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磁性高分子微球 被引量：40
1
作者 谢钢 张秋禹 李铁虎 《高分子通报》 CAS CSCD 2001年第6期38-45,共8页
对磁性高分子微球的研究现状进行了综述 ,详细探讨了目前常用的各种合成制备方法 ,并对各种方法的优缺点进行了分析。在此基础上 ,对磁性高分子微球在细胞分离、有机合成、环境 食品微生物检测等领域的最新应用进展及存在的问题进行了分... 对磁性高分子微球的研究现状进行了综述 ,详细探讨了目前常用的各种合成制备方法 ,并对各种方法的优缺点进行了分析。在此基础上 ,对磁性高分子微球在细胞分离、有机合成、环境 食品微生物检测等领域的最新应用进展及存在的问题进行了分析 。 展开更多
关键词 制备 磁性高分子微球 细胞分离 有机合成 微生物检测 包埋法 单体聚合法 原位法
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BrdU体外标记大鼠骨髓间充质干细胞的研究 被引量：40
2
作者 冯善伟 姚晓黎 +3 位作者 李中 柳太云 黄文 张成 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期184-186,共3页
目的探讨连续培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)最佳标记时间、剂量。方法差速贴壁法对SD鼠MSCs进行体外传代培养;第6代细胞行流式细胞仪鉴定细胞的表面抗原;以终浓度分别为5、10、15μmol/L的BrdU检测最佳标记剂... 目的探讨连续培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)最佳标记时间、剂量。方法差速贴壁法对SD鼠MSCs进行体外传代培养;第6代细胞行流式细胞仪鉴定细胞的表面抗原;以终浓度分别为5、10、15μmol/L的BrdU检测最佳标记剂量;在细胞生长融合前72、48、36、24、12、3h加入BrdU,使终浓度为10μmol/L,并分别孵育至细胞融合,测定BrdU的标记率,找出最佳标记时间;免疫组化分析BrdU标记率。结果流式细胞仪检测所标记的细胞表达CD29和CD44,不表达CD11b和CD45;终浓度为10μmol/L和孵育48hBrdU标记率均>98%,并且连续传5代均可检测到。结论传代后贴壁生长的梭形细胞为MSCs,终浓度为10μmol/L和孵育48hBrdU标记率均>98%,且可以连续检测到,提示BrdU标记可用于MSCs移植入体内后存活、生长和分化的动态观察。 展开更多
关键词 尿嘧啶核苷酸类 流式细胞术 细胞 培养的 细胞分离 造血干细胞 骨髓细胞
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人肺腺癌干细胞的分离及鉴定 被引量：42
3
作者 董强刚 姚明 +2 位作者 耿沁 周瑾 闫明霞 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期1-7,共7页
目的:从人肺腺癌细胞株中分离及鉴定具有干细胞特征的高致瘤性癌干细胞。方法:采用磁性细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)技术将肺腺癌细胞分成多个亚群,然后应用流式细胞及RT-PCR技术检测干细胞相关标志表达,通过NOD-SCI... 目的:从人肺腺癌细胞株中分离及鉴定具有干细胞特征的高致瘤性癌干细胞。方法:采用磁性细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)技术将肺腺癌细胞分成多个亚群,然后应用流式细胞及RT-PCR技术检测干细胞相关标志表达,通过NOD-SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果:在A549和SPC-A肺腺癌细胞中发现一个新颖的癌细胞亚群,此类癌细胞的表型特征为CD24+IGF-1R+,具有高侵袭性和高致瘤性,在NOD-SCID小鼠中仅需移植100个细胞即可形成肿瘤,其致瘤能力是上述标志阴性细胞的1000倍。此外,这些细胞表达胚胎干细胞标志(OCT4和Bmi-1)及肺干细胞标志(CCSP,SP-C,TTF-1和Gremlin),类似小鼠肺脏细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cells,BASC),并具有自主生长特性,能够在无血清条件下长期培养。结论:人体肺腺癌中CD24+IGF-1R+细胞属于BASC样癌干细胞。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 肿瘤干细胞 细胞分离
