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绿色木霉纤维素酶CBHⅡ基因的结构研究 被引量：25
1
作者 王建荣 张曼夫 黄涛 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1995年第1期74-80,共7页
实验经限制性酶切和双向Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交将重组质粒ｐＣＢＨＩＩ－１４的１４ｋｂ外源片段上的绿色木霉纤维素酶ＣＢＨＩＩ基因定位于４．４ｋｂ的ＥｃｏＲＩ片段上，将该片段克隆于质粒ｐＵＣ１９，获得重组质粒ｐＣＢＨＩＩ。通... 实验经限制性酶切和双向Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交将重组质粒ｐＣＢＨＩＩ－１４的１４ｋｂ外源片段上的绿色木霉纤维素酶ＣＢＨＩＩ基因定位于４．４ｋｂ的ＥｃｏＲＩ片段上，将该片段克隆于质粒ｐＵＣ１９，获得重组质粒ｐＣＢＨＩＩ。通过限制性分析构建了ｐＣＢＨＩＩ上４．４ｋｂＥｃｏＲＩ片段的物理图谱。在此基础上用质粒制作该片段的亚克隆，采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终止法测定了含绿色木霉纤维素酶ＣＢＨＩＩ基因的４０７４ｂｐ的ＤＮＡ序列，由ＧＴ－ＡＧ规则和ｃＤＮＡ序列推知该结构基因由４个外显子和３个内含子组成，总长１６１３ｂｐ，５′端存在与一般真核基因类似的两个特征性调控序列，但３′端不存在真核基因通常具有的特征序列而存在功能未明的短重复序列和嘧啶富集区。并对纤维素酶基因间的同源性和可能的功能作了初步的探讨。 展开更多
关键词 纤维素酶 木霉 基因 序列分析
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生物产纤维素酶研究进展 被引量：35
2
作者 刘洁丽 王靖 《化学与生物工程》 CAS 2008年第12期9-12,共4页
纤维素酶是降解纤维素最有效的生物催化剂。自然界存在很多产纤维素酶的生物。综述了纤维素酶的类别、族属、结构;产纤维素酶的原生动物、后生动物及微生物菌种(细菌、真菌、放线菌等);目前已发现的编码纤维素酶的基因及其表达;纤维素... 纤维素酶是降解纤维素最有效的生物催化剂。自然界存在很多产纤维素酶的生物。综述了纤维素酶的类别、族属、结构;产纤维素酶的原生动物、后生动物及微生物菌种(细菌、真菌、放线菌等);目前已发现的编码纤维素酶的基因及其表达;纤维素酶的主要作用机理等方面的研究进展,并就今后的研究方向及重点提出了建议。 展开更多
关键词 纤维素酶 分类 机理 基因 表达
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青霉木质纤维素降解酶系研究进展 被引量：31
3
作者 孙宪昀 曲音波 刘自勇 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期736-740,共5页
越来越多的研究表明青霉属(Penicillium)真菌中的一些种类不仅能分泌组成齐全、酶活较高的木质纤维素降解酶系,而且具有易培养和生长快的优势.本文就国内外对青霉菌木质纤维素降解酶系研究的最新动态进行了综述,包括菌株的选育、纤维素... 越来越多的研究表明青霉属(Penicillium)真菌中的一些种类不仅能分泌组成齐全、酶活较高的木质纤维素降解酶系,而且具有易培养和生长快的优势.本文就国内外对青霉菌木质纤维素降解酶系研究的最新动态进行了综述,包括菌株的选育、纤维素酶系的特性与合成调控,以及基因分析与克隆.同时介绍了斜卧青霉纤维素酶系的生产与发酵工艺,以及酶解过程分析等相关研究进展. 展开更多
关键词 青霉 纤维素酶 合成调控 基因克隆
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白蚁消化纤维素机理研究进展 被引量：17
4
作者 杨天赐 莫建初 程家安 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期110-115,共6页
