期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到76篇文章
< 1 2 … 4 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
瑞香狼毒水提物小鼠药物血清对小鼠白血病L_(1210)细胞增殖、克隆形成和DNA合成的影响 被引量：23
1
作者 贾正平 樊俊杰 +3 位作者 王彦广 谢景文 徐丽婷 王荣 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期807-809,共3页
目的　从整体水平探讨瑞香狼毒水提物 (SCL A)的抗癌作用及机制。方法　以不同剂量 SCL A ig给药后 ,不同时间采集小鼠血清 ,处理体外培养的小鼠白血病 L1 2 1 0 细胞 ,观察肿瘤细胞 MTT还原 ,克隆形成能力和 DNA合成的改变。结果　 SCL... 目的　从整体水平探讨瑞香狼毒水提物 (SCL A)的抗癌作用及机制。方法　以不同剂量 SCL A ig给药后 ,不同时间采集小鼠血清 ,处理体外培养的小鼠白血病 L1 2 1 0 细胞 ,观察肿瘤细胞 MTT还原 ,克隆形成能力和 DNA合成的改变。结果　 SCL A 3,6 ,12 g/ kg给药 1,2 ,4,8h后的药物血清处理肿瘤细胞后 ,其 MTT还原及克隆形成率均显著降低 ;给药 2 h时的药物血清表现出更强的抑制肿瘤细胞增殖作用。SCL A小鼠药物血清也显著抑制 [3H]Td R掺入 L1 2 1 0 细胞 DNA。结论　直接抑制癌细胞增殖及 DNA合成是瑞香狼毒的重要抗癌机制。 展开更多
关键词 瑞香狼毒 血清药理学 L1210细胞 克隆细胞 DNA合成 水提物 SCLA 白血病
下载PDF
瑞香狼毒小鼠药物血清增敏化疗药物对K562/VCR耐药细胞的抗癌活性 被引量：14
2
作者 贾正平 樊俊杰 +4 位作者 谢景文 徐丽婷 马骏 王荣 魏虎来 《西北国防医学杂志》 CAS 2001年第4期307-309,共3页
目的 :研究瑞香狼毒 (SC)小鼠药物血清与细胞毒化疗药物联合应用对K5 6 2 /VCR多药耐药细胞的协同抗肿瘤效应。方法 :小鼠口服SC水提物 6g·kg-1,2h后采集血清。SC药物血清与长春新碱 (VCR)、阿霉素 (Dox)或足叶乙甙 (VP - 16 )联... 目的 :研究瑞香狼毒 (SC)小鼠药物血清与细胞毒化疗药物联合应用对K5 6 2 /VCR多药耐药细胞的协同抗肿瘤效应。方法 :小鼠口服SC水提物 6g·kg-1,2h后采集血清。SC药物血清与长春新碱 (VCR)、阿霉素 (Dox)或足叶乙甙 (VP - 16 )联合处理K5 6 2 /VCR多药耐药细胞 ,检测细胞MTT转化率 ,克隆形成和DNA合成能力。结果 :5 %SC药物血清显著增加细胞毒化疗药物对K5 6 2 /VCR耐药细胞的敏感性 ;VCR、Dox、VP - 16对K5 6 2 /VCR的IC50 较单独化疗药物组分别减小 6 .3、15 .0和 18.5倍 ;细胞克隆数分别减少 45 .1%、6 6 .6 %和 5 8.6 % ;[3 H]TdR掺入K5 6 2 /VCR细胞DNA也显著减少。增敏作用随SC药物血清比例的增高而增强。结论 展开更多
关键词 肿瘤 瑞香狼毒 血清药理学 K562/VCR细胞 MTT 克隆形成 DNA合成 增敏 小鼠
下载PDF
信号通路对胃癌干细胞及胃癌发生的影响 被引量：13
3
作者 陈浩 许浪 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第14期2532-2537,共6页
