目的进一步纯化人精浆中与精子前向运动相关的蛋白并进行活性鉴定.方法运用ConA包被珠的蛋白质亲和层析技术及超滤技术对热处理后的人精浆进行蛋白分离,随后对获得的层析洗脱液经浓缩后进行聚丙酰胺凝胶电泳及Commassie Blue R-250染色...目的进一步纯化人精浆中与精子前向运动相关的蛋白并进行活性鉴定.方法运用ConA包被珠的蛋白质亲和层析技术及超滤技术对热处理后的人精浆进行蛋白分离,随后对获得的层析洗脱液经浓缩后进行聚丙酰胺凝胶电泳及Commassie Blue R-250染色,根据染色部位将电泳凝胶切割成5部分并获得各部分的蛋白浸出液.结果含第2和第3部分蛋白浸出液的实验组与公牛附睾头部精子及茶碱共同孵育后,与仅用茶碱的对照组相比,前者的精子前向运动值显著高于后者(P＜0.01).聚丙酰胺凝胶电泳及银染色分析显示,第2和第3部分蛋白的分子量分别介于85.0～135.0kDa及44.1～85.0 kDa之间;而SDS-聚丙酰胺凝胶电泳分析却发现:第2部分蛋白解离成分子量分别为89,74,18,16 kDa的条带痕迹,第3部分蛋白则解离成46.8和57.5k Da的亚基.结论人精浆中与精子前向运动相关蛋白的纯化及活性分析可能对了解该蛋白的结构和功能具有重要的意义.展开更多
