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基于电喷雾电离质谱的人肝癌细胞HepG2与正常肝细胞L02的N-糖链的定性定量比较 被引量:8
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作者 潘丽英 王承健 +3 位作者 袁江北 张英 黄琳娟 王仲孚 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期237-243,共7页
以培养的原发性肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02为研究对象,采用细胞裂解液提取总蛋白,用PNGase F酶解释放N-糖链,以微晶纤维素柱结合石墨碳柱纯化分离N-糖链,通过电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对N-糖链进行序列鉴定,以β-环... 以培养的原发性肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02为研究对象,采用细胞裂解液提取总蛋白,用PNGase F酶解释放N-糖链,以微晶纤维素柱结合石墨碳柱纯化分离N-糖链,通过电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对N-糖链进行序列鉴定,以β-环糊精为内标对2种细胞系的N-糖链进行了定量比较分析.结果表明,在肝癌细胞系HepG2和正常细胞系L02中共检测到26种N-糖链,与L02相比,HepG2的大多数高甘露糖型糖链、唾液酸化糖链和岩藻糖基化糖链的数量都明显升高,其中有15种糖链在数量上具有极显著性差异(p<0.01),1种糖链具有显著性差异(p<0.05).本研究为进一步探索肝癌中各类N-糖链的表达特点及发现早期肝癌糖链标志物提供了参考. 展开更多
关键词 原发性肝癌细胞(hepg2) 正常肝细胞(L02) N-糖链 电喷雾电离质谱
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慢病毒载体介导的人肝癌HepG2细胞BC047440基因沉默 被引量:6
2
作者 钟扬 李靖 +4 位作者 黄小兵 郑璐 杨彤翰 赵弘智 梁平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期744-748,共5页
目的构建BC047440基因RNAi慢病毒干扰载体,并检测其对人肝癌细胞系HepG2细胞中BC047440基因的沉默效果。方法针对已经筛选确定的BC047440基因RNAi有效靶序列,合成BC047440基因特异性shRNA序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后... 目的构建BC047440基因RNAi慢病毒干扰载体,并检测其对人肝癌细胞系HepG2细胞中BC047440基因的沉默效果。方法针对已经筛选确定的BC047440基因RNAi有效靶序列,合成BC047440基因特异性shRNA序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pFU-GW-iRNA载体连接产生pFU-GW-shBC047440慢病毒载体,PCR、DNA测序鉴定阳性克隆。用脂质体转染法将pFU-GW-shBC047440、pHelper 1.0载体和pHelper 2.0载体共转染293T细胞,产生具备感染能力的慢病毒。以293T细胞中绿色荧光蛋白的表达水平测定病毒滴度,并测定其对人肝癌细胞株HepG2细胞最适感染复数(MOI)。以最适MOI感染HepG2细胞,分BC047440-shRNA组、control-shRNA组和HepG2组;RT-PCR和Western blot检测各组细胞BC047440 mRNA及蛋白的表达差异。结果经PCR鉴定,成功构建BC047440基因RNAi慢病毒载体。测定慢病毒滴度为5×108TU/ml,其在HepG2细胞中最适MOI为20;RT-PCR和Western blot检测结果分别显示BC047440-shRNA组中BC047440 mRNA及BC047440蛋白表达较control-shRNA组和HepG2组明显降低,control-shRNA组与HepG2组间无明显差异。结论成功构建BC047440特异性RNAi慢病毒载体,感染人肝癌细胞系HepG2细胞后,实现了对HepG2细胞中BC047440基因的有效沉默。 展开更多
关键词 BC047440 RNA干扰 慢病毒载体 人肝癌细胞系hepg2
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磁性三氧化二铁纳米粒子对HepG2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:4
3
作者 夏婷 唐萌 +6 位作者 殷海荣 陆敏玉 王姝 张婷 杨扬 张宇 顾宁 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期29-33,共5页
