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黑龙江省部分奶牛场牛病毒性腹泻病毒感染的血清学调查 被引量：34
1
作者 魏伟 李岩 +2 位作者 刘长军 万培明 王君伟 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期561-563,共3页
为了解黑龙江省奶牛场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染情况,采用已建立的BVDV NS3蛋白抗体间接ELISA方法对采自黑龙江省内不同地区的4个奶牛养殖场2006～2008年的1 388份血清样本进行了BVDV抗体检测。结果显示,4个奶牛养殖场这3年的平均B... 为了解黑龙江省奶牛场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染情况,采用已建立的BVDV NS3蛋白抗体间接ELISA方法对采自黑龙江省内不同地区的4个奶牛养殖场2006～2008年的1 388份血清样本进行了BVDV抗体检测。结果显示,4个奶牛养殖场这3年的平均BVDV血清阳性率分别为54.66%、57.68%和62.90%。提示,在黑龙江省奶牛养殖场中BVDV感染率较高,并且呈逐年上升趋势。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 感染 间接酶联免疫吸附试验
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几种动物病毒的基因芯片检测技术 被引量：25
2
作者 杨素 花群义 +7 位作者 徐自忠 周晓黎 杨晶焰 董俊 杨云庆 贾建军 谭德勇 赖建华 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第3期35-39,共5页
分别用水疱性口炎病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段构建质粒 ,在此基础上制备了芯片探针。提取样品中的核酸 ,经反转录和荧光标记后滴加到芯片上进... 分别用水疱性口炎病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段构建质粒 ,在此基础上制备了芯片探针。提取样品中的核酸 ,经反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交 ,对杂交结果扫描检测 ,可同时对上述 7种动物传染病进行快速、准确的诊断 ,此方法敏感性高 ,特异性强 ,适合于大批动物高通量检疫。 展开更多
关键词 动物病毒 基因芯片 检测技术 水疱性口炎病毒 蓝舌病病毒 口蹄疫病毒 猪瘟病毒 牛病毒性腹泻病毒
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牛病毒性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量：30
3
作者 高存福 秦建华 +2 位作者 赵月兰 包永占 张宁 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第8期620-622,共3页
将牛病毒性腹泻病毒超免疫血清以常规方法提取IgG,采用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶(HRP),建立了从粪样中检测牛病毒性腹泻病毒抗原的双抗体夹心ELISA。结果,抗体的最佳包被量为150μg/mL,酶标抗体最适工作浓度为1∶200;封闭液为50mL/... 将牛病毒性腹泻病毒超免疫血清以常规方法提取IgG,采用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶(HRP),建立了从粪样中检测牛病毒性腹泻病毒抗原的双抗体夹心ELISA。结果,抗体的最佳包被量为150μg/mL,酶标抗体最适工作浓度为1∶200;封闭液为50mL/L的兔血清;待检粪样及酶标抗体的感作时间为37℃120min;底物显色时间为室温15min。应用建立的检测方法对河北省8个大中型奶牛场298份乳牛腹泻粪样进行了检测,结果,阳性检出率为42.6%。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 双抗体夹心ELISA 乳牛 检测
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鉴别牛病毒性腹泻病毒和猪瘟病毒的复合PCR方法及其应用 被引量：23
4
作者 周绪斌 王新平 +1 位作者 宣华 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期557-560,共4页
以牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)特异引物 P1/ P3扩增 BVDV标准毒株及以猪瘟病毒 (HCV)特异引物 P2 / P3扩增HCV阳性病料 ,分别扩增出 32 6 bp和 2 5 2 bp的特异片段 ;以 P1、P2、P3扩增 BVDV和 HCV人工混合感染样品 ,扩增出大小为 32 6 bp和... 以牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)特异引物 P1/ P3扩增 BVDV标准毒株及以猪瘟病毒 (HCV)特异引物 P2 / P3扩增HCV阳性病料 ,分别扩增出 32 6 bp和 2 5 2 bp的特异片段 ;以 P1、P2、P3扩增 BVDV和 HCV人工混合感染样品 ,扩增出大小为 32 6 bp和 2 5 2 bp的 2条片段 ,建立了特异的一步检测 BVDV和 HCV的复合 PCR方法。以建立的复合 PCR方法检测 BVDV分离株 ,都扩增出 1条 32 6 bp的特异片段 ;从吉林等地送检的病料和猪瘟兔化弱毒疫苗中扩增出一2 5 2 bp的特异片段 ,从长岭地区的疑似猪瘟病猪的血清病料中 ,同时扩增出 32 6 bp和 2 5 2 bp的核酸片段 ,表明长岭某猪场流行的“猪瘟”为 BVDV和 HCV混合感染。本研究为进行 HCV和 BVDV的鉴别诊断与流行病学调查提供了有效的方法。 展开更多
关键词 鉴别 复合PCR方法 应用 牛病毒性腹泻病毒 猪瘟病毒
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牛病毒性腹泻病毒P125基因重要区的比较与分析 被引量：24
5
作者 王新平 涂长春 +4 位作者 李红卫 宣华 朱维正 费恩阁 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第6期546-553,共8页
根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株的序列，以计算机辅助设计，化学合成１对引物（Ｗ１／Ｗ２）；应用ＲＴ－ＰＣＲ对国内不同地区分离的４株ＢＶＤＶ的Ｐ１２５基因外源序列插入区进行了扩增，并将扩增的片段进行克隆和序列... 根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株的序列，以计算机辅助设计，化学合成１对引物（Ｗ１／Ｗ２）；应用ＲＴ－ＰＣＲ对国内不同地区分离的４株ＢＶＤＶ的Ｐ１２５基因外源序列插入区进行了扩增，并将扩增的片段进行克隆和序列测定，同时以ＤＮＡＳＩＳ和ＰＲＯＳＩＳ计算机软件将测定的核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行比较分析。结果证实，国内分离的４株ＢＶＤＶ在这一区域中既没有外源序列的插入，也没有基因重组、基因重排或基因缺失，但存在某些核苷酸和氨基酸的替换，表明病毒的致细胞病变作用除与外源序列的插入、基因重组、基因重排或基因缺失有关外，可能还存在其他机制。核苷酸序列的同源性及系统树分析的结果表明，国内的ＢＶＤＶ毒株存在Ｉａ和Ｉｂ２个基因亚型。 展开更多
关键词 牛病 腹泻病毒 P125基因 基因型
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牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒和牛肠道病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：26
6
作者 侯佩莉 王洪梅 何洪彬 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1672-1675,1700,共5页
根椐GenBank中已发表中病毒性腹泻病毒(BVDV)、中冠状病毒(BCoV)和中肠道病毒(BEV)基因的保守序列,设计合成引物,在建立单一病毒RT-PCR检测方法的基础上,继续优化条件,建立上述3种病毒的多重RT-PCR检测方法,并应用建立的检测方法对临床... 根椐GenBank中已发表中病毒性腹泻病毒(BVDV)、中冠状病毒(BCoV)和中肠道病毒(BEV)基因的保守序列,设计合成引物,在建立单一病毒RT-PCR检测方法的基础上,继续优化条件,建立上述3种病毒的多重RT-PCR检测方法,并应用建立的检测方法对临床样本进行检测,计算符合率。结果表明,引物浓度分别为BVDV 0.5μL(20μmol/L),BCoV 0.25μL(20μmol/L),BEV 0.25μL(20μmol/L),退火温度为52℃时,可同时扩增BVDV的289bp,BCoV的458bp和BEV的732bp的特异性片段,对牛流行热病毒(BEFV)、牛轮状病毒(BRV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)均无扩增。该方法最低能检出6.4pg的BVDV,1.28pg的BCoV和6.4pg的BEV的等量混合质粒模板。对24份临床腹泻病料进行检测,与单项RT-PCR检测的符合率为100.0%。本研究建立的多重RT-PCR检测方法,具有准确、快速、特异的特点,可用于临床混合感染的同时检测。 展开更多
关键词 多重RT—PCR 牛病毒性腹泻病毒 牛冠状病毒 牛肠道病毒
