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山羊地方性鼻内肿瘤病毒Shaanxi株前病毒全基因组克隆及生物信息学分析 被引量:8
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作者 何亚鹏 付明哲 +4 位作者 许信刚 庞文静 王景 周曼 张琪 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期63-66,共4页
为研究山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV)Shaanxi株前病毒全基因组序列,本研究根据Gen Bank中收录的ENTV前病毒基因组序列设计5对引物,通过PCR方法从肿瘤组织中分段扩增获得了ENTV前病毒全基因组的5个片段,测序并分析。结果显示该病毒基因... 为研究山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV)Shaanxi株前病毒全基因组序列,本研究根据Gen Bank中收录的ENTV前病毒基因组序列设计5对引物,通过PCR方法从肿瘤组织中分段扩增获得了ENTV前病毒全基因组的5个片段,测序并分析。结果显示该病毒基因组全长7 275 bp,包含相互重叠的gag-pro-pol-env编码区及5'端非编码区;ENTV Shaanxi株基因组全序列与NC004994.2、AY197548.2、ENTV-SC株(HM104174.1)核苷酸同源性分别为89%、89%、99%。本研究为ENTV的分子生物学特性研究提供资料,为进一步研究其检测方法与致病机理奠定了基础。 展开更多
关键词 山羊 地方性鼻内肿瘤病毒 全基因克隆 生物信息学分析
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山东烟区首次发现番茄斑萎病毒侵染 被引量:6
2
作者 张万红 冯佳 +10 位作者 ALI Kamran 罗健达 杨举田 王术科 宗浩 申莉莉 李莹 王凤龙 张石飞 杨金广 金轲 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2020年第5期87-91,共5页
为确定番茄斑萎病毒(TSWV)在山东烟草上的侵染,基于GenBank中已有的TSWV基因组序列设计该病毒特异性引物,通过总RNA提取,RT-PCR扩增,全基因组序列测定和拼接分析等,结果表明,山东临沂疑似病样中含有TSWV,该TSWV分离物具有3条RNA链,大小... 为确定番茄斑萎病毒(TSWV)在山东烟草上的侵染,基于GenBank中已有的TSWV基因组序列设计该病毒特异性引物,通过总RNA提取,RT-PCR扩增,全基因组序列测定和拼接分析等,结果表明,山东临沂疑似病样中含有TSWV,该TSWV分离物具有3条RNA链,大小分别为8911、4773和2971bp,与国内已报道的其他TSWV分离物核酸序列同源性均在99.0%以上,蛋白氨基酸序列同源性均在98.0%以上。系统进化分析结果显示,该分离物与已报道的TSWV云南分离物聚类到同一分支中,推测山东烟区中的TSWV可能由云南烟区通过带毒介体的迁入而传入。该研究为山东烟区TSWV的发生流行溯源和该危险性病毒病的精准测报及防控提供科学依据。 展开更多
关键词 番茄斑萎病毒(TSWV) 全基因组克隆 系统发育树
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山羊地方性鼻内肿瘤病毒ENTV/CH/GT/2015株全基因组cDNA文库的构建及生物信息学分析 被引量:2
3
作者 林裕胜 江锦秀 +2 位作者 张靖鹏 游伟 胡奇林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1707-1714,共8页
为获得山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)古田株(暂命名为:ENTV/CH/GT/2015株)全基因组序列。通过PCR方法从山羊鼻内肿瘤组织中分段扩增获得ENTV-2全基因组7个片段,目的片段经胶回收后分别连接至pMD19-T载体上,并转化至基因工程菌DH5a,提... 为获得山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)古田株(暂命名为:ENTV/CH/GT/2015株)全基因组序列。通过PCR方法从山羊鼻内肿瘤组织中分段扩增获得ENTV-2全基因组7个片段,目的片段经胶回收后分别连接至pMD19-T载体上,并转化至基因工程菌DH5a,提取阳性质粒进行测序,利用生物学软件对获得的序列进行拼接分析。获得ENTV/CH/GT/2015株全基因组序列长度为7506 bp,包含相互重叠的gag-pro-pol-env编码区及5′端非编码区,并上传至GenBank上获得登录号为MK210250.1;与国外NC004994.2株和AY197548.2株核苷酸同源性均为87.5%,与国内ENTV-2CHN8株核苷酸同源性为97.7%。氨基酸序列分析结果显示,gag蛋白在124~126 aa插入GVE 3个氨基酸和229~232 aa插入APPP 4个氨基酸,env蛋白在590~593 aa处存在AESL 4个氨基酸的缺失;gag和env蛋白抗原表位分析结果显示,尽管存在氨基酸的突变和缺失,但抗原表位并没有明显差异。糖基化位点预测结果显示:gag、pro、pol和env蛋白分别含有1,1,4,6个糖基化位点,均可能不包含信号肽。遗传进化树分析结果推测,该毒株是国内ENTV-2CHN2株和ENTV-2CHN10株变异毒株。本研究获得ENTV/CH/GT/2015株全基因序列并明确其生物学特性,不仅丰富了ENTV-2全基因序列库,还为今后研究ENTV-2快速检测方法及致病机理提供了研究素材。 展开更多
