 13.5% (P <0 .0 5)和 12 .4 % (P <0 .0 5) ;添加 2 4 0mg/kg硫酸铜和 50mg/kg酪蛋白铜使脑铜含量分别提高了 33.1% (P <0 .0 5)和 2 8.8% (P <0 .0 5) ,血清尿素氮含量分别下降了 2 3.4 % (P <0 .0 1)和 16 .8% (P <0 .0 5) ,血清生长激素、铜蓝蛋白活性分别提高了 76 .2 % (P <0 .0 1) ,4 5.1%(P <0 .1)和 31.5% (P <0 .0 1) ,32 .8% (P <0 .0 1) ,肝脏超氧化物歧化酶活性分别提高了 75.2 %(P <0 .0 1)和 80 .6 % (P <0 .0 1) ,奶蛋白组血清生长激素、铜蓝蛋白活性较对照组亦分别上升了38.4 % (P <0 .0 1)和 4 8.6 % (P <0 .0 1)。 展开更多
关键词 硫酸铜 蛋白铜 生长性能 仔猪 饲粮
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日粮铜水平对育成蛋鸡生长性能和新城疫抗体效价的影响 被引量:5
3
作者 张彩英 郭小权 +2 位作者 曹华斌 李浩棠 胡国良 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期206-209,共4页
通过探讨有机铜对育成蛋鸡免疫功能和生产性能的影响,为蛋白质螯合铜在生产中的应用提供理论依据。试验选用9周龄的海兰褐蛋鸡216只,随机分为6组,每组3个重复,每个重复12只鸡,11周龄时开始进入正式试验。分别饲喂添加蛋白质螯合铜(以铜... 通过探讨有机铜对育成蛋鸡免疫功能和生产性能的影响,为蛋白质螯合铜在生产中的应用提供理论依据。试验选用9周龄的海兰褐蛋鸡216只,随机分为6组,每组3个重复,每个重复12只鸡,11周龄时开始进入正式试验。分别饲喂添加蛋白质螯合铜(以铜量计)0mg/kg(Ⅰ组)、6.5mg/kg(Ⅱ组,对照组)、15mg/kg(Ⅲ组)、30mg/kg(Ⅳ组)、60mg/kg(Ⅴ组)、125mg/kg(Ⅵ组)相同的基础日粮,试验期为6周,测定鸡的平均日增重、平均日采食量和新城疫抗体效价。结果表明:与对照组相比,Ⅲ组和Ⅳ组显著提高育成蛋鸡平均日增重、平均日采食量和新城疫抗体效价。添加15mg/kg和30mg/kg铜(以蛋白质螯合铜的形式)可显著提高育成蛋鸡的生产性能和免疫功能,15~30mg/kg铜(以蛋白质螯合铜的形式)为育成蛋鸡最适宜的添加范围。 展开更多
关键词 蛋白质螯合铜 育成蛋鸡 生产性能 新城疫抗体效价
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大豆蛋白用作水溶性防腐剂中铜的螯合剂的初步研究 被引量:1
4
作者 卢子强 《木材工业》 北大核心 1998年第4期18-23,26,共7页
大豆蛋白首次被引进于木材防腐处理作为铜的螯合剂。试验结果表明,经过硫酸铜、氨水和大豆蛋白HM90处理西黄松(Pinusponderosa)边材,铜的流失有明显减少。在铜氨溶液中加入8和16kg/m3大豆蛋白HM90,... 大豆蛋白首次被引进于木材防腐处理作为铜的螯合剂。试验结果表明,经过硫酸铜、氨水和大豆蛋白HM90处理西黄松(Pinusponderosa)边材,铜的流失有明显减少。在铜氨溶液中加入8和16kg/m3大豆蛋白HM90,其处理木块经流失试验后的固着率平均分别为起始固着率的75%和66%,由于蛋白对铜的螯合作用,流失处理后的固着率平均增加40%,最高可达62%。采用较低浓度的硫酸铜(16kg/m3),流失处理后的固着率增长幅度达到最大值。但是,用铜蛋白处理的木块对褐腐菌(Postiaplacenta)的防腐效果没有明显提高,有待进一步的改进。 展开更多
关键词 大豆蛋白 螯合剂 有效处理浓度 木材防腐
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蓝铜蛋白His143位点在电子传递过程中的作用研究(英文)
5