应用 HepG2细胞作为研究对象,探讨 Fe_2O_3纳米粒子对肿瘤细胞的活力与凋亡的影响.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)还原检测法确定受试物的染毒剂量.分别对各个组进行流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化及凋亡.结果显示,Fe_2O_3纳米粒子在0.55... 应用 HepG2细胞作为研究对象,探讨 Fe_2O_3纳米粒子对肿瘤细胞的活力与凋亡的影响.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)还原检测法确定受试物的染毒剂量.分别对各个组进行流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化及凋亡.结果显示,Fe_2O_3纳米粒子在0.555~3.310 mg/mL 范围内均可抑制 HepG2细胞增值,IC_(50)为1.1lmg/mL.Fe_2O_3纳米粒子在0.173、0.347、0.694 mg/mL 剂量组均导致细胞线粒体膜电位均较对照组有所下降且细胞凋亡率显著增高. 展开更多
关键词 氧化铁磁性纳米颗粒 人肝癌细胞株 线粒体膜电位 细胞凋亡
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α-亚麻酸和花生四烯酸对Nrf 2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1表达的影响 被引量:3
4
作者 张金铭 张秀英 +1 位作者 郝丽红 马丽梅 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期1-4,共4页
为了检测α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对于人肝癌细胞系(HepG2细胞)中核转录因子Nrf 2和Ⅰ相代谢酶胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的mRNA和蛋白质表达的影响,并探究CYP7A1是否受Nrf 2的调控,试验以不... 为了检测α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对于人肝癌细胞系(HepG2细胞)中核转录因子Nrf 2和Ⅰ相代谢酶胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的mRNA和蛋白质表达的影响,并探究CYP7A1是否受Nrf 2的调控,试验以不同浓度的ALA和AA诱导HepG2细胞24 h,之后采用Real-time PCR法和Western-blot法分别检测HepG2细胞内Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量。结果表明:当使ALA浓度为0.25,0.5,1 mmol/L作用于HepG2细胞时,Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照均呈剂量依赖性升高(P<0.01);当使AA浓度为0.25,0.5,1 mmol/L作用于HepG2细胞时,Nrf 2的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照呈剂量依赖性升高(P<0.01),但CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照则呈剂量依赖性减少(P<0.01)。说明不同剂量的ALA和AA对Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量影响不同,Nrf 2和CYP7A1呈正相关或负相关。 展开更多
关键词 胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1) 核转录因子Nrf 2 α-亚麻酸(ALA) 花生四烯酸(AA) 人肝 癌细胞系(hepg2)
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南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导HepG2细胞凋亡的实验研究 被引量:3
5
作者 熊熙 张馨 +1 位作者 李平 汪茂荣 《中国肝脏病杂志(电子版)》 CAS 2015年第3期81-84,共4页
目的探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导肝癌细胞Hep G2凋亡的作用。方法 Hoechst33342/PI染色后,在荧光显微镜下观察经南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导的Hep G2细胞凋亡后细胞及细胞核的形态变化;应用琼脂糖凝胶电泳观察细胞晚期凋亡形成的"... 目的探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导肝癌细胞Hep G2凋亡的作用。方法 Hoechst33342/PI染色后,在荧光显微镜下观察经南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导的Hep G2细胞凋亡后细胞及细胞核的形态变化;应用琼脂糖凝胶电泳观察细胞晚期凋亡形成的"DNA梯带"。结果随着南蛇藤乙酸乙酯提取物浓度的增加,Hep G2细胞生长被抑制,凋亡细胞增多。同时,随着作用时间的延长,细胞凋亡的数量增多;30μg/ml的南蛇藤乙酸乙酯提取物作用细胞24 h后,可观察到明显的"DNA梯带"。随着南蛇藤乙酸乙酯提取物作用剂量的提高,DNA梯带更加明显。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物可诱导Hep G2细胞凋亡,具有量效关系和时间依存性。 展开更多
