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题名甜瓜cDNA-AFLP分析体系的建立
被引量：2
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作者
赵惠新
唐亚萍
祝长青
覃建兵
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机构
新疆师范大学分子生物学与生物信息研究室
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出处
《种子》
CSCD
北大核心
2009年第11期45-48,共4页
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基金
新疆维吾尔自治区重大科技专项科技支疆项目(20084010249)
国家自然科学基金(30960044
30960092)
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文摘
选用新疆甜瓜伽师和皇后为试材,研究了影响cDNA-AFLP反应体系的几个关键因素,建立了适合于甜瓜的cDNA-AFLP反应体系。结果表明:适用于甜瓜cDNA-AFLP分析的RNA可以用Trizol试剂提取的总RNA,双链cDNA合成应用置换法,双链酶切用VspⅠ、TaqⅠ和EcoRⅠ、MseⅠ,效果均能达到目标。相比较而言,VspⅠ、TaqⅠ酶切组合更为理想。酶切cDNA用量、连接产物、预扩增产物稀释倍数参照常规AFLP技术中的常用即可满足要求。检测采用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显色,操作较文献介绍的变性胶方法简单、方便。实验得到了较为理想的甜瓜mRNA指纹图谱,建立的反应体系可以应用于甜瓜差异基因表达分析等方面的研究。
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关键词
甜瓜
cdna-aflp体系
影响因素
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Keywords
Cucumis melon（Cucumis me/on L. ）
cdna-aflp analysis system
influencing factor
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分类号
S562
[农业科学—作物学]
Q503
[生物学—生物化学]
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题名建立番木瓜性别研究的cDNA-AFLP分析体系
被引量：3
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作者
李亚丽
沈文涛
言普
熊建平
周鹏
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机构
中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带生物技术重点实验室
海南大学
茂名学院静电研究所
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出处
《热带作物学报》
CSCD
2009年第4期515-519,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(No.30760134)(No.30560082)
中央级事业单位基本科研业务费(2008)资助
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文摘
以番木瓜幼苗为材料,利用多重PCR技术快速鉴定其性别,建立适合番木瓜性别研究的cDNA-AFLP分析体系,分析影响cDNA-AFLP分析体系的各种可能因素(RNA提取、酶切与连接效率、预扩增效果等),并对影响选择性扩增反应的各因子进行优化。结果表明,选择性扩增的最佳体系,即在反应体系中,各因素终浓度分别为:Tap酶0.06U/μL;Mg2+2.4mmol/L;dNTP2.0mmol/L;引物0.48μmol/L。通过优化体系得到的选择性扩增产物,银染检测后条带清晰稳定。表明成功建立了适合番木瓜性别研究的cDNA-AFLP分析体系。
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关键词
番木瓜
性别
cdna-aflp分析体系
选择性扩增体系
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Keywords
Carica papaya
sex
cdna-aflp analysis system
selective amplification analysis
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分类号
S66
[农业科学—果树学]
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