增强化学发光酶免疫法对猪肉中盐酸克伦特罗的检测 被引量：21

1

作者 王硕 李细芬 +3 位作者 生威 张燕 杨泽琳 方国臻 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期215-219,共5页

建立了猪肉中克伦特罗（CLB）的直接竞争化学发光酶免疫检测（dc—CLEIA）方法。通过优化离子强度、pH值确立了化学发光酶免疫法的标准曲线，优化后dc—CLEIA的检出限可达0．02μg/L。猪肉中的盐酸克伦特罗用高氯酸提取、SPE净化后绘制... 建立了猪肉中克伦特罗（CLB）的直接竞争化学发光酶免疫检测（dc—CLEIA）方法。通过优化离子强度、pH值确立了化学发光酶免疫法的标准曲线，优化后dc—CLEIA的检出限可达0．02μg/L。猪肉中的盐酸克伦特罗用高氯酸提取、SPE净化后绘制基质曲线，基质曲线与标准曲线吻合，说明基质影响基本消除。测定0．10、1．0、5．0μg/kg3个水平的添加回收率，平均回收率为83％～98％，批内与批间的相对标准偏差均小于15％。进一步研究了dc—CLEIA与HPLC两种方法测定猪肉样品的相关性，结果显示两者测定结果相关性良好，r=0．9647，说明所建立的直接化学发光酶免疫方法可用于实际样品的检测，结果准确可靠。 展开更多

关键词 直接竞争 化学发光酶免疫法 克伦特罗 猪肉

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化学发光酶免疫法检测猪肉中氯丙嗪残留 被引量：17

2

作者 孙文佳 沈玉栋 +4 位作者 孙远明 雷红涛 王弘 曾道平 杨金易 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1397-1402,共6页

采用棋盘滴定法确定包被抗原浓度和抗体稀释倍数,通过单因素实验优化了竞争反应时间、磷酸盐缓冲液浓度、甲醇含量、pH值等参数,建立了氯丙嗪的间接竞争化学发光酶免疫检测方法,并考察了方法的特异性、灵敏度和稳定性。结果表明,最佳反... 采用棋盘滴定法确定包被抗原浓度和抗体稀释倍数,通过单因素实验优化了竞争反应时间、磷酸盐缓冲液浓度、甲醇含量、pH值等参数,建立了氯丙嗪的间接竞争化学发光酶免疫检测方法,并考察了方法的特异性、灵敏度和稳定性。结果表明,最佳反应条件为包被抗原浓度为0.05!g/L;氯丙嗪抗体稀释32000倍;体系缓冲液为含10%甲醇、0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)。本方法的IC50为0.12!g/L;检出限为0.02!g/L;线性范围0.02～24.78!g/L;批内和批间相对标准偏差均小于10%。与其它结构类似物没有明显交叉反应。猪肉检测的平均回收率为87.4%～105.6%,与高效液相色谱方法的相关性良好。本方法具有较高的灵敏度和较好的稳定性。 展开更多

关键词 氯丙嗪 间接竞争 化学发光酶免疫方法 氯丙嗪残留 猪肉

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郑州某粮库小麦中玉米赤霉烯酮含量的检测 被引量：8

3

作者 徐新慧 晏猛 +6 位作者 符锋 贺秀媛 周华东 张君涛 李小佳 邓立新 王建华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第4期59-62,共4页

为了解动物饲料小麦中是否含有玉米赤霉烯酮毒素,应用竞争性酶免疫分析法快速定量测定43个小麦样品中玉米赤霉烯酮毒素的含量,并进行了分析。结果显示,在被检的43个小麦样品中,含有玉米赤霉烯酮的有5个(5/43),检出率占11.6%,玉米赤霉烯... 为了解动物饲料小麦中是否含有玉米赤霉烯酮毒素,应用竞争性酶免疫分析法快速定量测定43个小麦样品中玉米赤霉烯酮毒素的含量,并进行了分析。结果显示,在被检的43个小麦样品中,含有玉米赤霉烯酮的有5个(5/43),检出率占11.6%,玉米赤霉烯酮含量超过国家粮食卫生标准的有3个(3/43),超标率占7.0%,说明作为畜禽饲料原料的小麦,存在引发动物玉米赤霉烯酮毒素中毒的潜在危险。本法适宜于大批量小麦样品中玉米赤霉烯酮含量的快速测定,这对于选择品质优良的小麦作为饲料、避免玉米赤霉烯酮对畜禽生长危害有重要意义。 展开更多