关键词 南蛇藤 人类肝癌细胞hepg2 细胞凋亡 琼脂糖凝胶电泳
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和厚朴酚衍生物对肝癌细胞(HepG2)凋亡的影响 被引量:2
6
作者 仇鲸翔 陈俐娟 《四川化工》 CAS 2014年第1期1-3,共3页
为探讨和厚朴酚衍生物对肝癌细胞的毒性,在合成了6个和厚朴酚衍生物的同时,并应用MTT分析和细胞流式分析等手段研究了活性较好的厚朴酚3#H对肝癌HepG2细胞凋亡的影响。采用倒置显微镜观察细胞的形态学的改变,用流式细胞分析技术测定亚... 为探讨和厚朴酚衍生物对肝癌细胞的毒性,在合成了6个和厚朴酚衍生物的同时,并应用MTT分析和细胞流式分析等手段研究了活性较好的厚朴酚3#H对肝癌HepG2细胞凋亡的影响。采用倒置显微镜观察细胞的形态学的改变,用流式细胞分析技术测定亚二倍体峰等方法检测该药物对细胞凋亡影响,结果表明和厚朴酚3#H可明显诱导HepG2细胞凋亡。 展开更多
关键词 和厚朴酚衍生物 肝癌hepg2细胞 细胞凋亡
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疏肝导浊方药含药血清对HepG2细胞PPARα、HL及载脂蛋白表达的影响 被引量:2
7
作者 王威 江海涛 +4 位作者 史红 刘友刚 王超 田维 胡利民 《天津中医药大学学报》 CAS 2009年第4期182-184,共3页
[目的]观察疏肝导浊方药含药血清对肝癌细胞株(HepG2)细胞株的过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα),肝脂酶(HL)及载脂蛋白ApoB100,ApoAII,ApoCIImRNA表达的影响,探讨其治疗脂肪肝的机制。[方法]以HepG2细胞株为研究对象,采用血清药理学... [目的]观察疏肝导浊方药含药血清对肝癌细胞株(HepG2)细胞株的过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα),肝脂酶(HL)及载脂蛋白ApoB100,ApoAII,ApoCIImRNA表达的影响,探讨其治疗脂肪肝的机制。[方法]以HepG2细胞株为研究对象,采用血清药理学方法,将含药血清分为高、中、低(16,8,4g/kg)剂量组、东宝肝泰对照组、模型组和空白对照组,研究疏肝导浊方药对HepG2细胞株PPARα及载脂蛋白的mRNA表达的影响。[结果]表明疏肝导浊方药含药血清能增加HepG2细胞PPARα、HL、ApoB100,ApoAII,ApoCIImRNA的表达。[结论]疏肝导浊方药含药血清提高了PPARα、HL及载脂蛋白ApoB100,ApoAII,ApoCIImRNA的表达,从而促进了肝细胞的脂代谢功能这可能是疏肝导浊方药治疗脂肪肝的重要机制之一。 展开更多
关键词 疏肝导浊方药 hepg2细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR) 载脂蛋白
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5-脂氧合酶抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响 被引量:1
8
作者 邓君健 徐细明 +5 位作者 郭红庭 向淼 吴耀贵 张一桥 戈伟 宋启斌 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第3期410-413,共4页
目的:研究5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-Lox)在人肝癌细胞株HepG2中的表达,以及5-Lox抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。方法:应用免疫细胞化学染色及RT-PCR分别检测5-Lox的蛋白和mRNA在人肝癌细胞株HepG2中的表达,采用MTT法... 目的:研究5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-Lox)在人肝癌细胞株HepG2中的表达,以及5-Lox抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。方法:应用免疫细胞化学染色及RT-PCR分别检测5-Lox的蛋白和mRNA在人肝癌细胞株HepG2中的表达,采用MTT法及流式细胞术检测5-Lox抑制剂齐留通(Zileuton)对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。结果:5-Lox蛋白表达于肝癌细胞浆,局灶细胞核膜亦见阳性染色,RT-PCR可检测到肝癌细胞5-Lox的mRNA的表达。人肝癌细胞株HepG2给予不同浓度的齐留通处理24小时后,细胞存活率呈剂量依赖性下降;流式细胞术检测可见细胞凋亡率呈剂量依赖性升高。结论:人肝癌细胞株HepG2存在5-Lox的表达,5-Lox抑制剂齐留通可抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 人肝癌细胞株hepg2 5-脂氧合酶 细胞凋亡