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猪源牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定 被引量：25
7
作者 杨小燕 魏春华 +2 位作者 刘建奎 戴爱玲 李晓华 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期9-13,共5页
从福建省某猪场疑似猪瘟的发病仔猪采集病料,处理后接种于牛肾细胞(MDBK),分离到1株病毒,并对其进行了系统鉴定。结果显示,病料接种MDBK细胞72h后产生了明显的细胞病变;该分离毒株可以被牛病毒性腹泻病毒(BVDV)阳性血清中和,中和效价为1... 从福建省某猪场疑似猪瘟的发病仔猪采集病料,处理后接种于牛肾细胞(MDBK),分离到1株病毒,并对其进行了系统鉴定。结果显示,病料接种MDBK细胞72h后产生了明显的细胞病变;该分离毒株可以被牛病毒性腹泻病毒(BVDV)阳性血清中和,中和效价为1∶106;该分离毒株对氯仿、乙醚、胰酶、酸敏感,不耐热,56℃30min可被灭活,PCR检测该分离毒株的细胞培养液,结果可扩增出325bp的片段,该片段的核苷酸序列与BVDV NADL株标准种毒的同源性为89.2%。结果表明,该分离毒株为猪源牛病毒性腹泻病毒。 展开更多
关键词 猪 牛病毒性腹泻病毒 分离 鉴定
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新疆石河子地区牛病毒性腹泻病毒的分子流行病学调查 被引量：23
8
作者 李娜 韩猛立 +4 位作者 黄新 薄新文 王新华 赵玉龙 钟发刚 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2009年第6期706-711,共6页
根据GenBank中公布的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'UTR保守区基因序列,设计3对引物,应用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法对采自石河子地区3个场的64份牛全血样品进行核酸检测及测序。结果表明:BVDV阳性率为39.06%(25/64),其中有2... 根据GenBank中公布的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'UTR保守区基因序列,设计3对引物,应用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法对采自石河子地区3个场的64份牛全血样品进行核酸检测及测序。结果表明:BVDV阳性率为39.06%(25/64),其中有22对母子对应样品,母牛阳性率为40.91%,犊牛为45.45%,提示新疆石河子地区BVDV垂直感染较严重。9头牛表现临床症状,阳性率为22%,其余为临床健康牛,阳性率为41.81%,数据显示新疆石河子地区奶牛BVDV隐性感染严重。测序得到2条不同的序列,经5'UTR区域核酸序列同源性比较和系统发生分析表明2株病毒与VEDEVAC(匈牙利弱毒疫苗株)亲缘关系最近,同源性达96.2%～100%,用DNASTAR软件进行基因与系统发生进化关系分析属于BVDV-1b基因亚型,未检测到BVDV-2型病毒。提示新疆石河子地区BVDV流行株为BVDV-1b亚型,且经生物型鉴定,所测阳性样品为非致细胞病变型。本研究可为今后的流行病学研究和疫苗应用等防制措施提供依据。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分子流行病学 调查
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牛病毒性腹泻病毒黑龙江分离株的分离鉴定 被引量：23
9
作者 张国华 吴丹丹 +3 位作者 周玉龙 范春玲 任亚超 朴范泽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期805-807,共3页
为分离牛病毒性腹泻病毒(BVDV)并分析其5'UTR序列和遗传特征,本研究于2010年对黑龙江某奶牛场采集的患有腹泻的牛病料样品进行病毒分离,通过理化特性试验及RT-PCR对两株分离株进行鉴定,并根据其5'UTR序列进行同源性分析。结果表... 为分离牛病毒性腹泻病毒(BVDV)并分析其5'UTR序列和遗传特征,本研究于2010年对黑龙江某奶牛场采集的患有腹泻的牛病料样品进行病毒分离,通过理化特性试验及RT-PCR对两株分离株进行鉴定,并根据其5'UTR序列进行同源性分析。结果表明,两株分离株均能够产生典型的细胞空泡样细胞病变,对乙醚、氯仿、胰酶极其敏感,不耐热,Mg2+对其不具有保护力,对酸的抵抗力较弱;5'UTR序列分析显示两株分离株与BVDV-1b型5'UTR同源性较高。以上结果表明本研究分离获得的两株分离株为1b基因型的BVDV,为引起该牛群腹泻病的主要病原因素。本研究为BVDV感染机制和疫苗研制奠定了重要基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分离鉴定 进化分析
