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异甘草素对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响 被引量:13
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作者 王志国 黄贤明 +4 位作者 赵雁 王其亮 窦晓静 王俊 卢娜 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1800-1805,共6页
目的研究异甘草素对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 10、20、40、60、80、100、120μmol/L异甘草素处理HCT116、HT29细胞后,MTT法检测细胞毒性,流式细胞术检测HCT116细胞凋亡,Western blot法检测HCT116细胞中cleaved caspas... 目的研究异甘草素对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 10、20、40、60、80、100、120μmol/L异甘草素处理HCT116、HT29细胞后,MTT法检测细胞毒性,流式细胞术检测HCT116细胞凋亡,Western blot法检测HCT116细胞中cleaved caspase-3、pJNK、JNK、pERK1/2、ERK1/2、pP38、P38蛋白表达,Transwell实验检测HCT116细胞侵袭和迁移。结果异甘草素对HCT116、HT29细胞的IC50值分别为22.45、23.69μmol/L。与对照组比较,异甘草素组呈浓度依赖性地显著诱导HCT116细胞凋亡(P<0.05),显著上调cleaved caspase-3蛋白表达(P<0.05),显著抑制HCT116细胞侵袭和迁移(P<0.05),显著下调pJNK/JNK、pERK1/2/ERK1/2、pP38/P38(P<0.05)。结论异甘草素能抑制结直肠癌细胞增殖和侵袭,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 异甘草素 结直肠癌细胞 增殖 侵袭 迁移 MAPK/ERK信号通路
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羽扇豆醇通过抑制RhoA-ROCK1信号通路抑制结肠癌细胞增殖 被引量:12
2
作者 蒋亦雯 洪丹 +1 位作者 楼哲丰 金龙金 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第2期186-194,共9页
该文探讨了羽扇豆醇(Lupeol)对人结肠癌HCT116和SW620细胞增殖的影响及相关作用机制。使用不同浓度的Lupeol处理HCT116和SW620细胞后,用MTT法检测细胞活性,CCK8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细... 该文探讨了羽扇豆醇(Lupeol)对人结肠癌HCT116和SW620细胞增殖的影响及相关作用机制。使用不同浓度的Lupeol处理HCT116和SW620细胞后,用MTT法检测细胞活性,CCK8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blot检测相应mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光检测β-Catenin蛋白细胞内分布情况。通过构建shRNA敲低两种结肠癌细胞中RhoA,进一步研究Lupeol影响细胞增殖的分子机制。结果显示,Lupeol处理后,HCT116和SW620细胞增殖能力明显下降,克隆形成能力受到抑制,细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞内RhoA、ROCK1、β-Catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平均显著下降,β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。敲低RhoA后抑制了细胞增殖,同时使得RhoA-ROCK1-β-Catenin信号通路蛋白受到抑制,β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。综上所述,Lupeol可通过抑制RhoA-ROCK1信号通路,抑制β-Catenin蛋白表达,进而抑制HCT116和SW620细胞增殖,Lupeol有望成为临床结肠癌治疗的新药物。 展开更多
关键词 羽扇豆醇 RhoA-ROCK1信号通路 结肠癌 增殖
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昆仑雪菊对结肠癌细胞株体外抗肿瘤作用研究 被引量:9
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作者 帕尔哈提.买买提依明 令狐晨 +1 位作者 朱青梅 阿依吐伦.斯马义 《安徽农业科学》 CAS 2015年第20期146-148,共3页