关键词 山羊 地方性鼻内肿瘤病毒 全基因克隆 生物信息学分析
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绵羊肺腺瘤病毒NM株前病毒基因组的克隆与全序列分析 被引量:15
4
作者 刘淑英 马学恩 +1 位作者 齐景伟 王宇 《中国病毒学》 CSCD 2006年第5期443-448,共6页
本研究参照GenBank中已发表的绵羊肺腺瘤病毒的基因组全序列,设计合成8对引物,从内蒙古某羊场自然感染绵羊肺腺瘤病的病肺肿瘤组织中提取总DNA为模板,对JSRV-NM株基因组分8段进行PCR扩增,产物分别为8个(531bp,888bp,949bp,944bp,1428bp,... 本研究参照GenBank中已发表的绵羊肺腺瘤病毒的基因组全序列,设计合成8对引物,从内蒙古某羊场自然感染绵羊肺腺瘤病的病肺肿瘤组织中提取总DNA为模板,对JSRV-NM株基因组分8段进行PCR扩增,产物分别为8个(531bp,888bp,949bp,944bp,1428bp,947bp,1836bp,538bp)基因片段,将其分别克隆入pMD-18T载体中进行双向测序并拼接序列,获得完整的JSRV-NM株前病毒基因组全序列。结果表明,JSRV-NM株前病毒基因组全长7430bp,有相互重叠的4个较长的开放阅读框(ORF),分别代表gag、pro、pol和env基因。与绵羊肺腺瘤病毒Ⅰ型即南非代表株(NC-001494)和绵羊肺腺瘤病毒Ⅱ型即美国代表株(AF105220)的核苷酸同源性比较分别为90.4%和90%,推导出的氨基酸同源性分别为90%和89.1%。分析JSRV-NM株基因组结构,发现在LTR的上游和下游都具有外源性exJSRV特有的ScaⅠ酶切位点,在gag基因编码的NC区发现有2个较典型的“胱氨酸—组氨酸序列”,可形成锌指结构。在env基因编码的TM区有特异性的“YXXM”基序。用地高辛标记外源性exJSRV特异的JSRV-2片段制成探针,原位杂交法检测自然感染绵羊肺腺瘤病(OPA)的病肺组织中JSRV-NM的RNA及前病毒DNA,结果表明OPA患羊肺肿瘤细胞的胞浆和核内都有JSRV-2基因mRNA的表达,说明JSRV-NM株是具有致瘤作用的外源性反转录病毒。这是我国首次报道的绵羊肺腺瘤病毒的基因组全序列。 展开更多
关键词 绵羊肺腺瘤病毒 全基因组 克隆 序列分析
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鸡传染性贫血病毒广西株全基因组的克隆与序列分析 被引量:7
5
作者 邓显文 谢芝勋 +3 位作者 谢丽基 刘加波 谢志勤 庞耀珊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期19-22,共4页
为了解鸡传染性贫血病毒(CIAV)广西分离株全基因变异情况,设计3对特异性引物,对CIAV广西分离株(GXC060821)的全基因进行PCR扩增、克隆和序列分析。结果显示,广西分离株的全基因为2 292个核苷酸,含有3个互相重叠的开放阅读框(ORF)... 为了解鸡传染性贫血病毒(CIAV)广西分离株全基因变异情况,设计3对特异性引物,对CIAV广西分离株(GXC060821)的全基因进行PCR扩增、克隆和序列分析。结果显示,广西分离株的全基因为2 292个核苷酸,含有3个互相重叠的开放阅读框(ORF)。序列分析表明,本CIAV分离株与国内外其他31个CIAV毒株比较核苷酸的同源性在96.1%~98.5%之间,推导氨基酸的同源性在89.8%~94.2%之间。全基因系统发育进化树分析显示,广西分离株和中国的TJBD40株、LF4株都处于一个分支,它们的亲缘关系较近,而与美国的98D06073分离株及中国的HA4分离株的亲缘关系较远。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 全基因组 克隆 序列分析
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猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与序列分析 被引量:5
6
作者 王亚丹 卢权威 +5 位作者 陈红英 崔保安 王淑娟 朱前磊 王子馨 钞安军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1429-1434,共6页