白蚁利用自身及体内共生微生物分泌的纤维素酶降解食物中的纤维素成分,来满足新陈代谢需要。据美国国家生物技术信息中心GenBank数据库统计,目前已有4科6属9种白蚁及其体内共生物的纤维素酶基因被克隆测序。同源性分析表明,白蚁及其共... 白蚁利用自身及体内共生微生物分泌的纤维素酶降解食物中的纤维素成分,来满足新陈代谢需要。据美国国家生物技术信息中心GenBank数据库统计,目前已有4科6属9种白蚁及其体内共生物的纤维素酶基因被克隆测序。同源性分析表明,白蚁及其共生物编码内切β-1,4-葡聚糖酶的基因,在序列上有较高的相似性。 展开更多
关键词 白蚁 纤维素酶 共生微生物 基因克隆 基因序列
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纤维素酶的研究概况 被引量：7
5
作者 王建平 陈小娥 《浙江水产学院学报》 CAS 1996年第2期140-144,共5页
本文着重介绍了纤维素酶的组成、分子结构、基因表达及研究趋向和应用前景，提出了在纤维素酶研究中必须解决的一些问题。纤维素酶的研究为纤维素的充分利用开辟了一条新的途径。
关键词 纤维素酶 基因表达
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木霉纤维素酶基因的克隆与表达研究进展 被引量：9
6
作者 张磊 吴兴泉 《纤维素科学与技术》 CAS CSCD 2004年第4期38-43,共6页
对自然界中能够产生纤维素酶完全酶系的丝状真菌木霉的纤维素酶基因克隆与表达的研究进展进行了综述,主要包括基因克隆,转化载体,以及基因表达等分子生物学方面的研究。
关键词 基因表达 酶基因 研究进展 基因克隆 转化载体 分子生物学 综述 木霉 纤维素酶 丝状真菌
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纤维素酶基因克隆与表达 被引量：12
7
作者 卢敏 王帅豪 +2 位作者 狄元冉 袁林 尹清强 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1013-1018,共6页
纤维素酶应用广泛,但因受到酶活低、成本高等诸多因素的制约,纤维素酶的工业化生产和应用受到限制。应用基因工程技术来获得高活性、高产量的纤维素酶资源越来越受到人们的重视。本文对纤维素酶分子结构、基因的克隆、原核与真核表达进... 纤维素酶应用广泛,但因受到酶活低、成本高等诸多因素的制约,纤维素酶的工业化生产和应用受到限制。应用基因工程技术来获得高活性、高产量的纤维素酶资源越来越受到人们的重视。本文对纤维素酶分子结构、基因的克隆、原核与真核表达进展进行了综述,并提出构建纤维素酶酵母表达系统、木霉表达系统以及多个纤维素酶基因共表达系统是未来纤维素酶基因工程的发展趋势。 展开更多
关键词 纤维素酶 基因工程 原核表达 真核表达
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纤维素酶在青贮饲料中的作用及其基因克隆的研究进展 被引量：10
8
作者 胡爽 王炜 +2 位作者 山其木格 杨红兰 包慧芳 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第2期242-247,共6页
以新鲜的青绿饲料作物、牧草等为原料,通过厌氧微生物的发酵制成的青贮饲料,能达到长期保存原料营养特性的目的,在反刍动物的饲养中得到了广泛的应用。在青贮饲料中添加纤维素酶制剂能有效的提高其营养价值,已成为当前动物营养学研究中... 以新鲜的青绿饲料作物、牧草等为原料,通过厌氧微生物的发酵制成的青贮饲料,能达到长期保存原料营养特性的目的,在反刍动物的饲养中得到了广泛的应用。在青贮饲料中添加纤维素酶制剂能有效的提高其营养价值,已成为当前动物营养学研究中的一个热点。随着分子生物学技术的不断发展,构建产纤维素酶的基因工程菌引起了人们更多的关注,这样不仅能提高青贮饲料的营养价值,有效地消除抗营养因子,而且具有很高的实用性和经济性。就青贮饲料的特点、纤维素酶的组成和纤维素酶在青贮饲料中的作用,及纤维素酶基因的克隆研究作一综述。 展开更多
