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丹参酮ⅡA诱导早幼粒细胞白血病细胞分化及其分子机制研究 被引量:63
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作者 梁勇 羊裔明 +3 位作者 袁淑兰 孟文彤 刘霆 贾永前 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期23-26,共4页
目的 探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA ,TanⅡA)对急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞诱导分化的作用及其分子机制。方法 将APL细胞株NB4细胞与TanⅡA在体外共同培养 5天 ,观察细胞形态变化 ,并检测药物作用前后细胞NBT还原能力 ,用流式细... 目的 探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA ,TanⅡA)对急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞诱导分化的作用及其分子机制。方法 将APL细胞株NB4细胞与TanⅡA在体外共同培养 5天 ,观察细胞形态变化 ,并检测药物作用前后细胞NBT还原能力 ,用流式细胞术测定细胞增殖周期、c myc、bcl 2、p5 3、c fos、CD3 3 及CD11b表达。结果  0 .5 μg/mlTanⅡA可诱导 (91.3± 2 .1) %的NB4细胞向终末细胞分化。其中 ,中、晚幼粒细胞占 0 .2 6 ,杆状及分叶核细胞占 0 .6 8;细胞生长明显抑制 ;NBT还原能力显著增强 ;CD3 3 表达下降 ,CD11b表达升高 ;与全反式维甲酸 (ATRA)相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。流式细胞术分析发现 ,TanIIA处理组细胞被阻滞于G0 /G1期 ,S期细胞数明显减少 ,增殖指数降低 ,c myc、bcl 2基因蛋白表达降低 ,c fos、p5 3基因蛋白表达增加。结论 TanⅡA体外能使NB4细胞分化成熟 ,增殖能力下降。其机制可能是通过调控与NB4细胞增殖、分化相关的基因表达 ,抑制细胞DNA合成 ,从而抑制细胞增殖 ,诱导细胞分化。 展开更多
关键词 丹参酮 白血病 细胞分化 分子机制
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黄芪多糖对TA2小鼠乳腺癌MA-891移植瘤生长及HSP70表达的影响 被引量:51
2
作者 谷俊朝 余微波 +2 位作者 王宇 张忠涛 屈翔 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第20期1534-1537,共4页
目的:在复制津白二号小鼠乳腺癌模型的基础上,应用黄芪多糖干预,观测肿瘤生长免疫情况、热休克蛋白(heat-shockprotein,HSP)、血管内皮生长因子(vascularendotheli-algrowthfactor,VEGF)及凋亡相关蛋白Bcl-2的表达情况,探讨热休克蛋白... 目的:在复制津白二号小鼠乳腺癌模型的基础上,应用黄芪多糖干预,观测肿瘤生长免疫情况、热休克蛋白(heat-shockprotein,HSP)、血管内皮生长因子(vascularendotheli-algrowthfactor,VEGF)及凋亡相关蛋白Bcl-2的表达情况,探讨热休克蛋白在乳腺肿瘤病理生理机制中的作用,了解黄芪多糖对乳腺肿瘤生物学行为的影响,从分子生物学水平探索其作用机制。方法:将对数生长期的乳腺癌细胞MA891接种于TA2小鼠皮下,模型建立后随机分为两组,每组10只,生理盐水组(A组)和黄芪多糖组(B组),黄芪多糖组小鼠自接种后第2天,给予成人用量6倍的黄芪多糖粉针剂溶于生理盐水中皮下注射(200mg/kg),而生理盐水组则给予同等量的生理盐水皮下注射,连续治疗23d活杀,MTT法检测小鼠淋巴细胞活性,对比肿瘤瘤质量变化,免疫组化法检测HSP70、VEGF和Bcl-2表达。结果:治疗组小鼠瘤质量有所减轻(抑瘤率为13·56%),但两组相比差异无统计学意义(3·32±1·96vs2·87±1·65,P>0·05),而治疗组淋巴细胞活性显著提高(吸光度OD570值分别为1·941±0·025vs1·985±0·023,P<0·05),肿瘤组织HSP70、VEGF和Bcl-2表达均有显著降低(光密度分别为0·28±0·37vs0·21±0·22,P<0·05;0·31±0·41vs0·23±0·15,P<0·05;0·26±0·11vs0·22±0·16,P<0·05)。结论:黄芪多糖提高了荷瘤小鼠淋巴细胞免疫活性,并抑制了肿瘤血管生成及细胞凋亡相关因子的表达,体现出一定的抑瘤作用,而热休克蛋白70亦参与了乳腺肿瘤的病理生理过程,并与肿瘤血管生成和细胞凋亡存在密切的关系。 展开更多
关键词 黄芪/药理学 多糖类/药理学 乳腺肿瘤 乳房肿瘤 实验性 细胞系 热休克蛋白质70 肿瘤模型 动物 小鼠
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siRNA逆转K562/A02细胞多药耐药的研究 被引量:42
3
