8-Br-cAMP对人食管癌Eca-109细胞生长相关基因表达的影响 被引量：18

1

作者 陈奎生 郑乃刚 +2 位作者 吴景兰 丁一 王一菱 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期227-229,I009,共4页

目的探讨８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人Ｅｃａ－１０９细胞与生长相关基因表达的影响。方法体外培育的人食管癌Ｅｃａ－１０９细胞受８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理后，用原位杂交、免疫组织化学及ＲＮＡ、蛋白质斑点印迹技术研究了与细胞生长相关的... 目的探讨８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人Ｅｃａ－１０９细胞与生长相关基因表达的影响。方法体外培育的人食管癌Ｅｃａ－１０９细胞受８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理后，用原位杂交、免疫组织化学及ＲＮＡ、蛋白质斑点印迹技术研究了与细胞生长相关的几种基因的表达变化。结果８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可减弱ＥＧＦＲ、Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、突变型ｐ５３等基因的表达，增强野生型ｐ５３基因表达和ｐ２１ＷＡＦ１蛋白的表达。结论８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可通过影响有关信号传递和细胞周期进程基因表达而抑制细胞生长。 展开更多

关键词 8-br-CAMP 基因表达 Eca-109细胞系 食管肿瘤

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BRAF V600E基因突变与细针穿刺细胞学对甲状腺乳头状癌诊断价值的Meta分析

2

作者 王思雷 张艳 +1 位作者 徐建 杨汶士 《国际耳鼻咽喉头颈外科杂志》 2024年第1期16-21,共6页

目的系统评价BRAF V600E基因突变的检测与细针穿刺细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)的诊断价值。方法计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库(WANFANG)、维普... 目的系统评价BRAF V600E基因突变的检测与细针穿刺细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)的诊断价值。方法计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库(WANFANG)、维普中文科技期刊数据库(VIP)、Pubmed、Embase、Cochrane图书馆,自2019年1月至2022年12月以病理组织诊断为“金标准”,对比分析BRAF V600E基因突变的检测与FNAC诊断PTC的诊断性试验文献,应用Review Manager 5.0、MetaDiSc软件进行Meta分析,并绘制汇总受试者工作特征(SROC)曲线,计算曲线下面积。结果最终纳入32篇文献共计7223枚甲状腺结节,BRAF V600E基因突变检测和FNAC诊断PTC合并敏感性分别为0.79(95%CI:0.78~0.80)和0.78(95%CI:0.77~0.79);特异性分别为0.96(95%CI:0.95~0.97)和0.90(95%CI:0.89~0.91);诊断比数比分别为64.87(95%CI:33.96~123.94)和22.55(95%CI:14.47~35.14);两种诊断方法联合的敏感性、特异性、诊断比数比分别为0.92(95%CI:0.91~0.93)、0.93(95%CI:0.92~0.94)和141.37(95%CI:85.30~234.31)。SROC曲线下面积分别为0.89、0.88和0.97。结论BRAF V600E基因突变的检测对于PTC的诊断具有较高的特异性,可以有效减少细胞学诊断意义不明确甲状腺结节患者的不必要手术比率,但是其较低的敏感性,限制了其在临床诊断中的单独应用。BRAF V600E基因突变检测联合FNAC应用于PTC的诊断,具有较高的敏感性和特异性,对PTC的术前诊断具有重要的临床意义。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 诊断 META分析 甲状腺乳头状癌 细针穿刺细胞学 br AF V600E 基因突变