关键词 青贮饲料 纤维素酶 基因克隆
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离子注入改良纤维分解细菌及其机理研究 被引量：6
9
作者 曾宪贤 吕杰 《新疆大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第1期17-21,共5页
对纤维分解细菌HY2进行不同剂量离子束注入诱变,通过研究离子注入对纤维素酶活性的影响,筛选出纤维素酶活性高的突变菌株HY2-3.通过聚合酶链式反应PCR技术扩增得到纤维素酶高产菌株Bacillus sp.HY2-3以及原始菌株Bacillus sp.HY2的纤维... 对纤维分解细菌HY2进行不同剂量离子束注入诱变,通过研究离子注入对纤维素酶活性的影响,筛选出纤维素酶活性高的突变菌株HY2-3.通过聚合酶链式反应PCR技术扩增得到纤维素酶高产菌株Bacillus sp.HY2-3以及原始菌株Bacillus sp.HY2的纤维酶基因chy2-3和chy2.经过克隆和序列分析表明,所得到的突变型和野生型纤维素酶基因编码区均为1500bp.同时发现,经过离子束诱变得到的高产菌株和野生菌株的纤维素酶基因序列存在差别.这些碱基突变引起氨基酸序列的改变有可能导致两个菌株纤维素酶产量上的不同. 展开更多
关键词 离子注入 纤维分解 纤维素酶 基因克隆
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芽孢杆菌CY1-3株碱性纤维素酶基因celC的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：7
10
作者 蔡勇 阿依木古丽 +4 位作者 臧荣鑫 杨具田 董开忠西北民族大学理科实验中心 曹斌云 樊俊华 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期961-966,共6页
芽孢杆菌CY1-3株基因组DNA经Sau3A Ⅰ部分消化后回收2～7 kb片段,构建了部分文库.通过刚果红染色鉴定,筛选出6个纤维素酶基因的阳性克隆子,经酶切鉴定为同一克隆子,命名为pGJc-1.经测序分析,该片段包含一个由1 593个核苷酸组成的开放阅... 芽孢杆菌CY1-3株基因组DNA经Sau3A Ⅰ部分消化后回收2～7 kb片段,构建了部分文库.通过刚果红染色鉴定,筛选出6个纤维素酶基因的阳性克隆子,经酶切鉴定为同一克隆子,命名为pGJc-1.经测序分析,该片段包含一个由1 593个核苷酸组成的开放阅读框（ORF）,命名为celC.经推导,celC基因编码由一531个氨基酸残基组成的CelC蛋白.氨基酸序列分析表明,CelC蛋白的氨基酸序列与多种细菌的β-1,4-内切葡聚糖酶具有很高的同源性.粗酶液的SDSPAGE分析表明,celC基因在大肠杆菌中所表达的CelC蛋白具有纤维素酶活力,其分子质量约为58 ku. 展开更多
关键词 纤维素酶 基因克隆 序列分析 芽孢杆菌CY1—3 表达 大肠杆菌
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天牛体内纤维素酶研究进展 被引量：7
11
作者 李晓娟 阎雄飞 +3 位作者 骆有庆 田桂芳 年寅杰 张铁林 《中国森林病虫》 北大核心 2010年第3期27-29,23,共4页
文章综述近年来国内外有关天牛体内纤维素酶的研究进展,主要包括:天牛体内纤维素酶的来源、不同天牛种类纤维素酶的性质、纤维素酶抑制剂、纤维素酶同工酶、纤维素酶基因以及天牛体内纤维素酶活性变化与寄主的关系,并展望了未来的研究... 文章综述近年来国内外有关天牛体内纤维素酶的研究进展,主要包括:天牛体内纤维素酶的来源、不同天牛种类纤维素酶的性质、纤维素酶抑制剂、纤维素酶同工酶、纤维素酶基因以及天牛体内纤维素酶活性变化与寄主的关系,并展望了未来的研究方向。 展开更多
关键词 纤维素酶 天牛 纤维素酶的来源 性质 抑制剂 同工酶 基因 寄主