作者 彭智 肖志坚 +4 位作者 王一 刘澎 蔡英林 冯文莉 韩忠朝 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期5-7,共3页
目的 研究小分子干扰RNA片段 (smallinterferingRNAs,siRNA)对白血病多药耐药细胞系K5 6 2 A0 2mdr1基因和P 糖蛋白 (P gp)表达及功能的影响。方法 根据mdr1基因已知序列设计 3条含 2 1个碱基的siRNA(si mdr1 1,si mdr1 2 ,si mdr1 3... 目的 研究小分子干扰RNA片段 (smallinterferingRNAs,siRNA)对白血病多药耐药细胞系K5 6 2 A0 2mdr1基因和P 糖蛋白 (P gp)表达及功能的影响。方法 根据mdr1基因已知序列设计 3条含 2 1个碱基的siRNA(si mdr1 1,si mdr1 2 ,si mdr1 3)及阴性对照 (si neg) ,在脂质体的介导下转染K5 6 2 A0 2细胞 ;用RT PCR分析mdr1mRNA的表达 ;流式细胞术检测P gp表达和细胞内柔红霉素积累量 ;MTT法检测阿霉素对K5 6 2 A0 2细胞的半数抑制浓度 (IC50 )。结果  3条siRNA均能不同程度地逆转K5 6 2 A0 2细胞的多药耐药。第 3条序列能更有效地封闭mdr1基因 ,使mdr1mRNA相对水平下降(5 8.0± 1 5 4 ) % ;P gp表达由处理前的 (76 .0± 1.0 ) %降到处理后的 (19.6± 1.9) % ;对阿霉素药物敏感性的相对逆转效率为 70 .4 % ;同时使K5 6 2 A0 2细胞内柔红霉素积累量增加。结论 siRNA可逆转mdr1基因编码蛋白P gp介导的多药耐药。 展开更多
关键词 RNA干扰技术 多药耐药 白血病 阿霉素 药物敏感性 P-糖蛋白
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蟾蜍灵对肝癌细胞SMMC 7721的细胞毒作用及生长相关基因表达的影响 被引量:42
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作者 陈小义 呼文亮 +2 位作者 徐瑞成 陈莉 钱进 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期293-296,共4页
为探讨蟾蜍灵的抗癌作用机理 ,以肝癌SMMC772 1细胞为靶细胞 ,应用噻唑蓝还原法检测细胞毒作用 ,双荧光染色法和DNA电泳技术检测细胞凋亡与坏死 ;免疫组织化学方法检测细胞生长相关基因p2 1waf1/cip1和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达 .... 为探讨蟾蜍灵的抗癌作用机理 ,以肝癌SMMC772 1细胞为靶细胞 ,应用噻唑蓝还原法检测细胞毒作用 ,双荧光染色法和DNA电泳技术检测细胞凋亡与坏死 ;免疫组织化学方法检测细胞生长相关基因p2 1waf1/cip1和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达 .结果表明 ,0 .0 1μmol·L- 1及以上浓度蟾蜍灵对SMMC772 1细胞具有显著细胞毒作用 ,形态学和DNA片段化检测证实蟾蜍灵诱导的细胞死亡以凋亡为主 ;p2 1waf1/cip1在蟾蜍灵诱导下表达上调 ,同时PCNA的表达下降 ,两者呈负相关 (P <0 .0 1) .提示蟾蜍灵通过上调p2 1waf1/cip1表达 ,下调PCNA表达 。 展开更多
关键词 蟾蜍灵 细胞毒性 肝癌 增殖细胞核抗原 基因表达 细胞系 SMMC7721细胞 细胞凋亡
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苦参碱对K562细胞端粒酶hTERT-mRNA表达及其酶活性影响作用的研究 被引量:37
5
作者 李旭芬 张苏展 +1 位作者 郑树 张行 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期391-393,共3页
目的:观察苦参碱对 K562细胞 hTERT- mRNA表达及端粒酶活性的影响作用 ,并明确两者的相关性。方法:以 0.1~ 2 mg/ml苦参碱处理 K562细胞 48h后, RT- PCR检测其 hTERT- mRNA表达,同时行 TRAP- PCR- ELISA端粒酶活性检测。结果 :K56... 目的:观察苦参碱对 K562细胞 hTERT- mRNA表达及端粒酶活性的影响作用 ,并明确两者的相关性。方法:以 0.1~ 2 mg/ml苦参碱处理 K562细胞 48h后, RT- PCR检测其 hTERT- mRNA表达,同时行 TRAP- PCR- ELISA端粒酶活性检测。结果 :K562细胞为一强端粒酶活性细胞株,在浓度分别为 0.1、 0 5、 1 0、 2 0 mg/ml苦参碱作用后, K562细胞 hTERT- mRNA表达明显受抑,同时伴有端粒酶活性下降,抑制率分别为 0 3%、 13 0%、 91 7%和 98 6%。结论:苦参碱可降低 K562细胞 hTERT- mRNA表达 ,同时伴端粒酶活性下降;端粒酶活性强度与 hTERT- mRNA表达有关。 展开更多
关键词 苦参碱 端粒酶 肿瘤细胞系 聚合酶链反应 hTERT-mRNA