背景:Hedgehog与Wnt/β-catenin信号通路对胃癌干细胞的影响及在胃癌发生发展中的作用机制少见报道。目的:探讨Hedgehog与Wnt/β-catenin信号通路在胃癌发生发展中的作用机制。方法:采用肿瘤球悬浮分选法从胃癌组织标本中分选胃癌干细... 背景:Hedgehog与Wnt/β-catenin信号通路对胃癌干细胞的影响及在胃癌发生发展中的作用机制少见报道。目的:探讨Hedgehog与Wnt/β-catenin信号通路在胃癌发生发展中的作用机制。方法:采用肿瘤球悬浮分选法从胃癌组织标本中分选胃癌干细胞。采用免疫组化SP法检测Hedgehog及Wnt/β-catenin信号通路主要分子SHH、GLI1、Wnt2及β-catenin在胃癌干细胞中的表达。Spearman相关分析各细胞因子间的相关性分析。结果与结论:SHH、GLI1、Wnt2及β-catenin在胃癌干细胞中的阳性表达率分别为74.7%,78.3%,85.5%和83.3%,均显著高于癌旁组织的阳性表达率(P<0.05)。各细胞因子间在胃癌干细胞中的表达均呈正相关(P<0.05)。说明在胃癌干细胞中Hedgehog及Wnt/β-catenin信号通路均被激活,二者互相作用可能参与了胃癌的发生发展,为胃癌的干细胞治疗提供了新的研究方向。 展开更多
关键词 干细胞 肿瘤干细胞 胃癌 胃癌干细胞 HEDGEHOG信号通路 Wnt/β-catenin信号通路 SHH GLI1 Wnt2 β-catenin 克隆球细胞 免疫组化 阳性细胞 干细胞图片文章
下载PDF
4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4′-去甲表鬼臼毒对L1210细胞系增殖、克隆形成和DNA合成的影响 被引量：15
4
作者 贾正平 张培棪 梁重栋 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期47-49,共3页
新合成的鬼臼毒自旋标记衍生物4-(4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基)-4′-去甲表鬼臼毒(GP-7)显著抑制体外培养的L1210细胞生长。抑制作用和浓度及处理时间正相关,作用特点和鬼臼乙叉甙(VP-16)相似,24,48hIC_(50)分别为1... 新合成的鬼臼毒自旋标记衍生物4-(4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基)-4′-去甲表鬼臼毒(GP-7)显著抑制体外培养的L1210细胞生长。抑制作用和浓度及处理时间正相关,作用特点和鬼臼乙叉甙(VP-16)相似,24,48hIC_(50)分别为1.51和0.13μmol/L。GP-7和VP-16对L1210细胞软琼脂克隆形成均有抑制作用,且有浓度依赖性,IC_(50)分别为3.29和2.82μmol/L。GP-70.08～100μmol/L对L1210细胞DNA合成抑制率为18.4～80.7％。本文结果表明GP-7体外抗肿瘤作用与VP-16相似。 展开更多
关键词 GP-7 L1210细胞 DNA 克隆细胞
全文增补中
骨髓增生异常综合征T淋巴细胞异常与克隆造血 被引量：15
5
作者 胡晓梅 许勇钢 +12 位作者 全日城 杨晓红 王洪志 徐述 郭小青 刘池 肖海燕 郑春梅 张姗姗 唐旭东 李柳 刘锋 麻柔 《白血病．淋巴瘤》 CAS 2011年第2期71-75,共5页
目的 了解T淋巴细胞异常在骨髓增生异常综合征（MDS）克隆造血中的作用。方法对76例MDS患者的染色体核型、T淋巴细胞亚群及激活状态进行分析。结果正常核型36例，异常核型40例，异常发生率52．6％。40例异常核型中，三体8（＋8）24例，... 目的 了解T淋巴细胞异常在骨髓增生异常综合征（MDS）克隆造血中的作用。方法对76例MDS患者的染色体核型、T淋巴细胞亚群及激活状态进行分析。结果正常核型36例，异常核型40例，异常发生率52．6％。40例异常核型中，三体8（＋8）24例，占异常核型的60．0％。与健康对照组比较，MDS患者CD；CD-19、CD＋3；CD＋3；CD＋8；以及CD＋3HLA—DR^＋细胞百分率显著升高，CD-3（CD16CD56）^＋细胞的百分率明显降低。将MDS患者进行核型分组，异常核型组CD＋3（CD16CD56）^＋细胞的百分率显著高于正常对照组。将＋8核型从MDS异常核型中独立出来进行分析，CD＋3CD＋4CD-8细胞的百分率明显低于正常核型以及其他异常组，CD4／CD8的比值明显低于健康对照组。结论MDS存在T淋巴细胞异常，异常核型MDS可能恶性克隆增殖更为优势，预后更差。＋8核型MDS存在更为严重的免疫监视功能下降，导致恶性克隆过度增殖与残存造血过度受抑。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 T淋巴细胞 核型分析 克隆细胞