原文传递

一个水稻簇生穗突变体的遗传分析与基因定位 被引量：4

3

作者 陈光毅 张红宇 +4 位作者 徐培洲 陈晓琼 黄芳 邝小林 吴先军 《中国农学通报》 CSCD 2014年第27期258-264,共7页

水稻的花器官是籽粒形成的基础,对如何提高水稻产量的研究一直都是水稻遗传育种工作者所关注的重点。从一个经EMS诱变的高世代回交群体M2中获得一个簇生穗突变体（Cl）,突变体表型特征为：主穗轴严重退化,枝梗顶端2~4粒小穗簇生在一起,... 水稻的花器官是籽粒形成的基础,对如何提高水稻产量的研究一直都是水稻遗传育种工作者所关注的重点。从一个经EMS诱变的高世代回交群体M2中获得一个簇生穗突变体（Cl）,突变体表型特征为：主穗轴严重退化,枝梗顶端2~4粒小穗簇生在一起,簇生率高达70%。以粳稻品种日本晴和簇生穗突变体杂交,构建F2群体。遗传分析表明该性状受隐性基因控制,其F2分离比远偏离经典孟德尔遗传分离比。利用该F2群体,采用BSA法将基因定位在4号染色体的SSR标记CGY-08与CGY-02之间,两者间的物理距离为145.7 kb。对该区间内的预测基因测序发现：一个P450（CYP724B1）基因的第四外显子发生了单碱基的突变,而P450编码与BR合成相关的蛋白。因此,结合突变体表型和测序结果,推测细胞色素P450可能是控制小穗簇生的候选基因。 展开更多

关键词 簇生穗 遗传分析 基因定位 P450 br

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br基因的定点突变与表达

4

作者 潘笑娱 吴敏 +1 位作者 乔守怡 阮红 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期350-353,共4页

细菌视紫红质(bacteriorhodopsinBR)是极端嗜盐菌(Halobacteriumhalobium)紫膜上的一种光能转换色素蛋白,是一种极有前途的生物光电材料.野生型BR蛋白达不到实用光电材料的要求,因此,通过对细菌视紫红质基因(br基因)的定点改造,构建和表... 细菌视紫红质(bacteriorhodopsinBR)是极端嗜盐菌(Halobacteriumhalobium)紫膜上的一种光能转换色素蛋白,是一种极有前途的生物光电材料.野生型BR蛋白达不到实用光电材料的要求,因此,通过对细菌视紫红质基因(br基因)的定点改造,构建和表达BR突变体成为生物光电材料研究中的一个热点.以野生型br基因为模板,通过连续PCR的方法向br基因引入一个点突变,并将之克隆至pUC19载体中.将经测序鉴定的br突变基因重组到穿梭质粒pNov-R中并转化BR缺陷型嗜盐菌L33,得到紫色阳性克隆.经PCR分析和Western杂交检测表明,阳性克隆中构建的br突变基因获得了表达. 展开更多

关键词 细菌视紫红质基因 br基因 定点突变 基因突变 基因表达 生物光电材料

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8-Br-cAMP对人白血病HL-60细胞生长、分化及有关基因表达的影响 被引量：1

5

作者 张鑫 吴景兰 +2 位作者 王淑钗 郭东欣 黄鹂 《洛阳医专学报》 2000年第1期1-3,共3页

目的　观察 8 Br cAMP对HL 6 0细胞生长、分化及其相关基因的调节。方法　组织化学、原位杂交和完整细胞RNA斑点印迹。结果　 8 Br cAMP作用 2 4h ,HL 6 0细胞c fos癌基因和p2 1waf1抑癌基因表达明显升高 ,c myc癌基因表达明显降低 ;8 B... 目的　观察 8 Br cAMP对HL 6 0细胞生长、分化及其相关基因的调节。方法　组织化学、原位杂交和完整细胞RNA斑点印迹。结果　 8 Br cAMP作用 2 4h ,HL 6 0细胞c fos癌基因和p2 1waf1抑癌基因表达明显升高 ,c myc癌基因表达明显降低 ;8 Br cAMP作用 48h ,HL 6 0细胞生长、增殖明显受抑制 ,并向中性粒细胞方向分化。结论　 8 Br cAMP可调整HL 6 0细胞生长、分化及相关癌基因和抑癌基因的表达 ,抑制HL 6 0细胞的生长 ,促进HL 6 展开更多