关键词 小麦 玉米赤霉烯酮 竞争性酶免疫分析法 测定

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人血清转铁蛋白酶联免疫测定法的研究 被引量：2

4

作者 何涛 吴明泸 +3 位作者 罗文炽 杨烨 刘友平 周志远 《泸州医学院学报》 1999年第2期99-101,共3页

目的：建立人血清转铁蛋白（Tf）的竞争性酶联免疫测定法（CEIA），促进Tf的实验研究及临床检测。方法：采用纯化人Tf免疫家兔制备抗血清，进行间接竞争性酶联免疫抑制试验，并进行灵敏度、精确度准确性、特异性试验。结果：通过棋盘滴... 目的：建立人血清转铁蛋白（Tf）的竞争性酶联免疫测定法（CEIA），促进Tf的实验研究及临床检测。方法：采用纯化人Tf免疫家兔制备抗血清，进行间接竞争性酶联免疫抑制试验，并进行灵敏度、精确度准确性、特异性试验。结果：通过棋盘滴定确定抗原包被浓度以10μg／ml，抗血清稀释度以1：4000为最佳工作条件，标准曲线工作范围为0．5～256μg／L，灵敏度为0．39μg／L，批内及批间变异系数分别为6．0％及8．2％，回收率为95．6％，与人血清白蛋白、牛血清白蛋白、铁蛋白、γ－球蛋白无交叉结合反应。用该法测定正常人（20例）、肝病患者（15例）血清Tf含量分别为2．61±0．37g／L、1．85±0．31g／L。结论：该法具有简便、准确、特异、灵敏和成本低的优点，可用于Tf的实验与临床研究。 展开更多

关键词 转铁蛋白 ELISA 血清

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竞争酶免疫分析法用于抗-D浓度检测及其与效价值相关性 被引量：1

5

作者 陈思恬 宋宁 +2 位作者 田力 徐海霞 刘忠 《中国输血杂志》 CAS 2020年第4期373-375,共3页

目的建立检测抗-D浓度的竞争酶免疫分析法(EIA)检测抗-D浓度,探讨抗-D浓度与效价的相关性。方法应用EIA法检测抗-D标准品浓度并建立标准曲线,收集18(人)份抗-D阳性血浆并使用EIA法检测其抗-D浓度;同时用试管法检测18份标本的抗-D效价。... 目的建立检测抗-D浓度的竞争酶免疫分析法(EIA)检测抗-D浓度,探讨抗-D浓度与效价的相关性。方法应用EIA法检测抗-D标准品浓度并建立标准曲线,收集18(人)份抗-D阳性血浆并使用EIA法检测其抗-D浓度;同时用试管法检测18份标本的抗-D效价。采用简单线性回归分析抗-D浓度与效价的相关性。结果抗-D标准品浓度(1.78—28.5)IU/mL在EIA法检测标准曲线的线形范围内,r2>0.99;抗-D浓度(3.2—43.7)IU/mL时,抗-D效价为4—256,二者的回归模型Y=6.829+0.158X(X为效价,Y为浓度),回归方程r2=0.932(P<0.01)。结论EIA法可定量检测抗-D浓度,抗-D浓度与效价呈良好的相关性。 展开更多

关键词 竞争酶免疫分析 抗-D浓度 抗-D效价 试管法 相关性 RHD阴性

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虾肉中呋喃它酮代谢物化学发光酶免疫分析方法的建立 被引量：12

6

作者 杨武英 董洁娴 +5 位作者 沈玉栋 杨金易 王弘 徐振林 杨星星 孙远明 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1816-1821,共6页