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脂肪干细胞分离、纯化和保存:研究进展与未来方向 被引量：35
4
作者 陈犹白 陈聪慧 +1 位作者 Qixu Zhang 韩岩 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第10期1508-1520,共13页
背景:2001年,Zuk等从吸脂术抽出的脂肪中发现了脂肪干细胞,揭开了干细胞研究的新篇章。近年来的研究证实,干细胞广泛存在于体内各组织,但脂肪干细胞以其来源广泛、获取简单等优点,一直以来是整形修复科、组织工程和再生医学等相关学科... 背景:2001年,Zuk等从吸脂术抽出的脂肪中发现了脂肪干细胞,揭开了干细胞研究的新篇章。近年来的研究证实,干细胞广泛存在于体内各组织,但脂肪干细胞以其来源广泛、获取简单等优点,一直以来是整形修复科、组织工程和再生医学等相关学科的研究重点。目的:从脂肪组织的取材、脂肪干细胞的分离、纯化、传代培养和冻存等方面进行综述,讨论上述过程中影响脂肪干细胞产量、增殖和分化能力的主要因素,同时提出目前的问题和未来的研究方向。方法:于2015年9月10日在PubM ed中以(adipose stem cells[Title])OR(adipose-derived stem cells[Title])OR(adipose-derived mesenchymal stem cells[Title])作为检索式进行检索,在SinoM ed中以("脂肪干细胞"[中文标题:智能])or("脂肪间充质干细胞"[中文标题:智能])作为检索式进行检索。通过标题及摘要判断其主要内容,最终选取81篇代表性文献。文章还介绍了美国德克萨斯大学MD安德森肿瘤中心整形科和TRAMCEL实验室(Tissue Regeneration and Molecular Cell Engineering Lab)的相关经验。结果与结论:脂肪组织分布广泛,给脂肪干细胞提供了充足的来源。利用吸脂术获得脂肪组织,患者痛苦小,供区损伤低。胶原酶消化法操作简单,产量高,仍然是基础实验中脂肪干细胞的主要分离方法,但是临床应用中一般不分离脂肪干细胞,或者利用临床级的无异种胶原酶甚至无酶的分离方法。脂肪干细胞的产量、表型、增殖和分化能力等生物学特性会受到取材和分离过程中多种因素的影响,因此目前需要制定标准化的脂肪干细胞分离准则。 展开更多
关键词 干细胞 脂肪干细胞 分离 纯化 冻存 组织工程
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基于凹点搜寻的重叠细胞图像自动分离的算法研究 被引量：28
5
作者 傅蓉 申洪 陈浩 《计算机工程与应用》 CSCD 北大核心 2007年第17期21-23,28,共4页
提出了一种重叠细胞图像自动分离的新算法。根据重叠细胞的凹凸性,从细胞重叠区域的凹区域中寻找到凹点,根据凹点数与细胞个数的关系,判断是细胞串联还是细胞并联:如果是串联的情况,则直接将成对的凹点连成直线分离重叠区域;如果是并联... 提出了一种重叠细胞图像自动分离的新算法。根据重叠细胞的凹凸性,从细胞重叠区域的凹区域中寻找到凹点,根据凹点数与细胞个数的关系,判断是细胞串联还是细胞并联:如果是串联的情况,则直接将成对的凹点连成直线分离重叠区域;如果是并联的情况,则将凹点与重叠区域的中心连接成直线分离重叠区域。该算法在Matlab环境下对重叠细胞图像进行了自动分离,实验结果表明该算法实现简单,效果理想,且能基本保持原细胞的大小和形状。 展开更多
关键词 重叠细胞 凹点 细胞串联 细胞并联 自动分离
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成体人牙髓干细胞的分离与鉴定 被引量：22
6
作者 杨雪超 樊明文 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期244-247,共4页