关键词 8-br-CAMP HL-60细胞 基因表达 白血病

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bop基因及其上游启动子的克隆与表达

6

作者 宋景娇 王友亮 曹军卫 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期215-218,共4页

应用重组PCR的方法,直接从盐沼盐杆菌(Halobactrium salinarium)S9的基因组DNA上扩增到了编码细菌视紫红质(bacteriorhodopsin)的基因———bop基因及其启动子部分(1 196 bp),并将其克隆到表达载体pXLNovR后,在宿主菌株中得到了表达.测... 应用重组PCR的方法,直接从盐沼盐杆菌(Halobactrium salinarium)S9的基因组DNA上扩增到了编码细菌视紫红质(bacteriorhodopsin)的基因———bop基因及其启动子部分(1 196 bp),并将其克隆到表达载体pXLNovR后,在宿主菌株中得到了表达.测序结果表明,扩增得到的片段与NCBI数据库中的bop基因及启动子的序列完全相同,且其表达产物的分子量与野生型BR蛋白的分子量一致,并且在568 nm处表现出BR蛋白特征吸收峰.本方法与其他方法(如逆转录PCR,建立基因文库后从中调取等方法)相比具有操作简便,成功率高的优点. 展开更多

关键词 细菌视紫红质 bop基因 重组PCR br蛋白

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水稻羧酸酯酶OsCDAP的生物学功能初探

7

作者 李臻 潘教文 +1 位作者 王庆国 刘炜 《山东农业科学》 2019年第1期8-13,共6页

本课题组在对水稻病害的研究中,鉴定并克隆到一个羧酸酯酶基因OsCDAP。为进一步研究该酯酶生物学功能,构建了OsCDAP植物过表达载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻"中花11"。转基因水稻表型分析显示,过表达转基因水稻植株株高... 本课题组在对水稻病害的研究中,鉴定并克隆到一个羧酸酯酶基因OsCDAP。为进一步研究该酯酶生物学功能,构建了OsCDAP植物过表达载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻"中花11"。转基因水稻表型分析显示,过表达转基因水稻植株株高略高于对照,其第一节间长度明显长于对照,而第五节间长度明显短于对照,其他节间长度差异不明显;OsCDAP过表达株系的剑叶夹角明显大于对照。进一步对转基因水稻GA和BR合成及信号转导相关基因进行分析,发现部分基因的表达发生改变。本试验结果显示OsCDAP可通过调控内源GA和BR的含量及参与相关信号途径调控水稻节间长度及叶夹角大小,进而对水稻的生长发育产生影响。 展开更多

关键词 水稻 羧酸酯酶OsCDAP 株高 节间长度 剑叶夹角 赤霉素 油菜素内酯 基因表达

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介入急救顽固性肝硬化性上消化道大出血的治疗体会

8

作者 杨瑞民 李玉侠 +3 位作者 梁秋冬 李奋保 董启梅 李培兰 《介入放射学杂志》 CSCD 1999年第3期158-159,共2页

顽固性肝硬化性门脉高压食管胃底静脉曲张破裂出血临床发病急骤，出血量大，病死率高。在因患者不适于或不能耐受手术而不能有效控制出血的情况下，急诊行经皮经肝食管、胃底静脉栓塞与经肠系膜上动脉导管中滴入垂体后叶素并脾动脉部分... 顽固性肝硬化性门脉高压食管胃底静脉曲张破裂出血临床发病急骤，出血量大，病死率高。在因患者不适于或不能耐受手术而不能有效控制出血的情况下，急诊行经皮经肝食管、胃底静脉栓塞与经肠系膜上动脉导管中滴入垂体后叶素并脾动脉部分栓塞术，可以有效地控制出血。对１２... 展开更多

关键词 肝硬变 上消化道出血 急救 介入疗法

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玉米br-2矮生基因利用的研究 被引量：9

9

作者 崔绍平 孙世珍 +2 位作者 徐有 郑积德 李洪杰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1990年第2期7-12,共6页

本研究在国内外多年研究的基础上,利用玉米br-2基因的致矮特性,根据基因重组的原理,通过各种杂交方式和选择,使抗病、抗倒、窄叶片等许多优良基因与br-2基因很好地结合,克服了原br-2基因型矮生自交系节间短、叶宽重叠密集、雌雄不协调... 本研究在国内外多年研究的基础上,利用玉米br-2基因的致矮特性,根据基因重组的原理,通过各种杂交方式和选择,使抗病、抗倒、窄叶片等许多优良基因与br-2基因很好地结合,克服了原br-2基因型矮生自交系节间短、叶宽重叠密集、雌雄不协调、授粉不良等一系列缺点,育成了一批具有应用价值的优良矮生系和冀单20号等矮生杂交种,在单基因矮生特性运用于玉米育种研究上取得了进展. 展开更多