采用对碘苯酚增强的HRP-鲁米诺-H2O2化学发光体系,建立了虾肉中呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮(AMOZ)残留的间接竞争化学发光酶免疫分析(icCLEIA)检测方法。检测所用抗体是基因重组的抗AMOZ衍生物单链抗体。优化的icCLEI... 采用对碘苯酚增强的HRP-鲁米诺-H2O2化学发光体系,建立了虾肉中呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮(AMOZ)残留的间接竞争化学发光酶免疫分析(icCLEIA)检测方法。检测所用抗体是基因重组的抗AMOZ衍生物单链抗体。优化的icCLEIA最佳工作条件为:AMOZA-OVA包被浓度62.5μg/L,抗AMOZ衍生物单链抗体最佳稀释度为1∶10,竞争免疫反应时间45 min,HRP酶标记羊抗鼠抗体最佳稀释度为1∶10000,孵育时间50 min。本方法的IC50为1.38μg/L;灵敏度为0.09μg/L;线性范围为0.26～9.08μg/L(IC20～IC80);批内和批间相对标准偏差均小于15%;抗AMOZ衍生物单链抗体与其它硝基呋喃类抗生素及其代谢物均没有交叉反应,特异性良好。4个不同添加量的AMOZ加标样品的平均回收率分别为72.2%,73.4%,72.6%和78.6%。与HPLC-MS/MS法测定值进行比较发现,两种方法相关性良好(R2=0.9997)。本方法可用于水产品中AMOZ残留的快速检测。 展开更多

关键词 呋喃它酮代谢物AMOZ 刀额新对虾 间接竞争化学发光酶免疫分析 辣根过氧化物酶

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猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体竞争化学发光酶联免疫检测方法的建立 被引量：11

7

作者 马震原 王淑娟 +5 位作者 闫若潜 班付国 赵雪丽 谢彩华 王华俊 王东方 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期574-583,共10页

为了建立一种快速定量检测猪伪狂犬病病毒(PRV)gB蛋白抗体的竞争化学发光酶联免疫检测方法,以大肠杆菌表达并纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记的抗gB蛋白单克隆抗体作为酶标抗体,以国家参考品稀释制备... 为了建立一种快速定量检测猪伪狂犬病病毒(PRV)gB蛋白抗体的竞争化学发光酶联免疫检测方法,以大肠杆菌表达并纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记的抗gB蛋白单克隆抗体作为酶标抗体,以国家参考品稀释制备的校准品绘制标准曲线实现定量检测,成功建立的PRV-gB-CLEIA在45 min内即可完成检测,可检测到最大稀释倍数为1∶2 048稀释的国家参考品;与猪瘟等其他5种病毒抗原的标准阳性血清无交叉反应;批内变异系数为1.13%~9.47%,批间变异系数为2.43%~14.07%,重复性和稳定性较好。通过对采集的180份临床血清检测结果进行比较,该方法与中和试验阳性符合率为94.00%,阴性符合率为96.92%,总符合率为96.11%,明显优于商品化ELISA试剂盒。本研究建立的PRV-gB-CLEIA检测方法可以用于PRV gB抗体的快速定量检测。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 gB蛋白 竞争化学发光酶联免疫 定量

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家禽饲料中玉米赤霉烯酮化学发光酶联免疫分析方法的建立 被引量：9

8

作者 熊挺 蒋蔚 +4 位作者 韩阳瑞 龙梦瑶 凌娇 王权 孙卫东 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第2期122-130,共9页

为了建立比较间接竞争化学发光酶联免疫分析法（ic-CLEIA）与直接竞争化学发光酶联免疫分析法（dc-CLEIA）检测家禽饲料中玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）的方法,采用二因子交叉试验优化确定最佳包被原浓度和抗体稀释度,建立ic-CLEIA和... 为了建立比较间接竞争化学发光酶联免疫分析法（ic-CLEIA）与直接竞争化学发光酶联免疫分析法（dc-CLEIA）检测家禽饲料中玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）的方法,采用二因子交叉试验优化确定最佳包被原浓度和抗体稀释度,建立ic-CLEIA和dc-CLEIA。结果显示：icCLEIA在0.05-5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.383 5x＋0.417 9（R^2=0.994 6）,灵敏度（IC50）为0.611 ng/m L,检出限（LOD）为15 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.79%和1.02%,家禽饲料添加样品回收率为91.9%-112.1%,变异系数小于10.5%;dcCLEIA在0.025-5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.386 5x＋0.334 1（R^2=0.991 8）,灵敏度（IC50）为0.372 ng/m L,检出限（LOD）为3 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.16%和1.20%,添加样品回收率为87.3%-119.3%,变异系数小于9.8%。结果表明：两种方法精确,灵敏度高,均可作为定量检测ZEN的有效手段;与ic-CLEIA相比,dc-CLEIA更适用于检测家禽饲料中的ZEN。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 间接竞争化学发光酶联分析法 直接竞争化学发光酶联分析法 家禽饲料