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人卵巢癌细胞系HO-8910的建立及其生物学特性 被引量:41
6
作者 牟瀚舟 许沈华 +4 位作者 张奕荫 钱丽娟 黄晓曙 朱赤红 高永良 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期162-164,T013,共4页
以分化差的卵巢乳头状浆液性囊腺癌患者腹水为材料,建立了体外培养的人卵巢癌细胞系HO-8910。细胞已传代130次,生长良好;组织学和超微结构均显示该细胞具有恶性上皮细胞特征;染色体数目分布在45~300之间,众数为5... 以分化差的卵巢乳头状浆液性囊腺癌患者腹水为材料,建立了体外培养的人卵巢癌细胞系HO-8910。细胞已传代130次,生长良好;组织学和超微结构均显示该细胞具有恶性上皮细胞特征;染色体数目分布在45~300之间,众数为54(42%),流式细胞仪检测DNA指数为1.45,均呈超二倍体;该细胞能分泌性激素,并有激素受体存在;裸鼠移植瘤与患者原始肿瘤病理形态基本一致;细胞经液氮冻存后复苏良好。该细胞系的建立为卵巢癌防治研究提供了体外实验材料。 展开更多
关键词 细胞株 卵巢肿瘤 细胞分化 HO-8910
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草鱼肾组织细胞系CIK的建立及其生物学特性 被引量:45
7
作者 左文功 钱华鑫 +2 位作者 许映芳 杜森英 杨先乐 《水产学报》 CAS 1986年第1期11-17,共7页
作者于1982年1月开始进行草鱼肾组织单层细胞培养,至今已连续培养32个月,传至l20多代,建立了细胞系,定名为草鱼肾组织细胞系(CIK)。本文介绍了原代和传代培养、细胞形态、细胞生长速度和分裂指数、细胞的保存和对温度的适应性、细胞染... 作者于1982年1月开始进行草鱼肾组织单层细胞培养,至今已连续培养32个月,传至l20多代,建立了细胞系,定名为草鱼肾组织细胞系(CIK)。本文介绍了原代和传代培养、细胞形态、细胞生长速度和分裂指数、细胞的保存和对温度的适应性、细胞染色体分析以及细胞系对病毒敏感性的试验和研究结果。CIK生长迅速、适应性强、以20°—38℃生长较好,28℃左右生长稳定,pH为6.5时仍能保持致密单层,染色体数为非整倍体,众数为55。对草鱼出血病左右病毒FRV具敏感性。 展开更多
关键词 草鱼 肾组织细胞系 CIK 生物学特性 细胞培养 出血病
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蝎毒抗癌多肽对4种人肿瘤细胞系的作用 被引量:48
8
作者 董伟华 孔天翰 +4 位作者 韩雪飞 王成裕 雷留根 魏玲 郑湘豫 《河南医科大学学报》 1999年第1期52-55,共4页
目的:观察蝎毒抗癌多肽(antineoplasticpolypeptidefromButhusMatensivenom,APBMV)对人肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)法、台盼蓝拒染法和集落形成观察... 目的:观察蝎毒抗癌多肽(antineoplasticpolypeptidefromButhusMatensivenom,APBMV)对人肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)法、台盼蓝拒染法和集落形成观察为指标,丝裂霉素C(MMC)为阳性对照药品,以APBMV4mg/L,8mg/L,12mg/L和16mg/L处理4种人肿瘤细胞(人早幼粒白血病细胞株HL60、人肝细胞癌细胞株SMMC7721、人低分化鼻咽上皮癌细胞株CNE2Z和人胃癌细胞株MGC803),选用不同的作用时间点,分别观察APBMV对上述细胞的影响。结果:APBMV对HL60、SMMC7721、CNE2Z和MGC803细胞均有显著的细胞毒性作用,HL60和SMMC7721比后两者显示出更好的量效关系(r=0.9828,r=0.9863,P=0.02)。APBMV处理HL60和SMMC7721细胞24h,48h和96h后,两种细胞的生长均受到抑制(P<0.05,P<0.01),并有显著的剂量效应关系;处理SMMC7721细胞24h,48h和96h时APBMV的IC50分别是15.87mg/L、13.05mg/? 展开更多
关键词 蝎毒 细胞株 抗癌药 APBMV
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人鼻咽癌顺铂耐药细胞系(CNE2/DDP)的建立及耐药相关基因的筛选 被引量:37
9
作者 姜润德 张立新 +6 位作者 岳文 朱运峰 路浩军 刘昕 岑信棠 关新元 李春海 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期337-345,共9页