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绿色木霉(Trichoderma viride)基因组文库构建及其CBH I基因阳性克隆筛选 被引量：4
12
作者 王建荣 张曼夫 《上海农业学报》 CSCD 1993年第3期1-5,共5页
用绿色木霉核DNA部分酶解片段与噬菌体λEMBL3载体左右臂连接,并用高效价包装蛋白对重组分子进行体外包装,侵染宿主菌后,构建了含1.92×10_6个重组噬菌体的绿色木霉基因组文库。以李氏木霉纤维素酶CBH Ⅰ基因的5′、3′两个末端片... 用绿色木霉核DNA部分酶解片段与噬菌体λEMBL3载体左右臂连接,并用高效价包装蛋白对重组分子进行体外包装,侵染宿主菌后,构建了含1.92×10_6个重组噬菌体的绿色木霉基因组文库。以李氏木霉纤维素酶CBH Ⅰ基因的5′、3′两个末端片段为探针,对所建立的基因组文库作轮回噬菌斑原位杂交,筛选到含绿色木霉CBH Ⅰ基因的阳性克隆7个,随机取其中三个克隆进一步用李氏木霉CBH Ⅰ、CBHⅡ基因的5′、3′四个末端片段探针作交叉斑点杂交,证明本实验确实克隆了很可能为全长的绿色木霉CBH Ⅰ基因,并提示CBH Ⅰ与CBHⅡ基因的末端序列之间不存在同源性。 展开更多
关键词 木霉属 基因组文库 CBHI基因
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木质素降解菌的筛选及其纤维素酶基因克隆表达研究 被引量：5
13
作者 林玲 林志伟 +2 位作者 郭梧年 杨菁 汪世华 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期938-943,共6页
以高效降解木质素为指标,进行木质素降解菌的筛选和纤维素酶处理纤维材料的研究。通过测定14株白腐菌菌株在愈创木酚、苯胺兰和鞣酸培养基上生长状况和酶活分泌能力,得到8株能产生阳性反应的菌株。以木质素和综纤维素失重的比值(SF指数... 以高效降解木质素为指标,进行木质素降解菌的筛选和纤维素酶处理纤维材料的研究。通过测定14株白腐菌菌株在愈创木酚、苯胺兰和鞣酸培养基上生长状况和酶活分泌能力,得到8株能产生阳性反应的菌株。以木质素和综纤维素失重的比值(SF指数)为指标,对这几株菌进行复筛,从中筛选出具有生长优势和强酶分泌能力的菌株平菇10969和侧耳WP1。与黄胞原毛平革菌Phanerochaete chrysosporium RP78和P.chrysosporium BKM-F-1767两株模式菌相比,白腐菌具有良好的生长优势、强酶系分泌能力和降解的优势。从分离的白腐菌中克隆纤维素酶基因(egl2),表达蛋白并测定酶活。用粗酶液处理不同的纤维材料,结果表明,其还原糖产量为综纤维素(酸解)>菌草(白腐菌处理)>未处理菌草。白腐菌的研究对草质资源的充分利用、污染物的降解、燃料乙醇的开发以及我国生态农业的持续发展等都有着重要意义。 展开更多
关键词 白腐菌 木质素降解菌 纤维素酶 综纤维素 基因克隆 还原糖 污染物降解
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不同氮含量对大球盖菇菌丝生长和碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响
14
作者 张津京 卓馨怡 +5 位作者 冀浩 郝海波 岳一鸿 王倩 肖婷婷 陈辉 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期10-18,共9页