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N端脑钠肽原对儿童肺炎合并心力衰竭的诊断价值 被引量：8

9

作者 刘坚 乔发清 +5 位作者 罗小平 何学琴 吴彩萍 赵建中 陈嘉莉 戚佑荣 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期672-675,共4页

目的评估N端脑钠肽原(NT-proBNP)对儿童肺炎合并心力衰竭(HF)的诊断价值。方法采用竞争性酶免疫法(EIA)测定血浆NT-proBNP浓度,同时测定CK-MB、LDH1和肌钙I(CTnI)的浓度。将肺炎患儿分成HF组和非HF组,HF组测左室射血分数(LVEF)。结果年... 目的评估N端脑钠肽原(NT-proBNP)对儿童肺炎合并心力衰竭(HF)的诊断价值。方法采用竞争性酶免疫法(EIA)测定血浆NT-proBNP浓度,同时测定CK-MB、LDH1和肌钙I(CTnI)的浓度。将肺炎患儿分成HF组和非HF组,HF组测左室射血分数(LVEF)。结果年龄介于2周至14岁的对照组血浆NT-proBNP水平基本保持稳定,平均值为(346.25±73.52)fmol/ml,HF组血浆NT-proBNP、CK-MB、LDH1和CTnI浓度的平均值高于非HF组:(1568±1061)fmol/ml比(553±190)fmol/ml、(85.80±28.60)U/L比(42.30±27.10)U/L、(452.00±227.00)U/L比(133.00±93.4)U/L、(3.48±1.56)ng/ml比(1.53±0.95)ng/ml。ROC曲线下面积(AUC)为0.888。诊断界点定为790fmol/ml时,NT-proBNP用以诊断肺炎合并HF的灵敏度、特异度和准确度分别是83.3%、91.7%和87.9%,阳性及阴性似然比分别为10和0.182,阳性和阴性预测值分别是20.4%和99.5%。多元线性回归分析显示LDH1和CTnI对血浆NT-proBNP水平的影响具有统计学意义;HF组血浆NT?proBNP水平与LVEF呈负相关。结论NT-proBNP是肺炎合并HF比较可靠的诊断指标,其水平的高低也反映了肺炎合并HF的严重程度以及心肌损害的程度。 展开更多

关键词 心力衰竭 N端脑钠肽原 肺炎 竞争性酶免疫法 多元线性回归分析 超声心动图

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直接竞争化学发光酶免疫法检测猪肉中磺胺嘧啶 被引量：7

10

作者 楚金申 许杨 +2 位作者 何庆华 王刘花 卢江 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第10期124-129,共6页

建立一种检测猪肉中磺胺嘧啶的简便、快速、高特异性的直接竞争化学发光酶免疫法。采用改良的过碘酸钠法制备酶标抗体,以辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢作为化学发光体系。经优化该方法检测条件为:利用柠檬酸缓冲液稀释抗原包被质... 建立一种检测猪肉中磺胺嘧啶的简便、快速、高特异性的直接竞争化学发光酶免疫法。采用改良的过碘酸钠法制备酶标抗体,以辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢作为化学发光体系。经优化该方法检测条件为:利用柠檬酸缓冲液稀释抗原包被质量浓度为0.8μg/mL,酶标抗体2000倍稀释,竞争反应25min;所建立的方法分析灵敏度为2.96ng/mL,批内变异系数小于8.32%,批间变异系数小于13.4%,以猪肉为样品的分析回收率为75.6%～103.7%,与其他结构类似物未见明显交叉,所建立的标准曲线相关系数为0.9922、检测线性范围为4.14～244ng/mL、检测时间为25min,可在实际生产中应用。 展开更多

关键词 磺胺嘧啶 直接竞争化学发光酶免疫法 辣根过氧化物酶 猪肉

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酱油与白酒中邻苯二甲酸二甲酯的化学发光酶免疫分析方法研究 被引量：6

11

作者 朱彬 朱帆 +6 位作者 徐振林 杨金易 柳春红 孙远明 王弘 雷红涛 沈玉栋 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1027-1032,共6页