原文传递
人胃癌细胞端粒酶RNA组分hTR基因片段的克隆及其正反义真核表达载体的构建 被引量：11
6
作者 冯润华 李建芳 +2 位作者 刘炳亚 朱正纲 尹浩然 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第12期1409-1414,共6页
目的克隆人胃癌细胞端粒酶RNA组分(hTR)基因片段并构建其正义和反义真核表达载体,为以端粒酶为靶目标的肿瘤基因治疗奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人胃癌细胞株MKN-45中扩增出人hTR部分cDNA序列。将该片段插入pEF6/V5-His-TOPO载体后... 目的克隆人胃癌细胞端粒酶RNA组分(hTR)基因片段并构建其正义和反义真核表达载体,为以端粒酶为靶目标的肿瘤基因治疗奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人胃癌细胞株MKN-45中扩增出人hTR部分cDNA序列。将该片段插入pEF6/V5-His-TOPO载体后构建人端粒酶RNA组分(hTR)基因正义真核表达载体(pEF-hTR)。随后采用EcoRV和SpeⅠ从pEF-hTR上切下该目的基因片段并反向插入pBluescriptⅡKS载体上的EcoRV/SpeⅠ酶切位点上。最后采用KpnⅠ和NotⅠ从pBluescriptⅡKS载体上切下该目的基因片段并正向插入pEF-hTR的KpnⅠ/NotⅠ酶切位点上从而构建出人端粒酶RNA组分(hTR)基因反义真核表达载体(pEF-ahTR)。对所构建的载体均进行酶切鉴定和测序确认。结果所克隆的基因片段其碱基序列与文献报道完全一致,且插入载体的方向完全正确。结论本实验已成功克隆了人端粒酶RNA组分(hTR)基因的部分序列并成功构建其正义、反义真核表达载体,从而为研究反义抑制人胃癌细胞端粒酶活性对胃癌细胞生物学行为的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 胃肿瘤 病理学 端粒 末端转移酶 遗传学 RNA 遗传载体 克隆细胞
下载PDF
人脂肪间充质干细胞的致瘤性研究 被引量：6
7
作者 秦秀军 张伟 +3 位作者 李建国 魏锦萍 阚卫军 李荣荣 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第2期152-153,I0002,共3页
目的研究人脂肪间充质干细胞是否具有致瘤性,为其临床应用提供安全性依据。方法96只裸鼠分为空白对照组、阳性对照组和脂肪间充质干细胞组,每组32只,雌雄各半。将传代第5代的人脂肪间充质干细胞接种至裸鼠皮下,分别于注射后3d、1个月、... 目的研究人脂肪间充质干细胞是否具有致瘤性,为其临床应用提供安全性依据。方法96只裸鼠分为空白对照组、阳性对照组和脂肪间充质干细胞组,每组32只,雌雄各半。将传代第5代的人脂肪间充质干细胞接种至裸鼠皮下,分别于注射后3d、1个月、3个月、6个月对动物进行解剖检查,观察其肿瘤形成情况;同时用软琼脂克隆形成实验观察人脂肪间充质干细胞形成集落的能力。结果裸鼠体内致瘤实验中,脂肪间充质干细胞组和空白对照组动物大体解剖学观察和病理组织学检查均未见异常。软琼脂克隆形成实验显示人脂肪间充质干细胞未表现出在阻力介质中的克隆生长能力。结论短期传代后的人脂肪间充质干细胞不具致瘤性,有一定安全性。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓细胞 细胞分化 致癌性试验 克隆细胞 琼脂 小鼠 近交BALB C
下载PDF
利用噬菌体随机肽库对神经胶质瘤母系SWO-38进行全细胞筛选 被引量：6
8