目的从成体人牙髓组织中分离培养牙髓干细胞,初步探讨其分化潜能。方法选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法原代培养。扩大培养细胞克隆,检测STRO1的表达。体外诱导分化... 目的从成体人牙髓组织中分离培养牙髓干细胞,初步探讨其分化潜能。方法选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法原代培养。扩大培养细胞克隆,检测STRO1的表达。体外诱导分化后对各克隆从碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节形成、牙本质涎蛋白(DSP)表达、OilRedO染色、PPARr2基因表达等方面进行检测。结果克隆来源细胞STRO1表达阳性。在矿化液诱导下,克隆细胞呈现明显高的ALP活性;能够形成矿化结节;可以分泌表达DSP,已向成牙本质细胞方向发生了分化。成脂肪诱导后,OilRedO染色阳性,可检测到PPARr2基因表达。结论从成体人牙髓组织中可以分离培养出干细胞,在体外能有效增殖并保持低分化状态。 展开更多
关键词 人牙髓干细胞 分离与鉴定 成体 人牙髓组织 体外诱导分化 牙本质涎蛋白 成牙本质细胞 分离培养 基因表达 单细胞悬液 有限稀释法 碱性磷酸酶 ALP活性 分化潜能 初步探讨 第三磨牙 年轻患者 原代培养 细胞克隆 扩大培养
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磁性高分子微球研究进展 被引量：3
7
作者 胡书春 周祚万 《材料科学与工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期616-619,共4页
对磁性高分子微球的研究进展进行了综述 ,介绍了各类微球的制备方法及相关原理。在此基础上 ,概述了磁性高分子微球在磁性塑料、固定化酶、细胞分离和靶向药物等领域的应用情况 。
关键词 磁性高分子微球 制备 应用 原理
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表皮干细胞体外分离与培养 被引量：17
8
作者 李建福 付小兵 +2 位作者 盛志勇 杨银辉 孙同柱 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期386-387,共2页
探索和建立表皮干细胞体外分离与培养的技术方法。通过酶消化法获得幼鼠表皮 ,并制成单表皮细胞悬液 ,以表皮干细胞培养基 ,即无钙EMEM培养基 (添加 9%FBS ,0 0 5mmol/LCaCl2 ,4ng/mlEGF ,0 5ng/ml硫酸庆大霉素及 5 0 %成纤维细胞条... 探索和建立表皮干细胞体外分离与培养的技术方法。通过酶消化法获得幼鼠表皮 ,并制成单表皮细胞悬液 ,以表皮干细胞培养基 ,即无钙EMEM培养基 (添加 9%FBS ,0 0 5mmol/LCaCl2 ,4ng/mlEGF ,0 5ng/ml硫酸庆大霉素及 5 0 %成纤维细胞条件培养基 )置细胞培养箱内培养。成纤维细胞条件培养基为无钙EMEM培养基(添加 9%FBS、0 0 5mmol/LCaCl2 、0 5 μg/ml硫酸庆大霉素 )培养幼鼠皮肤块 4 8h后所得培养液。将 1×10 6/ml上述培养的角质形成细胞经TGG细胞消化液 37℃下振荡消化后 ,接种至鼠Ⅳ型胶原包被的培养瓶内 ,37℃下静置 10～ 15min,留用快速贴壁细胞继续培养 ,所得细胞分别以能否呈克隆状生长和透射电镜观察其超微结构及β1整合素、K19免疫细胞化学染色进行鉴定。结果显示 ,鼠Ⅳ型胶原包被的培养瓶内快速贴壁细胞经继续培养 ,可见细胞呈克隆状生长。电镜观察其超微结构示非成熟细胞特征 ,β1整合素、K19免疫细胞化学染色阳性。研究表明 ,表皮干细胞可在体外分离与培养 ,本实验方法为较好方法之一。 展开更多
关键词 表皮干细胞 细胞培养 细胞分离 实验室技术 动物实验
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人脐带间质干细胞分离纯化及基本生物学特性研究 被引量：16
9
作者 袁源 王媛丽 +2 位作者 杨树源 韩忠朝 张晓辉 《青岛大学医学院学报》 CAS 2006年第2期120-122,125,共4页
目的探讨人脐带间质干细胞（MSC）的分离、纯化、扩增方法,研究其基本生物学特性.方法无菌条件下收集剖宫产新生儿脐带,分别用组织块贴壁法和酶消化法获取脐带间质干细胞,进行原代培养.应用DMEM/F12培养液进行纯化和扩增培养.用流式细... 目的探讨人脐带间质干细胞（MSC）的分离、纯化、扩增方法,研究其基本生物学特性.方法无菌条件下收集剖宫产新生儿脐带,分别用组织块贴壁法和酶消化法获取脐带间质干细胞,进行原代培养.应用DMEM/F12培养液进行纯化和扩增培养.用流式细胞仪检测MSC的细胞表面标志.绘制细胞生长曲线并测定细胞周期.结果两种分离方法均可获得MSC,原代培养12～14 d后可达90%融合,细胞可传代20代以上.流式细胞仪检测结果显示,脐带MSC强表达CD13、CD29、CD44、CD105,弱表达CD106,不表达CD34、CD11a、CD14、CD31、CD45.结论脐带MSC在体外有较强的增殖能力,可作为组织工程的种子细胞. 展开更多