利用PCR方法,对河南郑州、南阳、焦作等地采集的疑似猪圆环病毒2型(PCV2)感染的病料进行检测。PCR检测为阳性的病料经处理后,接种无PCV污染的PK-15细胞中盲传6代,克隆11株PCV2全基因组并进行序列分析。结果表明,11株PCV2中有10株基因组... 利用PCR方法,对河南郑州、南阳、焦作等地采集的疑似猪圆环病毒2型(PCV2)感染的病料进行检测。PCR检测为阳性的病料经处理后,接种无PCV污染的PK-15细胞中盲传6代,克隆11株PCV2全基因组并进行序列分析。结果表明,11株PCV2中有10株基因组全长为1 767bp,基因组分型为PCV2b,1株为1 768bp,说明PCV2b是河南省断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)发生的主要因素;11个毒株的同源性位于94.9%~100%,与其他毒株的同源性为94.7%~100%;10株基因组为1 767bp的毒株处于一大分支上,遗传进化比较稳定;本试验为PCV2在河南地区的分子流行病学、遗传变异及防治奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 全基因序列 克隆 序列分析
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10株猪圆环病毒2型(PCV2)河南株全基因组的克隆与序列分析 被引量:5
7
作者 陈陆 彭志锋 +5 位作者 杨霞 陈圆圆 王宏魁 孙彦婷 郑鹿平 王川庆 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期166-173,共8页
为了解猪圆环病毒2型(PCV2)河南株的起源及遗传变异,从河南省不同临床表现的病猪中克隆了10株PCV2的全基因组,并对其进行了序列测定及分析。结果表明,河南株之间以及与中国其他地区PCV2流行株之间同源性均很高;河南株均处于欧洲分支中,... 为了解猪圆环病毒2型(PCV2)河南株的起源及遗传变异,从河南省不同临床表现的病猪中克隆了10株PCV2的全基因组,并对其进行了序列测定及分析。结果表明,河南株之间以及与中国其他地区PCV2流行株之间同源性均很高;河南株均处于欧洲分支中,提示PCV2河南株可能起源于欧洲株;河南省不同年份的PCV2中确实存在一定的基因差异,但PCV2全基因组从总体上来说遗传进化相对稳定;河南省猪群中与PCV相关的疾病不是由PCV2变异毒株引起的。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 全基因组克隆 序列分析
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猪细小病毒河南分离株全基因组克隆及序列分析 被引量:4
8
作者 陈龙彪 高晓云 +5 位作者 吴宇阳 冯亚琼 陈红英 崔保安 马世杰 郭官鹏 《安徽农业科学》 CAS 2015年第4期26-29,33,共5页
[目的]进一步了解河南地区猪细小病毒(PPV)的变异特点。[方法]利用PCR方法,对河南郑州、周口、济源等地采集的疑似PPV感染的病料进行检测。PCR检测为阳性的病料经处理后,同步接种猪睾丸细胞盲传6代,对4株PPV全基因组进行分段克隆及测... [目的]进一步了解河南地区猪细小病毒(PPV)的变异特点。[方法]利用PCR方法,对河南郑州、周口、济源等地采集的疑似PPV感染的病料进行检测。PCR检测为阳性的病料经处理后,同步接种猪睾丸细胞盲传6代,对4株PPV全基因组进行分段克隆及测序,并与Gen Bank登录的国内外PPV流行株全基因组进行比较。[结果]获得的4株PPV全基因组序列全长均为4 679 bp。4个毒株之间的核苷酸同源性介于99.6%-99.8%,与其他毒株间核苷酸同源性为98%-100%,遗传进化较为稳定。[结论]为PPV在河南地区分子流行病学调查及遗传变异分析奠定了基础。 展开更多
关键词 猪细小病毒 全基因组 克隆 序列分析
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1株猪圆环病毒3型全基因组克隆与序列分析 被引量:3
9
作者 胡胜云 刘鑫宇 +3 位作者 柳迦鹏 王阳 石玉佩 周双海 《北京农学院学报》 2019年第1期66-69,共4页
【目的】克隆获得1株猪圆环病毒3型(PCV3)全基因组序列并进行序列分析。【方法】以PCV3阳性临床样品为模板,用PCR技术扩增PCV3全基因组片段,随后进行克隆、序列测定与分析。【结果】扩增出1株PCV3全基因组片段,序列测定结果显示,这株PCV... 【目的】克隆获得1株猪圆环病毒3型(PCV3)全基因组序列并进行序列分析。【方法】以PCV3阳性临床样品为模板,用PCR技术扩增PCV3全基因组片段,随后进行克隆、序列测定与分析。【结果】扩增出1株PCV3全基因组片段,序列测定结果显示,这株PCV3全基因组大小为2 000bp,与其他国内外14株PCV3的核苷酸同源性均达98.6%以上,表明获得1株PCV3全基因组序列,且不同PCV3之间的全基因组核苷酸有非常高的同源性。PCV3与PCV1、PCV2之间的全基因组核苷酸同源性都低于50%。系统发育显示,3种PCV分别处于明显不同的分支,表明各自属于不同的基因型。【结论】获得1株PCV3全基因组序列,其与其他PCV3毒株之间的核苷酸同源性很高。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 全基因组 基因克隆 序列分析
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1株圆环病毒3型美国毒株全基因组克隆与遗传演化分析 被引量:1
10
作者 郑晶 郝桂英 +8 位作者 谢礼 安微 杨苗 陈瑛琪 张婧 郑巧 陈溪 陈孝宇 林华 《中国动物检疫》 CAS 2022年第1期116-123,共8页