作者 高双荣 钟雪云 +6 位作者 颜艳灵 钟振宇 秦艳芳 孙艳花 王冰 于莉娜 钟瑛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期946-948,共3页
目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用... 目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用噬菌体肽库可以简便。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 全细胞筛选 噬菌体 神经胶质瘤 肿瘤导向治疗
下载PDF
利用In-Fusion技术构建存活素-增强型绿色荧光蛋白融合基因重组慢病毒表达载体 被引量：4
9
作者 林朝贵 范林 陈良龙 《心血管康复医学杂志》 CAS 2010年第1期10-14,F0003,共6页
目的:本研究以构建存活素-增强型绿色荧光蛋白(Survivin&eGFP)融合基因慢病毒表达载体(p-GC-FU-Survivin)为例来探讨In-Fusion克隆技术在常规载体构建中的应用价值。方法:根据In-Fusion技术原理,克隆引物设计时,在Survivin同源序列... 目的:本研究以构建存活素-增强型绿色荧光蛋白(Survivin&eGFP)融合基因慢病毒表达载体(p-GC-FU-Survivin)为例来探讨In-Fusion克隆技术在常规载体构建中的应用价值。方法:根据In-Fusion技术原理,克隆引物设计时,在Survivin同源序列的两侧分别引入经AgeI线性化的载体p-GCFU两端各15个碱基,将以此引物扩增的聚合酶链式反应(PCR)产物与线性化p-GCFU用In-Fusion交换酶在室温下作用30min,使Sur-vivin特异性扩增产物两端的序列与线性化载体两端的序列发生同源交换,取2μl交换液进行转化,挑取阳性克隆,进行酶切和测序鉴定。将鉴定正确的阳性克隆瞬时转染293T细胞,观察Survivin&eGFP融合蛋白在293T细胞中的表达。结果:每2μl克隆交换液获得大约103个克隆数,阳性率达90%以上,瞬时转染p-GCFU-Survivin可获得Survivin&eGFP融合蛋白在293T细胞中的表达。结论:该技术是一种非连接酶依赖性克隆技术,使基因克隆步骤简化并大大节省了实验时间和经费。 展开更多
关键词 基因 克隆细胞 基因 病毒
下载PDF
猪流行性腹泻病毒敏感细胞的筛选方法及应用
10
作者 许冬 虞慎义 +4 位作者 张辰羽 魏磊 侯丹丹 赵文艳 黄浩 《中国兽药杂志》 2024年第7期13-19,共7页
为提高猪流行性腹泻抗原的病毒含量,对敏感Vero细胞的筛选方法及应用进行了研究。从6株不同来源的Vero细胞中筛选出敏感细胞进行单细胞克隆,对每个克隆细胞进行猪流行性腹泻病毒培养实验,筛选出病毒含量最高的克隆细胞,即为敏感克隆细... 为提高猪流行性腹泻抗原的病毒含量,对敏感Vero细胞的筛选方法及应用进行了研究。从6株不同来源的Vero细胞中筛选出敏感细胞进行单细胞克隆,对每个克隆细胞进行猪流行性腹泻病毒培养实验,筛选出病毒含量最高的克隆细胞,即为敏感克隆细胞。对敏感克隆细胞进行猪流行性腹泻病毒感染实验,当细胞病变达到80%以上时冻融收获,病毒含量能达到10~(7.5)TCID_(50)/mL。试验表明,本研究克隆出了一株对猪流行性腹泻病毒最敏感的VERO-D细胞,生产出的抗原病毒含量比常规工艺提高0.5个滴度以上。制备的成品检验结果和常规产品无差异,且免疫效果良好,为猪流行性腹泻灭活疫苗生产工艺的优化提供了数据支持。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 克隆细胞 病毒含量
下载PDF
转基因克隆猪与人类异种器官移植 被引量：4
11
作者 俞远京 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第1期50-53,共4页