[目的]探讨昆仑雪菊中总黄酮粗提取物、纯化物及总多糖对人结肠癌细胞株(HCT116细胞、CACO-2细胞)增殖的抑制作用。[方法]体外培养结肠癌细胞,采用不同浓度昆仑雪菊中总黄酮粗提取物、纯化物及总多糖对其进行干预,MTT法检测细胞生长抑制... [目的]探讨昆仑雪菊中总黄酮粗提取物、纯化物及总多糖对人结肠癌细胞株(HCT116细胞、CACO-2细胞)增殖的抑制作用。[方法]体外培养结肠癌细胞,采用不同浓度昆仑雪菊中总黄酮粗提取物、纯化物及总多糖对其进行干预,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪测细胞凋亡率。[结果]MTT法检测昆仑雪菊中总黄酮粗提取物、纯化物及总多糖对结肠癌细胞株的抑制作用具有浓度和时间依赖性;流式细胞仪检测昆仑雪菊总黄酮纯化物能增强结肠癌细胞株的凋亡率,且剂量与凋亡率呈正相关。[结论]昆仑雪菊总黄酮纯化物抗肿瘤活性优于总黄酮粗提物及总多糖,且对结肠癌细胞株的增殖有明显抑制作用,其作用机制可能与增强细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 昆仑雪菊 结肠癌细胞 生长抑制 细胞凋亡 抗肿瘤
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汉黄芩素调控Ywhaz蛋白抑制结肠癌细胞增殖及侵袭转移 被引量:9
4
作者 李瑶瑶 王继军 +7 位作者 刘静 郝臻凤 张瑜 侯亚颖 李艳 卜平 孔桂美 郁多男 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期97-101,共5页
目的:探讨汉黄芩素对人结肠癌细胞HCT116和HT29细胞系的增殖、侵袭能力的影响,并研究汉黄芩素对酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(Ywhaz)蛋白水平的影响。方法:体外培养HCT116和HT29细胞系,设空白组、汉黄芩素不同浓度组(浓度分别为5,1... 目的:探讨汉黄芩素对人结肠癌细胞HCT116和HT29细胞系的增殖、侵袭能力的影响,并研究汉黄芩素对酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(Ywhaz)蛋白水平的影响。方法:体外培养HCT116和HT29细胞系,设空白组、汉黄芩素不同浓度组(浓度分别为5,10,20,40μmol·L-1)作用不同时间后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测汉黄芩素对结肠癌细胞增殖的影响,并用Annexin V-FITC/PI双标后流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡率;穿透小室(Transwell)小室法检测处理24 h后细胞侵袭和迁移力的变化;实时荧光定量-聚合酶链式反应(q PCR)检测不同浓度汉黄芩素作用24 h后Ywhaz mRNA的水平,并运用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测该蛋白及其磷酸化水平。结果:与空白组比较,汉黄芩素可明显抑制结肠癌细胞系的增殖,具有浓度和时间依赖性,并促进结肠癌细胞系的凋亡率,其中20和40μmol·L-1的汉黄芩素抑制细胞增殖作用显著(P<0.01),且不同浓度的汉黄芩素(10,20,40μmol·L-1)作用于结肠癌细胞后,明显降低肿瘤细胞的穿膜数(P<0.05,P<0.01),汉黄芩素可下调Ywhaz mRNA水平和蛋白水平的表达,并降低Ywhaz的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论:汉黄芩素可显著抑制HCT116和HT29细胞系的增殖、侵袭和迁移能力,并诱导细胞凋亡,其抗肿瘤机制可能与下调Ywhaz的蛋白水平及其蛋白的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 汉黄芩素 结肠癌 增殖 侵袭 凋亡 迁移 酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白
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甘草水提物联合Erastin对二肽基肽酶4诱导结直肠癌细胞铁死亡的作用 被引量:7
5
作者 陈吉 姚欢欢 尚韬 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期270-275,共6页
目的:探究甘草水提物(licorice extracts, LE)联合铁死亡诱导剂Erastin能否通过二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase-4,DPP4)诱导人结直肠腺癌上皮细胞(DLD-1)发生铁死亡。方法:将DLD-1细胞随机分为Control组、L-LE组(50μg·mL^(-1)... 目的:探究甘草水提物(licorice extracts, LE)联合铁死亡诱导剂Erastin能否通过二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase-4,DPP4)诱导人结直肠腺癌上皮细胞(DLD-1)发生铁死亡。方法:将DLD-1细胞随机分为Control组、L-LE组(50μg·mL^(-1)LE)、H-LE组(100μg·mL^(-1)LE)、H-LE+Erastin组(100μg·mL^(-1)LE+30 nmol·L^(-1)Erastin)、H-LE+Erastin+Sita(DDP4抑制剂)组(100μg·mL^(-1)LE+30 nmol·L^(-1)Erastin+31.25μg·mL^(-1)Sita),药物干预24 h。