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黄芪多糖对高血脂大鼠肾脏的保护机制研究 被引量：6
1
作者 黄昊乐 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2014年第6期693-695,共3页
目的探讨黄芪多糖对高血脂大鼠肾皮质辅酯酶的影响,初步研究其肾脏保护机制。方法采用高脂饲料制备高血脂大鼠,黄芪多糖腹腔给药连续8周,测定血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肾脏丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(S... 目的探讨黄芪多糖对高血脂大鼠肾皮质辅酯酶的影响,初步研究其肾脏保护机制。方法采用高脂饲料制备高血脂大鼠,黄芪多糖腹腔给药连续8周,测定血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肾脏丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肾皮质辅酯酶及观察肾脏形态学。结果黄芪多糖使血清Cr,BUN,TC,TG等明显降低,肾组织MDA明显降低,肾组织SOD明显升高,肾皮质辅酯酶明显升高且与Cr呈良好的负性相关(r=?0.993 0);但肾组织形态学未明显改善。结论黄芪多糖具有明显的降脂抗氧化作用,能减少脂质过氧化产物,对高血脂大鼠具有一定的肾脏保护作用,其机制可能与其促进肾皮质辅酯酶表达增加有一定的关系。 展开更多
关键词 黄芪多糖 肾脏 抗氧化 高血脂 辅酯酶
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雪莲果浸膏对高脂模型大鼠肠道脂质吸收的影响及机制 被引量：2
2
作者 孙见飞 龚顺航 +5 位作者 姚龙凤 殷文凤 章先旭 刘俊奇 李蓉 吴遵秋 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第10期1137-1146,共10页
目的观察雪莲果浸膏对高脂模型大鼠的降脂作用及机制。方法利用网络药理学方法对雪莲果干预高脂血症的可能分子机制进行预测,确定脂质代谢研究对象;80只SD大鼠随机选取20只作为空白组(普通饲料饲养8周),60只作为高脂模型组(用高脂高糖... 目的观察雪莲果浸膏对高脂模型大鼠的降脂作用及机制。方法利用网络药理学方法对雪莲果干预高脂血症的可能分子机制进行预测,确定脂质代谢研究对象;80只SD大鼠随机选取20只作为空白组(普通饲料饲养8周),60只作为高脂模型组(用高脂高糖饲料饲养8周建模);建模成功后高脂模型组大鼠再分为阳性对照组、模型组及雪莲果浸膏(高、中、低)剂量组,雪莲果浸膏3个剂量组给予相应浓度雪莲果浸膏灌胃、阳性对照组给予奥利司他灌胃、其余各组给予生理盐水灌胃,连续8周,观察各组大鼠的体质量变化;采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,实时荧光定量PCR及免疫印迹法分别检测各组大鼠胰腺组织中胰脂肪酶、辅脂酶的m RNA及蛋白水平。结果通过网络药理学对雪莲果干预高脂血症的可能分子机制进行预测分析,确定胰脂肪酶和辅脂酶为脂质代谢研究的目标;动物实验结果显示,与模型组比较,雪莲果浸膏可降低高脂大鼠胰腺组织中胰脂肪酶、辅脂酶m RNA及蛋白表达水平(P<0.05),能改善高脂模型大鼠的血脂情况。结论雪莲果浸膏具有降脂作用,其机制为抑制胰脂肪酶、辅脂酶表达,抑制胰腺中胰脂肪酶、辅脂酶的合成,降低大鼠肠道对脂质的吸收。 展开更多
关键词 雪莲果浸膏 高脂模型 降脂作用 胰脂肪酶 辅脂酶
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人辅脂酶样3基因hCLPSL3及其同源基因cDNA克隆及鉴定
3
作者 卢艳 薛永常 +1 位作者 于鹏 王平章 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期575-584,共10页