利用猪的器官来解决当前人源器官严重短缺 ,为解决移植器官短缺的可行的途径 ,直接并准确地对α- 1,3半乳糖苷转移酶 (α - 1,3GT)基因进行同源重组 ,使α- 1,3GT失活 ,再结合猪体细胞克隆技术 ,对其进行人源化改造 ,减弱或消除排异反... 利用猪的器官来解决当前人源器官严重短缺 ,为解决移植器官短缺的可行的途径 ,直接并准确地对α- 1,3半乳糖苷转移酶 (α - 1,3GT)基因进行同源重组 ,使α- 1,3GT失活 ,再结合猪体细胞克隆技术 ,对其进行人源化改造 ,减弱或消除排异反应。然而 ,猪内源性逆转录病毒 (porcineendogenousretrovirus,PERV)为异种器官移植的主要障碍。因此 ,既要剔除导致人类排异反应的排斥基因 。 展开更多
关键词 转基因克隆猪 人类 异种器官移植 PERV Α-半乳糖苷酶 治疗 免疫学
下载PDF
大鼠肝再生增强因子的基因克隆 被引量：4
12
作者 黄志刚 刘殿武 +2 位作者 张辉 杨维青 刘树贤 《河北医科大学学报》 CAS 2001年第6期325-327,I002,共4页
目的克隆大鼠肝再生增强因子基因编码序列 ,并在原核细胞表达。方法按文献报道大鼠肝再生增强因子核苷酸序列合成引物 ,从 2周龄大鼠肝组织提取RNA ,利用RT PCR扩增大鼠肝再生增强因子基因编码区 ;将PCR扩增片段亚克隆到pBV2 2 1质粒 ,... 目的克隆大鼠肝再生增强因子基因编码序列 ,并在原核细胞表达。方法按文献报道大鼠肝再生增强因子核苷酸序列合成引物 ,从 2周龄大鼠肝组织提取RNA ,利用RT PCR扩增大鼠肝再生增强因子基因编码区 ;将PCR扩增片段亚克隆到pBV2 2 1质粒 ,构建原核表达重组载体 ,导入到大肠杆菌后热诱导表达目的蛋白。结果从大鼠肝脏的RNA中扩增到长约 4 0 0bp的肝再生增强因子cDNA编码区基因 ,序列分析表明与文献报道一致 ;重组克隆经热诱导表达出分子量约 15kD大小的蛋白质 ,与预期值一致。结论从 2周龄大鼠肝组织中成功克隆肝再生增强因子基因 ,并获得了原核细胞高效表达。 展开更多
关键词 肝再生增强因子 克隆细胞 RT-PCR 大鼠 基因克隆
下载PDF
反应性关节炎患者关节液T细胞克隆研究 被引量：4
13
作者 古洁若 黄烽 +1 位作者 赵丽珂 余得恩 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期129-132,共4页
目的比较来自反应性关节炎(ReA)患者的关节液的CD8+T细胞克隆、CD4+T细胞克隆和γδ+T细胞克隆的细胞因子表达谱,探讨ReA的免疫机制。方法用含56种细胞因子基因的cDNA微阵列筛选来自3个ReA患者的关节液的3个CD8+T细胞克隆、3个CD4+T细... 目的比较来自反应性关节炎(ReA)患者的关节液的CD8+T细胞克隆、CD4+T细胞克隆和γδ+T细胞克隆的细胞因子表达谱,探讨ReA的免疫机制。方法用含56种细胞因子基因的cDNA微阵列筛选来自3个ReA患者的关节液的3个CD8+T细胞克隆、3个CD4+T细胞克隆和3个γδ+T细胞克隆的差异表达基因。结果微阵列研究显示,CD8+和CD4+T细胞克隆中有编码干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α转录物的表达。15个微阵列试验中有14个可以用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术证实有这些细胞因子的表达。CD4+细胞持续表达淋巴毒素-α(LT-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。但是γδ+T细胞主要表达转化生长因子(TGF)-β2和GM-CSF。结论CD8+和CD4+T细胞克隆的细胞因子表达谱主要为Th1,而γδ+T细胞较少表达促炎症细胞因子,似为Th3模式。ReA患者关节液的T淋巴细胞克隆显示了不同的细胞因子表达谱,它反映了不同的T细胞在发病机制中有不同的作用。 展开更多
关键词 反应性关节炎 关节液 T细胞克隆 细胞因子表达谱 免疫机制
原文传递
草苁蓉多糖提取物对喉癌细胞增殖、迁移及程序性死亡分子1/程序性死亡配体-1水平的研究分析 被引量：4
14