行细胞克隆实验和EDU-594细胞增殖实验测定细胞克隆及增殖情况,ELISA检测细胞Fe2+含量及DPP4活性变化,流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量,Western blotting检测细胞中溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、花生四烯酸脂加氢酶3(arachidonate lipoxygenase 3,ALOXE3)蛋白的表达情况。结果:相较于Control组,L-LE,H-LE及H-LE+Erastin处理组细胞的克隆数下降,ROS含量增加(P<0.05或P<0.01);H-LE和H-LE+Erastin处理组细胞的增殖能力降低,Fe^(2+)含量、DPP4活性以及ALOXE3蛋白表达升高,SLC7A11蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。与H-LE+Erastin组相比,加入Sita处理后,细胞的克隆数量、增殖能力及SLC7A11蛋白表达显著增加,而Fe^(2+)含量、DPP4活性、ROS生成量及ALOXE3蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:LE联合Erastin可通过DPP4诱导结直肠癌(CRC)细胞发生铁死亡。 展开更多
关键词 甘草水提物 Erastin 二肽基肽酶4 结直肠癌细胞 铁死亡
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洋葱提取物对结肠癌细胞增殖的抑制作用 被引量:7
6
作者 周阿成 金黑鹰 +4 位作者 谈瑄忠 钱晓磊 张春霞 何勇山 王水明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第19期2011-2015,共5页
目的:研究洋葱水提取物和乙醇提取物中黄酮类化合物的含量及其各自对结肠癌细胞株增殖的抑制作用.方法:采用水提取和乙醇提取洋葱后,用紫外可见分光光度仪检测提取物中黄酮类化合物含量.体外培养结肠癌细胞株(LoVocells、SW480cells、HT... 目的:研究洋葱水提取物和乙醇提取物中黄酮类化合物的含量及其各自对结肠癌细胞株增殖的抑制作用.方法:采用水提取和乙醇提取洋葱后,用紫外可见分光光度仪检测提取物中黄酮类化合物含量.体外培养结肠癌细胞株(LoVocells、SW480cells、HT-29cells、HCT-8cells),采用不同浓度的黄酮类化合物(0、2.5、5、10、20、40、60、80mg/L)对其进行干预,WST-8法检测洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株增殖的抑制作用.结果:洋葱水提取物中黄酮类化合物含量较乙醇提取物高.WST-8法检测洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株的抑制作用具有剂量和时间依赖性,且72h时水提取物较乙醇提取物对结肠癌细胞株(SW480)增殖抑制(%)更显著(10mg/L:37.77±5.84vs17.36±5.24;20mg/L:52.35±5.72vs24.15±5.54;40mg/L:68.17±7.76vs32.79±6.02;60mg/L:71.08±8.16vs47.55±2.45;80mg/L:76.00±5.87vs60.35±6.61,均P<0.05).结论:洋葱水提取物和乙醇提取物对体外培养的结肠癌细胞株的增殖有明显抑制作用,其作用机制有待进一步研究. 展开更多
关键词 洋葱提取物 结肠癌细胞 WST-8分析 细胞增殖
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MicroRNA-183抑制结直肠癌肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移 被引量:7
7
作者 董然 朱晓雷 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第13期2267-2271,共5页
目的:探讨microRNA183 (miRNA-183)对结直肠癌肿瘤细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法:使用慢病毒技术,分别转染HT29细胞株,建立稳定过表达细胞株miRNA-183 mimics,抑制miRNA-183表达的稳定细胞株miRNA-183 inhibitor以及阴性对照组negat... 目的:探讨microRNA183 (miRNA-183)对结直肠癌肿瘤细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法:使用慢病毒技术,分别转染HT29细胞株,建立稳定过表达细胞株miRNA-183 mimics,抑制miRNA-183表达的稳定细胞株miRNA-183 inhibitor以及阴性对照组negative control。qRT-PCR检测各组细胞miRNA-183的表达,Western blot检测miRNA-183下游靶基因PDCD4蛋白水平表达变化,CCK8增殖实验检测各组细胞的增殖情况,同时以划痕实验和Transwell实验分析转染miRNA-183 mimics和miRNA-183 inhibitor对HT29细胞迁移、侵袭能力的影响。结果:与阴性对照组相比,miRNA-183 mimics组细胞增殖速度明显下降,其迁移和侵袭能力也显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);miRNA-183下游靶基因PDCD4蛋白水平表达明显增加。结论:miRNA-183可有效地抑制结直肠癌肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 microRNA-183 结直肠癌肿瘤细胞 转染 增殖 侵袭 迁移