作者 郭烨 唐琳 +1 位作者 王敏 曾嘉 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期395-400,共6页
蓝铜蛋白是嗜酸氧化亚铁硫杆菌中铁呼吸电子传递的重要组分。蓝铜蛋白分子内的铜原子与His85、Cys138、His143以强健结合,与Met148以较弱的键结合,形成四面体结构。通过对His143位点的定点突变,聚丙烯酰胺凝胶电泳,光谱学数据确定143位... 蓝铜蛋白是嗜酸氧化亚铁硫杆菌中铁呼吸电子传递的重要组分。蓝铜蛋白分子内的铜原子与His85、Cys138、His143以强健结合,与Met148以较弱的键结合,形成四面体结构。通过对His143位点的定点突变,聚丙烯酰胺凝胶电泳,光谱学数据确定143位点是蓝铜蛋白与外界电子传递的关键位点。分子结构模型证明His143位点咪唑基团形成疏水屏障使铜离子不会暴露在溶液环境中。结果表明His143位点是蓝铜蛋白电子传递的关键部位。 展开更多
关键词 蓝铜蛋白 铜蛋白家族 His143 电子传递
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烟草多酚氧化酶的分离提纯及性质研究 被引量:29
6
作者 戴亚 唐宏 +1 位作者 施春华 刘清亮 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2001年第4期7-12,共6页
本文用丙酮干粉,硫酸铵分级沉淀,阴离子交换层析,阳离子交换层析和凝胶过滤方法从新鲜的烟叶中分离纯化出了一种多酚氧化酶Ⅰ和多酚氧化酶Ⅱ(根据过DEAE-Sephadex A-50柱后的前后顺序,命名A-5柱先洗脱的活性组分为... 本文用丙酮干粉,硫酸铵分级沉淀,阴离子交换层析,阳离子交换层析和凝胶过滤方法从新鲜的烟叶中分离纯化出了一种多酚氧化酶Ⅰ和多酚氧化酶Ⅱ(根据过DEAE-Sephadex A-50柱后的前后顺序,命名A-5柱先洗脱的活性组分为多酚氧化酶Ⅰ(PPOⅠ),后洗脱的为多酚氧化酶Ⅱ(PPO Ⅱ)))。分离后多酚氧化酶Ⅰ的比活力是原来的71倍,而多酚氧化酶Ⅱ的比活力为原来的100倍。SDS-PAGE电泳显示分离所得的多酚氧化酶为纯品,其分子量分别为42kDa和42.5kDa。最后测量了分离得到的PPO的一些基本性质,结果表明多酚氧化酶Ⅰ在pH=7,t=40℃时具有最大活力,多酚氧化酶Ⅱ在pH=6,t=40℃时具有最大活力。动力学研究表明在pH=6.5,以邻苯二酚为底物的条件下,两种酶Km值分别为6.8mmol/L和1.2mmol/L。 展开更多
关键词 烟草 多酚氧化酶 蛋白质分离纯化 含铜蛋白
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饲料中不同形式的铜及添加量对凡纳滨对虾(Paneaus vannamei)生长性能、血清铜蓝蛋白和生长激素水平的影响 被引量:17
7
作者 周萌 王安利 曹俊明 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期577-582,共6页
在对照饲料中添加不同水平的硫酸铜、富马酸铜和蛋氨酸铜,使硫酸铜组铜离子含量为32mg/kg,富马酸铜和蛋氨酸铜组铜离子含量分别为16mg/kg、32mg/kg和48mg/kg,共组成8种饲料(饲料编号为对照、Sul-32、Fum-16、Fum-32、Fum48、Met-16、Met... 在对照饲料中添加不同水平的硫酸铜、富马酸铜和蛋氨酸铜,使硫酸铜组铜离子含量为32mg/kg,富马酸铜和蛋氨酸铜组铜离子含量分别为16mg/kg、32mg/kg和48mg/kg,共组成8种饲料(饲料编号为对照、Sul-32、Fum-16、Fum-32、Fum48、Met-16、Met-32和Met-48),饲喂凡纳滨对虾(初重0.74±0.01g)8周。结果表明,饲料中添加三种铜源均能不同程度提高凡纳滨对虾的特定生长率(SGR)、存活率(Survival)和蛋白质效率(PER),降低饲料系数(FCE)。