关键词 脐带 间质干细胞 生物学 细胞分离
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免疫磁珠分离及流式细胞仪分选纯化外周血CD34^+/CD90^+干细胞 被引量：15
10
作者 徐勇 霍梅 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期246-248,共3页
目的　建立人外周血CD34+ 细胞及其亚群的纯化分离方法。方法　用干细胞采集仪收集了 3例病人的外周血干细胞 ,应用免疫磁珠分离柱快速分离其中的CD34+ 细胞 ,随后采用分选型EPICSElite流式细胞仪进一步分选出CD34+ /CD90 + 双阳性早期... 目的　建立人外周血CD34+ 细胞及其亚群的纯化分离方法。方法　用干细胞采集仪收集了 3例病人的外周血干细胞 ,应用免疫磁珠分离柱快速分离其中的CD34+ 细胞 ,随后采用分选型EPICSElite流式细胞仪进一步分选出CD34+ /CD90 + 双阳性早期造血干细胞。结果　免疫磁珠分离纯化后CD34+ 干细胞的纯度可达 83%～ 95 % ,回收率 5 4 %～ 71% ,活细胞率 >95 %。流式细胞仪分选后的CD34+ /CD90 + 细胞纯度可达 90 %以上 ,回收率在 4 0 %～ 5 0 % ,生存率 >95 %。起始标本中CD34+ 细胞含量越高 ,纯化所得到的干细胞纯度和回收率越高。两种纯化后的干细胞在形态学上有明显的不同。结论　联合应用免疫磁珠分离和流式细胞仪分选 ,可以较高的回收率快速纯化高纯度的CD34+ 展开更多
关键词 免疫磁珠分离 流式细胞仪 分选 纯化 外周血 CD34^+/CD90^+干细胞
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人脐静脉内皮细胞的体外分离培养及鉴定 被引量：14
11
作者 秦明春 王若光 +4 位作者 秦莉花 刘小丽 李春梅 刘惠萍 叶赞 《湖南中医药大学学报》 CAS 2007年第4期12-15,共4页
目的探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养方法,提高体外分离培养血管内皮细胞的成功率。建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法取2根脐带(至少20 cm)冲净淤血,采用加工穿刺针固定脐静脉灌注消化液,一根用0.2%... 目的探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养方法,提高体外分离培养血管内皮细胞的成功率。建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法取2根脐带(至少20 cm)冲净淤血,采用加工穿刺针固定脐静脉灌注消化液,一根用0.2%胶原酶Ⅱ,另一根用0.1%胶原酶Ⅰ和0.25%胰酶等比混合消化液,比较两种酶的消化效果。收集细胞并用含有10 ng/mL的VEGF的培养基中培养,观察细胞的生长及传代。并在倒置显微镜下观察细胞的形态学特点,同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定。用流式细胞术观察细胞周期。结果两种消化酶方法均获得了相当数量的人脐静脉内皮细胞,胶原酶Ⅱ的消化效果稍优于混合消化酶,且比较理想的消化时间均为13 min,细胞接种后4～5 h开始贴壁生长,1周左右可生长成单层,光镜下呈多角形,"铺路石"样排列,免疫组织化学法可见内皮细胞胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应。细胞周期显示约有50.6%的细胞处于G0/G1期。结论胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅰ与胰酶等比混合消化液灌注法是获得脐静脉内皮细胞的一种可取方法,而胶原酶是分离培养脐静脉内皮细胞的首选消化液,成功率高,可靠性大,可成功构建体外研究血管内皮细胞的模型。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 细胞培养 流式细胞术 细胞周期 分离 鉴定