通过研究液体培养时不同氮含量(0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%)对菌丝生长、碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响,筛选大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)菌丝生长最适氮源。结果表明:豆粕粉是大球盖菇菌丝生长最适氮源。氮含量... 通过研究液体培养时不同氮含量(0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%)对菌丝生长、碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响,筛选大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)菌丝生长最适氮源。结果表明:豆粕粉是大球盖菇菌丝生长最适氮源。氮含量为0.6%时,菌丝生长速度最快。在实验范围内,对照(氮含量为0)的亚硝酸盐还原酶活性较高,1.2%氮含量的天冬酰胺合成酶活性较高,0.6%氮含量的谷氨酸合酶活性最高;0.6%氮含量的内切β-1,4-葡聚糖酶活性最高,β-1,3-葡聚糖酶活性较高;0.6%氮含量的谷氨酸合酶基因表达量最高,1.2%氮含量的谷氨酸脱氢酶基因表达量较高;对照的β-1,3-葡聚糖酶基因和半纤维素酶基因表达量均最高。研究结果可为大球盖菇液体菌种开发和应用提供参考。 展开更多
关键词 大球盖菇 氮源 纤维素酶 基因表达
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纤维素酶基因表达研究进展 被引量：5
15
作者 何敏超 许敬亮 +4 位作者 袁振宏 孔晓英 张宇 陈小燕 梁翠谊 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期169-174,共6页
获得更高生产性能的菌株是降低纤维素酶在纤维乙醇、纸浆造纸、纺织等领域使用成本的主要解决途径。总结了影响宿主菌(里氏木霉和毕赤酵母)高效表达纤维素酶基因的多种因素,如里氏木霉转录调控、启动子优化、外源酶基因与毕赤酵母表达... 获得更高生产性能的菌株是降低纤维素酶在纤维乙醇、纸浆造纸、纺织等领域使用成本的主要解决途径。总结了影响宿主菌(里氏木霉和毕赤酵母)高效表达纤维素酶基因的多种因素,如里氏木霉转录调控、启动子优化、外源酶基因与毕赤酵母表达的适配性、启动子拷贝数及酶基因拷贝数等,以期为纤维素酶高产菌株的构建提供有益的参考。 展开更多
关键词 纤维素酶 转录调控 基因表达 里氏木霉 毕赤酵母
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油菜秸秆高效降解菌的筛选及其双功能纤维素酶性质研究 被引量：4
16
作者 李凌波 许欢欢 +6 位作者 夏燕维 郭传旭 杨明珠 马磊 缪有志 刘东阳 张瑞福 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期711-720,共10页
[目的]本研究旨在筛选油菜秸秆高效降解菌株并对其降解特性进行分析,为油菜秸秆的资源化利用提供科学依据。[方法]采用稀释涂布平板法、刚果红透明圈试验以及纤维素酶活性测定对菌株进行分离筛选;根据菌株的形态特征和ITS序列分析对菌... [目的]本研究旨在筛选油菜秸秆高效降解菌株并对其降解特性进行分析,为油菜秸秆的资源化利用提供科学依据。[方法]采用稀释涂布平板法、刚果红透明圈试验以及纤维素酶活性测定对菌株进行分离筛选;根据菌株的形态特征和ITS序列分析对菌株进行鉴定;结合扫描电镜技术,分析在降解过程中降解菌对油菜秸秆物理、化学性质的影响;设置盆栽试验模拟秸秆还田以综合探究菌株对油菜秸秆的降解特性;通过纤维素酶酶谱分析及质谱检测技术获得纤维素酶基因(celI)的序列信息,克隆该基因,再利用pPICZαA质粒和毕赤酵母X33进行异源表达;经镍柱纯化后对CelI的酶学性质进行分析。[结果]从腐烂油菜秸秆田土样中共分离纯化出8株真菌,其中菌株A15的透明圈直径/菌落直径比值最大,为3.0,且滤纸酶活性和内切葡聚糖酶活性均显著高于其他菌株,分别为16.13和8.16 U·g^(-1),经鉴定其为绿色木霉(Trichoderma viride);接种菌株A15固体发酵28 d后,油菜秸秆失重率达29.17%,纤维素及半纤维素含量分别下降至29.41%和17.18%,经过30 d的模拟秸秆还田盆栽试验,油菜秸秆失重率达57.50%;成功表达并纯化了菌株A15来源的GH7家族纤维素酶CelI,该蛋白相对分子质量约为72×10^(3),具有内、外切葡聚糖酶的双重活性,CelI的最适反应温度为50℃,且表现出良好的热稳定性,CelI的内切葡聚糖酶活性最适pH值为4,且Co^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)对其具有促进作用,而CelI的外切葡聚糖酶活性最适pH值为5,且Mn^(2+)对其具有显著激活作用,而Zn^(2+)、Fe^(3+)具有抑制作用。[结论]从腐烂油菜秸秆田土样中筛选到1株油菜秸秆降解真菌绿色木霉A15,其能高效产胞外纤维素酶,在油菜秸秆资源化利用方面具备良好的应用前景。 展开更多
