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神经干细胞的分离培养及其鉴定 被引量：29
1
作者 刘仕勇 张可成 +2 位作者 杨辉 何家全 石军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期26-28,共3页
目的 :从成年大鼠纹状体区和胎鼠皮层分离并鉴定神经干细胞。方法 :利用无血清培养和单细胞克隆技术在成年大鼠纹状体区和胎鼠皮层分离具有单细胞克隆能力的细胞群 ,选取单个克隆进行连续传代培养获得大量亚克隆 ,采用免疫荧光细胞化学... 目的 :从成年大鼠纹状体区和胎鼠皮层分离并鉴定神经干细胞。方法 :利用无血清培养和单细胞克隆技术在成年大鼠纹状体区和胎鼠皮层分离具有单细胞克隆能力的细胞群 ,选取单个克隆进行连续传代培养获得大量亚克隆 ,采用免疫荧光细胞化学技术检测克隆细胞Nestin抗原和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达。结果 :从纹状体区和皮层分离的细胞群具有连续克隆能力 ,胚胎早期细胞抗原 Nestin抗原阳性 ,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原。结论 :我们分离的细胞具有自我更新能力和多分化潜能 ,属于胚胎早期细胞 ,有很强的增殖能力 ,是中枢神经系统的干细胞。 展开更多
关键词 神经干细胞 克隆 细胞培养 分离 大鼠
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新生大鼠神经干细胞的分离培养与分化
2
作者 程清洲 戴冀斌 明新贵 《解剖科学进展》 CAS 2004年第3期196-198,共3页
目的　从新生SD大鼠脑室下区分离并培养神经干细胞 ,观察神经干细胞的生长、增殖及分化的特点。方法　利用无血清培养和单细胞克隆技术 ,采用原代贴壁及传代悬浮的方法 ,培养获得细胞克隆。应用免疫细胞化学方法及透射电镜检测技术 ,鉴... 目的　从新生SD大鼠脑室下区分离并培养神经干细胞 ,观察神经干细胞的生长、增殖及分化的特点。方法　利用无血清培养和单细胞克隆技术 ,采用原代贴壁及传代悬浮的方法 ,培养获得细胞克隆。应用免疫细胞化学方法及透射电镜检测技术 ,鉴定神经干细胞和分化的神经细胞。结果　从新生SD大鼠脑室下区分离的组织 ,经原代和传代培养均可形成细胞克隆 ,并具有增殖的能力。原代和传代细胞Nestin抗原呈阳性 ,分化后的细胞可表达NSE、GFAP、GC特异性抗原。结论　本法从新生SD大鼠脑室下区分离的细胞具有自我更新和分化潜能 ,有很强的增殖能力 。 展开更多
关键词 新生大鼠 神经干细胞 细胞分离 细胞培养 细胞分化
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人肝脏再生增强因子cDNA的克隆、表达及产物活性鉴定
3
作者 陈世敏 蔡在龙 毛积芳 《实用医药杂志》 2004年第4期331-333,共3页
目的通过对人源肝脏再生增强因子穴Augmenterofliverregeneration熏ALR雪cDNA进行克隆、表达及表达产物活性的初步鉴定,为基因工程大量制备重组hALR穴humanAugmenterofliverregeneration熏ALR雪及其临床应用提供资料。方法提取人胎肝总R... 目的通过对人源肝脏再生增强因子穴Augmenterofliverregeneration熏ALR雪cDNA进行克隆、表达及表达产物活性的初步鉴定,为基因工程大量制备重组hALR穴humanAugmenterofliverregeneration熏ALR雪及其临床应用提供资料。方法提取人胎肝总RNA,通过RT-PCR获得全长hALRcDNA,构建原核融合表达质粒pGEX-4T-3/hALRcDNA,转化大肠杆菌诱导表达融合蛋白。MTT法及小鼠CCl4肝衰竭模型检测重组hALR的生物学活性。结果测序证实克隆得到的hALR序列完全正确。SDS-PAGE检测表达产物分子量约41kD,与融合蛋白GST-hALR的预期分子量相吻合。MTT比色结果为21.9ng/mlhALR对Hep3B细胞系的促增殖作用显著高于对照组(P<0.05)。体内活性检测结果表明hALR能显著提高CCl4诱导肝功能衰竭动物的存活率(χ2=3.923熏P<0.05)。结论重组hALR的制备过程简单易行,可通过基因工程方法大量生产。活性检测表明hALR具有促肝细胞增殖和肝功能修复的作用。 展开更多
关键词 人肝脏再生增强因子 克隆 表达 活性鉴定
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