作者 崔静 王帅帅 +4 位作者 曹萌萌 单凤金 佟旭楠 高义恰 张义 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2021年第8期492-496,共5页
目的探究草苁蓉多糖提取物(BRP)对喉癌细胞增殖、迁移及程序性死亡分子1(programmed death-1 receptor,PD-1)/程序性死亡配体-1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)水平的影响。方法人喉癌Hep-2细胞分组,根据BRP浓度分为YY组(100 mg... 目的探究草苁蓉多糖提取物(BRP)对喉癌细胞增殖、迁移及程序性死亡分子1(programmed death-1 receptor,PD-1)/程序性死亡配体-1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)水平的影响。方法人喉癌Hep-2细胞分组,根据BRP浓度分为YY组(100 mg/L)、EY组(200 mg/L)、SY组(400 mg/L)及WY组(无药物干扰)。采用qRT-PCR、克隆、MTT法、Transwell小室及Western blot检测检测4组Hep-2细胞中的PD-1/PD-L1 mRNA表达、细胞复制、细胞活力、迁移能力及PD-1/PD-L1蛋白变化。结果WY组Hep-2细胞表现为船形,生长较快,细胞分布密集。YY组细胞生长速度减慢,EY组/SY组细胞体积缩小、固缩及碎裂。YY组、EY组、SY组Hep-2细胞抑制率升高,克隆细胞及迁移数量均降低,相比WY组有差异(P均<0.05);相比WY组,YY组、EY组、SY组Hep-2细胞中的PD-1/PD-L1表达均降低(P均<0.05)。结论BRP能够通过降低PD-1/PD-L1表达抑制Hep-2细胞增殖和迁移,并且药效的发挥随时间和浓度增加而增大。 展开更多
关键词 喉肿瘤 细胞增殖 克隆细胞 细胞迁移分析 草苁蓉多糖提取物
下载PDF
乙型脑炎病毒活疫苗生产株SA_(14)-14-2的感染性克隆构建 被引量：1
15
作者 曾明 贾丽丽 +4 位作者 俞永新 董关木 刘文雪 王志伟 李德富 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期9-11,共3页
目的　构建乙型脑炎病毒 (乙脑病毒 )活疫苗生产株SA1 4 14 2的感染性克隆。方法　在对SA1 4 14 2株全长基因组测序基础上 ,引入适当酶切位点和T7RNA聚合酶启动子 ,采用分部连接策略 ,获得全长基因组cDNA ,体外转录RNA后 ,转染细胞获... 目的　构建乙型脑炎病毒 (乙脑病毒 )活疫苗生产株SA1 4 14 2的感染性克隆。方法　在对SA1 4 14 2株全长基因组测序基础上 ,引入适当酶切位点和T7RNA聚合酶启动子 ,采用分部连接策略 ,获得全长基因组cDNA ,体外转录RNA后 ,转染细胞获得感染性克隆 ,病毒传代培养、抗体中和试验和乳鼠脑腔攻击试验鉴定病毒。结果　由疫苗株cDNA构建了病毒感染性克隆 ,经鉴定为乙脑病毒 ,且病毒毒力比野毒株弱。结论　获得了乙脑病毒活疫苗生产株SA1 4 14 2的感染性克隆 。 展开更多
关键词 SA14-14-2 乙脑病毒 乙型脑炎病毒 感染性克隆 活疫苗 乳鼠 病毒感染 试验鉴定 生产 野毒株
原文传递
克隆细胞株S2D9建立的肿瘤动物模型基本特性研究 被引量：4
16
作者 王秀芳 吕占军 +2 位作者 刘福英 徐增年 刘军须 《中国实验动物学杂志》 2001年第4期207-212,共6页