其中,Met-16和Fum-32组的SGR显著高于对照组(P<0.05),Met-16、Met-32和Fum-32组的PER显著高于其它各组(P<0.05);不同铜源对凡纳滨对虾的体组成没有显著影响(P>0.05),但Met-32组的肝体比(HSI)显著下降(P<0.05)。各组间血清铜蓝蛋白(CER)含量差异不显著(P>0.05),Met-16和Fum-32组的生长激素(GH)含量则显著高于对照组(P<0.05)。本研究结果表明,饲料中三种铜源能不同程度的提高凡纳滨对虾的生长性能,但相同浓度有机铜离子的生物利用率优于无机铜,其顺序为:蛋氨酸铜>富马酸铜>硫酸铜。饲料铜对凡纳滨对虾的促生长作用可能是通过提高体内相关抗氧化酶的活性及刺激生长激素的分泌来实现的。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 生长 铜蓝蛋白 生长激素
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昆虫免疫蛋白多酚氧化酶的研究进展 被引量:6
8
作者 苑胜垒 管京敏 +3 位作者 杨兵 路岸瑞 凌尔军 宋红生 《生命科学》 CSCD 2016年第1期70-76,共7页
多酚氧化酶是无脊椎动物,包括昆虫的重要免疫蛋白,经由受体识别病原物,通过丝氨酸蛋白酶切割激活,数分钟之内在病原物周围发生黑化反应。多酚氧化酶的活性抑制或者基因丢失,导致宿主对大多数病原物抵抗力下降。近年来,随着多酚氧化酶晶... 多酚氧化酶是无脊椎动物,包括昆虫的重要免疫蛋白,经由受体识别病原物,通过丝氨酸蛋白酶切割激活,数分钟之内在病原物周围发生黑化反应。多酚氧化酶的活性抑制或者基因丢失,导致宿主对大多数病原物抵抗力下降。近年来,随着多酚氧化酶晶体结构的解析,对多酚氧化酶蛋白结构及其活性、抑菌等作用有了新的认识。同时,在昆虫中发现多酚氧化酶可能具有超越免疫的功能,显示对多酚氧化酶的研究具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 昆虫 多酚氧化酶 3型含铜蛋白酶 免疫 黑化作用
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棉纤维特异表达蓝铜蛋白基因(GhBCP1)的克隆与鉴定 被引量:5
9
作者 田琴 李艳军 +3 位作者 郭芳 张新宇 王海云 孙杰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期612-617,共6页
【目的】对从棉纤维细胞分离获得的基因GhBCP1进行序列和表达分析,初步分析其功能。【方法】采用mRNA荧光差异显示结合cDNA末端快速扩增技术克隆基因全长cDNA序列,用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推定氨基酸序列进行分析,并用荧光... 【目的】对从棉纤维细胞分离获得的基因GhBCP1进行序列和表达分析,初步分析其功能。【方法】采用mRNA荧光差异显示结合cDNA末端快速扩增技术克隆基因全长cDNA序列,用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推定氨基酸序列进行分析,并用荧光实时定量PCR法研究基因在不同组织中的表达。【结果】克隆了一个棉纤维特异表达基因的全长cDNA,命名为GhBCP1(GenBank登录号:EF222282),该cDNA全长721bp,含有一个编码176个氨基酸蛋白的开放阅读框。BLAST分析表明该基因所编码产物为一个蓝铜蛋白。Southern杂交分析表明该基因在陆地棉(Gossypium hirsytum L.)中有2个拷贝。实时荧光定量PCR分析发现该基因在棉花纤维细胞特异表达,在纤维发育过程中,GhBCP1转录产物的累积主要发生在纤维细胞发育由伸长向次生壁合成转换阶段。【结论】GhBCP1基因的组织特异性和发育阶段性表达初步证明该基因的功能可能与次生壁合成的起始密切相关。 展开更多
关键词 棉花 纤维 蓝铜蛋白 特异表达