关键词 玉米 br-2基因 复交种 定向选择

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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响 被引量：8

10

作者 李士坤 郑乃刚 +2 位作者 吴景兰 白经修 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第5期663-666,共4页

目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,... 目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,将野生型DNApolβ的cDNA ,EGFRcDNA ,野生型 (wt)p5 3cDNA及c myccDNA分别制备了生物素 /地高辛标记的探针进行原位杂交和RNA斑点印迹阵列。另进行POLB ,XRCC1,VEGF及PCNA的免疫组化染色及免疫斑点印迹阵列。结果 :Br组和Q组的DNApolβ ,EGFR ,c myc基因表达下调而wtp5 3基因表达上调。POLB ,XRCC1,PCNA及VEGF免疫斑点印迹减弱。 8 Br cAMP及槲皮素显著下调Eca 10 9细胞的DNApolβ基因表达及相关癌基因表达 ,同时上调抑癌基因的表达。作为POLB的异二聚体XRCC1及恶性细胞生物标志的PCNA及VEGF表达下调。结论 :分化诱导剂下调Eca 10 9细胞DNApolβ基因表达 ,提示Eca 10 9细胞的polβ基因是高表达的 ;功能调整后的polβ通过相关基因表达的改变尤其是wtp5 展开更多

关键词 DNA聚合酶Β 基因表达 ECA-109细胞 8-br-CAMP 槲皮素 食管鳞状上皮癌

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布鲁氏菌043强毒株BR0524基因缺失突变株的构建与毒力的初步评价 被引量：9

11

作者 纪太旺 张辉 +6 位作者 郭飞 张科 李志强 王震 赵庆亮 王浩 陈创夫 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第5期529-535,共7页

为研究BR0524基因对羊种布鲁氏菌043毒力的影响,本研究利用同源重组的原理,以BR0524基因外侧的同源臂序列构建重组质粒,将其电转化至布鲁氏菌043感受态细胞,通过卡那抗性筛选和检测引物鉴定之后进而获得羊种布鲁氏菌043-ΔBR0524缺失突... 为研究BR0524基因对羊种布鲁氏菌043毒力的影响,本研究利用同源重组的原理,以BR0524基因外侧的同源臂序列构建重组质粒,将其电转化至布鲁氏菌043感受态细胞,通过卡那抗性筛选和检测引物鉴定之后进而获得羊种布鲁氏菌043-ΔBR0524缺失突变株,且该缺失突变株在15代内未发生回复性突变,遗传性稳定。将羊种布鲁氏菌043-ΔBR0524缺失突变株、羊种布鲁氏菌043和M5以106 CFU剂量腹腔接种小鼠,进行体内感染试验,并以布鲁氏菌与小鼠巨噬细胞为100∶1的感染比例侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7。结果表明:与羊种布鲁氏菌043相比,羊种布鲁氏菌043-ΔBR0524缺失突变株的载菌量几乎没有下降(P<0.05),对小鼠脾脏重量变化的影响也趋于相似(P<0.05);侵染小鼠巨噬细胞试验结果与动物感染试验结果也趋于一致(P<0.05),这表明BR0524基因的缺失不会对羊种布鲁氏菌043毒力功能的发挥产生显著的影响。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 br0524基因 毒力 同源重组

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一个新的靶向HER-2 mRNA的反义寡核苷酸,HA824,对HER-2表达的影响(英文) 被引量：5

12

作者 杨栓平 宋三泰 +2 位作者 宋海峰 郑晓玲 汤仲明 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期87-92,共6页