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神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤 被引量：17
12
作者 曲艺 孙正巍 +1 位作者 杨东波 蒋传路 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第10期1876-1883,共8页
背景:近年来,神经干细胞移植已成为治疗神经退行性疾病和中枢神经系统损伤的研究热点。目的:探讨神经干细的定向分化调控机制和神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤的研究进展。方法:以"neural stem cells,stem cell transplan... 背景:近年来,神经干细胞移植已成为治疗神经退行性疾病和中枢神经系统损伤的研究热点。目的:探讨神经干细的定向分化调控机制和神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤的研究进展。方法:以"neural stem cells,stem cell transplantation,ischemic brain injury"为检索词,检索Pubmed数据库1990至2012年相关文献;以"神经干细胞,干细胞移植,缺血性脑损伤"为检索词,检索CNKI数据库2005至2012年相关文献。分析神经干细的定向分化调控机制和神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤的内容,排除重复研究。结果与结论:①体外分离培养的神经干细胞有胚胎来源、脐血来源和成体来源,主要采用机械分离法和胰酶消化法进行分离。②目前体外培养的神经干细胞分离鉴定的标记物有巢蛋白、波形蛋白1、5-溴脱氧尿嘧啶核苷、神经元特异性烯醇化酶等。③神经干细胞的分化调节是通过正负双重作用实现的,负性调节是通过对称性的分裂来增加神经干细胞数量,包括Notch信号途径和一些生长因子等。正性调节诱导神经干细胞分化,包括参与细胞合成的骨形态发生蛋白信号途径等。④神经干细胞移植的时间窗选择在实验动物脑缺血两三周后,时间过早和过晚均不适合细胞的存活。神经干细胞通过脑立体定位仪直接进行脑内移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤,移植后可见细胞在局灶性脑缺血大鼠脑室内和梗死中心均可长期存活,并可广泛迁移,移植神经干细胞后观察到其运动行为学评分有明显提高。缺血性脑卒中的神经干细胞移植治疗还存在一些问题需要解决,未来的临床应用前景广阔,是缺血性脑卒中患者的新希望。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞综述 神经干细胞 干细胞移植 缺血性脑损伤 细胞培养 机械分离法 胰酶消化法 巢蛋白 波形蛋白1 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 神经元特异性烯醇化酶 脑内移植 立体定向移植
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磁性微球在生物医学领域的最新进展 被引量：11
13
作者 刘美红 陈晓明 《精细与专用化学品》 CAS 2006年第2期6-8,16,共4页
磁性微球作为一种新型功能材料,在生物医学工程等领域有着广泛的应用前景。首先介绍磁性微球的几种制备方法,包括喷雾干燥、热处理等物理方法,以及乳液聚合、自组装等化学方法。同时着重阐述了磁性微球在固定化酶、靶向药物、细胞分离... 磁性微球作为一种新型功能材料,在生物医学工程等领域有着广泛的应用前景。首先介绍磁性微球的几种制备方法,包括喷雾干燥、热处理等物理方法,以及乳液聚合、自组装等化学方法。同时着重阐述了磁性微球在固定化酶、靶向药物、细胞分离、诊断等生物医学领域的应用。 展开更多
关键词 磁性微球 生物医学 固定化酶 细胞分离
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肝脏细胞的分离、培养和鉴定技术 被引量：16
14
作者 龚建平 韩本立 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第5期417-419,共3页
