目的:检测生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45g(growth arrest and DNA damage inducible protein 45g,GADD45g)基因在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓标本和细胞系中的表达情况及其表达水平与AML患者预后的关系,探究过表...目的:检测生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45g(growth arrest and DNA damage inducible protein 45g,GADD45g)基因在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓标本和细胞系中的表达情况及其表达水平与AML患者预后的关系,探究过表达GADD45g对AML细胞增殖、凋亡、衰老、周期、分化和药物敏感性的影响。方法:选取中国医学科学院血液病医院2013年1月至2016年12月初次诊断为AML患者的骨髓标本共27例,用Real-time PCR和Western blotting检测AML患者、正常对照骨髓单个核细胞以及AML细胞系中GADD45g mRNA和蛋白水平的表达情况。在两个相互独立的数据集GSE10358和GSE425-GPL317中分析GADD45g表达与AML患者的总生存率(overall survival,OS)和无事件生存率(event-free survival,EFS)的相关性。构建GADD45g过表达慢病毒并感染AML细胞系U937、THP-1和Molm-13,通过生长曲线、集落形成、β-半乳糖苷酶染色、流式细胞术分析Annexin V/7AAD染色和PI染色等方法分析GADD45g过表达对AML细胞增殖、克隆形成、衰老、凋亡、周期、分化和化疗药物敏感性的影响。结果:GADD45g在AML患者和AML细胞系中的表达水平显著低于正常对照(均P<0.01)。低表达GADD45g的AML患者的OS(P<0.05)和EFS较高表达患者显著缩短(均P<0.05)。在AML细胞系中过表达GADD45g能显著抑制细胞增殖、集落形成,显著促进细胞的凋亡、衰老、周期阻滞和分化,增强了细胞对化疗药物敏感性(P<0.05或P<0.01)。结论:GADD45g基因在AML患者骨髓组织和AML细胞系中低表达,对AML细胞系有显著的全方位的抑制作用,其表达水平对AML具有预后判断价值。展开更多
目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropietin,r-HuEPO)对癫痫大鼠海马齿状回的影响。方法 140只大鼠按随机数字表法分为正常对照组20只,余120只制作氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫模型,符合条件者采用随机数字表将其分为...目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropietin,r-HuEPO)对癫痫大鼠海马齿状回的影响。方法 140只大鼠按随机数字表法分为正常对照组20只,余120只制作氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫模型,符合条件者采用随机数字表将其分为癫痫治疗组和癫痫组;各组均经腹腔注射BrdU,治疗组同时予以r-HuEPO处理;以FJ-B(Fluoro-Jade B)免疫荧光观察神经元变性情况,BrdU免疫组化观察细胞增殖情况,Timm’s染色观察齿状回苔藓纤维发芽情况。结果海马齿状回神经元变性在癫痫组(32.32±5.09)较治疗组(11.12±0.75)和对照组(6.50±1.08)明显(P<0.01),而治疗组和对照组相比无显著差异;第9天细胞增殖在癫痫组(92.8±2.97)较治疗组(16.95±0.54)和对照组(12.80±2.13)明显(P<0.01),治疗组和对照组相比无显著差异;第28天细胞增殖在癫痫组(146.45±5.91)较治疗组(46.27±2.93)和对照组(38.52±3.10)明显(P<0.01),治疗组和对照组相比无显著差异;Timm’s染色结果表明在第14天,癫痫组(0.45±0.19)苔藓纤维发芽比对照组(0.10±0.11)明显(P<0.05),第28天癫痫组(3.60±0.16)比治疗组(0.55±0.10)和对照组(0.30±0.11)更加明显(P<0.01),治疗组与对照组比差异不明显(P>0.05)。结论癫痫能诱发大鼠海马齿状回神经元变性、细胞增殖和苔藓纤维发芽;r-HuEPO处理能降癫痫大鼠海马齿状回神经元变性和细胞增殖,并能抑制苔藓纤维发芽。展开更多
文摘目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropietin,r-HuEPO)对癫痫大鼠海马齿状回的影响。方法 140只大鼠按随机数字表法分为正常对照组20只,余120只制作氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫模型,符合条件者采用随机数字表将其分为癫痫治疗组和癫痫组;各组均经腹腔注射BrdU,治疗组同时予以r-HuEPO处理;以FJ-B(Fluoro-Jade B)免疫荧光观察神经元变性情况,BrdU免疫组化观察细胞增殖情况,Timm’s染色观察齿状回苔藓纤维发芽情况。结果海马齿状回神经元变性在癫痫组(32.32±5.09)较治疗组(11.12±0.75)和对照组(6.50±1.08)明显(P<0.01),而治疗组和对照组相比无显著差异;第9天细胞增殖在癫痫组(92.8±2.97)较治疗组(16.95±0.54)和对照组(12.80±2.13)明显(P<0.01),治疗组和对照组相比无显著差异;第28天细胞增殖在癫痫组(146.45±5.91)较治疗组(46.27±2.93)和对照组(38.52±3.10)明显(P<0.01),治疗组和对照组相比无显著差异;Timm’s染色结果表明在第14天,癫痫组(0.45±0.19)苔藓纤维发芽比对照组(0.10±0.11)明显(P<0.05),第28天癫痫组(3.60±0.16)比治疗组(0.55±0.10)和对照组(0.30±0.11)更加明显(P<0.01),治疗组与对照组比差异不明显(P>0.05)。结论癫痫能诱发大鼠海马齿状回神经元变性、细胞增殖和苔藓纤维发芽;r-HuEPO处理能降癫痫大鼠海马齿状回神经元变性和细胞增殖,并能抑制苔藓纤维发芽。
