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celB基因标记法研究酸性土花生接种及施钼效果 被引量：8
1
作者 于景丽 张小平 +2 位作者 李登煜 陈强 王可美 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期250-253,共4页
以缺钼酸性紫色土为供试土壤做盆栽试验,选用celB标记的三株慢生型花生根瘤菌celB3-5、celB3-7、celB4-5接种天府9号花生。通过标记根瘤菌形成的根瘤能与检测试剂产生颜色反应的特征,检测施钼及施不同浓度的钼对花生-根瘤菌有效性和竞... 以缺钼酸性紫色土为供试土壤做盆栽试验,选用celB标记的三株慢生型花生根瘤菌celB3-5、celB3-7、celB4-5接种天府9号花生。通过标记根瘤菌形成的根瘤能与检测试剂产生颜色反应的特征,检测施钼及施不同浓度的钼对花生-根瘤菌有效性和竞争性的影响。结果表明,缺钼酸性紫色土上单施钼、单接种、接种配合施钼均能促进花生与根瘤菌的共生固氮效应和竞争结瘤能力,但接种配合施钼的效果最好,单接种的效果次之,单施钼的效果差。单施钼时,0.4%的钼酸铵拌种效果好,接种根瘤菌时,0.2%的效果好。供试菌株中celB4-5的有效性和竞争性最强,celB3-7次之,celB3-5差。 展开更多
关键词 缺钼 celb基因 花生根瘤菌 有效性 竞争性
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一种基于单交换原理的地衣芽孢杆菌基因敲除方法及应用 被引量：5
2
作者 韩海红 汪俊卿 +3 位作者 王腾飞 肖静 韩登兰 王瑞明 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期63-69,共7页
目的:基于同源单交换原理构建地衣芽孢杆菌基因快速敲除方法,提高基因敲除效率。方法:以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)20085内切纤维素酶基因celb为拟敲除对象,利用重叠PCR技术将celb基因内约500bp片段与氯霉素抗性基因(Cmr)相... 目的:基于同源单交换原理构建地衣芽孢杆菌基因快速敲除方法,提高基因敲除效率。方法:以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)20085内切纤维素酶基因celb为拟敲除对象,利用重叠PCR技术将celb基因内约500bp片段与氯霉素抗性基因(Cmr)相连接,经末端单酶切后电转化至B.licheniformis 20085感受态细胞中,仅通过一次同源单交换,将抗性基因Cmr插入至celb基因内部,实现目的基因的敲除。结果:经过氯霉素抗性筛选和基因组PCR鉴定,成功获得celb基因缺失菌株B.licheniformis 20085Δcelb;发酵验证结果显示,B.licheniformis 20085Δcelb较原始菌株滤纸崩解能力显著降低,其中发酵60h后内切纤维素酶(CMC酶)活力由1.86U/ml降低至0.50U/ml,表明celb基因在地衣芽孢杆菌降解纤维素的过程中起着重要作用。结论:通过重叠PCR技术结合同源单交换原理能够实现地衣芽孢杆菌目的基因的快速敲除,为该菌株甚至其它微生物提供了一种基因功能快速鉴定的手段。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 同源单交换 基因敲除 celb基因
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用celB基因检测慢生花生根瘤菌竞争性的可行性
3
作者 王可美 张小平 +2 位作者 陈强 于景丽 LINDSTRM Kristina 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期423-425,共3页
采用大肠杆菌和根瘤菌接合的方法,将celB标记基因分别导入了两株慢生型花生根瘤菌Spr3-5和Spr4-5中.对出发菌株和标记菌株的代时测定结果表明,二者之间没有显著差异.在标记菌株与出发菌株等量接种的前提下,比较了二者的竞争结瘤能力;结... 采用大肠杆菌和根瘤菌接合的方法,将celB标记基因分别导入了两株慢生型花生根瘤菌Spr3-5和Spr4-5中.对出发菌株和标记菌株的代时测定结果表明,二者之间没有显著差异.在标记菌株与出发菌株等量接种的前提下,比较了二者的竞争结瘤能力;结果显示,标记菌株形成的根瘤(蓝瘤)的占瘤率与50%相比,差异不显著.为了研究标记菌株与出发菌株的固氮有效性,测定了标记菌株与出发菌株各自共生植株的干重、全氮和叶绿素含量;结果表明,标记菌株与出发菌株的这3项指标之间没有显著差异.说明利用celB基因研究慢生花生根瘤菌的竞争结瘤能力是可行的. 展开更多