关键词 肝细胞 细胞分离 细胞培养
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原代猪肝细胞的分离获取及培养 被引量：14
15
作者 陈柯 高毅 +1 位作者 潘玉先 杨继震 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第3期200-202,共3页
目的研究猪肝细胞的获取率、活率．观测普通培养过程中肝细胞形态变化过程．方法取用本地杂种小猪作为肝细胞供体．用Ｓｅｇｌｅｎ胶原酶二步灌注法，原位灌注分离获取肝细胞悬液，ＴＢ染色法计算细胞数及细胞活率．在含１００ｍＬ／Ｌ... 目的研究猪肝细胞的获取率、活率．观测普通培养过程中肝细胞形态变化过程．方法取用本地杂种小猪作为肝细胞供体．用Ｓｅｇｌｅｎ胶原酶二步灌注法，原位灌注分离获取肝细胞悬液，ＴＢ染色法计算细胞数及细胞活率．在含１００ｍＬ／Ｌ胎牛血清及其他附助因子的ＤＭＥＭ培养基中培养，光镜下观察培养过程中肝细胞形态变化过程，检测不同时期培养上清中清蛋白、尿素的浓度．结果平均猪肝重４３４ｇ，每只猪肝平均可获取２１８×１０１０个肝细胞，平均活力为９４６％．在ＤＭＥＭ培养基中普通培养可存活４ｗｋ～５ｗｋ，并具有生物活性．结论本方法分离获取肝细胞产率高、活性高，可作为人工肝较好的生物材料． 展开更多
关键词 人工肝 肝细胞 细胞分离 细胞培养
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体外分离、纯化人表皮干细胞促进皮肤的功能生理性修复 被引量：13
16
作者 李剑 戴育成 《中国临床康复》 CSCD 2003年第11期1620-1621,F002,共3页
目的表皮干细胞是皮肤发生、修复、重建的关键“种子细胞”,因而研究建立人表皮干细胞体外分离、培养及鉴定的方法非常重要。方法通过酶消化法,分离小儿包皮的表皮与真皮层,表皮制成单细胞悬液,以高糖低钙的DMEM培养基,补充100ml/L的干... 目的表皮干细胞是皮肤发生、修复、重建的关键“种子细胞”,因而研究建立人表皮干细胞体外分离、培养及鉴定的方法非常重要。方法通过酶消化法,分离小儿包皮的表皮与真皮层,表皮制成单细胞悬液,以高糖低钙的DMEM培养基,补充100ml/L的干细胞培养专用胎牛血清(FBS),0.05mmol/L氯化钙,10ng/ml表皮生长因子,1×10-6mol/L氢化可的松进行培养。在实验之前用胶原IV包被直径35mm的培养皿,其中有些放置消毒盖玻片以制“细胞玻片,置4℃冰箱中放置30min以上,吸干胶原IV,再将培养皿置室温下自然干燥半小时以上,备用。调整细胞含量为2×106/ml,接种于包被好胶原IV的培养皿中快速黏附10～15min(37℃),弃去未黏附细胞,保留快速黏附细胞继续培养。培养至21d对所培养细胞进行流式细胞仪α6、CD71表型鉴定,角蛋白19(K19)、角蛋白5(K5)免疫细胞化学染色鉴定以及形态学观察、克隆计数。结果在胶原IV包被的培养皿中快速贴壁细胞经继续培养,可见细胞克隆数增多,细胞传代次数达8～10次,培养时间达2个月。K19,K5免疫化学染色阳性,α6briCD71dim细胞占细胞总数的40%左右。结论研究表明用胶原IV快速黏附法可从包皮分离和富集表皮干细胞,用此体外培养体系,可较好地扩增表皮干细胞。 展开更多
关键词 体外分离 功能生理性修复 人表皮干细胞 细胞分离 细胞培养 鉴定 表皮生长因子 皮肤损伤
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成年大鼠心肌细胞的分离和培养 被引量：12
17
作者 李勇刚 石应康 +3 位作者 陈焕文 刘小菁 丁怡 王树人 《华西医学》 CAS 2005年第2期308-309,共2页
目的:建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果:分离的活性心肌细胞比率约70%～80%,杆... 目的:建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果:分离的活性心肌细胞比率约70%～80%,杆状、横纹清晰。加血清贴壁培养的细胞逐渐发生形态学改变。结论:通过本方法可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离培养。 展开更多
关键词 大鼠 心肌细胞 细胞分离 细胞培养 心肌结构
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磁性高分子微球的研究进展 被引量：8