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川西北牦牛3种病毒性腹泻病血清学调查 被引量：22
10
作者 何美琳 张焕容 +3 位作者 王永 王言轩 王远微 汤承 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期248-251,共4页
本研究旨在了解川西北牦牛病毒性腹泻病的流行情况,为防制这类疫病提供一定科学依据。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对来源于川西北阿坝州8县的1070份牦牛血清中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛冠状病毒(bovine ... 本研究旨在了解川西北牦牛病毒性腹泻病的流行情况,为防制这类疫病提供一定科学依据。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对来源于川西北阿坝州8县的1070份牦牛血清中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCV)和牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)进行了抗体检测。结果显示,BVDV、BCV和BRV抗体平均阳性率分别为44.3%、84.1%和94.4%。结果表明,BVDV、BCV和BRV感染在川西北牦牛中普遍存在,需进一步加强该地区牦牛病毒性腹泻疾病的综合防制。 展开更多
关键词 牦牛 牛病毒性腹泻病毒 牛冠状病毒 牛轮状病毒 抗体
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地高辛标记核酸探针检测牛粘膜病病毒 被引量：18
11
作者 王伟利 钱爱东 +1 位作者 胡桂学 刘清河 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第5期1-4,共4页
本课题建立了地高辛标记核酸探针检测牛病毒性腹泻 -粘膜病病毒 ( BVDV)的诊断方法。根据 BVDV基因序列的结构特点 ,在编码非结构蛋白 p1 2 5高度保守基因区内 ,设计合成一对特异性引物。以 PCR技术从 BVDV基因重组质粒中扩增出了 BVDV... 本课题建立了地高辛标记核酸探针检测牛病毒性腹泻 -粘膜病病毒 ( BVDV)的诊断方法。根据 BVDV基因序列的结构特点 ,在编码非结构蛋白 p1 2 5高度保守基因区内 ,设计合成一对特异性引物。以 PCR技术从 BVDV基因重组质粒中扩增出了 BVDV特异的、保守的 40 0 bp核苷酸片段 ,经纯化后 ,地高辛标记 ,制备牛病毒性腹泻病毒的特异性核酸探针。通过检测 BVDV细胞培养物、相关病毒及核酸载体和 BVDV细胞培养物的总 RNA、反转录产物及 RT- PCR产物 ,结果证明 ,该探针特异性强、敏感性高 ,适于病毒反转录产物的检测。本试验用所制备的核酸探针对某奶牛场的腹泻犊牛粪便进行了 BVD的临床诊断的初步应用试验。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 地高辛 核酸探针 检测
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牛病毒性腹泻病毒BVDV-JL株的分离与鉴定 被引量：22
12
作者 张淑琴 郭利 +3 位作者 冷雪 张亭亭 吴永旺 武华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期181-184,共4页
本研究从吉林某牛场表现严重腹泻症状濒死牛的胸腺病料样品中分离一株病毒,该病毒在MDBK细胞中盲传4代无细胞病变产生,而通过RT-PCR和间接免疫荧光试验、微量血清中和试验检测表明该分离病毒株为牛病毒性腹泻病毒(BVDV),并命名为BVDV-J... 本研究从吉林某牛场表现严重腹泻症状濒死牛的胸腺病料样品中分离一株病毒,该病毒在MDBK细胞中盲传4代无细胞病变产生,而通过RT-PCR和间接免疫荧光试验、微量血清中和试验检测表明该分离病毒株为牛病毒性腹泻病毒(BVDV),并命名为BVDV-JL。将BVDV-JL株F4代细胞培养液(107.13TCID50/mL)经鼻内喷雾人工感染3月龄～6月龄BVDV抗体阴性黄牛(6mL/头),感染牛表现连续两天体温升高,白细胞数量下降,并在感染牛的白细胞提取物及鼻拭子样品中分离到该病毒株,表明该病毒株具有致病性。BVDV-JL株的分离对进一步开展疫苗研发、流行病学调查以及致病机理等方面的研究具有重要意义。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 无细胞病变 分离与鉴定
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1株猪源牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定 被引量：19