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两种非甾体类抗炎药抑制结肠癌细胞增殖的机制 被引量:5
8
作者 陈光侠 费素娟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期923-927,共5页
目的:研究选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利与非选择性COX-2抑制剂舒林酸对结肠癌细胞株LOVO生长的影响,探讨其可能的机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察两药对结肠癌细胞增殖的抑制,流式细胞仪(FCM)分析其对细胞凋亡... 目的:研究选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利与非选择性COX-2抑制剂舒林酸对结肠癌细胞株LOVO生长的影响,探讨其可能的机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察两药对结肠癌细胞增殖的抑制,流式细胞仪(FCM)分析其对细胞凋亡及细胞周期的影响,放免法分析其对PGE2的影响。结果:MTT显示尼美舒利、舒林酸均能抑制LOVO细胞的增殖,呈剂量和浓度依赖性。FCM显示两药均能促进细胞的凋亡,并能使G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低,与对照组相比均有显著性差异(P<0.05)。上清中PGE2表达水平呈剂量依赖性下调。结论:尼美舒利、舒林酸可抑制结肠癌细胞株LOVO的生长,促进其凋亡,其机制可能与其阻止细胞周期的进展,抑制COX-2的活性及PGE2的合成有关。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 非甾体抗炎药 凋亡 增殖 尼美舒利 舒林酸
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干扰ZEB1表达对结直肠癌细胞上皮间质转化与增殖、凋亡与迁移的影响 被引量:5
9
作者 钟轩 王红钰 +4 位作者 蒋涛 马鹏程 张超 郑宝军 刘金凤 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第21期3290-3295,共6页
目的观察干扰ZEB1表达对结直肠癌细胞上皮间质转化与增殖、凋亡与迁移的影响。方法RT?PCR与Western Blot检测检测人结直肠癌细胞HT29、LOVO、SW480中的ZEB1的基因与蛋白表达。将对数生长期的LOVO细胞分2组转染:干扰组转染慢病毒pPLK?ZEB... 目的观察干扰ZEB1表达对结直肠癌细胞上皮间质转化与增殖、凋亡与迁移的影响。方法RT?PCR与Western Blot检测检测人结直肠癌细胞HT29、LOVO、SW480中的ZEB1的基因与蛋白表达。将对数生长期的LOVO细胞分2组转染:干扰组转染慢病毒pPLK?ZEB1?shRNA,干扰对照组转染慢病毒pPLK?control?shRNA,以未转染的细胞为正常对照。转染48 h后,检测细胞增殖、克隆形成率、迁移能力、凋亡及上皮间质转化相关蛋白表达。结果干扰ZEB1表达后,人结直肠癌细胞LOVO的增殖、克隆形成率与迁移能力明显下降(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),上皮间质转化E?cadherin蛋白表达提高,Vimentin、Twist蛋白表达降低(P<0.05)。结论干扰ZEB1表达可抑制人结直肠癌细胞的增殖、迁移能力,增加细胞凋亡,抑制其上皮间质转化。 展开更多
关键词 结直肠癌细胞 干扰ZEB1表达 上皮间质转化 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移
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microRNA-214靶向调控HOXB7基因抑制结直肠癌细胞侵袭转移的机制与意义 被引量:5
10
作者 刘英 何凤屏 +1 位作者 刘玉兰 李定云 《中国当代医药》 CAS 2022年第18期5-10,共6页
目的探讨microRNA-214(miRNA-214)靶向调控HOXB7基因抑制结直肠癌(CRC)细胞侵袭转移的机制与意义。方法选取2018年1月至2020年12月汕头大学医学院附属粤北人民医院收治的200例CRC住院患者为研究对象,按照是否发生转移分为无转移组(100例... 目的探讨microRNA-214(miRNA-214)靶向调控HOXB7基因抑制结直肠癌(CRC)细胞侵袭转移的机制与意义。方法选取2018年1月至2020年12月汕头大学医学院附属粤北人民医院收治的200例CRC住院患者为研究对象,按照是否发生转移分为无转移组(100例)和转移组(100例),另选取同期健康体检者200例为对照组。采用分子生物学技术检测组织细胞miRNA-214、HOXB7、Wnt/β-catenin的表达,并进行相关性分析及评价其临床意义。结果无转移组和转移组患者组织中的miRNA-214表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-214在CRC SW1116和SW480细胞株中的表达量低于正常细胞株,差异有统计学意义(P<0.05)。