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重组人促红细胞生成素对肝癌生长的影响研究
9
作者 杨阳 罗萍 《中国现代医药杂志》 2016年第3期21-25,共5页
目的探讨重组人促红细胞生成素(rh EPO)对人肝癌细胞株(human hepatoma cell line,Hep G2)裸鼠皮下移植瘤的生长影响,及其与促红细胞生成素(EPO)、促红细胞生成素受体(EPOR)、内皮生长因子(VEGF)、Bcl-2(B淋巴细胞/白血病-2基因)表达的... 目的探讨重组人促红细胞生成素(rh EPO)对人肝癌细胞株(human hepatoma cell line,Hep G2)裸鼠皮下移植瘤的生长影响,及其与促红细胞生成素(EPO)、促红细胞生成素受体(EPOR)、内皮生长因子(VEGF)、Bcl-2(B淋巴细胞/白血病-2基因)表达的时效和量效关系。方法在BALB/C裸鼠皮下接种人肝癌细胞(Hep G2)建立模型,成瘤后随机将其分为rh EPO低剂量组、高剂量组,阴性对照组(PBS组),分组给药,分别于第2周和第4周观察各组肿瘤生长情况,采用HE染色观察肿瘤组织病理情况,应用real-time PCR技术检测肿瘤组织中EPO、EPOR、VEGF、Bcl-2的m RNA水平。结果对照组的肿瘤体积增长幅度均高于实验组肿瘤体积增长幅度;real-time PCR的结果显示:1与对照组比较,第2周高剂量组和低剂量组EPO m RNA表达降低,差异无统计学意义(P>0.05);EPOR m RNA表达降低(P<0.05);VEGF、Bcl-2 m RNA表达均略升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。第4周高剂量组和低剂量组EPO、EPOR m RNA较对照组表达降低(P<0.05);EPO高剂量组的VEGF、Bcl-2 m RNA较对照组表达降低(P<0.05),EPO低剂量组的VEGF、Bcl-2 m RNA较对照组表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。2第2周高剂量组4个基因表达均较低剂量组降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。第4周高剂量组EPO、EPOR m RNA表达较低剂量组略有升高,但差异无统计学意义(P>0.05);高剂量组VEGF、Bcl-2 m RNA表达较低剂量组降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。3EPO高剂量组第4周与第2周比较4个基因的表达均有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);EPO低剂量组第4周与第2周比较EPO m RNA表达下降(P<0.05),EPOR、VEGF、Bcl-2m RNA表达有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同剂量的rh EPO及rh EPO作用时间的不同对Hep G2肿瘤组织的VEGF、Bcl-2 m RNA表达均无明显影响,无直接证据显示rh EPO可引发Hep G2皮下移植瘤的生长。 展开更多
关键词 重组人促红细胞生成素 人肝癌细胞株 时效和量效关系 基因表达
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三氧化二砷与阿霉素对人肝癌细胞株HepG2中survivin表达的影响 被引量:11
10
作者 李志红 王志明 穆拉德 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2005年第6期441-447,共7页
目的探讨三氧化二砷与阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的可能机制。方法用不同浓度的As2O3或/和ADM干预人肝癌细胞株HepG2不同时间,以免疫细胞化学和RTPCR方法检测HepG2细胞中survivin表达的改变。结果(1)未加药物干预之前,HepG2细胞中可见survi... 目的探讨三氧化二砷与阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的可能机制。方法用不同浓度的As2O3或/和ADM干预人肝癌细胞株HepG2不同时间,以免疫细胞化学和RTPCR方法检测HepG2细胞中survivin表达的改变。结果(1)未加药物干预之前,HepG2细胞中可见survivin强烈表达;(2)不同浓度的As2O3或ADM均可降低HepG2细胞survivin表达程度,并且随药物浓度的增加或作用时相的延长,降低程度更明显;浓度与时相之间存在交互作用;(3)ADM降低HepG2细胞survivin表达的作用比As2O3更明显,两者联用后,作用进一步增强。结论(1)单用As2O3或ADM均可降低HepG2细胞中survivin表达,并呈浓度和时间依赖性;(2)相同浓度下,ADM对HepG2细胞中survivin表达的减弱作用较As2O3更强,但两者的联用较单用者能更显著降低survivin表达;(3)As2O3和ADM可能通过下调survivin表达而参与诱导癌细胞凋亡,从而发挥其抗癌作用;两者联用有叠加抗癌作用,从而可降低各自的临床使用剂量。 展开更多