目的　观察HA82 4 ,这种新合成的靶向HER 2mRNA的反义寡核苷酸对SK BR 3乳癌细胞株mRNA和蛋白表达的特异性作用。方法　以HA4为阳性对照 ,随机序列为随机对照检测了HA82 4对SK BR 3细胞生长的抑制作用与IC50 值 ;采用逆转录聚合酶链反应... 目的　观察HA82 4 ,这种新合成的靶向HER 2mRNA的反义寡核苷酸对SK BR 3乳癌细胞株mRNA和蛋白表达的特异性作用。方法　以HA4为阳性对照 ,随机序列为随机对照检测了HA82 4对SK BR 3细胞生长的抑制作用与IC50 值 ;采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、流式细胞技术、免疫组织化学法检测了对SK BR 3细胞mRNA与蛋白表达的影响。结果　结果表明HA82 4对SK BR 3乳癌细胞的生长有剂量依赖性的抑制作用〔IC50 (nmol·L- 1) :HA82 4 ,(47± 2 6 ) ;HA4 ,(97± 4 1) ;随机序列 ,(2 5 1± 86 )。HA82 4vsHA4 ,P <0 .0 5〕。HA82 4还显著抑制了HER 2mRNA与蛋白的表达 (免疫组化结果 :HA82 4 ,1+染色 ;HA4 ,2 +染色 ;随机序列 ,3+染色 ;流式细胞技术检测结果 ,荧光强度分别为 :HA82 4 ,338.6 ;HA4 ,35 5 .5 ;随机序列 ,5 32 .4 )。结论HA82 4对SK BR 3乳癌细胞生长的抑制作用与特异性的抑制HER 展开更多

关键词 乳腺癌 SK-br-3细胞 HA824 HER-2 反义寡核苷酸 蛋白表达 逆转录聚合酶链反应

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玉米矮秆基因d15的克隆及表达分析 被引量：1

13

作者 赵长云 白光庭 +5 位作者 何少勇 余学杰 李仁飞 夏伟 许秀兰 柯永培 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1141-1150,共10页

发掘矮秆基因并解析其调控机制,为玉米矮化育种提供基因资源和理论依据。利用形态观察和石蜡切片方法,研究了玉米矮秆突变体K15d与野生型K15的矮化特征差异;通过等位性鉴定并利用PCR扩增克隆了矮秆基因d15,分析了3个时期茎节间中d15的... 发掘矮秆基因并解析其调控机制,为玉米矮化育种提供基因资源和理论依据。利用形态观察和石蜡切片方法,研究了玉米矮秆突变体K15d与野生型K15的矮化特征差异;通过等位性鉴定并利用PCR扩增克隆了矮秆基因d15,分析了3个时期茎节间中d15的表达模式。与野生型K15比较,突变体K15d的株高、穗位高和穗下节间数分别降低39.22%、69.75%和38.83%,差异均达显著或极显著水平;茎秆横切面细胞大小差异不明显,纵切面细胞变短,排列不规则。矮秆基因d15与br2等位,第5外显子5485~5685 bp区间缺失200 bp,编码区全长3983 bp。d15编码蛋白的跨膜结构域为10个,比D15编码蛋白的跨膜结构域减少2个,负责底物结合和转运功能的第2个保守功能域缺失。d15启动子较br2仅有2个SNPs差异。在拔节前、拔节期和拔节后3个时期,突变体中d15基因的表达量与野生型间均无显著差异。由此可见,矮秆基因d15的矮化特征及表达模式均与br2相似,是1个新的br2等位基因,丰富了玉米矮秆基因资源。 展开更多

关键词 玉米 矮秆 br2基因 等位突变 基因表达

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8-Br-cAMP联合HSV-TK/GCV治疗舌鳞癌移植瘤的研究 被引量：4

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作者 王安训 温映萍 +1 位作者 李苏 黄洪章 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期89-91,I006,共4页