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蓝铜蛋白质的电子顺磁共振研究
10
作者 赵敏光 《四川师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第5期30-31,共2页
本文综述了蓝铜蛋白质的电子顺磁共振研究
关键词 电子顺磁共振 蓝铜蛋白质 铜蛋白质 生物化学
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叠氮活化烟草多酚氧化酶II的机理 被引量:2
11
作者 戴亚 施春华 +1 位作者 汪长国 刘清亮 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2004年第6期1-6,共6页
至今人们一直报道叠氮作为金属蛋白 (特别是铜蛋白 )的一种抑制剂 ,本研究表明叠氮也可以作为烟草多酚氧化酶 II(简称PPOII)的激活剂。在天然 PPOII、叠氮 - PPOII络合物和过氧化物 - PPOII络合物的方波电位学研究中 ,从硝基蓝四唑 (nit... 至今人们一直报道叠氮作为金属蛋白 (特别是铜蛋白 )的一种抑制剂 ,本研究表明叠氮也可以作为烟草多酚氧化酶 II(简称PPOII)的激活剂。在天然 PPOII、叠氮 - PPOII络合物和过氧化物 - PPOII络合物的方波电位学研究中 ,从硝基蓝四唑 (nitro bluetetrazolium)能被酶还原和 PPOII能被过氧化物激活的试验结果可以看出 ,叠氮与 PPOII的结合诱导了天然 PPOII活性中心的Cu O2 - Cu生成了 Cu O2 2 - Cu活性中心结构。叠氮作为激活剂的原因应归因于叠氮分子与 PPOII的络合反应导致了 Cu O2 2 - Cu的生成 ,它恰是过氧化物 - PPOII络合物的活性中心 ,其实质是过氧负离子起到激活剂的作用。 展开更多
关键词 烟草 多酚氧化酶 叠氮 活化 铜蛋白质
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以双雌甾为模板的双核铜蛋白模型化合物的合成及催化苯偶姻的氧化 被引量:1
12
作者 鄢家明 张林 +1 位作者 谢如刚 赵华明 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期818-821,共4页
以2,4-双(N-咪唑甲基)-17β-雌二醇与1,3-二溴丙烷通过醚化偶联,继与[Cu(CH3CN)4]ClO4反应,合成了含双雌二醇、四咪唑基的新型双核铜蛋白模型化合物.研究了该模型物与相关模拟体系催化氧化苯偶姻的... 以2,4-双(N-咪唑甲基)-17β-雌二醇与1,3-二溴丙烷通过醚化偶联,继与[Cu(CH3CN)4]ClO4反应,合成了含双雌二醇、四咪唑基的新型双核铜蛋白模型化合物.研究了该模型物与相关模拟体系催化氧化苯偶姻的反应。 展开更多
关键词 双核铜蛋白 仿酶模型化合物 双雌甾 氧化 苯偶姻
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三齿NS_2型配体Cu(Ⅱ)配合物的合成、光谱性质及电化学性质
13
作者 乐学义 石巨恩 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期128-131,共4页
蓝铜蛋白具有特征的光谱性质和异常的电化学性质因而受到人们的广泛重视[1,2]。为了阐述其结构与性质之间的关系,科学家们研究了一系列模型化合物,并且已取得了某些公认的结论[1]。然而,只有很少的配合物模拟了蓝铜蛋白ES... 蓝铜蛋白具有特征的光谱性质和异常的电化学性质因而受到人们的广泛重视[1,2]。为了阐述其结构与性质之间的关系,科学家们研究了一系列模型化合物,并且已取得了某些公认的结论[1]。然而,只有很少的配合物模拟了蓝铜蛋白ESR谱中较小的超精细裂分A‖值(30... 展开更多
关键词 配合物 三齿 SN2型配体 模型化合物 蓝铜蛋白