关键词 肝肿瘤/药物疗法 三氧化二砷 治疗应用 阿霉素 细胞株hepg2 SURVIVIN蛋白 细胞凋亡
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复方斑蝥注射液联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响 被引量:12
11
作者 李丽娜 南克俊 张茜 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第3期438-440,共3页
目的:探讨复方斑蝥注射液(CCI)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对人肝癌HepG2细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法观察不同浓度复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物... 目的:探讨复方斑蝥注射液(CCI)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对人肝癌HepG2细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法观察不同浓度复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞的凋亡率的影响。结果:复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合作用对HepG2细胞的抑制作用均呈明显的剂量依赖关系。均可诱导细胞凋亡,联用时有协同作用。结论:复方斑蝥注射液、奥沙利铂能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导凋亡。两药联合有协同作用。 展开更多
关键词 复方斑蝥注射液 奥沙利铂 hepg2细胞 细胞凋亡
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5-脱氧杂氮胞苷抑制肝癌细胞株生物学行为的机制 被引量:9
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作者 刘丽华 肖文华 杨金亮 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第4期420-423,共4页
目的 DNA甲基化模式的改变伴随着永生性细胞系的确立,生长调控基因CpG岛的重新甲基化可能导致了其转录的不活跃,在体外培养的情况下,使得肿瘤细胞选择了有利于生长的条件,我们用DNA甲基转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷处理两株肝癌细胞,研... 目的 DNA甲基化模式的改变伴随着永生性细胞系的确立,生长调控基因CpG岛的重新甲基化可能导致了其转录的不活跃,在体外培养的情况下,使得肿瘤细胞选择了有利于生长的条件,我们用DNA甲基转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷处理两株肝癌细胞,研究其对肝癌细胞的影响,探讨DNA甲基化异常与肝细胞癌间的相关性及5-脱氧杂氮胞苷对肝癌细胞株恶性生物学行为的影响及其机制。 方法 用5-脱氧杂氮胞苷处理肝癌细胞株SMMC-7721和HePG2,然后采用相差显微镜观察药物处理前后细胞的形态变化,采用MTT法观察细胞的生长速度变化,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率、P16蛋白表达的变化,采用RT-PCR法比较p16和甲基转移酶mRNA表达量的变化,比较裸鼠致瘤性的大小。 结果 5-脱氧杂氮胞苷处理后细胞形态趋于规则,生长速度减慢,SMMC-7721细胞,G1期细胞增加了8.5%,而S期和C_2/M朗细胞分别减少了47.8%和10.4%,HePG2细胞,G_1期细胞增加了3.5%,S期减少了46.2%,G_2/M期增加了23.7%,两细胞凋亡率分别增加了91.6%和133.3%,P16蛋白表达分别增加了23.4%和20.9%,p16 mRNA表达增高,而DNA甲基转移酶mRNA表达明显降低,裸鼠皮下移植瘤生长减慢。 结论 肝细胞癌的发生与DNA甲基化异常有关,甲基化酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷可能通过抑制甲? 展开更多
关键词 肝肿瘤细胞株 5-脱氧杂氮胞苷 甲基转移酶
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两种方法建立的人肝癌细胞多药耐药模型的比较 被引量:4
13
作者 邵泽勇 沈鼎明 +2 位作者 伍烽 翟宝进 王智彪 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期51-54,共4页