13
作者 邓宇 孙春清 +8 位作者 张宏彪 蔺涛 张荣 龙进学 黄律 曹三杰 袁世山 文心田 郑浩 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期416-423,共8页
从BVDV阳性仔猪病料中分离病毒,为开展猪源BVDV病原学研究奠定基础。将处理后BVDV阳性仔猪组织样品接种MDBK细胞,分离到1株猪源BVDV,命名为SD0803株。通过细胞培养、直接免疫荧光、5′-UTR与Npro PCR扩增、电镜观察、TCID50测定及对其... 从BVDV阳性仔猪病料中分离病毒,为开展猪源BVDV病原学研究奠定基础。将处理后BVDV阳性仔猪组织样品接种MDBK细胞,分离到1株猪源BVDV,命名为SD0803株。通过细胞培养、直接免疫荧光、5′-UTR与Npro PCR扩增、电镜观察、TCID50测定及对其分子进化特征加以分析。结果表明,该毒株在MDBK细胞上盲传至13代未出现细胞病变。在直接免疫荧光试验中呈阳性荧光信号。PCR扩增分别获得5′-UTR与Npro预期大小DNA片段。电镜观察,病毒粒子略呈圆形,有囊膜,直径约50nm。病毒滴度为10-6.5 TCID50.0.2 mL-1。SD0803 5′-UTR、Npro序列进化分析显示,该分离株属于BVDV-1,与已知BVDV-1各亚型之间同源性较低,单独成一分支。结果表明,成功分离鉴定1株猪源BVDV SD0803,该毒株为非致病变型BVDV-1,极有可能为BVDV-1新的亚型。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 进化分析 分离鉴定
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牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：20
14
作者 范晴 谢芝勋 +5 位作者 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 彭宜 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第10期10-14,共5页
根据GenBank公布的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）5′端非编码区核苷酸序列,设计引物和TaqMan荧光探针,建立了BVDV的实时荧光定量PCR检测方法。建立的方法只能检测到BVDV,而与CSFV、BRV、MT及IBRV没有交叉反应,具有高度的特异性,在1010~102... 根据GenBank公布的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）5′端非编码区核苷酸序列,设计引物和TaqMan荧光探针,建立了BVDV的实时荧光定量PCR检测方法。建立的方法只能检测到BVDV,而与CSFV、BRV、MT及IBRV没有交叉反应,具有高度的特异性,在1010~102模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为0.991,最低可检测到100个拷贝的阳性质粒。所建立的BVDV实时荧光定量PCR检测方法具有快速、特异、灵敏等特点。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 实时荧光定量PCR 检测
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猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量：18
15
作者 李晶梅 刘丹 +5 位作者 薛霜 秦红刚 陈其兵 靖志强 漆世华 谢红玲 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第4期66-71,共6页
猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒同属于黄病毒科瘟病毒属,在基因组序列上有很高的同源性,2种病毒交叉污染的情况十分严重,给疫病诊断和疫苗质量控制带来很大麻烦。为了更好的对这2种病的病原进行分子生物学鉴别检测,参考GenBank上2种病毒标... 猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒同属于黄病毒科瘟病毒属,在基因组序列上有很高的同源性,2种病毒交叉污染的情况十分严重,给疫病诊断和疫苗质量控制带来很大麻烦。为了更好的对这2种病的病原进行分子生物学鉴别检测,参考GenBank上2种病毒标准株的基因组序列,选取各自的保守基因区域设计可以进行鉴别检测的特异性引物,经过对PCR反应条件的优化,建立了可以对2种病毒同时检测的双重RT-PCR方法。该方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪日本脑炎病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪圆环病毒2型的扩增结果均为阴性;该检测方法的敏感性为5ng病毒基因组RNA。建立的猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高,可以用于2种疫病的临床分子检测,也可用于猪瘟疫苗的质量控制,为2种病毒的交叉污染的检测提供一种方便、快捷的方法。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 牛病毒性腹泻病毒 双重RT—PCR 鉴别检测