为了解进口美国种猪中获取的猪圆环病毒3型(PCV3)毒株全基因组序列及遗传变异情况,根据GenBank中收录的PCV3基因组序列,设计2对特异性引物,对确诊感染PCV3的病死猪组织进行全基因组序列扩增、拼接、测序和序列分析。结果显示,获得的PCV... 为了解进口美国种猪中获取的猪圆环病毒3型(PCV3)毒株全基因组序列及遗传变异情况,根据GenBank中收录的PCV3基因组序列,设计2对特异性引物,对确诊感染PCV3的病死猪组织进行全基因组序列扩增、拼接、测序和序列分析。结果显示,获得的PCV3美国毒株(命名为PCV3_USA2021,GenBank登录号OL799306)全基因组序列长度约为2000 bp,与国内外不同地区的38个PCV3参考毒株同源性为98.7%~99.8%。其中,PCV3_USA2021株开放阅读框ORF1和ORF2与国内外38个参考毒株同源性分别为99.1%~99.9%和98.0%~100%。构建的全基因组系统进化树显示,该毒株为PCV3a亚型,与美国毒株(PCV3-US_SD2016)亲缘关系最近。本研究为PCV3的遗传变异、流行病学分析提供了参考,也为相关疫苗的研制打下了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 全基因组克隆 遗传演化分析 CAP蛋白 美国毒株
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猪乙脑病毒HW株的全基因组克隆及分析 被引量:2
11
作者 付文鹏 陈建军 +3 位作者 岳桂平 熊东海 徐涤平 杨在清 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期117-119,共3页
关键词 日本乙型脑炎病毒 全基因组 克隆
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PCV2海南株全基因组的克隆与序列分析 被引量:2
12
作者 曹宗喜 郑心力 +3 位作者 张艳 叶保国 林哲敏 王峰 《广东农业科学》 CAS 2015年第8期118-123,F0003,共7页
为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)海南株的分子特征,采用PCR方法从疑似PCV2感染的猪组织病料中扩增基因并进行序列分析。结果表明:8株PCV2海南株均属于PCV2b型,其中7株为PCV2b-1C亚型,1株为PCV2b-1A/1B亚型。PCV2海南株的ORF2基因的长度... 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)海南株的分子特征,采用PCR方法从疑似PCV2感染的猪组织病料中扩增基因并进行序列分析。结果表明:8株PCV2海南株均属于PCV2b型,其中7株为PCV2b-1C亚型,1株为PCV2b-1A/1B亚型。PCV2海南株的ORF2基因的长度均为705 bp,编码234个氨基酸。Cap蛋白的抗原表位区发生了一定的变异。8个PCV2海南株的ORF2基因之间核苷酸序列相似性及推导的氨基酸序列相似性分别为95.3%~99.7%和93.6%~100%。海南株与国内分离株(AY682994,AF381175,JX945577,JX682407,AY180397)的核苷酸序列相似性为91.0%~99.9%,推导的氨基酸相似性为91.0%~99.6%。海南株与国外分离株(NC_005148,JQ994268,KJ187306,AF201307,AF454546,AY754020)的核苷酸序列相似性为90.0%~97.0%,推导的氨基酸相似性为88.0%~97.9%。海南株与疫苗株SH的核苷酸序列相似性为98.2%~100.0%,推导的氨基酸相似性为94.9%~100.0%。海南株与疫苗株LG的核苷酸序列相似性为90.6%~91.7%,推导的氨基酸相似性为89.7%~91.0%。这些数据为海南地区PCV2的防控和疫苗株选择提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 全基因组 克隆 序列分析
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Phylogenetic Relationship Analysis of the Complete Genomes of Porcine Circovirus Type 2( PCV2) Strains Isolated from Hainan Province
13
作者 Baoguo YE Xinli ZHENG +3 位作者 Yan ZHANG Zhemin LIN Feng WANG Zongxi CAO 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2015年第5期45-48,53,共5页