[目的]探讨8-Br-cAMP联合单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)对舌鳞癌移植瘤的治疗作用。[方法]舌鳞癌Tca8113细胞接种于28只裸鼠右侧腋下,随机分成4组进行治疗:对照组,8-Br-cAMP组,HSV-TK/GCV组,8-Br-cAMP联合 HSV-TK/GCV... [目的]探讨8-Br-cAMP联合单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)对舌鳞癌移植瘤的治疗作用。[方法]舌鳞癌Tca8113细胞接种于28只裸鼠右侧腋下,随机分成4组进行治疗:对照组,8-Br-cAMP组,HSV-TK/GCV组,8-Br-cAMP联合 HSV-TK/GCV组;观察肿瘤的生长状态、计算抑瘤率和群体倍增时间;观察肿瘤的组织病理学及超微结构改变。[结果]与对照组比较,8-Br-cAMP和HSV-TK/GCV单独应用时肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.01),肿瘤的群体倍增时间延长;析出分析显示两者间存在协同的抑瘤作用(P<0.01)。光镜下对照组和8-Br-cAMP组无明显差别,HSV-TK/GCV组和8-Br-cAMP联合HSV-TK/GCV组肿瘤组织中可见囊性变和大片的灶性坏死;透射电镜显示8-Br-cAMP对舌癌细胞具有诱导分化作用。[结论]8-Br-cAMP与HSV-TK/GCV系统具有协同的抑制舌鳞癌移植瘤生长作用。 展开更多

关键词 8-br-CAMP 自杀基因 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 基因疗法 舌肿瘤

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中国HIV-1 B′亚型毒株不同基因区与全长基因组系统进化比较 被引量：6

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作者 李喆 杨尧 +4 位作者 魏静 冯毅 邢辉 何翔 邵一鸣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期366-371,共6页

本研究旨在探索不同基因区的使用对HIV-1B′亚型毒株系统进化分析结果的影响。首先利用既往研究中已发表的共计47条来自泰国,缅甸和中国多个地区不同传播途径的B′毒株近全长基因组序列,将其按基因区分为不同的数据集(gag,pol,vif,vpr,v... 本研究旨在探索不同基因区的使用对HIV-1B′亚型毒株系统进化分析结果的影响。首先利用既往研究中已发表的共计47条来自泰国,缅甸和中国多个地区不同传播途径的B′毒株近全长基因组序列,将其按基因区分为不同的数据集(gag,pol,vif,vpr,vpu,env,nef),并分别进行系统进化分析研究。比较不同基因区系统进化分析的结果发现,B′亚型毒株pol基因在分析的基因区中,具有最低的复杂度和进化速率,可以较好的区分B′TH和B′YN毒株,重复近全长基因组序列的分析结果;尽管env基因则具有最高的复杂度和进化速率,但无法获得类似结果。本研究比较了不同基因区对HIV-1B′亚型毒株系统进化分析结果的影响,对进一步开展HIV分子流行病学调查,分析我国B′毒株在我国的传播奠定了基础。 展开更多

关键词 HIV-1 B'亚型 pol基因 近全长基因组

原文传递

甘蓝型油菜的BR响应及BnBZL2基因的功能分析 被引量：2

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作者 李不凡 姜雨彤 +2 位作者 张禹 张燕洁 林文慧 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期824-834,共11页

对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)与拟南芥(Arabidopsis thaliana L.)中保守的油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)信号相关基因进行对比分析,并以甘蓝型油菜品种‘沪油15’为材料,对BR信号通路相关同源基因进行了组织表达分析。结果显示,B... 对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)与拟南芥(Arabidopsis thaliana L.)中保守的油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)信号相关基因进行对比分析,并以甘蓝型油菜品种‘沪油15’为材料,对BR信号通路相关同源基因进行了组织表达分析。结果显示,BR合成基因与信号组分在花和幼嫩种子中表达量更高;低浓度BR处理可以促进幼苗根的生长,高浓度BR处理则起抑制作用; BR合成抑制剂(Brassinozole,BRZ)处理可抑制黑暗条件下幼苗下胚轴的伸长; BR处理可以降低BR合成基因的表达水平,而BRZ处理则相反,表明甘蓝型油菜中BR信号增加能反馈抑制BR的合成。烟草(Nicotiana tabacum L.)瞬时表达实验结果发现,与拟南芥BZR1基因同源的甘蓝型油菜BnBZL2编码蛋白定位在细胞质和细胞核中,BR处理可增加BnBZL2的核定位。蛋白质免疫印迹检测结果显示,BR处理可增加去磷酸化BnBZL2的比例。本研究进一步模拟了拟南芥bzr1-1D功能获得性突变体对BnBZL2蛋白进行点突变(BnBZL2*),并构建载体转化拟南芥,黑暗条件下转基因植株幼苗对BRZ处理不敏感,提示BnBZL2*可提高转基因植株的BR信号水平。本研究结果表明甘蓝型油菜中存在与拟南芥相似且保守的BR信号通路和调控机制。 展开更多