背景与目的:化疗是鼻咽癌最主要的辅助治疗手段,然而癌细胞耐药性的产生常常导致药物治疗的失败,因此,筛查鼻咽癌耐药相关基因、寻找逆转药物耐受的分子靶点具有重要的现实意义。本研究首先用鼻咽癌药物敏感细胞CNE2作为亲本细胞诱导建... 背景与目的:化疗是鼻咽癌最主要的辅助治疗手段,然而癌细胞耐药性的产生常常导致药物治疗的失败,因此,筛查鼻咽癌耐药相关基因、寻找逆转药物耐受的分子靶点具有重要的现实意义。本研究首先用鼻咽癌药物敏感细胞CNE2作为亲本细胞诱导建立耐药细胞系,并在此基础上,筛选鼻咽癌耐药相关基因,探讨耐药性产生的分子机制。方法:以顺铂(cisplatin,DDP)为诱导剂,采用大剂量冲击与剂量逐渐递加相结合的方法,诱导建立人鼻咽癌耐药细胞系CNE2/DDP。采用MTT法测定药物的敏感性、流式细胞术测定细胞周期及细胞内荧光药物罗丹明的蓄积,并进行细胞生长曲线测绘、倍增时间测定及细胞形态学观察。随后,采用基于PCR技术改良的消减杂交法筛选并克隆耐药相关基因。反向点杂交鉴定排除假阳性,DNA测序分析差异表达片段,RT-PCR对差异表达的基因片段做进一步验证。结果:所建立的人鼻咽癌耐药细胞系CNE2/DDP对DDP的耐药指数为27.9,对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)及长春新碱(vincristine,VCR)的耐药指数分别可达227.9和55.5,表明其具有多药耐药的特征。流式细胞测定显示耐药细胞内罗丹明的蓄积明显低于敏感细胞(12.98vs.243.62)。镜下观察耐药细胞体积变小,形态变圆,细胞倍增时间明显延长(26hvs.19h)。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 细胞多 多药耐药 消减杂交
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14株(亚株)人鼻咽癌细胞的放射生物特性(英文) 被引量:49
10
作者 夏云飞 李满枝 +4 位作者 黄冰 陈剑经 李志强 汪惠民 William A.Brook 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第7期683-687,共5页
目的:了解14株(亚株)人鼻咽癌细胞的放射生物学特性。材料与方法:采用集落存活分析法分析中国建成的14株(亚株)人鼻咽癌细胞的特性;除了CNE1之外,所有的细胞均为低分化鳞癌细胞,实验求得的放射剂量存活曲线用线性二次模型进行... 目的:了解14株(亚株)人鼻咽癌细胞的放射生物学特性。材料与方法:采用集落存活分析法分析中国建成的14株(亚株)人鼻咽癌细胞的特性;除了CNE1之外,所有的细胞均为低分化鳞癌细胞,实验求得的放射剂量存活曲线用线性二次模型进行拟合,用Fertil 和Malais 介绍的方法和原理计算存活曲线的初斜率(α),平均抑制剂量(mean inactivation dose, MID)及2 Gy处的存活分数(SF2)。结果:α:0.001~0.81, MID:1.11~2.46, SF2:0.17~0.66, 14株(亚株)鼻咽癌细胞的放射敏感性变化较大,来源同一个母株(SUNE1)的8个亚株之间的放射敏感性存在着差别。结论:鼻咽癌细胞在个体内和个体间变化较大;因此,在临床制定鼻咽癌的治疗计划时,要考虑鼻咽癌的个体放射生物学特性。 展开更多
关键词 鼻咽癌 细胞株 放射生物学
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Tumor blood vessels formation in osteosarcoma:vasculogenesis mimicry 被引量:45
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作者 蔡宣松 贾永伟 +1 位作者 梅炯 汤如勇 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2004年第1期94-98,共5页
BACKGROUND: Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarco... BACKGROUND: Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarcoma and to illustrate mechanism of tumor blood vessels formation in osteosarcoma. METHODS: Osteosarcoma cell lines (U-2OS) were tested for their ability to form tubular networks in three-dimensional culture containing type I collagen. The structures of the tubular networks were observed with phase contrast microscope and transmission electron microscope (TEM). Morphometric studies using hematoxylin and eosin (HE) stain and CD31 immunohistochemical stain to show tumor-lined channels in human osteosarcoma were also performed. RESULTS: Observation with light microscope and TEM showed that highly aggressive osteosarcoma cell lines (U-2OS) formed networks containing channels when grown in three-dimensional culture containing