目的 比较药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立的人肝癌多药耐药模型的生物学特性。方法 分别采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人肝癌阿霉素(adriamycin,ADM)多药耐药细胞亚系HepG2 /ADMs和HepG2 /ADMi。MTT法检测两种细... 目的 比较药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立的人肝癌多药耐药模型的生物学特性。方法 分别采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人肝癌阿霉素(adriamycin,ADM)多药耐药细胞亚系HepG2 /ADMs和HepG2 /ADMi。MTT法检测两种细胞对多种化疗药的敏感性,细胞计数法绘制生长曲线并用公式法计算倍增时间,流式细胞术检测细胞周期以及细胞对药物的摄入和外排。并将细胞接种于裸鼠,观察成瘤率及瘤体大小。结果 以含1μg/mLADM的培养液进行筛选,3个月共筛选4次,所得细胞亚系命名为HepG2 /ADMs,其对ADM的耐药指数为30.5。浓度梯度递增法诱导3个月后,细胞可以在含0.4μg/mLADM的培养液中正常生长增殖,对ADM的耐药指数为51,将该细胞亚系命名为HepG2 /ADMi; MTT法检测显示,两种细胞系不仅对ADM耐药,而且对其它化疗药也有抗性,呈现多药耐药特性,但HepG2 /ADMs对药物的敏感性普遍高于HepG2 /ADMi。与HepG2 /ADMi相比,HepG2 /ADMs的倍增时间相对较短,G0 /G1期细胞相对较少,G2 /M期细胞相对较多,细胞对ADM的摄入较多,外排较少,表现为药物的滞留率较高。动物实验发现HepG2 /ADMs的成瘤率明显高于HepG2 /ADMi(90% vs3.33% ),且肿瘤生长速度较快,体积较大。 展开更多
关键词 细胞系hepg2 多药耐药 阿霉素
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人肝癌原发性耐药细胞亚系的建立及耐药机制的初步探讨 被引量:7
14
作者 邵泽勇 沈鼎明 +1 位作者 伍烽 翟宝进 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期455-458,共4页
目的 从人肝癌细胞系HepG2中筛选出原发性耐药株,建立相应的细胞亚系并探讨其耐药机制。方法 采用阿霉素(adriamycin.ADM)大剂量冲击法筛选原发性耐药细胞株,倒置显微镜下观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,MTT法检测药物敏感性... 目的 从人肝癌细胞系HepG2中筛选出原发性耐药株,建立相应的细胞亚系并探讨其耐药机制。方法 采用阿霉素(adriamycin.ADM)大剂量冲击法筛选原发性耐药细胞株,倒置显微镜下观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,MTT法检测药物敏感性,流式细胞术分析细胞周期和检测耐药蛋白的表达。结果 随冲击次数的增加,筛选出细胞的耐药指数(resistance index,RI)逐渐升高,筛选3次后对ADM的RI可达30.5;其形态学特点、生长特性及细胞周期分布与亲本细胞有明显差异,同时发现耐药蛋白P-gp、MRP和LRP表达增强。结论 肝癌细胞系HepG2是个非均质的群体,其中存在着原发性耐药细胞株。 展开更多
关键词 肝肿瘤 细胞系hepg2 多药耐药 阿霉素 P-糖蛋白
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杨梅素抗肝肿瘤细胞HepG2作用及其机制的研究 被引量:8
15
作者 卞杰 顾明 +1 位作者 侯胜燕 贾强 《中国医药导报》 CAS 2012年第36期7-9,共3页
目的探讨杨梅素对肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡作用及其作用机制。方法应用甲基噻唑蓝(MTT)比色法,测定杨梅素对HepG2细胞株活性的影响,检测其抑制HepG2细胞株的时间效应和剂量效应;应用形态学观察、HE染色和Annexin V-PI流式检测... 目的探讨杨梅素对肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡作用及其作用机制。方法应用甲基噻唑蓝(MTT)比色法,测定杨梅素对HepG2细胞株活性的影响,检测其抑制HepG2细胞株的时间效应和剂量效应;应用形态学观察、HE染色和Annexin V-PI流式检测,测定杨梅素对HepG2细胞的凋亡作用,并进行细胞周期的分析,最后对杨梅素对细胞凋亡相关的蛋白p34cdc-2、Cyclin B1、Bcl-2和PARP的影响进行了研究。结果杨梅素对HepG2细胞具有生长抑制及诱导凋亡作用,且呈时间依赖和剂量依赖性,表现为:细胞G2/M期阻滞,出现明显的凋亡峰;Bliss法测定杨梅素对HepG2细胞的IC50值为(32.18±2.31)μmol/L,30、50μmol/L杨梅素对G2/M期细胞比率分别为(41.32±0.90)%和(80.07±0.90)%,差异有统计学意义(P<0.05);p34cdc-2蛋白的表达量未见变化,而CyclinB1蛋白的表达量明显上升,Bcl-2蛋白的表达量锐减,并诱导半胱氨酸蛋白酶Caspase-3的底物PARP蛋白(113 kD)水解为89 kD的特异性水解产物。结论杨梅素通过激活Caspase家族蛋白实现对肝癌细胞HepG2细胞株的增殖抑制及诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 杨梅素 肝肿瘤细胞 hepg2 凋亡