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铜蓝蛋白及其临床应用 被引量:19
14
作者 宫春勇 《医学综述》 2006年第13期823-825,共3页
铜蓝蛋白是一种由氧化酶的a2—球蛋白与铜离子的结合物,它能调节铁的吸收和运输,具有亚铁氧化酶及胺氯化酶活性;CP作为一个急性期的反应蛋白,在临床许多疾病的诊断监测及预后判断上应用很广。
关键词 铜蓝蛋白 临床 应用
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微量元素铜在动物体内的转运代谢过程 被引量:10
15
作者 付世新 王哲 《动物医学进展》 CSCD 2003年第2期15-17,共3页
铜是所有生物必需的微量元素之一,在生物体的生长和发育过程中发挥着重要功能。为进一步研究铜在机体内的转运代谢过程,本文就微量元素铜在血液、细胞膜、细胞内的运输及其排泄途径进行了阐述。
关键词 微量元素 代谢过程 动物体内 转运 Ctr蛋白 铜元素
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抑郁症患者血清CRP、CER、Hcy和Anti-CCP抗体的浓度变化 被引量:13
16
作者 唐亚梅 周利君 +1 位作者 刘勇 秦立新 《实用预防医学》 CAS 2012年第9期1399-1401,共3页
目的探讨抑郁症患者血清C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、铜蓝蛋白(copper-protein,CER)、同型半胱氨酸(Homocysteinc,Hcy)及抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)与抑郁症的关系。方法收集本院确诊的抑郁症患者55例,健康体检者30例,采用速... 目的探讨抑郁症患者血清C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、铜蓝蛋白(copper-protein,CER)、同型半胱氨酸(Homocysteinc,Hcy)及抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)与抑郁症的关系。方法收集本院确诊的抑郁症患者55例,健康体检者30例,采用速率散射比浊法测血清CRP和CER,酶法测血清Hcy,酶联免疫吸附法测血清anti-CCP抗体,比较抑郁患者和正常对照人群的组间差异。结果与对照组比较,抑郁患者血清CRP水平无显著性变化(P>0.05),CER水平显著降低(P<0.05),Hcy和Anti-CCP水平均显著升高(P<0.05)。结论抑郁患者存在免疫炎症和自身免疫反应,CER、Hcy和anti-CCP均可能参与了抑郁症的病理进程。 展开更多
关键词 抑郁症 C-反应蛋白 铜蓝蛋白 同型半胱氨酸 抗环瓜氨酸肽抗体
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铜及铜相关蛋白在肿瘤中的研究进展 被引量:5
17
作者 王映翘 杨密 +2 位作者 王茵 刘来昱 官键 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2022年第2期265-270,共6页
铜作为机体不可缺少的微量元素,是多种酶活性位点上的辅因子,参与能量代谢、抗氧化、凝血、神经递质合成、铁代谢、色素沉着等重要生命活动。铜代谢异常会导致严重疾病,如铜缺乏引起的Menkes病及铜过量积聚引起的肝豆状核变性。铜对机... 铜作为机体不可缺少的微量元素,是多种酶活性位点上的辅因子,参与能量代谢、抗氧化、凝血、神经递质合成、铁代谢、色素沉着等重要生命活动。铜代谢异常会导致严重疾病,如铜缺乏引起的Menkes病及铜过量积聚引起的肝豆状核变性。铜对机体的重要性及其潜在毒性决定其在人体的运输与分布需要受复杂而精密的转运系统调控,其中涉及多种铜伴侣蛋白和铜转运蛋白。