用miRNA-214模拟物转染SW1116和SW480细胞发现,miRNA-214高表达会导致HOXB7呈低表达。HOXB7是miRNA-214的靶基因,两者之间的表达水平呈负相关(r=-0.394,P<0.05)。无转移组和转移组的HOXB7表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在SW1116和SW480细胞株中的HOXB7表达水平高于正常细胞株,差异有统计学意义(P<0.05);当HOXB7过表达后Wnt/β-catenin表达也增高,而在加入miRNA-214干扰HOXB7后,Wnt/β-catenin表达下降。结论miRNA-214高表达调控HOXB7基因下调可以影响Wnt/β-catenin表达下调,并且抑制CRC细胞生长和增殖,miRNA-214—HOXB7—Wnt/β-catenin通路参与抑制结直肠癌侵袭和转移,这为结直肠癌早期辅助诊断提供了新的检测手段,并可能作为未来潜在的CRC抗癌细胞侵袭和转移疗法的新靶点。 展开更多
关键词 microRNA-214 HOXB7基因 WNT/Β-CATENIN 结直肠癌细胞 侵袭 转移
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过表达Oct4B1诱导结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化 被引量:4
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作者 陈奕霖 文坤明 +2 位作者 胡水清 陈正权 曾庆良 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期656-659,664,共5页
目的:探讨Oct4B1基因过表达是否诱导人结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化(EMT)及其可能的机制。方法:用带G418抗性的Oct4B1基因过表达质粒及阴性对照质粒转染人结直肠癌SW480细胞株,分别称为实验组(SW480-Oct4B1)及对照组(SW480-NC),... 目的:探讨Oct4B1基因过表达是否诱导人结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化(EMT)及其可能的机制。方法:用带G418抗性的Oct4B1基因过表达质粒及阴性对照质粒转染人结直肠癌SW480细胞株,分别称为实验组(SW480-Oct4B1)及对照组(SW480-NC),转染成功后用G418筛选建立稳定转染的细胞株,对两种稳定转染细胞进行如下检测:(1)RTq PCR检测Oct4B1的mRNA水平;(2)划痕实验和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;(3)Western blot检测EMT相关标记物E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达;(4)RT-q PCR和Western blot检测EMT转录因子Twist的mRNA及蛋白表达。结果:稳定转染细胞株建立后,实验组与对照组比较:Oct4B1基因表达水平明显升高(P<0.01);细胞迁移明显增强(P<0.01);细胞侵袭能力明显提高(P<0.01);上皮标记物E-cadherin蛋白表达量明显下降(P<0.01);而间质标记物N-cadherin及Vimentin蛋白表达量明显上调(P<0.01);Twist的mRNA及蛋白表达量均明显升高(P<0.01)。结论:过表达Oct4B1基因可诱导人结直肠癌SW480细胞发生EMT,增强细胞迁移及侵袭能力,其分子机制可能与提高Twist表达有关。 展开更多
关键词 结直肠癌细胞 Oct4B1 上皮间质转化 TWIST
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shRNA沉默ANGPTL4表达对大肠癌HT-29细胞的迁移能力的影响 被引量:4
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作者 韩杰 胡晓彤 黄学锋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1614-1618,共5页
目的探讨ANGPTL4基因沉默对人大肠癌细胞迁移能力的影响。方法用半定量RT-PCR检测ANGPTL4在大肠癌细胞株中的表达情况;通过体外稳定转染,用半定量RT-PCR和直接法ELISA检测shRNA沉默ANGPTL4后HT29细胞的mRNA和蛋白在转染后表达变化,并利... 目的探讨ANGPTL4基因沉默对人大肠癌细胞迁移能力的影响。方法用半定量RT-PCR检测ANGPTL4在大肠癌细胞株中的表达情况;通过体外稳定转染,用半定量RT-PCR和直接法ELISA检测shRNA沉默ANGPTL4后HT29细胞的mRNA和蛋白在转染后表达变化,并利用稳转HT29细胞株通过Transwell细胞迁移实验和细胞免疫荧光实验观察ANGPTL4沉默后对肿瘤细胞迁移能力和细胞形态的影响。结果 ANGPTL4在大多数大肠癌细胞株中表达;转染shRNA ANGPTL4后HT29细胞中ANGPTL4基因在mRNA和蛋白表达水平相对于对照组明显下调,与对照组相比具有有统计学意义(P<0.01);shRNA沉默ANGPTL4表达的HT29细胞与对照组细胞相比,细胞迁移能力降低,可能与ANGPTL4影响细胞伪足的形成有关。结论 ANGPTL4在多数大肠癌细胞株中表达;沉默ANGPTL4基因表达能够抑制大肠癌细胞株HT29的迁移能力和伪足形成。 展开更多