关键词 油菜素甾醇(br) 甘蓝型油菜 br响应 BnBZL2基因

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8-Br-cAMP对Eca-109细胞c-myc,wtp53,iNOS基因和EGFR表达的影响 被引量：1

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作者 王红梅 宫璀璀 +1 位作者 吴景兰 王一菱 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第5期669-672,共4页

目的 :探讨 8 Br cAMP对Eca 10 9细胞c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 2组 :①实验组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 -5mol/L ,培养 2 4h ;②对照组 :不加 8 Br cAMP ,培养 2 4... 目的 :探讨 8 Br cAMP对Eca 10 9细胞c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 2组 :①实验组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 -5mol/L ,培养 2 4h ;②对照组 :不加 8 Br cAMP ,培养 2 4h。对 2组的细胞涂片和硝酸纤维素膜 (NCM)标本进行c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达检测 ,并对扫描数值进行统计学处理。结果 :原位杂交及免疫组化反应信号皆定位于Eca 10 9细胞的胞质 ,扫描数值显示 :①c mycmRNA :实验组为 3.38± 0 .99,对照组为 5 .18± 1.39;②wtp5 3mRNA :实验组为 2 .74± 0 .83,对照组为 0 .38±0 .2 7;③iNOSmRNA :实验组为 4 .5 2± 0 .74 ,对照组为 2 .6 3± 0 .13;④EGFR IR :实验组为 2 .37± 1.0 5 ,对照组为 4 .38±0 .4 8。以上实验组与对照组比较差异有统计学意义 (P均 <0 .0 5 )。结论 :c myc、wtp5 3和NO均可参与 8 Br 展开更多

关键词 C-MYC基因 wtp53基因 INOS基因 EGFR 8-br-CAMP ECA-109细胞 癌细胞

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敲降HER-2和TOP2A增强乳腺癌细胞放射敏感性研究 被引量：2

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作者 袁鹏 王承正 +7 位作者 徐本玲 杨晗昭 孙恒 秦鹏 吴军召 谢天 秦丽 刘晓 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第6期652-656,共5页

目的 研究HER-2和TOP2A对乳腺癌细胞系SK-Br-3的放射敏感性影响,并探讨二者联合作用,为临床研究奠定基础。方法 分别构建表达HER-2或TOP2A siRNA的重组质粒,并使用lipofectamine 2000将其转染至乳腺癌细胞SK-Br-3中,敲降HER-2和TOP2A的... 目的 研究HER-2和TOP2A对乳腺癌细胞系SK-Br-3的放射敏感性影响,并探讨二者联合作用,为临床研究奠定基础。方法 分别构建表达HER-2或TOP2A siRNA的重组质粒,并使用lipofectamine 2000将其转染至乳腺癌细胞SK-Br-3中,敲降HER-2和TOP2A的基因表达。2 d后利用蛋白印迹法检测干扰效果,利用流式细胞仪和MTT法分别检测放射处理后细胞凋亡和增殖变化,并检测凋亡和增殖相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Ki-67表达变化。克隆形成实验检测放射敏感性。结果在乳腺癌细胞SK-Br-3中敲降HER-2和TOP2A的表达,放射处理后细胞凋亡率升高,增殖率降低。凋亡标志蛋白活化的Caspase-3表达升高,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达降低。细胞增殖标志蛋白Ki-67表达降低。同时敲降HER-2和TOP2A两个基因时促进凋亡和抑制增殖及克隆形成的作用增强,表明这两个基因存在协同效应。结论 敲降HER-2和TOP2A基因在乳腺癌细胞SK-Br-3中的表达后,乳腺癌细胞的放射敏感性提高,细胞凋亡率升高,细胞增殖率降低,克隆形成率降低,且2基因存在协同效应,作用机制可能与Caspase-3、Bcl-2有关的凋亡通路及细胞增殖蛋白Ki-67有关。 展开更多