因此,铜与其相关蛋白密不可分。肿瘤患者体内肿瘤组织及血清铜水平显著升高。近年来,针对铜离子及铜相关蛋白调控肿瘤增殖的分子机制研究越来越深入,目前已经明确铜离子及铜相关蛋白参与肿瘤的发生发展,特别是参与肿瘤细胞侵袭与转移相关信号通路的激活。此外,铜离子及铜相关蛋白与肿瘤微环境存在串扰,共同调控肿瘤生长与转移。本文将深入探讨铜在人体的生理代谢途径、铜离子及铜相关蛋白对肿瘤自身以及肿瘤微环境的影响,并介绍以铜离子及铜相关蛋白为靶点的新型肿瘤治疗方式,为肿瘤研究及诊断治疗提供新的思路,为铜螯合剂在肿瘤治疗方面的应用提供有力的理论依据。 展开更多
关键词 肿瘤 铜代谢 铜相关蛋白 肿瘤微环境
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铜转运相关蛋白在醋酸铅致C6细胞铜蓄积中作用 被引量:4
18
作者 曹孟颖 薛玲 +6 位作者 李清钊 刘楠 李爽 高福佳 田凯琦 王琰 张艳淑 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2016年第3期262-268,274,共8页
目的探讨铜转运蛋白和铜伴侣蛋白在醋酸铅染毒致大鼠神经胶质瘤细胞株C6细胞铜蓄积中的作用。方法 1采用CCK-8实验,以终浓度为0~50μmol/L醋酸铅处理C6细胞24.0 h,筛选合适的后续实验染毒剂量。2将C6细胞分为对照组和铅染毒组,分别予... 目的探讨铜转运蛋白和铜伴侣蛋白在醋酸铅染毒致大鼠神经胶质瘤细胞株C6细胞铜蓄积中的作用。方法 1采用CCK-8实验,以终浓度为0~50μmol/L醋酸铅处理C6细胞24.0 h,筛选合适的后续实验染毒剂量。2将C6细胞分为对照组和铅染毒组,分别予终浓度为0和10μmol/L醋酸铅处理24.0 h,再予浓度为2μmol/L的氯化铜培养,于培养后0.0、0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 h收获细胞。以电感耦合等离子体-质谱法检测C6细胞内铜和铅水平,荧光实时定量聚合酶链式反应检测C6细胞中铜转运蛋白铜转运体1(CTR1)、二价金属转运体1(DMT1)、铜转运三磷酸腺苷酶α肽/β肽(ATP7A/ATP7B)和铜伴侣蛋白抗氧化蛋白1(ATOX1)、细胞色素C氧化酶17(COX17)、超氧化物歧化酶铜伴侣蛋白(CCS)的mRNA表达,以激光共聚焦检测铅染毒后细胞中CTR1和ATP7A的蛋白表达。结果 1CCK-8实验结果显示,浓度为10μmol/L的醋酸铅对C6细胞增殖尚未造成有统计学意义的影响(P〉0.05),以该浓度作为后续铅染毒剂量。2醋酸铅染毒24.0 h后,铅染毒组C6细胞中铅和铜的水平均高于对照组(P〈0.01),但2组C6细胞存活率比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。经染铜处理后,铅染毒组C6细胞存活率低于对照组(P〈0.01)。C6细胞中铜水平在铅染毒处理和染铜时间的交互效应间有统计学意义(P〈0.01);其中,在染铜后0.5~8.0 h 5个时间点,铅染毒组C6细胞中铜水平均高于对照组(P〈0.05);对照组C6细胞中铜水平在染铜后2.0 h时间点达到高峰,此后直至8.0 h时间点均维持在较为平稳的水平;而铅染毒组C6细胞中铜水平呈随着染铜时间的增加而升高的时间-效应关系,在染铜后8.0 h时间点达到高峰。醋酸铅染毒24.0 h后,与对照组比较,铅染毒组C6细胞中CTR1和DMT1的mRNA相对表达水平分别上调113.00%和36.00%(P〈0.01),ATP7A mRNA相对表达水平下调25.00%(P〈0.01),CTR1� 展开更多
关键词 醋酸铅 C6细胞 蓄积 铜转运蛋白 铜伴侣蛋白
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铜转运蛋白hCtr1结合Cu(I)并转运至铜伴侣蛋白Atox1 被引量:4
19