关键词 ANGPTL4 SHRNA 大肠癌细胞 细胞迁移
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敲低长链非编码RNA THOR对结直肠癌细胞糖代谢重编程和转移能力的影响
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作者 牛子薇 张勇 +2 位作者 李璐 褚菲菲 吴慧丽 《医学研究杂志》 2024年第8期96-101,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)THOR对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞糖代谢重编程、迁移和侵袭能力的影响,以及其与果糖-1,6-二磷酸醛缩酶C(fructose-1,6-bisphosphate aldolase C,ALDOC)之间的靶向调控关... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)THOR对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞糖代谢重编程、迁移和侵袭能力的影响,以及其与果糖-1,6-二磷酸醛缩酶C(fructose-1,6-bisphosphate aldolase C,ALDOC)之间的靶向调控关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测THOR在CRC细胞系中的表达,使用THOR特异性siRNA转染HCT116和SW480细胞沉默THOR的表达,通过细胞划痕实验和Transwell实验检测THOR对CRC细胞迁移、侵袭能力的影响,通过检测CRC细胞的葡萄糖摄取量及丙酮酸生成量探讨THOR对CRC细胞糖代谢重编程的影响,采用RT-qPCR法和Western blot法检测ALDOC mRNA和蛋白质的表达水平。结果RT-qPCR法检测结果显示,THOR在HCT116和SW480细胞中的表达水平显著高于正常人肠上皮细胞NCM460。沉默THOR后,细胞划痕实验及Transwell实验结果表明,HCT116和SW480细胞的迁移与侵袭能力均受到抑制,葡萄糖摄取量及丙酮酸生成量均下降,RT-qPCR法和Western blot法检测结果显示,ALDOC mRNA及蛋白的表达水平显著下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA THOR在CRC细胞中高表达,可能通过靶向调控ALDOC影响CRC细胞糖代谢重编程促进细胞的迁移与侵袭。 展开更多
关键词 LncRNA THOR 结直肠癌细胞 转移 糖代谢重编程 ALDOC
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LDH法检测新城疫病毒野生株与疫苗株对大肠癌的体外杀伤作用 被引量:3
14
作者 黄川 姜艳华 +3 位作者 宋德志 高灵茜 杨哲 樊晓晖 《医学综述》 2008年第17期2696-2699,共4页
目的比较新分离的新城疫病毒野生株(NDV7793、NDVD817)与疫苗株Lasota对大肠癌的体外杀伤作用。方法3株病毒作用于大肠癌细胞株LS174T和LOVO,用乳酸脱氢酶微量释放法测定病毒的杀瘤活性并通过测定培养上清液的血凝效价来检测病毒的增殖... 目的比较新分离的新城疫病毒野生株(NDV7793、NDVD817)与疫苗株Lasota对大肠癌的体外杀伤作用。方法3株病毒作用于大肠癌细胞株LS174T和LOVO,用乳酸脱氢酶微量释放法测定病毒的杀瘤活性并通过测定培养上清液的血凝效价来检测病毒的增殖能力。结果3株新城疫病毒均可杀伤大肠癌细胞并可在其复制增殖,对正常大肠细胞无明显细胞毒性。而对正常大肠组织细胞未见明显影响(P<0.05);野生株对癌细胞的杀伤作用较强,72h后对LOVO细胞株的杀伤效应>90%;LOVO大肠癌细胞对NDV敏感性强于LS174T大肠癌细胞。结论3株NDV对大肠癌细胞均有选择性杀伤作用,野生株病毒的抑瘤效应强于疫苗株,对正常大肠组织无细胞毒性。 展开更多
关键词 新城疫病毒 大肠癌细胞 LDH微量释放法 杀瘤活性
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骨髓间充质干细胞促进结肠癌细胞HT29增殖和迁移 被引量:3
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作者 周昌宁 曹海宁 李利平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期649-654,共6页
目的探讨骨髓来源的间充质干细胞(bone marrowe-derived mesenchymal stem cells,BD-MSCs)对结肠癌细胞HT29的增殖与迁移能力的影响及其可能的机制。方法将BD-MSCs与结肠癌细胞系HT29共培养,并观察共培养后对结肠癌细胞的增殖和迁移能... 目的探讨骨髓来源的间充质干细胞(bone marrowe-derived mesenchymal stem cells,BD-MSCs)对结肠癌细胞HT29的增殖与迁移能力的影响及其可能的机制。方法将BD-MSCs与结肠癌细胞系HT29共培养,并观察共培养后对结肠癌细胞的增殖和迁移能力的影响。