为发现新的辅脂酶样家族成员,通过EST拼接获得1个新的人类辅脂酶样蛋白编码基因hCLPSL3(human colipase-like 3);同时,通过同源性分析,对小鼠(Mus musculus)、大鼠(Rattus norvegicus)同源基因Clpsl3的完整编码区进行分析和预测。利用RT... 为发现新的辅脂酶样家族成员,通过EST拼接获得1个新的人类辅脂酶样蛋白编码基因hCLPSL3(human colipase-like 3);同时,通过同源性分析,对小鼠(Mus musculus)、大鼠(Rattus norvegicus)同源基因Clpsl3的完整编码区进行分析和预测。利用RT-PCR技术以人细胞系cDNA为模板成功扩增到hCLPSL3的2个转录变异体,即hCLPSL3-v1和-v2,前者包含完整的开放阅读框架(ORF),后者ORF被提前终止密码子(premature stop codon,PTC)中断;hCLPSL3-v1包含159个氨基酸,含有1个典型的信号肽,2个高度同源的内部序列重复区以及2个不完整的辅脂酶样结构域。通过真核表达载体构建,在人293T细胞中以过表达方式证实了hCLPSL3-v1能够分泌。通过RT-PCR技术,在小鼠肾、结肠和脾脏组织中各获得1个Clpsl3转录变异体序列,分别称为mCLPSL3-v1、-v2和-v3,其中mCLPSL3-v1包含完整的编码区,编码产物含161个氨基酸,而mCLPSL3-v2和-v3的ORF均被PTC中断;从大鼠结肠和小肠组织中克隆到大鼠Clpsl3的cDNA序列,即rCLPSL3,其编码162个氨基酸。此外,CLPSL3在哺乳动物中广泛存在,基因结构相似,均含有高度保守的18个半胱氨酸,推测与二硫键形成有关。这些工作为CLPSL3的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 克隆 辅脂酶 人辅脂酶样3基因
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小鼠附睾特异性辅脂酶的原核表达及其抗体的制备 被引量：2
4
作者 关艺青 禹艳红 +1 位作者 黄丹 潘善培 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期105-110,共6页
目的:利用原核表达系统重组表达小鼠附睾特异性辅脂酶(meClps),并制备抗meClps抗体。方法:通过生物信息分析meClps蛋白结构,Oligo 6设计引物,PCR法从小鼠附睾cDNA中扩增meClps全长序列并克隆到pMD19-T载体中。将含meClps序列pMD19-T载... 目的:利用原核表达系统重组表达小鼠附睾特异性辅脂酶(meClps),并制备抗meClps抗体。方法:通过生物信息分析meClps蛋白结构,Oligo 6设计引物,PCR法从小鼠附睾cDNA中扩增meClps全长序列并克隆到pMD19-T载体中。将含meClps序列pMD19-T载体通过PCR扩增成熟肽区段序列,重组到pET-21b原核表达载体上,经菌落PCR及测序鉴定后,转化到表达菌株E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导蛋白表达后用Tricine-SDS-PAGE和Western blotting检测重组meClps的表达。包涵体沉淀经浓度为2 mol/L尿素洗涤,Tricine-SDS-PAGE分离、染色、脱色,切下目的条带用生理盐水浸泡、磨碎与弗氏佐剂混合后免疫新西兰大白兔获取免疫血清,Western blotting检测抗体与meClps反应。结果:在原核表达系统成功重组表达meClps,目的蛋白主要以包涵体形式存在,制备了高效价的兔抗meClps抗体。结论:成功建立meClps的原核表达系统和获得兔抗meClps抗体。 展开更多
关键词 附睾 辅脂酶 原核表达 抗体
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高脂血症肾损害大鼠体内辅脂酶的变化
5
作者 肖云 谢辉 +2 位作者 肖洁 张萌 吴峻 《热带医学杂志》 CAS 2011年第1期35-37,共3页
目的观察高脂血症大鼠血脂、尿蛋白、血肌酐,以及血清和肾皮质辅脂酶浓度及辛伐他汀治疗后的影响,探讨辅脂酶在高脂血症大鼠肾损害中可能的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常对照组、高脂血症模型组和辛伐他汀(10mg·kg-1d-1... 目的观察高脂血症大鼠血脂、尿蛋白、血肌酐,以及血清和肾皮质辅脂酶浓度及辛伐他汀治疗后的影响,探讨辅脂酶在高脂血症大鼠肾损害中可能的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常对照组、高脂血症模型组和辛伐他汀(10mg·kg-1d-1)治疗组,每组10只,12周后检测三组大鼠的血脂、血肌酐、24h尿蛋白水平以及血清和肾皮质辅脂酶浓度。结果高脂血症组尿蛋白明显高于正常对照组(P<0.01),肾组织辅脂酶水平低于正常对照组(P<0.05)。辛伐他汀治疗组总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、24h尿蛋白定量显著低于高脂血症组(P<0.01),血清及肾组织colipase含量高于高脂血症组。结论辅脂酶可能参与了高脂血症肾损害的发生,辛伐他汀可能通过调节辅脂酶水平来保护高脂血症肾损害。 展开更多
关键词 辛伐他汀 高脂血症 肾 辅脂酶