目的　研究从S180获得的克隆细胞株S2D9,接种 4个不同品 (种 )系小鼠建立肿瘤动物模型的某些基本生物学特性。方法　由KM小鼠腹腔传代的S2D9克隆细胞 ,用GKN稀释成不同浓度 ,接种KM、DBA 2、6 15、C57BL 6小鼠右腋皮下及腹腔 ,观察小鼠... 目的　研究从S180获得的克隆细胞株S2D9,接种 4个不同品 (种 )系小鼠建立肿瘤动物模型的某些基本生物学特性。方法　由KM小鼠腹腔传代的S2D9克隆细胞 ,用GKN稀释成不同浓度 ,接种KM、DBA 2、6 15、C57BL 6小鼠右腋皮下及腹腔 ,观察小鼠最早出现可见肿块、腹水时间及小鼠生存时间 ;不同品 (种 )系小鼠经皮下接种S2D9细胞 ,建立肿瘤模型 ,从接种后第 5日 ,每日观察肿瘤生长情况 ,测量肿块直径 (cm) ,绘制肿瘤生长曲线 ;S2D9克隆细胞株接种BALB c小鼠皮下 ,取接种第 7日肿块 ,经石蜡切片 ,HE染色 ,观察病理结果 ;不同品 (种 )系小鼠皮下接种S2D9瘤细胞建立的动物模型 ,经腹腔注射环磷酰胺 (CTX)或顺胺氯铂 ,观察S2D9克隆细胞肿瘤模型对CTX或顺胺氯铂治疗的敏感性。结果　S2D9克隆细胞在 6 15及DBA 2小鼠的皮下较KM及C57BL 6小鼠容易生长肿瘤 ;在KM及DBA 2小鼠腹腔较C57BL/ 6及 6 15小鼠容易长出腹水 ;皮下接种KM、C57BL/ 6、6 15及DBA 2四个不同品(种 )系小鼠 ,第 12天瘤重分别为 (2 3± 0 9)g ,(0 8± 0 2 )g ,(2 0± 0 2 )g及 (1 9± 0 1)g;S2D9瘤细胞接种 4个不同品 (种 )系小鼠制备的肿瘤模型 ,用CTX治疗 ,抑瘤率分别为 80 % (6 15 ) ,75 % (C57BL 6 ) ,6 8 4% (DBA 2 ) ,6 5 2 %(KM) ;用顺胺? 展开更多
关键词 肿瘤 小鼠 治疗 克隆细胞 动物模型 CTX C57BL/6 皮下接种 生长 稀释
下载PDF
骨髓增生异常综合征患者凋亡造血细胞的克隆性初步研究 被引量：3
17
作者 李晓 沈炜明 浦权 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期39-43,共5页
目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者凋亡造血细胞的克隆性来源。方法经过G带或R带染色体核型分析,确定骨髓细胞有异常克隆存在的MDS患者共19例,其中10例取骨髓分离有核细胞制备离心涂片。同步进行DNA末端原位杂交(ISEL)及相应异常染... 目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者凋亡造血细胞的克隆性来源。方法经过G带或R带染色体核型分析,确定骨髓细胞有异常克隆存在的MDS患者共19例,其中10例取骨髓分离有核细胞制备离心涂片。同步进行DNA末端原位杂交(ISEL)及相应异常染色体的间期荧光原位杂交(FISH)(简称ISEL/FISH法)。计数有核细胞中异常克隆细胞百分比和凋亡细胞中异常克隆细胞百分比。4名正常人8张离心涂片经Fas单抗孵育诱导凋亡后行FISH/ISEL检测作为方法学对照。另9例患者骨髓有核细胞经膜联蛋白Ⅴ(AnnexinⅤ)及碘化丙锭(PI)标记染色细胞,流式细胞术分选PI-、AnnexinⅤ+PI-、AnnexinV-PI-细胞,离心涂片后再行FISH检测(简称FCM/FISH法)。结果10例经ISEL/FISH分析的MDS患者骨髓有核细胞中异常克隆细胞百分比平均为37.1%,凋亡细胞中异常克隆细胞百分比仅为24.0%。正常人经Fas单抗诱导的凋亡细胞核型不变。9例经FCM/FISH分析者,8例显示凋亡细胞中核型正常百分比高于非凋亡细胞。结论MDS凋亡细胞主要来源于残余正常造血细胞。 展开更多
关键词 患者 凋亡细胞 MDS 造血细胞 克隆性 骨髓增生异常综合征 涂片 克隆细胞 核型 DNA
原文传递
大鼠肌细胞生成素基因的克隆 被引量：3
18
作者 姜浩 徐建光 +3 位作者 刘靖波 顾玉东 李继峰 胡韶楠 《中华手外科杂志》 CSCD 2003年第1期39-42,共4页
