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橡胶树延伸因子cDNA及其5′端启动子区域序列的分离与分析 被引量：5
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作者 邓晓东 费小雯 +1 位作者 黄俊生 郑学勤 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期528-532,共5页
橡胶延伸因子 REF(Rubber Elongation Factor)是橡胶生物合成中最重要的酶之一 ,是胶乳中主要的蛋白质。作者利用已发表的 REF c DNA序列设计并合成引物。通过提取胶乳总 RNA用 RT法合成 c DNA后 ,通过 PCR技术扩增并克隆了 REF c DNA... 橡胶延伸因子 REF(Rubber Elongation Factor)是橡胶生物合成中最重要的酶之一 ,是胶乳中主要的蛋白质。作者利用已发表的 REF c DNA序列设计并合成引物。通过提取胶乳总 RNA用 RT法合成 c DNA后 ,通过 PCR技术扩增并克隆了 REF c DNA序列。序列测定结果表明 ,所克隆的 REF c DNA编码区序列全长 4 14个碱基 ,编码 138个氨基酸 ,3′端非编码区长 112 bp。与 Goyvaerts E等人发表的序列比较 :REF c DNA编码区序列同源率为 10 0 % ,3′端非编码区有 2 bp的差异 ,同源率为 98%。在此基础上 ,通过步移法分离 5′端启动子区域 2 6 0 bp的序列 ,其中 ,含典型的TATA盒和 CAAT盒。为证实该基因为乳管特异表达 ,我们通过 Northern blot对橡胶延伸因子基因在胶乳和叶片中的表达做分析。初步结果表明 ,橡胶延伸因子基因主要在胶乳中表达。 展开更多
关键词 橡胶树 延伸因子 CDNA 5′端启动子区域 分离 序列分析
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橡胶延伸因子基因及3-端非编码区的克隆与序列分析 被引量：3
2
作者 费小雯 邓晓东 +1 位作者 胡新文 郑学勤 《生命科学研究》 CAS CSCD 1999年第4期339-343,共5页
橡胶延伸因子ＲＥＦ（Ｒｕｂｂｅｒ Ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ Ｆａｃｔｏｒ）是橡胶生物合成中最重要的酶之一．作者利用ＲＥＦ基因序列设计并合成引物． 通过提取胶乳总ＲＮＡ 用ＲＴ法合成ｃＤＮＡ 后，通过ＰＣＲ技术扩增并克隆了ＲＥ... 橡胶延伸因子ＲＥＦ（Ｒｕｂｂｅｒ Ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ Ｆａｃｔｏｒ）是橡胶生物合成中最重要的酶之一．作者利用ＲＥＦ基因序列设计并合成引物． 通过提取胶乳总ＲＮＡ 用ＲＴ法合成ｃＤＮＡ 后，通过ＰＣＲ技术扩增并克隆了ＲＥＦ基因和３端非编码区． 序列测定结果表明，ＲＥＦ基因全长４１４ 个碱基，编码１３８ 个氨基酸，３端非编码区长１１２ ｂｐ． 与Ｇｏｙｖａｅｒｔｓ Ｅ 等人发表的序列比较：ＲＥＦ基因同源率为１００％ ，３端非编码区有２ ｂｐ 的差异，同源率为９８％ ． 将所克隆的ＲＥＦ基因及３非编码区进行地高辛标记， 对胶乳和叶片总ＲＮＡ 进行点杂交分析，结果表明，胶乳总ＲＮＡ 呈阳性反应，叶片总ＲＮＡ 则呈阴性反应． 展开更多
关键词 橡胶 橡胶延伸因子 克隆 点杂交
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