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慢病毒干扰小鼠附睾特异的meClps基因可降低精子的运动能力 被引量：3
6
作者 廉滋珍 曹佐武 +6 位作者 陈冉 陈雷 薛樱子 秦俊文 齐绪峰 张春雪 禹艳红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1359-1364,共6页
目的筛选能有效干扰小鼠附睾特异的类辅脂酶meClps基因表达的RNA靶点,并通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后分析对精子运动的影响。方法构建真核表达载体pDsRed2.0-C1-meClps中并转染NIH-3T3细胞,用meClps抗血清检测meClps蛋白的表... 目的筛选能有效干扰小鼠附睾特异的类辅脂酶meClps基因表达的RNA靶点,并通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后分析对精子运动的影响。方法构建真核表达载体pDsRed2.0-C1-meClps中并转染NIH-3T3细胞,用meClps抗血清检测meClps蛋白的表达。针对meClps基因的序列设计并合成3对靶向干扰meClps表达的寡核苷酸序列,构建重组慢病毒载体pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251、224和286。将重组慢病毒干扰质粒分别与pDsRed2.0-C1-meClps共转染到NIH-3T3细胞,半定量PCR和Western blotting检测meClps基因在mRNA和蛋白水平的变化。将筛选得到的干扰效果最好的慢病毒载体包装慢病毒,注射到小鼠附睾头部组织后分析对附睾尾部精子运动性能的影响。结果构建了体外表达meClps蛋白的pDsRed2.0-C1-meClps表达载体和靶向meClps基因的慢病毒RNAi载体。靶向meClps的RNA干扰载体对转染pDsRed2.0-C1-meClps后的NIH-3T3细胞中的meClps的mRNA和蛋白表达都有抑制,但以转染pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251对meClps的抑制效果最明显。包装后的慢病毒注射到小鼠附睾头部后附睾尾部组织中的精子运动速率降低(P<0.05)。结论筛选出RNAi-251能有效干扰meClps表达,通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后精子运动性能降低。 展开更多
关键词 RNA干扰 附睾特异表达蛋白 meClps 慢病毒 精子运动
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斜带石斑鱼2种胰脂肪酶基因全长cDNA序列的克隆与分析
7
作者 李观贵 梁旭方 +3 位作者 郁颖 黎家成 张海发 王云新 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期83-89,共7页
利用RT-PCR和RACE方法克隆得到斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）肝胰脏中胆盐活化的胰脂肪酶（bile salt-activated lipase,BSAL）和依赖于辅酶的胰脂肪酶（colipase-dependent pancreatic lipase,PL）基因的全长cDNA序列.BSAL基因全... 利用RT-PCR和RACE方法克隆得到斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）肝胰脏中胆盐活化的胰脂肪酶（bile salt-activated lipase,BSAL）和依赖于辅酶的胰脂肪酶（colipase-dependent pancreatic lipase,PL）基因的全长cDNA序列.BSAL基因全长cDNA序列1796 bp,编码558个氨基酸,该蛋白序列含有BSAL的全部特征结构区,与其他脊椎动物BSAL的氨基酸序列同源性为49.9%-57.3%.PL基因的全长cDNA序列1503 bp,编码465个氨基酸,该蛋白序列含有PL全部的特征结构区,与其它脊椎动物PL的氨基酸同源性为49.1%-73.9%.系统树分析表明,斜带石斑鱼BSAL和PL与其它物种BSAL、PL和胰脂肪酶相关蛋白（PL-RP）聚于进化树的两个不同分支,属于2种不同的胰脂肪酶.结果证实,在同一鱼类体内也存在BSAL和PL两种胰脂肪酶基因. 展开更多
关键词 胆盐活化的胰脂肪酶 依赖于辅酶的胰脂肪酶 斜带石斑鱼 基因克隆
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