关键词 纤维素酶 油菜秸秆 基因克隆 异源表达 酶学特性
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毛柄金钱菌gpd启动子驱动福寿螺纤维素酶基因在灰盖鬼伞菌中的表达 被引量：4
17
作者 杨培周 郭丽琼 林俊芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第15期209-213,共5页
为研究毛柄金钱菌gpd启动子驱动福寿螺纤维素酶基因(mfc)在大型丝状真菌中的表达效果,本实验通过构建毛柄金钱菌gpd启动子驱动的mfc基因的真核表达载体,采用PEG(polyethylene glycol)介导法将目的基因重组进色氨酸营养缺陷型灰盖鬼伞菌... 为研究毛柄金钱菌gpd启动子驱动福寿螺纤维素酶基因(mfc)在大型丝状真菌中的表达效果,本实验通过构建毛柄金钱菌gpd启动子驱动的mfc基因的真核表达载体,采用PEG(polyethylene glycol)介导法将目的基因重组进色氨酸营养缺陷型灰盖鬼伞菌染色体,对转化子进行PCR、Southern blotting、RT-PCR等分子鉴定,通过测定滤纸酶、CMC酶和木聚糖酶的活力考察mfc的表达效果。结果表明:多功能纤维素酶基因整合入灰盖鬼伞基因组中,毛柄金钱菌gpd启动子能够高效驱动mfc基因的表达,其中酶活力最高的工程菌株为Cfvlm9,其滤纸酶活力、CMC酶活力和木聚糖酶活力分别为21.5、44、235U/mL,分别是对照的1.79倍、1.6倍和2.97倍。 展开更多
关键词 纤维素酶基因 福寿螺 毛柄金钱菌 gpd启动子
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琯溪蜜柚成熟期间汁胞纤维素含量及其合成酶基因表达分析 被引量：4
18
作者 代亚兰 赵秋月 +4 位作者 刘若南 刘林婷 庄木来 李延 王平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1435-1443,共9页
【目的】探究琯溪蜜柚汁胞粒化与次生壁纤维素含量、自由水和束缚水含量、品质等指标的相关性以及纤维素合成酶基因表达情况,以期为汁胞粒化过程中次生壁形成的分子调控机制研究提供依据。【方法】选取2018年8、9、10和11月4个时期的琯... 【目的】探究琯溪蜜柚汁胞粒化与次生壁纤维素含量、自由水和束缚水含量、品质等指标的相关性以及纤维素合成酶基因表达情况,以期为汁胞粒化过程中次生壁形成的分子调控机制研究提供依据。【方法】选取2018年8、9、10和11月4个时期的琯溪蜜柚果实,测定汁胞粒化率、可溶性固形物(total soluble solid,TSS)、可滴定酸(titratable acid,TA)、含水量和纤维素含量。从汁胞转录组中筛选差异表达的纤维素合酶基因(cellulose synthase,CESA)并进行分类和表达分析。【结果】琯溪蜜柚果实10月后,果实横径迅速增加,汁胞粒化明显加速,单汁胞粒化严重,纤维素、TA和束缚水含量显著上升,果形指数和自由水含量明显下降;转录组筛选差异基因CrCESA4、CrCESA7-1和CrCESA8分别与拟南芥AtCESA4、陆地棉GhCESA7和拟南芥AtCESA8聚类在一起。CrCESA4、CrCESA7-1、CrCESA8基因相对表达量在11月显著上升,相对表达量与转录组一致。【结论】汁胞粒化程度与纤维素、TA和束缚水含量呈正相关,与果形指数和自由水含量呈负相关;进化树、转录组和表达分析表明CrCESA4、CrCESA7-1、CrCESA8可能参与了汁胞粒化过程中次生壁纤维素的合成。 展开更多