本研究以邻苯二甲酸二甲酯（ DMP）为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二甲酯为半抗原,通过重氮化法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DMP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被原浓度为50μg/L,一抗... 本研究以邻苯二甲酸二甲酯（ DMP）为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二甲酯为半抗原,通过重氮化法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DMP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被原浓度为50μg/L,一抗浓度为92.5μg/L,二抗浓度为1μg/mL,药物稀释液为pH 6.0的纯水,竞争反应时间为40 min,基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测DMP。本方法对DMP的检出限为0.29μg/L,线性检测范围为0.74-30.32μg/L,与13种结构和功能类似物的交叉反应率均〈5%,通过倍比稀释降低白酒、酱油样品基质干扰,对样品的平均回收率在80.2%-116.0%之间,平均相对标准偏差〈3.6%,结果与GC-MS法的测定结果相符。本方法适用于食品样品中DMP的快速检测。 展开更多

关键词 邻苯二甲酸二甲酯 化学发光酶免疫分析 白酒 酱油

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直接竞争化学发光酶免疫法检测呋喃妥因代谢物 被引量：6

12

作者 李亚楠 王瑞 +2 位作者 李涛 王云贵 黄登宇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期231-235,共5页

建立检测动物组织中呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法。采用棋盘法确定抗体和酶标抗原的最佳稀释度,通过单因素试验优化包被条件、封闭液种类和竞争反应时间,建立直接竞争抑制曲线,并对方法的灵敏度、特异性、准确度和精密度... 建立检测动物组织中呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法。采用棋盘法确定抗体和酶标抗原的最佳稀释度,通过单因素试验优化包被条件、封闭液种类和竞争反应时间,建立直接竞争抑制曲线,并对方法的灵敏度、特异性、准确度和精密度进行方法学评价。结果表明,经优化,最佳反应条件为抗体稀释度1∶4 000,酶标抗原稀释度1∶80,包被条件为37℃2h后4℃过夜,封闭液为1%牛血清白蛋白,竞争反应1h。该方法的线性检测范围为0.030~10.595 ng/m L,IC_（50）为0.559 ng/m L;加标回收率为84.9%~103.4%,批内变异系数为3.4%~7.8%,批间变异系数为4.7%~11.8%;除与呋喃妥因原药交叉反应率为36.2%,与其他结构类似物及衍生化试剂交叉反应率均小于0.1%。该方法灵敏、准确,可用于动物组织中呋喃妥因代谢物的快速筛查。 展开更多

关键词 呋喃妥因 1-氨基-乙内酰脲 直接竞争化学发光酶免疫检测 动物组织

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竞争化学发光酶免疫测定技术检测盐酸克伦特罗 被引量：3

13

作者 王毅谦 陆慧媛 +4 位作者 袁芳 徐恒 方云涛 沈伟健 于洋 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第11期4518-4524,共7页

目的：建立一种检测盐酸克伦特罗（clenbuterol, CLB）的竞争化学发光酶免疫测定法（chemiluminescent enzyme immunoassay, CLEIA）。方法基于CLB的竞争酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）,通过优化反应... 目的：建立一种检测盐酸克伦特罗（clenbuterol, CLB）的竞争化学发光酶免疫测定法（chemiluminescent enzyme immunoassay, CLEIA）。方法基于CLB的竞争酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）,通过优化反应温度、反应时间和缓冲体系pH建立了CLB的CLEIA测定法。用CLB小鼠中毒模型评价CLEIA检测法对实际样本的检测效果,并将CLEIA与LC-MS法的相关性进行了比较。结果 CLEIA法测定CLB的检测范围为0.0433~42.5363μg/L,检测限为0.0178μg/L,变异系数小于10%,回收率为95%~110%,对莱克多巴胺和沙丁胺醇仅有极低的交叉反应性。所建立的 CLEIA 法与 LC-MS 法在检测实际样本时具有较高的相关性。结论本研究建立的CLEIA法操作简便,检测限、灵敏度、准确度、特异性均符合检测要求,可用于实际样品的检测。 展开更多

关键词 竞争化学发光酶免疫测定法 竞争酶联免疫吸附测定法 盐酸克伦特罗

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重金属铜化学发光酶联免疫快速检测方法的建立 被引量：4

14

作者 杨浩 程龙球 +3 位作者 黄建芳 朱柳蓉 刘洋 向军俭 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期584-590,共7页