type I collagen, in the absence of endothelial cells or fibroblasts. Morphometric observation using HE stain and CD31 immunohistochemical stain showed that tumor cell-lined channels were also detected in vivo in osteosarcoma; by comparison, all vascular areas in the pedicle of osteochondroma or outside osteochondroma were endothelial-lined. CONCLUSION: These observations strongly suggest that aggressive osteosarcoma cells may generate vascular channels that facilitate tumor perfusion independent of tumor angiogenesis and have the ability of vasculogenic mimicry. 展开更多
关键词 Bone Neoplasms cell line Tumor Collagen Humans IMMUNOHISTOCHEMISTRY Neovascularization Pathologic OSTEOSARCOMA Research Support Non-U.S. Gov't
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三氧化二砷诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的实验研究 被引量:35
12
作者 陈洪 秦叔逵 +3 位作者 陈惠英 潘其声 马军 刘文虎 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期336-338,共3页
MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞仪分析法观察As_2O_3对人肝癌细胞林SMMC-7721的作用。结果发现:AS_2O_3可显著抑制SMMC-7721细胞的生长;经药物作用后,AO/EB染色时,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪... MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞仪分析法观察As_2O_3对人肝癌细胞林SMMC-7721的作用。结果发现:AS_2O_3可显著抑制SMMC-7721细胞的生长;经药物作用后,AO/EB染色时,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪上可见亚Gl峰;凋亡呈剂量、时间依赖性特点;AS_2O_3使细胞周期阻止于G_2/M期。以上表明:As_2O_3可诱导人肝癌细胞株凋亡,可望为临床应用砷剂治疗肝癌提供实验依据。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肿瘤细胞株 细胞凋亡 三氧化二砷
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As_2O_3对K562细胞BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化的影响 被引量:28
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作者 肖冬梅 孙关林 +3 位作者 苏卉 邬维礼 陈竺 王振义 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期637-639,共3页
目的 进一步阐明As2O3 诱导K562 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为As2O3 在临床上的应用提供理论依据。方法 采用免疫沉淀、Western blot、生物化学及免疫荧光等方法研究了As2O3对BCR/ABL蛋... 目的 进一步阐明As2O3 诱导K562 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为As2O3 在临床上的应用提供理论依据。方法 采用免疫沉淀、Western blot、生物化学及免疫荧光等方法研究了As2O3对BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化及其所介导的信号途径和某些凋亡相关蛋白表达的影响。结果 1μmol/LAs2O3 使细胞内多种蛋白酪氨酸磷酸化减少,而且BCR/ABL蛋白自身酪氨酸磷酸化亦减少,但0 .1 μmol/LAs2O3 对蛋白酪氨酸磷酸化的影响不明显;As2O3 对蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP) 活性未见明显影响;As2O3 下调JAK2 蛋白的表达,但对STAT1 和STAT2 蛋白的表达以及STAT1 蛋白酪氨酸磷酸化无影响;As2O3 亦不影响凋亡相关蛋白Bcl2、BclxL/S、Bax、ICH1L、p53、PARP的表达,As2O3 亦使K562 细胞的PML蛋白降解。结论 As2O3 可能通过减少细胞内某些蛋白,尤其是BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化和( 或)下调JAK2 蛋白的表达而干扰BCR/ABL致癌信号的传导,引起K562 细胞凋亡和抑制其生长。 展开更多