作者 卫浩 许德晨 +3 位作者 崔杨 魏开举 袁斯明 刘扬中 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期458-464,共7页
铜转运蛋白hCtr1细胞膜内的C端区域对于细胞的铜转运过程具有重要作用,然而这一结构域对铜离子的捕获和胞内蛋白的铜分布机理尚不清楚.为了研究hCtr1蛋白的C端结构域与铜的结合方式,通过紫外-可见吸收光谱、核磁共振谱和质谱等方法,对C... 铜转运蛋白hCtr1细胞膜内的C端区域对于细胞的铜转运过程具有重要作用,然而这一结构域对铜离子的捕获和胞内蛋白的铜分布机理尚不清楚.为了研究hCtr1蛋白的C端结构域与铜的结合方式,通过紫外-可见吸收光谱、核磁共振谱和质谱等方法,对C端8肽(C8)与铜离子的结合进行了分析.结果表明,一价铜离子对C8有很高的亲和力(log K=16.6).C8能够结合多个铜离子,其HCH基序中的组氨酸和半胱氨酸残基是铜结合位点,而另一个天冬氨酸残基也可能参与铜结合.进一步研究发现,铜离子能够从C8转移到Atox1.实验数据揭示了铜与hCtr1结合的详情,也有助于理解铜在细胞中的分布. 展开更多
关键词 金属蛋白 铜转运蛋白 铜转移 铜伴侣蛋白Atox1 核磁共振
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肠胃清对结肠癌肝转移裸鼠生存期及肿瘤组织铜转运相关蛋白表达的影响 被引量:6
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作者 张勇 成玲玲 +7 位作者 许建华 李鳌 赵璐 彭维真 孙珏 张强 朱晏伟 范忠泽 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第15期92-96,共5页
目的:观察肠胃清对结肠癌肝转移裸小鼠生存期、肿瘤生长及对肿瘤组织铜转运相关蛋白表达的影响,探讨肠胃清对结直肠癌化疗增效的作用机制。方法:BALB/C裸小鼠,采用HCT116细胞建立裸小鼠结肠癌肝转移模型,随机分为模型组,肠胃清组、化疗... 目的:观察肠胃清对结肠癌肝转移裸小鼠生存期、肿瘤生长及对肿瘤组织铜转运相关蛋白表达的影响,探讨肠胃清对结直肠癌化疗增效的作用机制。方法:BALB/C裸小鼠,采用HCT116细胞建立裸小鼠结肠癌肝转移模型,随机分为模型组,肠胃清组、化疗组、肠胃清联合化疗组(联合组),每组20只,肠胃清组ig给予相应药物,ip生理盐水,化疗组ip奥沙利铂(L-OHP),5-氟尿嘧啶(5-FU),ig给予生理盐水,联合组ig给予肠胃清,ip L-OHP,5-FU,模型组ig和ip生理盐水,连续给药3周。观察肠胃清对荷瘤小鼠生存期及肿瘤生长的影响;利用免疫组化观察肿瘤组织人铜离子转运蛋白1(h CTR1),铜转运蛋白α链(ATP7A)和P型铜转运ATP酶(ATP7B),多药耐药相关蛋白2(MRP2),谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)蛋白表达的影响;采用TUNEL法观察移植瘤组织细胞凋亡率。结果:与模型组比较,肠胃清组、化疗组、联合组抑瘤率分别为45.33%,70.51%,72.07%,以联合组明显(P<0.01);肠胃清组、化疗组、联合组裸小鼠生存时间均长于模型组(P<0.05);肠胃清组、联合组肿瘤组织中h CTR1的表达阳性率均高于模型组和化疗组(P<0.05);肠胃清组、联合组ATP7A,ATP7B和GST-π的表达阳性率均低于模型组和化疗组(P<0.05);肠胃清组、联合组的MRP2表达阳性率低于模型组(P<0.05);联合组凋亡指数高于化疗组和模型组(P<0.01)。结论:肠胃清能上调肝转移瘤组织h CTR1的表达,下调ATP7A和ATP7B蛋白表达,降低GST-π和MRP2的表达,并有增加肿瘤组织内铂药物含量的趋势,同时能诱导细胞凋亡,增加肿瘤细胞凋亡率,从而提高化疗敏感性。 展开更多
关键词 肠胃清 结直肠癌 生存期 铜转运蛋白 细胞凋亡
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