目的:用自制重金属铜单抗和合成铜完全抗原,建立检测重金属铜离子的间接竞争化学发光酶联免疫(CLEIA)法,为植物中草药和土壤环境中铜的快速定量测定提供简便、可靠的方法。方法:使用本实验室前期制备并鉴定合格的优质铜单抗和合成铜抗原... 目的:用自制重金属铜单抗和合成铜完全抗原,建立检测重金属铜离子的间接竞争化学发光酶联免疫(CLEIA)法,为植物中草药和土壤环境中铜的快速定量测定提供简便、可靠的方法。方法:使用本实验室前期制备并鉴定合格的优质铜单抗和合成铜抗原,建立铜间接竞争CLEIA法,并对其准确度、精密度、特异性和稳定性进行评价;采集植物中草药和土壤样品共31份,通过微波消解联合沉淀法进行前处理并制备待测样,由间接竞争CLEIA法进行铜含量测定,以ICP-AES仪器法所测结果为对照评价其可靠性。结果:该方法检测灵敏度为17. 9 ng/ml,检测限为1. 9 ng/ml,线性范围为3. 0～200 ng/ml;准确度试验回收率为98. 8%～105. 5%,精密度试验RSD≤5. 0%;特异性试验仅与Mg^(2+)、Zn^(2+)有13. 3%、3. 3%的交叉反应;酶标板置-20℃避光保存6周内其检测结果准确性未出现明显改变。对植物中草药和土壤样品进行前处理并制样检测,对比ICP-AES法检测结果,相关系数分别为0. 972和0. 989,两种方法具有较好相关性,表明间接竞争CLEIA法可应用于一般环境样品中铜的简便快速定量测定。结论:成功建立铜间接竞争CLEIA检测法,其灵敏度及各参数均符合国家法定相关样品铜离子检测技术指标的要求,可应用于一般环境样品中铜含量的快速测定。 展开更多

关键词 铜离子 单克隆抗体 间接竞争化学发光酶联免疫

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竞争化学发光酶免疫分析检测血清透明质酸方法的建立 被引量：2

15

作者 刘爱霞 侯俊 +5 位作者 刘佳 徐军 赵静 郭静霞 闫静肖 李伯安 《中国医药导报》 CAS 2013年第24期162-163,165,共3页

目的建立人血清透明质酸(HA)化学发光酶免疫定量检测分析方法。方法以偶联了牛血清白蛋白的透明质酸包被,以辣根过氧化物酶标记透明质酸结合蛋白(HABP),以过氧化氢(H2O2)-鲁米诺(luminol)化学发光体系作为检测体系,采用竞争法的反应模式... 目的建立人血清透明质酸(HA)化学发光酶免疫定量检测分析方法。方法以偶联了牛血清白蛋白的透明质酸包被,以辣根过氧化物酶标记透明质酸结合蛋白(HABP),以过氧化氢(H2O2)-鲁米诺(luminol)化学发光体系作为检测体系,采用竞争法的反应模式,优化筛选温育条件、抗体包被条件、酶标记物稀释度和发光反应时间等条件。同时进行回收实验、热稳定性等实验,并随机选取60例肝纤维化患者血清与进口试剂进行比对实验。结果所建立方法的检出限为6.12μg/L,批内和批间变异均小于10%。检测HA的临床高、中、低值血清回收率为分别为93.5%、95.6%和101.2%;在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7 d的稳定性考察,线性相关系数均>0.98,标准偏差<9%。比对实验分析证明2种方法差异无统计学意义(P=0.62>0.05)。结论成功建立定量HA微孔板化学发光酶免疫分析方法,该方法具有较高的准确性、灵敏度及良好的重复性,并与进口试剂检测结果一致。 展开更多

关键词 透明质酸 竞争化学发光酶免疫分析 肝纤维化

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基于QuEChERS样品前处理的间接竞争酶联免疫分析法快速检测薏苡仁中黄曲霉毒素B_(1) 被引量：1

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作者 张磊 关凯仪 +1 位作者 黄雨心 王淑美 《广东药科大学学报》 CAS 2023年第6期37-43,共7页