通过Transwell实验检测共培养组与对照组细胞在迁移能力方面的差异;CCK-8实验、克隆形成和成球实验检测HT29细胞的体外增殖能力;体内成瘤实验比较共培养组和对照组细胞的成瘤能力差异;机制的阐明是通过荧光定量PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平检测共培养组与对照组细胞间E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Fibronectin、Snail1、Snail2、Twist1和Twist2的表达差异。结果结肠癌细胞系HT29在与BD-MSCs共培养后,增殖能力显著增强(P<0.05)。与对照组相比,与BD-MSCs共培养后的HT29细胞的迁移能力[(259.6±19.23)个细胞/视野vs(81.6±15.74)个细胞/视野]显著增强(P<0.05)。克隆形成率[(37±2.94)%vs(15.33±2.87)%]和成球率[(31±3.27)%vs(10.33±2.62)%]均显著提高(P<0.05)。在体内成瘤实验中,与BD-MSCs共同注射的实验组所成肿瘤的体积是显著大于对照组的,并且所成肿瘤的重量也是具有显著差异的[(1.73±0.62)g vs(0.54±0.81)g,P<0.05]。最终在mRNA和蛋白水平检测到,与对照组细胞相比,与BD-MSCs共培养的HT29细胞中上皮样标记物E-Cadherin出现显著下调表达,而间质样标记物Vimentin和Twist1则显著上调表达。结论骨髓来源的间充质干细胞促进结肠癌细胞HT29的增殖与迁移。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 结肠癌 增殖 迁移
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结直肠癌细胞辐射敏感性的定量比较蛋白组学研究 被引量:2
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作者 杨晓东 邢春根 +4 位作者 吴永友 赵奎 龚巍 陈博 何腾飞 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1120-1125,共6页
为筛选结直肠癌细胞辐射敏感相关的蛋白质,用于结直肠癌放疗的个体化选择,采用荧光差异显微凝胶电泳(DIGE)技术分离并筛选Cy3、Cy5及Cy2荧光素标记的不同辐射敏感性的结直肠癌细胞系SW480和LOVO的移植瘤组织的差异表达蛋白质,结果共筛选... 为筛选结直肠癌细胞辐射敏感相关的蛋白质,用于结直肠癌放疗的个体化选择,采用荧光差异显微凝胶电泳(DIGE)技术分离并筛选Cy3、Cy5及Cy2荧光素标记的不同辐射敏感性的结直肠癌细胞系SW480和LOVO的移植瘤组织的差异表达蛋白质,结果共筛选出35个差异表达蛋白点,其中,在SW480组肿瘤组织中表达上调的蛋白点有17个,在LOVO组肿瘤组织中表达上调的蛋白点有18个。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术进行鉴定并分析,成功鉴定蛋白质点27个,LOVO组肿瘤组织表达上调蛋白17个,SW480组肿瘤组织表达上调蛋白15个。这些差异表达蛋白质有可能在结直肠癌辐射敏感性的预测中作为特异性的标记物,在结直肠癌患者的放疗选择中发挥重要作用,为结直肠癌患者的治疗选择提供技术参考。 展开更多
关键词 结直肠癌细胞 辐射敏感性 荧光差异凝胶电泳 定量蛋白组学
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SIRT1通过NF-κB通路调节结直肠癌细胞HCT116增殖和活力 被引量:3
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作者 王福海 张广超 《解剖学研究》 CAS 2019年第1期20-24,共5页
目的探讨SIRT1是否通过NF-κB通路来调节结直肠癌细胞HCT116点增殖和活力。方法选用结直肠癌细胞HCT116,通过转染SIRT1质粒来过表达SIRT1,此为过表达组;通过siRNA来敲低SIRT1,此为敲低组;用MTT法、CCK-8法和克隆形成试验来测定HCT116细... 目的探讨SIRT1是否通过NF-κB通路来调节结直肠癌细胞HCT116点增殖和活力。方法选用结直肠癌细胞HCT116,通过转染SIRT1质粒来过表达SIRT1,此为过表达组;通过siRNA来敲低SIRT1,此为敲低组;用MTT法、CCK-8法和克隆形成试验来测定HCT116细胞的增殖和活力情况;通过免疫印迹试验来检测NF-κB通路相关蛋白的表达情况。结果过表达组中,p-P65、p-IKKalpha的表达量明显降低(P<0.05),而P65和IKKalpha的总体表达量没有明显差异(P>0.05),HCT116的生长速度、增殖速率以及细胞活力明显降低(P<0.05);敲低组中,p-P65、p-IKKalpha的表达量明显上升(P<0.05),而P65和IKKalpha的总体表达量没有明显差异(P>0.05),HCT116的生长速度、增殖速率以及细胞活力明显上升(P<0.05)。在过表达SIRT1的同时,用NF-κB的抑制剂Curcumin处理HCT116后,NF-κB通路相关蛋白的表达量以及HCT116的生长速度和增殖速率无明显变化(P>0.05)。结论 SIRT1通过抑制NF-κB的激活来降低结直肠癌细胞HCT116增殖和活力。 展开更多
关键词 结直肠癌细胞 沉默信息调节因子2相关酶1 NF-ΚB通路 HCT116细胞
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西妥昔单抗对^125I粒子照射结直肠癌细胞DNA修复能力和信号传导通路的影响 被引量:3