目的　设计特异引物克隆大鼠肌细胞生成素 (myogenin)的cDNA。方法　用逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)合成myogenincDNA ;经提纯后 ,连接到克隆载体pGEM T ,形成重组的克隆载体pGEMT myoge... 目的　设计特异引物克隆大鼠肌细胞生成素 (myogenin)的cDNA。方法　用逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)合成myogenincDNA ;经提纯后 ,连接到克隆载体pGEM T ,形成重组的克隆载体pGEMT myogenin。pGEMT myogenin转化大肠杆菌Ecoli DH5α内扩增 ;提取、纯化的pGEMT myogenin ,经酶切、PCR鉴定及DNA测序 ,来判断所克隆myogenincDNA的正确性。结果　RT PCR产物经凝胶电泳鉴定 ,含有大小正确的DNA片段 ;提取、纯化的pGEMT myogenin质粒经限制性内切酶酶切、PCR鉴定 ,含有大小正确的DNA片段 ,且该片段含有所设计的酶切位点。DNA测序结果证实所克隆的myogenincDNA序列正确。结论　该研究成功地克隆了myogenincDNA。 展开更多
关键词 肌形成调节因子 克隆细胞 肌细胞生成素 基因
原文传递
生物素标记的6种cDNA探针检测S180及其克隆细胞株mRNA的表达 被引量：3
19
作者 吕占军 王秀芳 刘秋燕 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第4期224-226,共3页
目的　检测S180及其克隆细胞株S1B11及S2D9mRNA的表达 ,对这些细胞株进行识别和质量控制。方法　用生物素标记的 6种cDNA探针 ,细胞玻片原位杂交的方法检测细胞中mRNA的表达。结果　北京市肿瘤研究所 (肿瘤所 )保存的S180与生物素标记的... 目的　检测S180及其克隆细胞株S1B11及S2D9mRNA的表达 ,对这些细胞株进行识别和质量控制。方法　用生物素标记的 6种cDNA探针 ,细胞玻片原位杂交的方法检测细胞中mRNA的表达。结果　北京市肿瘤研究所 (肿瘤所 )保存的S180与生物素标记的P16、c fos、c myc及c jun探针杂交阳性 ,克隆细胞株S1B11与c fos及c jun探针杂交阳性 ,克隆细胞株S2D9与c fos、c myc及c jun探针杂交阳性。结论　肿瘤所S180及其 2株克隆细胞中mRNA的表达不同 ,c myc基因的表达与否可以把S1B11及S2D9克隆细胞区别开 ; 展开更多
关键词 表达 S180 克隆细胞 探针杂交 C-JUN c-fos 阳性 RNA 玻片 CDNA探针
下载PDF
甲型流感病毒核蛋白基因的克隆表达及纯化 被引量：3
20
作者 房师松 程小雯 +3 位作者 刘涛 刘建军 赵树进 周丽 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期165-168,共4页
目的　将甲型流感病毒核蛋白(NP)基因克隆到原核表达载体进行可溶性融合表达,制备纯化的病毒核蛋白,为制备甲型流感病毒单克隆抗体提供材料。方法　提取甲型流感病毒RNA ,设计引物,RT PCR扩增NP基因,利用基因工程的手段,将甲型流感病毒... 目的　将甲型流感病毒核蛋白(NP)基因克隆到原核表达载体进行可溶性融合表达,制备纯化的病毒核蛋白,为制备甲型流感病毒单克隆抗体提供材料。方法　提取甲型流感病毒RNA ,设计引物,RT PCR扩增NP基因,利用基因工程的手段,将甲型流感病毒的NP基因在大肠埃希菌中进行融合表达,并将表达产物进行亲和层析。结果　成功构建了甲型流感病毒NP基因原核表达载体,经亲和层析制备了较高纯度的目的表达产物。结论　通过合理控制发酵时间、生长温度和诱导物浓度,制备了较为理想的可溶性甲型流感病毒核蛋白。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 核蛋白基因 纯化 表达及 RT-PCR扩增 基因原核表达载体 融合表达 亲和层析 表达产物 单克隆抗体 病毒RNA 大肠埃希菌 基因克隆 设计引物 基因工程 发酵时间 合理控制 可溶性 P基因 制备 高纯度 诱导物
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 4 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部