目的解决间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)检测薏苡仁中黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))的基质干扰问题,建立一种简便的高通量检测方法,用于薏苡仁中AFB_(1)的快速... 目的解决间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)检测薏苡仁中黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))的基质干扰问题,建立一种简便的高通量检测方法,用于薏苡仁中AFB_(1)的快速筛查。方法以ic-ELISA的显色值和抑制率为评价指标优化样品前处理过程,重点考察QuEChERS萃取净化技术、不同稀释溶剂和稀释方式消除基质效应的效果,并对建立的方法进行方法学考察,最后应用于薏苡仁实际样品检测,检测结果用液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行确证。结果建立了一种无需任何校正,可用溶剂标准曲线进行定量分析的ic-ELISA。方法的半数抑制浓度为0.074 ng/mL,线性范围为1.37~20.0μg/kg,加标回收率在75.12%~84.46%之间,RSD小于6%。122批薏苡仁及其相关样品中AFB_(1)的阳性率为20.5%,阳性样品的超标率为24.0%,污染水平为1.76~27.56μg/kg。ic-ELISA与LC-MS/MS检测结果的相关系数(r)为0.98。结论QuEChERS萃取净化技术能够有效去除薏苡仁中的干扰成分,对快速样品前处理方法的建立具有重要应用价值,结合本研究所建立的ic-ELISA,为薏苡仁中AFB_(1)的检测和监测提供简便有效的技术手段。 展开更多

关键词 QuEChERS技术 间接竞争酶联免疫分析方法 快速检测 薏苡仁 黄曲霉毒素B_(1)

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呋喃唑酮代谢物间接竞争化学发光酶免疫法的建立 被引量：1

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作者 黄登宇 高文静 +3 位作者 黄种乾 高丽霞 冯敏 杨秀松 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期294-299,共6页

建立快速检测动物源性食品中呋喃唑酮代谢物AOZ的间接竞争化学发光酶免疫法。利用对醛基苯甲酸(4-CBA)将AOZ衍生化为CPAOZ,利用活化酯法将CPAOZ与卵清蛋白(OVA)偶联,生成完全抗原CPAOZ-OVA。对包被原与抗体的最佳稀释倍数、封闭液浓度... 建立快速检测动物源性食品中呋喃唑酮代谢物AOZ的间接竞争化学发光酶免疫法。利用对醛基苯甲酸(4-CBA)将AOZ衍生化为CPAOZ,利用活化酯法将CPAOZ与卵清蛋白(OVA)偶联,生成完全抗原CPAOZ-OVA。对包被原与抗体的最佳稀释倍数、封闭液浓度、竞争时间、酶标二抗稀释倍数进行优化,建立标准曲线,同时对方法的特异性进行评价。结果表明:包被抗原最佳稀释倍数为2000倍,抗体的最佳稀释倍数为20000倍、封闭液为2%脱脂乳粉、竞争时间为2 h、二抗最佳稀释倍数为4000倍;线性范围是0.075~7.396 ng/m L,半抑制浓度IC_(50)为0.74 ng/m L,对呋喃唑酮原药的交叉反应率为23.4%,与其他结构类似物及衍生化试剂的交叉反应率均小于0.1%。该方法灵敏度高、特异性好,可为监管部门对于快速检测动物源性食品中AOZ提供依据。 展开更多

关键词 呋喃唑酮 间接竞争化学发光酶免疫法 动物源性食品 快速检测

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直接竞争化学发光酶免疫法检测氟喹诺酮类药物方法的建立 被引量：1

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作者 曹敬政 安静 +5 位作者 蒋蔚 辛思培 宋斌 李思 王权 孙卫东 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第5期48-58,共11页