关键词 celb基因 慢生花生根瘤菌 竞争性
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高效苜蓿根瘤菌的筛选 被引量：8
4
作者 钟文文 张小平 Kristina Lindstrom 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期69-74,共6页
旨在利用celB基因标记技术从土著根瘤菌中筛选出与盛世苜蓿品种相匹配的有效性高、竞争性强的高效苜蓿根瘤菌株。从四川雅安、重庆北碚、万州采集野生苜蓿根瘤,采用平板划线法分离纯化获得93株纯菌株,通过与盛世品种在无氮水培液中进行... 旨在利用celB基因标记技术从土著根瘤菌中筛选出与盛世苜蓿品种相匹配的有效性高、竞争性强的高效苜蓿根瘤菌株。从四川雅安、重庆北碚、万州采集野生苜蓿根瘤,采用平板划线法分离纯化获得93株纯菌株,通过与盛世品种在无氮水培液中进行结瘤试验和有效性分析并结合菌株的地理来源,初筛出了与对照相比有效性较高的4株苜蓿根瘤菌,分别为Y6-1-1、BB1-8-1-1、BB2-2-1-1和WZ-6-2-2。进一步利用celB基因标记技术对这4株菌进行竞争性研究,通过供体大肠杆菌HAMBI2356与根瘤菌接合的方法成功地将celB基因导入4个菌株中,对标记基因可能会对标记菌株产生的影响进行检测,结果表明标记基因在标记菌株内能稳定传代,而且对标记菌株的生长、竞争性及有效性都没有显著影响,从而证明celB基因标记技术可以作为一种简便、直观而又有效的检测手段用于追踪根瘤菌株在土壤中的竞争性。进一步通过田间试验比较分析标记菌与土著菌的竞争结瘤能力和固氮有效性,结果表明Y6-1-1、BB2-2-1-1、WZ-6-2-2与对照相比在占瘤率、瘤重、总瘤数上差异显著,占瘤率都在72%以上,显著提高了植株的干重、叶绿素含量、全氮量和产量,其中WZ-6-2-2的有效性最高、竞争性最强,可以用于苜蓿盛世品种的接种。 展开更多
关键词 苜蓿 根瘤前 筛选 celb基因 竞争性 有效性
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celB基因标记法检测苜蓿根瘤菌竞争性的可行性研究 被引量：1
5
作者 钟文文 张小平 Kristina Lindstrom 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第7期1311-1312,1320,共3页
对celB基因标记法检测苜蓿根瘤菌竞争性的可行性进行了研究。通过供体大肠杆菌HAMBI2356与根瘤菌接合的方法成功地将celB基因导入到4株苜蓿根瘤菌株Y611、BB1811、BB2211和WZ622中,然后对标记基因可能会对标记菌株产生的影响进行了一系... 对celB基因标记法检测苜蓿根瘤菌竞争性的可行性进行了研究。通过供体大肠杆菌HAMBI2356与根瘤菌接合的方法成功地将celB基因导入到4株苜蓿根瘤菌株Y611、BB1811、BB2211和WZ622中,然后对标记基因可能会对标记菌株产生的影响进行了一系列检测,结果表明标记基因在标记菌株内能稳定传代,而且对标记菌株的生长、竞争性及有效性都没有显著影响,从而证明celB基因标记技术可以作为一种简便、直观而又有效的检测手段用于追踪根瘤菌株在土壤中的竞争性。 展开更多
关键词 苜蓿 根瘤菌 筛选 celb基因 竞争性 有效性
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基因标记法研究石灰性土施铁肥对花生根瘤菌固氮作用的影响 被引量：1
6
作者 于景丽 《内蒙古大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期546-549,共4页
以缺铁的石灰性紫色土为供试土壤做盆栽实验,选用三株慢生型花生根瘤菌及gusA和celB基因标记的菌株接种花生.结果发现,缺铁的石灰性紫色土上施铁肥能促进接种根瘤菌的有效性和竞争性;喷施0.2%的硫酸亚铁溶液的效果比0.3%的好;两种标记... 以缺铁的石灰性紫色土为供试土壤做盆栽实验,选用三株慢生型花生根瘤菌及gusA和celB基因标记的菌株接种花生.结果发现,缺铁的石灰性紫色土上施铁肥能促进接种根瘤菌的有效性和竞争性;喷施0.2%的硫酸亚铁溶液的效果比0.3%的好;两种标记方法检测到的占瘤率间无显著差异;供试菌株中Spr4-5的有效性和竞争性最强,接种菌株Spr4-5的花生产量最高,喷施0.2%的铁溶液时其产量比CK产量提高204.31%. 展开更多
关键词 gusA和celb基因标记方法 缺铁 花生根瘤菌 有效性 竞争性
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