关键词 信号传递 酪氨酸磷酸化酶 砷剂 白血病 K562细胞
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大鼠肝星状细胞系的建立及其生物学特性的研究 被引量:28
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作者 冷希圣 翁山耕 +3 位作者 李涛 魏玉华 彭吉润 杜如昱 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期269-274,共6页
目的 建立并鉴定肝星状细胞 (HSC)细胞系。 方法 采用肝脏离体胶原酶灌注消化及密度梯度离心的方法分离培养大鼠的HSC ;通过体外长期传代培养后建立 1株细胞系 ,应用细胞形态学观察、细胞倍增时间测定、细胞生长曲线绘制、染色体分... 目的 建立并鉴定肝星状细胞 (HSC)细胞系。 方法 采用肝脏离体胶原酶灌注消化及密度梯度离心的方法分离培养大鼠的HSC ;通过体外长期传代培养后建立 1株细胞系 ,应用细胞形态学观察、细胞倍增时间测定、细胞生长曲线绘制、染色体分析、双层软琼脂培养、免疫细胞化学检测、RT PCR检测、聚硅酮膜培养法观测HSC的收缩等方法对其生物学特性进行研究。 结果 HSC细胞系已传了 78代 ,保持着肌成纤维样细胞的形态学特点。细胞倍增时间为 36 5h ;细胞的染色体众数 4 2条 ,为正常大鼠体细胞的染色体表型 ;双层软琼脂培养未见细胞克隆形成 ;免疫细胞化学检测表明 ,细胞系表达Desmin、GFAP、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α SMA、iNOS、ICAM 1、TGF α ;RT PCR检测表明 ,该细胞系表达TGF β、ICAM 1;聚硅酮膜培养法显示 ,HSC细胞系能在ET 1作用下产生收缩反应。结论 HSC细胞系符合建系标准 ,是 1株新建立的大鼠肝星状细胞系 ,命名为rHSC 99,可作为肝硬化、门静脉高压症实验研究的模型。 展开更多
关键词 大鼠 肝星状细胞系 生物学特性 肝硬化 门静脉高压症 动物模型
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奶牛乳腺上皮细胞系的建立 被引量:41
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作者 陈建晖 佟慧丽 +1 位作者 李庆章 高学军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期743-747,共5页
采用组织块种植法,成功地培养了奶牛乳腺上皮细胞,并利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行了鉴定。通过对细胞接种存活率、群体倍增时间、生长曲线、形态学等生物学性状的检测,建立并鉴定了正常培养的奶牛乳腺上皮细胞系,... 采用组织块种植法,成功地培养了奶牛乳腺上皮细胞,并利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行了鉴定。通过对细胞接种存活率、群体倍增时间、生长曲线、形态学等生物学性状的检测,建立并鉴定了正常培养的奶牛乳腺上皮细胞系,细胞传至20代以上时仍保持旺盛的增殖活力。通过对细胞传代及反复冻存,建立了奶牛乳腺上皮细胞系,获得了大量的乳腺上皮细胞。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺上皮细胞 细胞系
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木犀草素抗肿瘤细胞增殖及增敏抗肿瘤药物作用研究 被引量:39
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作者 王洪燕 全康 +2 位作者 蒋燕灵 吴加国 唐修文 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期30-36,共7页
目的:研究黄酮类化合物木犀草素(Luteolin)对体外抗肿瘤细胞增殖,以及其与抗肿瘤药联用的增敏作用。方法:选用5μmol/L或10μmol/L木犀草素与不同浓度抗肿瘤药联合作用肿瘤细胞24 h后,用MTS法检测其体外抗增殖作用。结果:5μmol/L木犀... 目的:研究黄酮类化合物木犀草素(Luteolin)对体外抗肿瘤细胞增殖,以及其与抗肿瘤药联用的增敏作用。方法:选用5μmol/L或10μmol/L木犀草素与不同浓度抗肿瘤药联合作用肿瘤细胞24 h后,用MTS法检测其体外抗增殖作用。结果:5μmol/L木犀草素对人非小细胞肺癌细胞(A549)、人子宫颈癌细胞(Hela)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人胃腺癌细胞(AGS)、人胃癌细胞(MGC-803)的抗增殖作用均<20%,对人结肠癌细胞(Caco2)和人肝癌细胞(HepG2)的抗增殖作用约20%。