关键词 HER-2基因 TOP2A基因 SK-br-3细胞系 放射敏感性

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5-羟色胺4受体mRNA在仔猪不同组织的表达 被引量：1

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作者 赵威 孟和 +1 位作者 李婧 潘玉春 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2005年第3期261-265,共5页

5-羟色胺4受体(5H-T4R)属于G-蛋白偶联受体超家族,广泛分布于中枢神经系统和外周组织中,调节多种神经递质的生理学效应。实验采用半定量RTP-CR的方法,检测和分析了猪5H-T4R的b亚型(5H-T4bR)基因mRNA在11种组织中的表达规律。结果发现,猪... 5-羟色胺4受体(5H-T4R)属于G-蛋白偶联受体超家族,广泛分布于中枢神经系统和外周组织中,调节多种神经递质的生理学效应。实验采用半定量RTP-CR的方法,检测和分析了猪5H-T4R的b亚型(5H-T4bR)基因mRNA在11种组织中的表达规律。结果发现,猪5H-T4bR在除肝脏以外的10种组织中都有表达,且不同组织内的表达量存在差异,其中脑组织和肠组织表达量较高。这一结果与5H-T4R基因在人和鼠上不同组织表达规律一致。 展开更多

关键词 5-HT4br 猪 半定量RT-PCR 基因表达

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下调lncRNA LINC00263靶向miR-4458调控乳腺癌SK-BR-3细胞放射敏感性 被引量：1

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作者 温兰兰 王东娟 +5 位作者 董辉 赵继伟 朱翠敏 林萍萍 刘兰芳 李青山 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第11期1195-1201,共7页

目的研究下调lncRNA LINC00263靶向miR-4458对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、运动、侵袭及放射敏感性影响。方法qRT-PCR方法分别检测乳腺癌组织、癌旁组织、正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞中LINC00263表达差异。SK-BR-3细胞中转染LINC00263shRN... 目的研究下调lncRNA LINC00263靶向miR-4458对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、运动、侵袭及放射敏感性影响。方法qRT-PCR方法分别检测乳腺癌组织、癌旁组织、正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞中LINC00263表达差异。SK-BR-3细胞中转染LINC00263shRNA下调LINC00263表达,克隆实验检测放射敏感性。SK-BR-3细胞给予6Gy照射处理,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡,Transwell小室检测细胞运动和侵袭,蛋白印迹法检测C-Caspase-3、C-Caspase-9、MMP-2、MMP-9蛋白表达。生物信息学软件预测LINC00263和miR-4458有互补结合位点,荧光素酶报告系统测定二者的靶向关系。在SK-BR-3细胞中共转染LINC00263shRNA和miR-4458 inhibitor,给予6Gy照射处理,检测细胞增殖、运动、侵袭和凋亡变化。结果乳腺癌组织中LINC00263表达水平高于癌旁组织。乳腺癌细胞中LINC00263表达水平高于正常乳腺上皮细胞。转染LINC00263shRNA以后的SK-BR-3细胞放射敏感性增加。转染LINC00263shRNA和放射联合具有协同作用,共同抑制细胞增殖、运动、侵袭,促进细胞凋亡,提高细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达水平,降低细胞中MMP-2、MMP-9蛋白表达水平。下调LINC00263靶向促进miR-4458表达。miR-4458 inhibitor逆转LINC00263shRNA联合放射对SK-BR-3细胞增殖、运动、侵袭的抑制作用和凋亡促进作用。结论下调lncRNA LINC00263靶向miR-4458抑制SK-BR-3细胞增殖、运动、侵袭,提高细胞放射敏感性。 展开更多

关键词 LINC00263基因 miR-4458基因 放射敏感性 SK-br-3细胞系

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