18
作者 彭洪修 朱以华 +2 位作者 郑志凤 古宏晨 干路平 《材料导报》 EI CAS CSCD 2001年第5期46-49,共4页
磁性离分子微球是80年代中期才发展起来的一种免疫学和生物医学新技术,它涉及到材料科学、生物学以及免疫学等多个学科。简要概述了国内外磁性高分子微球的研究近况、性质及其应用。
关键词 磁性高分子微球 制备方法 细胞分离 靶向药物 固定化酶 分类 性质 应用
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肝细胞移植实验研究中大鼠肝细胞的冻存与复苏初探 被引量：9
19
作者 李力 滕皋军 《中华放射学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期369-372,共4页
目的　以大鼠为实验对象 ,研究冷冻复苏及降温速率对肝细胞活率、形态和功能的影响。方法　改良Seglen门静脉 下腔静脉双插管胶原酶灌注法分离获取游离肝细胞。分别将肝细胞按B程序 (渐进式降温程序 :- 1 5℃ /min至 - 18℃ ,保持 5min... 目的　以大鼠为实验对象 ,研究冷冻复苏及降温速率对肝细胞活率、形态和功能的影响。方法　改良Seglen门静脉 下腔静脉双插管胶原酶灌注法分离获取游离肝细胞。分别将肝细胞按B程序 (渐进式降温程序 :- 1 5℃ /min至 - 18℃ ,保持 5min ,- 2 0℃ /min至 - 80℃ ,投入液氮保存 ) ;C程序 (慢速线形冷冻程序 :- 2 5℃ /min至 - 80℃ ,投入液氮保存 )进行处理。 2组冻存细胞分别在液氮中冷藏 3、15、30d后 ,40℃水浴复苏。检测复苏肝细胞活率、形态结构、蛋白质合成功能的改变。结果　 (1)B组、C组冻存后各时间点细胞活率及 3H 亮氨酸合成量较新鲜组 (A组 )均有明显下降 (P <0 0 0 1) ,C组明显低于B组 (P <0 0 0 5 ) ,2组各组内在不同时间点的活率及 3H 亮氨酸合成量无明显差别 (P >0 0 5 )。 (2 )光学显微镜下见复苏细胞与新鲜细胞无明显区别。电子显微镜下可见B、C组细胞超微结构有明显改变 ,但B组程度较C组轻。结论　降温速率的快慢直接关系冻存肝细胞的效果。冷冻复苏过程使细胞膜完整性受损、细胞质内容丢失导致细胞在复苏后活率降低、细胞功能丧失。肝细胞在液氮中保存 ,其活率及蛋白质合成功能并不随保存时间的延长而降低。 展开更多
关键词 肝细胞移植 细胞分离 细胞存活 低温保存 降温速率
原文传递
鸡胚盲肠上皮细胞原代培养与鉴定 被引量：13
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作者 古少鹏 王敏霞 +1 位作者 赵素芬 郑明学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1699-1704,共6页
为研究鸡E.tenella的宿主细胞——盲肠上皮细胞体外培养技术,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型,分别用胰蛋白酶法、胶原酶Ⅰ法、嗜热菌蛋白酶法、嗜热菌蛋白酶+胶原酶Ⅰ法和中性蛋白酶Ⅰ+胶原酶Ⅺ法分离纯化原代鸡胚盲... 为研究鸡E.tenella的宿主细胞——盲肠上皮细胞体外培养技术,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型,分别用胰蛋白酶法、胶原酶Ⅰ法、嗜热菌蛋白酶法、嗜热菌蛋白酶+胶原酶Ⅰ法和中性蛋白酶Ⅰ+胶原酶Ⅺ法分离纯化原代鸡胚盲肠上皮细胞,通过测定细胞活力、细胞团块比例、总细胞产量和细胞团块产量,筛选出鸡胚盲肠上皮细胞最佳分离方法,并进行了纯化和培养,对培养细胞进行了鉴定。结果表明:嗜热菌蛋白酶消化、低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,为最佳分离和纯化盲肠上皮细胞的方法;分离纯化的细胞接种后分别于第3-5天、第10-11天进入对数生长期,可存活14 d以上;经形态学观察、碱性磷酸酶染色、扫描电镜鉴定为盲肠上皮细胞,所分离的细胞培养至第4、7、11天时上皮细胞比例分别为81.67%、84.33%和72.00%。用该法可获得纯度较高的原代鸡胚盲肠上皮细胞。 展开更多
关键词 盲肠上皮细胞 细胞分离 体外培养 鉴定 鸡胚
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