Bexarotene单一用药时对Hela细胞抑制率达50%(IC50)的浓度约为2μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后IC50约0.2μmol/L,5μmol/L木犀草素与0.1μmol/L Bexarotene联用对Hela细胞的抗增殖作用达44%,Bexarotene与木犀草素联用在MGC-803、HepG2、A549细胞中增敏较小,在Caco2和MCF-7细胞中无增敏作用;顺铂单一用药时对Hela细胞的IC50>30μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后IC50约3μmol/L,联用后在MGC-803、HepG2和A549中增敏较小;博来霉素单一用药时对Hela细胞的IC50>100μmol/L,对A549细胞的IC50约为100μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后Hela细胞的IC50约为1μmol/L,与10μmol/L木犀草素联用后A549细胞的IC50约为10μmol/L。木犀草素与格列卫联用在MGC-803、HepG2、A549和AGS中增敏较小。结论:木犀草素在低于10μmol/L浓度时,对肿瘤细胞体外抗增殖作用较小。低浓度(5μmol/L^10μmol/L)的木犀草素在不同的肿瘤细胞中对抗肿瘤药的增敏作用强度不同,在Hela细胞中增敏作用最显著。 展开更多
关键词 细胞系 肿瘤 药物作用 木犀草素 投药和剂量 博来霉素 抗肿瘤药 治疗应用 顺铂 药物疗法 联合 药物协同作用
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人胚胎干细胞系的初步建立 被引量:24
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作者 何志旭 黄绍良 +1 位作者 李予 张清学 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第19期1314-1318,共5页
目的 探讨用人受精卵建立人胚胎干细胞系。方法 将体外受精获得的人受精卵发育至胚泡期 ,用机械法去除胚泡透明带后 ,取出内细胞团 ,分散后接种在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上 ,进行传代培养。通过碱性磷酸酶染色、胚胎干细胞特异性表... 目的 探讨用人受精卵建立人胚胎干细胞系。方法 将体外受精获得的人受精卵发育至胚泡期 ,用机械法去除胚泡透明带后 ,取出内细胞团 ,分散后接种在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上 ,进行传代培养。通过碱性磷酸酶染色、胚胎干细胞特异性表面标志物检测、染色体核型分析和严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠体内畸胎瘤形成实验 ,对连续传代的细胞进行鉴定。结果  9枚受精卵在体外培养 5~ 7d后 ,5个存活并发育为胚泡 ,取出的内细胞团经接种培养 ,3个内细胞团存活 ,呈克隆性生长 ,发育为胚胎干细胞 ,并连续体外传代 7个月保持未分化状态 ,建系成功。 3个细胞系分别命名为CHE1、CHE2和CHE3。取 3个细胞系第 5、15和 30代的细胞进行碱性磷酸酶染色 ,均为阳性。对CHE3第 2 5、30、4 0代、CHE1和CHE2第 2 1、2 2、30代的细胞检测人胚胎干细胞表面标志SSEA 4、SSEA 3、TRA 1 6 0和GCTM 2 ,结果均为阳性 ;检测小鼠胚胎干细胞表面标志SSEA 1,结果为阴性。染色体核型分析为二倍体核型。将连续传代 5个月后 (30代左右 )的 3个细胞系接种到SCID小鼠体内 ,6周后均形成畸胎瘤 ,组织病理学检查显示含有 3个胚层的组织结构。结论 使用 5个人受精卵来源的胚泡 ,成功地在体外建立了 3个胚胎干细胞系 ,长期传代后仍保持胚胎干性和? 展开更多
关键词 胚胎干细胞 胚胎 细胞鉴定 胚泡期 受精卵 细胞培养 细胞鉴定 细胞生长 传代
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模拟IMRT模式的生物效应研究初探 被引量:30
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作者 钱立庭 杨伟志 刘新帆 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期431-433,共3页
目的模拟临床调强适形放疗的照射模式对人大肠癌细胞系HT-29进行生物效应变化的初步研究.方法采用指数生长期的HT-29细胞制成单细胞悬液,于接种后12 h内进行不同模式和剂量的照射.分成3个照射组:(1)急速照射组(包括0、1、2、3、5、7、1... 目的模拟临床调强适形放疗的照射模式对人大肠癌细胞系HT-29进行生物效应变化的初步研究.方法采用指数生长期的HT-29细胞制成单细胞悬液,于接种后12 h内进行不同模式和剂量的照射.分成3个照射组:(1)急速照射组(包括0、1、2、3、5、7、10Gy共7个剂量点),剂量点的照射完成时间为0~5 min,剂量率为6 Gy/min;(2)IMRT照射模式组(包括15 min完成照射组及30min完成照射组),剂量率同上,每组所含照射剂量点同急速照射组,其中15min和30min照射组指各剂量点完成照射时间分别是15 min和30min.采用成克隆分析法计算存活分数,运用多靶单击数学模型拟合曲线,求出Do、Dq等参数值.结果急速照射组、15 min照射组和30 min照射组的Dq值分别为1.54、1.74和1.72Gy;Do值分别为0.82、0.89和1.00Gy;SF2分别为0.448、0.548和0.558.结论 IMRT模式下随分次照射时间的延长,相对剂量率降低,从而导致生物效应下降. 展开更多