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基因芯片研究血卟啉单甲醚对人肝癌细胞HEPG2基因表达的影响 被引量:4
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作者 郑世荣 王妍 +2 位作者 朱建国 罗芸 缪海珍 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期530-533,共4页
目的 :利用芯片技术观察血卟啉单甲醚 (HMME)光动力疗法对人原发性肝癌 HEPG2细胞基因表达的影响 ,以深入探讨其作用的分子机制。方法 :HMME加激光照射处理培养的肝癌 HEPG2细胞 ,H- E染色观察细胞形态 ;抽提细胞 m RNA,利用荧光标记 d ... 目的 :利用芯片技术观察血卟啉单甲醚 (HMME)光动力疗法对人原发性肝癌 HEPG2细胞基因表达的影响 ,以深入探讨其作用的分子机制。方法 :HMME加激光照射处理培养的肝癌 HEPG2细胞 ,H- E染色观察细胞形态 ;抽提细胞 m RNA,利用荧光标记 d UTP逆转录制备 c DNA探针 ,与人肝癌表达谱基因芯片杂交 ,并对 Cy3、Cy5荧光信号做扫描分析。 结果 :光照射后实验组细胞呈现凋亡形态 ;芯片扫描显示 2 .47%的检测基因 (389/15 38)出现明显表达差异 ,其中下调基因占 80 % ,多与细胞增殖调控功能有关 ;而细胞凋亡通路中几个重要关键蛋白 (CCP32、AIF、Mch2 )的基因明显上调。结论 :HMME激光疗法可诱导 HEPG2细胞凋亡 ; 展开更多
关键词 基因芯片 基因表达谱 光动力学疗法 肝癌细胞hepg2 血卟啉单甲醚
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索拉菲尼联合阿霉素对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用 被引量:7
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作者 史卫红 卞勇华 +1 位作者 宋祥和 吴建成 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第24期4845-4848,共4页
目的:探讨索拉非尼(Sorafenib)和阿霉素(adriamycin)联合用药对肝癌细胞株nepG2的作用及可能的机制。方法:以不同浓度索拉非尼和不同浓度阿霉素分别组成单药组和索拉非尼+阿霉素联合用药组作用于HepG2细胞,MTT法检测增殖抑制率、流式细... 目的:探讨索拉非尼(Sorafenib)和阿霉素(adriamycin)联合用药对肝癌细胞株nepG2的作用及可能的机制。方法:以不同浓度索拉非尼和不同浓度阿霉素分别组成单药组和索拉非尼+阿霉素联合用药组作用于HepG2细胞,MTT法检测增殖抑制率、流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率。结果:索拉非尼、阿霉素单药与联用均能抑制HepG2细胞增殖,呈剂量依赖效应,两药联用有协同效应(P<0.01)。索拉非尼、阿霉素单药与联用均能诱导HepG2细胞凋亡,并以联合组更为明显,与对照组比较有显著的统计学意义(P<0.01)。索拉非尼及阿霉素单药作用均可使细胞周期阻滞于G0-G1期,联合用药组G0/Gl期细胞比率低于索拉非尼及阿霉素单药组,S期细胞比率高于单药组;阿霉素能抑制HepG2细胞Survivin mRNA表达诱导细胞的凋亡。结论:索拉非尼与阿霉素联合作用于人肝癌HepG2细胞具有协同作用,其机制可能是通过多途径共同抑制HepG2细胞增殖及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 索拉非尼 阿霉素 肝癌 细胞凋亡 hepg2细胞
原文传递
恩度联合吉西他滨对肝癌HepG2细胞的抑制作用及对HIF-1α、VEGF表达的影响 被引量:7
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作者 李丽娜 南克俊 徐瑞 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第8期1703-1707,共5页