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作者 刘敬佳 王俊杰 +3 位作者 赵勇 王皓 曲昂 李金娜 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期578-582,共5页
目的探讨西妥昔单抗(C225)对^125I粒子照射下结直肠癌CL187细胞DNA损伤修复和信号传导通路的影响。方法实验分为空白对照组,100nmol/LC225处理组,单独^125I粒子持续低剂量率照射组和C225联合^125I粒子持续低剂量率照射组。在吸收... 目的探讨西妥昔单抗(C225)对^125I粒子照射下结直肠癌CL187细胞DNA损伤修复和信号传导通路的影响。方法实验分为空白对照组,100nmol/LC225处理组,单独^125I粒子持续低剂量率照射组和C225联合^125I粒子持续低剂量率照射组。在吸收剂量达4Gy后48h,经细胞免疫荧光检测各组细胞中γH2AX聚集点数量以及γH2AX聚集点阳性细胞比例。提取细胞内总蛋白,Westernblot检测DNA修复蛋白的变化。在吸收剂量达4Gy后即刻提取总蛋白,Westernblot分析在照射过程中C225对EGFR下游信号通路中蛋白分子的影响。结果与单独^125I粒子持续低剂量率照射组细胞相比,C225联合^125I持续低剂量率照射组细胞内残余的γH2AX聚集点数量和γH2AX聚集点阳性的细胞比例均高(t=8.0和6.8,P〈0.05),并且细胞中DNA修复蛋白Ku70和DNA.PKes的含量偏低(t=6.6和5.7,P〈0.05)。Westernblot结果显示,在^125I粒子持续低剂量率照射过程中,C225能够降低细胞内EGFR的水平(t=4.9,P〈0.05),抑制Akt的活化(t=5.5,P〈0.05)。结论在^125I放射性粒子持续低剂量率照射下,C225可以降低细胞内Ku70和DNA—PKes的含量,并抑制Akt活化,减弱CL187细胞的DNA损伤修复能力。 展开更多
关键词 西妥昔单抗 DNA损伤修复 结直肠癌细胞 KU70 Akt
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药物诱导后的人大肠癌细胞的 [Ca^(2+)]_i 的变化 被引量:3
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作者 王红梅 宋今丹 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1997年第2期97-101,共5页
采用荧光分光光度计法检测维甲酸(RA)、1,25(OH)2VD3及佛波酯(PMA)诱导CCL229细胞分化后[Ca2+]i变化,并观察内质网(ER)特异的Ca2+-ATPase抑制剂Thapsigargin(TG)、... 采用荧光分光光度计法检测维甲酸(RA)、1,25(OH)2VD3及佛波酯(PMA)诱导CCL229细胞分化后[Ca2+]i变化,并观察内质网(ER)特异的Ca2+-ATPase抑制剂Thapsigargin(TG)、IP3受体抑制剂Heparin对RA诱导[Ca2+]i变化的影响,从而探讨RA诱导[Ca2+]i变化与ER的关系。结果显示:RA和1,25(OH)2VD3在数秒内引起[Ca2+]i显著升高。在EGTA和Verapamil预处理细胞条件下,TG不能抑制RA引起Ca2+从细胞内钙池中外流,RA作用后TG仍能升高[Ca2+]i。另外,Heparin也不能完全抑制RA升高[Ca2+]i。提示RA诱导大肠癌细胞升高[Ca2+]i可能通过ER上IP3敏感性和非敏感性钙池,亦可能细胞内存在除ER外对RA敏感的钙池。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 癌细胞 内质网 钙离子
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RNA干扰HER2基因对人大肠癌HT29细胞株增殖影响的研究 被引量:3
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作者 吴爱国 纪术峰 +4 位作者 韩明阳 范应方 谭艺真 刘铮 刘鹏 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期380-383,共4页
目的研究载体介导的靶向HER2基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)对体外生长的人大肠癌HT29细胞增殖的影响。方法将针对HER2基因的短发夹RNA(shor thairpin RNA,shR-NA)表达载体转染体外生长的HT29细胞,分别用半定量RT-PCR和Western b... 目的研究载体介导的靶向HER2基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)对体外生长的人大肠癌HT29细胞增殖的影响。方法将针对HER2基因的短发夹RNA(shor thairpin RNA,shR-NA)表达载体转染体外生长的HT29细胞,分别用半定量RT-PCR和Western blot检测HER2 mRNA和蛋白的表达,MTT测定各组细胞的增殖差异。结果靶向HER2的shRNA可以有效地抑制体外生长的人大肠癌HT29细胞中HER2基因mRNA和蛋白表达,与对照组比较,实验组细胞增殖明显受到抑制。结论靶向HER2的shRNA表达载体可以通过降低HER2基因的表达,进而抑制体外生长的大肠癌HT29细胞的增殖。 展开更多
关键词 HER2基因 RNA干扰 大肠癌细胞 短发夹RNA
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