关键词 调强适形放射疗法 细胞存活曲线 细胞系 肿瘤 生物效应 模拟临床 效应研究 IMRT HT-29细胞 照射剂量
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蟾蜍灵诱导HL-60细胞凋亡过程中对Bcl-2、Survivin、Smac/DIABLO表达的影响 被引量:33
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作者 田昕 罗颖 +4 位作者 刘云鹏 侯科佐 金波 张敬东 王甦 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期21-24,共4页
目的研究蟾蜍灵在诱导HL-60细胞凋亡过程中,对线粒体凋亡途径相关基因Bcl-2、 Bax、Survivin及Smac/DIABLO表达的影响。方法采用锥虫蓝拒染法检测细胞存活情况,细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot分析Bcl-2、Bax、Sma... 目的研究蟾蜍灵在诱导HL-60细胞凋亡过程中,对线粒体凋亡途径相关基因Bcl-2、 Bax、Survivin及Smac/DIABLO表达的影响。方法采用锥虫蓝拒染法检测细胞存活情况,细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot分析Bcl-2、Bax、Smac/DIABLO、Survivin及caspase-3蛋白表达,RT-PCR检测Survivin mRNA表达。结果蟾蜍灵抑制HL-60细胞增殖,24,48及72 h的IC50 值分别为25.8,8.0及2.1 nmoL/L。蟾蜍灵大于50.0 nmol/L时可明显诱导HL-60细胞凋亡。50.0 nmol/L蟾蜍灵作用6,12,24及48 h,Bcl-2蛋白表达分别下调至作用前的88.6%,53.3%,19.2%及 9.5%,而Bax蛋白表达无明显变化,Bcl-2/Bax比值由2.0分别降至1.7,1.1,0.4及0.2。Survivin蛋白表达分别下调至作用前的75.2%,54.8%,37.5%及20.3%;Survivin mRNA表达在作用6,12和24 h 后分别下调至作用前的85.7%,39.4%和12.5%,在作用48 h后几乎检测不到。50.0 nmol/L蟾蜍灵作用12,24及48 h,线粒体部分的Smac/DIABLO蛋白表达分别下调至作用前的77.5%,21.2%及 15.3%,而胞浆部分的Smac/DIABLO蛋白表达分别上调至作用前的1.4,2.0.及3.5倍。蟾蜍灵作用 8-48 h可检测到caspase-3的活化亚基。结论蟾蜍灵诱导的HL-60细胞凋亡与Bcl-2及Survivin表达下调、线粒体释放Smac/DIABLO及caspase-3活化有关。 展开更多
关键词 蟾蜍灵 基因 BCL-2 基因 surivivin 基因 Smac/DIABLO 细胞系 HL-60 细胞凋亡
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SRB法与MTT法细胞计数应用比较 被引量:29
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作者 周思朗 屈艳妮 +2 位作者 张健 汪森明 张积仁 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期2615-2617,2620,共4页
目的比较SRB(SulforhodamineB)法与MTT法细胞计数的灵敏性与稳定性。方法取4种不同类型细胞系指数生长期细胞,调整细胞密度为1×106,并按比例稀释为0.078-10×105细胞梯度。分别用SRB法与MTT法测量各细胞梯度吸光度(A),分析其... 目的比较SRB(SulforhodamineB)法与MTT法细胞计数的灵敏性与稳定性。方法取4种不同类型细胞系指数生长期细胞,调整细胞密度为1×106,并按比例稀释为0.078-10×105细胞梯度。分别用SRB法与MTT法测量各细胞梯度吸光度(A),分析其与相应细胞数目的相关性。SRB法与MTT法各随机取100个A值,测量其在2、16、24h和7d后的A值,比较这两种方法的稳定性。结果SRB法与MTT法测定的A值与不同细胞系细胞数目均有极好的相关性;SRB法的测定结果几乎不随时间而变,而MTT法的测定结果受时间影响较大。结论SRB法相对于MTT法是进行大规模细胞计数与细胞生长曲线测定前途更加光明的实验方法。 展开更多
关键词 Sulforhoclamine B MTT 密度 生长曲线 细胞系
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