关键词 琯溪蜜柚 汁胞粒化 纤维素含量 CESA基因
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竹虫肠道微生物源纤维素酶基因在运动发酵单胞菌中的异源表达
19
作者 谭琼 吴波 +4 位作者 何燕 夏薇 胡国全 何明雄 王彦伟 《中国沼气》 CAS 2023年第5期24-33,共10页
运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis,Z.mobilis)是生产燃料乙醇的传统优势菌株,也是秸秆燃料乙醇研究方向的热点。秸秆为底物具有难降解性的特性,在实际生产应用过程中往往需要额外投加酶制剂,导致菌株发酵效率降低,发酵成本增高。为缓... 运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis,Z.mobilis)是生产燃料乙醇的传统优势菌株,也是秸秆燃料乙醇研究方向的热点。秸秆为底物具有难降解性的特性,在实际生产应用过程中往往需要额外投加酶制剂,导致菌株发酵效率降低,发酵成本增高。为缓解这一问题,通过引入外源纤维素酶基因,在Z.mobilis内构建纤维素酶的分泌途径,让发酵菌株能够水解利用纤维素。研究利用竹虫肠道内微生物含有丰富的纤维素酶基因,连接到质粒转化菌株后并检测其在大肠杆菌和Z.mobilis的异源表达。结果显示,研究构建了21株重组菌ZMS912,胞外酶活显示,ZMS912-GH44酶活最高为192.56 U·mL^(-1),ZMS912-GH44C酶活为139.19 U·mL^(-1),ZMS912-GH28为138.7 U·mL^(-1),分别比出发菌株提高了11倍、7.7倍和7.6倍。在菌株内构建分泌纤维素酶途径以降低生产中加酶量是一个可行的降低成本的方法。 展开更多
关键词 运动发酵单胞菌 纤维素酶基因 信号肽 竹虫 酶活
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中华绒螯蟹内源性纤维素酶EsGH9-1基因的克隆、表达及其对不同饵料的响应
20
作者 刁澎云 储俊东 +6 位作者 李旭光 陈建华 周军 邓燕飞 许郑超 刘洪岩 曾庆飞 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第1期147-155,共9页
本研究从中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)转录组数据库中比对筛选到内源性纤维素酶(β-1,4-内切葡聚糖酶)基因序列信息,通过克隆获得该纤维素酶(EsGH9-1)基因组DNA和c DNA序列。EsGH9-1基因组DNA序列长度为11 679 bp,包含15个外显子和1... 本研究从中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)转录组数据库中比对筛选到内源性纤维素酶(β-1,4-内切葡聚糖酶)基因序列信息,通过克隆获得该纤维素酶(EsGH9-1)基因组DNA和c DNA序列。EsGH9-1基因组DNA序列长度为11 679 bp,包含15个外显子和14个内含子;c DNA序列全长为2044 bp,编码580个氨基酸,具有糖基水解酶第9家族的典型催化功能域。RT-PCR结果显示,EsGH9-1主要分布在肝胰腺组织,在大眼幼体期和仔蟹早期高表达。不同饵料条件下,EsGH9-1相对表达量在植物性饵料组显著上调,与β-1,4内切葡聚糖酶活性趋势相一致,推测EsGH9-1参与纤维素的消化与分解。本研究证明中华绒螯蟹自身具有纤维素酶基因,为今后深入研究内源性纤维素酶在水生甲壳类的摄食与消化机制中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 纤维素酶 β-1 4内切葡聚糖酶 基因克隆 表达分析 不同饵料
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