[ Objective] This study aimed to investigate the molecular characteristics of porcine circovirus type 2 (PCV2) strains isolated from Hainan Province. [ Method] The complete genome of PCV2 was amplified from PMWS-sus... [ Objective] This study aimed to investigate the molecular characteristics of porcine circovirus type 2 (PCV2) strains isolated from Hainan Province. [ Method] The complete genome of PCV2 was amplified from PMWS-suspected samples by PCR for sequence analysis. [ Result] A total of eight PCV2 strains were isolated and identified. All the eight isolates belonged to genotype PCV2b, among which seven isolates belonged to subgenotype PCV2b-1 C, and one isolate be- longed to subgenotype PCV2b-IA/1B. ORF2 gene of PCV2 isolates from Hainan Province was 705 bp in length, encoding 234 amino acids. Antigenic epitopes of Cap protein exhibited certain changes. Nucleotide sequences and deduced amino acid sequences of ORF2 gene shared 95.3% -99.7% and 93.6% - 100% simi- larities among eight PCV2 isolates from Hainan Province, respectively. Moreover, nucleotide sequences and deduced amino acid sequences of ORF2 gene of PCV2 isolates from Hainan Province shared 91.0% -99.9% and 91.0% -99.6% similarities with other PCV2 strain isolated from China (AY682994, AF381175, JX945577, JX682407, AY180397 ), respectively; nucleotide sequences and deduced amino acid sequences of ORF2 gene of PCV2 isolates from Hainan Province shared 90.0% - 97.0% and 88.0% -97.9% similarities with PCV2 isolates from other countries ( NC_005148, JQ994268, KJ187306, AF201307, AF454546, AY"/Sd020), respectively; nucleotide sequences and deduced amino acid sequences of ORF2 gene of PCV2 isolates from Hainan Province shared 98.2% -100% and 94.9% -100% similarities with vaccine strain SH, respectively; nucleotide sequences and deduced amino acid sequences of ORF2 gene of PCV2 isolates from Hainan Province shared 90.6% -91.7% and 89.7% - 91.0% similarities with vaccine strain LG, respectively. [ Conclusion] This study provided theoretical hasis for the prevention and control of PCV2 and selection of vaccine strains in Hainan Province. 展开更多
关键词 Porcine circovirus type 2 complete genome cloning Sequence analysis
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猪圆环病毒2型滨州分离株全基因组的克隆与序列分析 被引量:1
14
作者 张文通 李峰 +3 位作者 魏凤 苗立中 吴家强 沈志强 《动物医学进展》 北大核心 2015年第9期33-36,共4页
为了解猪圆环病毒2型(PCV-2)滨州地方分离株的起源及遗传变异,从滨州不同区域疑似病猪病料中克隆了3株PCV-2的全基因组序列,并进行序列测定及分析。核苷酸同源性比较显示,PCV-2分离株BZ-1、BZ-2及BZ-3与GenBank上登录的14株PCV-2同源... 为了解猪圆环病毒2型(PCV-2)滨州地方分离株的起源及遗传变异,从滨州不同区域疑似病猪病料中克隆了3株PCV-2的全基因组序列,并进行序列测定及分析。核苷酸同源性比较显示,PCV-2分离株BZ-1、BZ-2及BZ-3与GenBank上登录的14株PCV-2同源性为95.6%~99.9%;核苷酸遗传进化树分析显示,BZ-1株与BZ-3株处在同一分支,而BZ-2株处在另一分支。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 全基因组 克隆 序列分析