建立一种能够快速检测动物源性食品中多种氟喹诺酮类药物残留的直接竞争化学发光酶免疫法。用诺氟沙星(NOR)分子修饰后制备的完全抗原免疫小鼠,获得对10种氟喹诺酮类药物具有广谱特异性的单克隆抗体,采用二因子交叉试验确定包被原与酶... 建立一种能够快速检测动物源性食品中多种氟喹诺酮类药物残留的直接竞争化学发光酶免疫法。用诺氟沙星(NOR)分子修饰后制备的完全抗原免疫小鼠,获得对10种氟喹诺酮类药物具有广谱特异性的单克隆抗体,采用二因子交叉试验确定包被原与酶标抗体的最佳稀释度,通过单因素试验优化最佳包被条件、封闭液种类、竞争反应时间,从而建立反应过程的最佳条件,并对方法的灵敏度、交叉反应率、精密度进行评价。结果表明:NOR-1-OVA包被浓度0.3μg/mL,酶标抗体的稀释倍数为1∶8000时为最佳稀释浓度;4℃包被过夜,封闭液为1%BSA,竞争时间为1 h时为最优反应条件。对10种氟喹诺酮类药物的灵敏度(IC50)为1.46~11.57 ng/mL,交叉反应率为12.6%~118.9%,并且与其他非喹诺酮类药物无交叉反应率;检出限为0.07~0.27 ng/mL,且批内差异和批间差异均低于10%;加标回收率为73.3%~103.1%,变异系数为1.9%~11.8%。以上结果表明,该方法可作为动物源性食品中10种FQs残留检测的常规方法。 展开更多

关键词 氟喹诺酮类药物 直接竞争化学发光酶免疫反应 药物检测

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保健食品中西地那非化学发光免疫分析方法研究 被引量：1

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作者 程智 张咏仪 +5 位作者 杨金易 徐振林 王弘 雷红涛 孙远明 沈玉栋 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1503-1508,共6页

针对保健食品中西地那非药物的非法添加问题,该研究采用辣根过氧化物酶(HRP)与鲁米诺为信号输出系统,结合直接竞争模式探索了保健食品中西地那非的直接竞争化学发光酶免疫分析方法。基于特异性多克隆抗体,通过逐步优化策略,确定最佳免... 针对保健食品中西地那非药物的非法添加问题,该研究采用辣根过氧化物酶(HRP)与鲁米诺为信号输出系统,结合直接竞争模式探索了保健食品中西地那非的直接竞争化学发光酶免疫分析方法。基于特异性多克隆抗体,通过逐步优化策略,确定最佳免疫分析条件为:包被原质量浓度为41.67 ng/mL,酶标抗体质量浓度为1.25μg/mL,封闭液和洗涤液的吐温-20含量为0.05%,稀释液的甲醇添加量为5%,竞争反应时间为40 min。在该条件下,建立了西地那非的直接竞争化学发光免疫分析方法,该方法对西地那非的半抑制浓度(IC_(50))为0.17 ng/mL,线性检测范围(IC_(20)~IC_(80))为0.024~1.21 ng/mL,检出限(IC_(10),LOD)为0.008 ng/mL。与他达那非等功能类似物无显著交叉;西地那非样品的加标回收率为82.0%~114%,相对标准偏差均小于15%。盲样检测结果与HPLC-MS/MS确证方法具有良好一致性,说明该方法准确可靠,适用于样品中西地那非的快速筛查。 展开更多

关键词 西地那非 直接竞争化学发光酶联免疫分析(dcCLEIA) 保健食品 辣根过氧化物酶(HRP)

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基于单克隆抗体的双酚A间接竞争酶联免疫分析法的建立 被引量：5

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作者 张玉超 刘旭东 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2020年第17期172-177,共6页

为建立一种简便、快速、准确的双酚A检测方法,采用活性酯法将双酚酸与牛血清蛋白、卵清蛋白偶联制备人工抗原免疫BALB/c小鼠。选择抗血清效价和灵敏度高的BALB/c小鼠,采用聚乙二醇法制备杂交瘤细胞,获得一株可分泌双酚A单克隆抗体的杂... 为建立一种简便、快速、准确的双酚A检测方法,采用活性酯法将双酚酸与牛血清蛋白、卵清蛋白偶联制备人工抗原免疫BALB/c小鼠。选择抗血清效价和灵敏度高的BALB/c小鼠,采用聚乙二醇法制备杂交瘤细胞,获得一株可分泌双酚A单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过方阵滴定和反应条件优化,建立一种基于单克隆抗体的双酚A间接竞争酶联免疫分析法。该检测方法在0.5 ng/mL^50 ng/mL内有良好的线性关系,最低检测限IC10为0.5 ng/mL,半数抑制率IC50为16.65 ng/mL,水样中加标回收率为89.72%~105.25%。该单克隆抗体效价高、特异性强,该检测方法灵敏度高。 展开更多

关键词 双酚A 人工抗原 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫分析法

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