目的:探讨恩度(ES)、吉西他滨(GEM)单药及联合作用在体外对人肝癌细胞系HepG2细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,以及加药前后HIF-1α、VEGF表达的变化。方法:MTT比色法观察不同浓度恩度、吉西他滨及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用。采... 目的:探讨恩度(ES)、吉西他滨(GEM)单药及联合作用在体外对人肝癌细胞系HepG2细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,以及加药前后HIF-1α、VEGF表达的变化。方法:MTT比色法观察不同浓度恩度、吉西他滨及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用。采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞凋亡率的影响。免疫组织化学技术检测上述药物单独或联合应用时HIF-1α、VEGF的表达差异。结果:恩度单药对HepG2细胞无明显增殖抑制及诱导细胞凋亡作用;吉西他滨单药及联合恩度对HepG2细胞有明显抑制作用,且均呈明显的剂量依赖关系,均可诱导细胞凋亡,联用时有协同作用(P<0.05)。加药组与空白组相比、联合用药组与单药组相比,HIF-1α、VEGF的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:吉西他滨单药以及与恩度联合能够抑制人肝癌HepG2细胞并诱导凋亡。两药联合有协同作用。其机制可能与HIF-1α、VEGF有关。 展开更多
关键词 恩度 吉西他滨 hepg2细胞 细胞凋亡 HIF-1Α VEGF
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恩度与阿霉素联用对人肝癌HepG2细胞生长的抑制作用 被引量:4
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作者 雷燕 南克俊 +1 位作者 梁璇 卢创新 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第6期1037-1040,共4页
目的:体外观察恩度与阿霉素联用对人肝癌细胞系HepG2细胞增殖的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度阿霉素、恩度及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用,采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞的凋亡及周期影响。结果:化疗... 目的:体外观察恩度与阿霉素联用对人肝癌细胞系HepG2细胞增殖的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度阿霉素、恩度及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用,采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞的凋亡及周期影响。结果:化疗药物单独应用时,对HepG2细胞的抑制作用呈明显的剂量效应依赖关系。阿霉素与恩度均可诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期,且联用时有协同作用。结论:恩度与化疗药物联合应用时的具有协同效应。 展开更多
关键词 恩度 肝肿瘤 hepg2细胞 细胞凋亡
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拓扑替康诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的初步研究 被引量:6
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作者 张军 蒲淑萍 周宇箭 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1305-1309,共5页
背景与目的:拓扑替康(topotecan,TPT)是新一代水溶性、半合成喜树碱类衍生物,系拓扑异构酶I抑制剂、细胞周期特异性抗肿瘤药物;肝癌为我国发病率居第三位的恶性肿瘤,现有治疗方法的临床疗效均不理想。本文研究TPT诱导肝癌细胞株HepG2凋... 背景与目的:拓扑替康(topotecan,TPT)是新一代水溶性、半合成喜树碱类衍生物,系拓扑异构酶I抑制剂、细胞周期特异性抗肿瘤药物;肝癌为我国发病率居第三位的恶性肿瘤,现有治疗方法的临床疗效均不理想。本文研究TPT诱导肝癌细胞株HepG2凋亡的作用,及其细胞毒作用。方法:运用MTT、HE染色、透射电镜、流式细胞仪、免疫组化技术等实验方法,对TPT杀伤HepG2细胞的程度进行了测定并观察了其诱导凋亡的过程。结果:TPT能通过诱导HepG2细胞凋亡的方式,杀伤HepG2细胞,TPT对HepG2细胞具有较强的体外杀伤作用,并存在明显的剂量、时间依赖关系,IC50约为95μg/L。TPT将HepG2细胞阻断在S期,并进一步诱导其凋亡。凋亡形态特征表现为典型的间期凋亡:细胞核染色质固缩,呈新月形聚集于核膜周缘,胞质浓缩,出现空泡。在TPT诱导HepG2细胞凋亡的过程中,不影响bcl-2基因蛋白正常表达(P>0.05)。结论:TPT能诱导HepG2细胞凋亡,细胞毒性较强。 展开更多
关键词 肝癌 拓扑替康 肝癌细胞株hepg2 细胞凋亡
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