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猪圆环病毒2型辽宁株全基因组克隆与序列分析 被引量:1
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作者 隋昀原 荣柳 +2 位作者 陈美君 朱耀才 沈国顺 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期26-29,共4页
本试验从辽宁地区某猪场疑似患有断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪群中采集病料,采用PCR方法进行猪圆环病毒2型(porcinecircovirustype2,PCV2)的检测,在此基础上对阳性病料进行PCV2全基因组克隆和序列分析。结果表明,PCV2辽... 本试验从辽宁地区某猪场疑似患有断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪群中采集病料,采用PCR方法进行猪圆环病毒2型(porcinecircovirustype2,PCV2)的检测,在此基础上对阳性病料进行PCV2全基因组克隆和序列分析。结果表明,PCV2辽宁分离株基因组全长为1768bp,与国内外PCV2分离株的同源性为95.9%~99.5%,其中与丹麦分离株(EF565365)、澳大利亚分离株(AY424405)和江苏分离株(FJ158606)同源性最高,均为99.5%;与广东分离株(JX912915)同源性最低,为95.9%。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 全基因 克隆 序列分析
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一株猪圆环病毒2型全基因组的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 王伟丞 梁海英 +2 位作者 曾智勇 汤德元 刘钊 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期20-22,共3页
应用猪繁殖障碍性病毒性疫病6重PCR检测方法对贵州省开阳县某规猪场送检的1头疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征的病死仔猪进行病原检测,确诊感染有猪圆环病毒2型(PCV2)后,对该病毒全基因组进行扩增,将其克隆到pMD19-T Simple载体上,筛选... 应用猪繁殖障碍性病毒性疫病6重PCR检测方法对贵州省开阳县某规猪场送检的1头疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征的病死仔猪进行病原检测,确诊感染有猪圆环病毒2型(PCV2)后,对该病毒全基因组进行扩增,将其克隆到pMD19-T Simple载体上,筛选获得了重组质粒pMD19-T-PCV2,并对其进行序列测定和分析。结果表明:克隆得到的PCV2毒株的基因组全长为1 767 bp,与国内外参考毒株核苷酸序列相似性为94.1%-98.4%,根据欧盟猪圆环病毒疾病委员会规定的PCV2基因型划分标准,将PCV2 GZ-KY1毒株划分为PCV2b亚型。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 基因组 克隆 序列分析
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传染性囊病病毒完整基因组的克隆和鉴定 被引量:5
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作者 曹永长 刘爵 +2 位作者 刘有昌 毕英佐 周蛟 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1999年第8期3-6,共4页
本文采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,在体外将1株IBDV弱毒株GZ911的基因组扩增为4个片断——GA5,GA3,GB5,GB3。将GA5和GA3依次克隆到pBssK载体上,构建含有GZ911毒株A片断... 本文采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,在体外将1株IBDV弱毒株GZ911的基因组扩增为4个片断——GA5,GA3,GB5,GB3。将GA5和GA3依次克隆到pBssK载体上,构建含有GZ911毒株A片断完整基因的质粒GA-pBssK。将GB3和GB5依次克隆到pBssK载体上,得到含有B片断完整基因的质粒GB-pBssK。酶切分析表明,质粒GA-pBssK和GB-pBssK的大小分别约为6.2kb和5.7kb,与预期的一致。并对A,B片断末端的DNA序列进行了分析。结果表明,本文构建的两个质粒分别包含了GZ911毒株的两个片断的完整基因。 展开更多
关键词 传染性囊病病毒 基因组 基因克隆 IBDV 鉴定
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