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牛病毒性腹泻病毒、牛传染性支气管炎病毒和口蹄疫病毒多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：17
16
作者 宋爽 赵柏林 +6 位作者 曲萍 胡冬梅 孙雨 董浩 杨林 宋晓晖 潘树德 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期133-136,共4页
为建立同时快速鉴别检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性支气管炎病毒(IBRV)和口蹄疫病毒(FMDV)的方法,本研究根据高度保守的BVDV的5'UTR基因、IBRV的g B基因和FMDV的3D基因,分别设计了3对对应的特异性引物和3种不同发光基团标记... 为建立同时快速鉴别检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性支气管炎病毒(IBRV)和口蹄疫病毒(FMDV)的方法,本研究根据高度保守的BVDV的5'UTR基因、IBRV的g B基因和FMDV的3D基因,分别设计了3对对应的特异性引物和3种不同发光基团标记的Taq Man探针,建立了同时检测这3种病毒的多重荧光定量PCR的方法。并对其反应条件进行优化。结果表明,该多重荧光定量PCR方法能够特异性检测出BVDV、IBRV和FMDV,而对BTV等检测结果均为阴性,对BVDV、IBRV、FMDV的最低检测量分别为194拷贝/μL、208拷贝/μL和150拷贝/μL。而且组内和组间变异系数均低于0.85%。本研究所建立的多重荧光定量PCR具有方便、快速、特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,能够用于BVDV、IBRV和FMDV的同时检测。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 牛传染性鼻气管炎病毒 口蹄疫病毒 多重荧光定量PCR
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牛病毒性腹泻病毒感染的免疫应答研究进展 被引量：18
17
作者 宫晓炜 曹小安 +4 位作者 郑福英 陈启伟 周继章 殷宏 才学鹏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1200-1205,共6页
从牛病毒性腹泻病毒影响宿主先天性免疫应答、适应性免疫应答及引发机体免疫抑制等方面,综合阐述了牛病毒性腹泻病毒感染损伤机体免疫防御系统的原因及研究进展,旨在为深入研究牛病毒性腹泻病毒免疫逃逸和持续性感染的机理提供理论依据。
关键词 牛病毒性腹泻病毒 先天性免疫应答 适应性免疫应答 免疫抑制
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内蒙古牛病毒性腹泻病毒血清学调查 被引量：18
18
作者 童钦 吕晓妍 +1 位作者 王炜 项键 《中国农学通报》 CSCD 2013年第5期26-29,共4页
为了解内蒙古自治区集约化养牛场病毒性腹泻的感染情况。用致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒毒株制备中和抗原,通过中和实验对采自乌兰浩特、巴彦淖尔和呼和浩特地区6个集约化奶牛场的509份血清进行了牛病毒性腹泻病毒抗体检测。结果表明:... 为了解内蒙古自治区集约化养牛场病毒性腹泻的感染情况。用致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒毒株制备中和抗原,通过中和实验对采自乌兰浩特、巴彦淖尔和呼和浩特地区6个集约化奶牛场的509份血清进行了牛病毒性腹泻病毒抗体检测。结果表明:共检出阳性血清297份,6个牛场的牛病毒性腹泻病毒血清阳性率分别为55.10%、38.80%、45.50%、50.00%、77.80%、33.33%;乌兰浩特、巴彦淖尔、呼和浩特这3个地区的平均阳性率分别为77.80%、48.70%、33.33%,总血清阳性率为58.35%。说明内蒙古地区存在牛病毒性腹泻病毒的感染,应采取相应的措施净化牛场。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 中和抗原 中和抗体
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牛病毒性腹泻病毒抗原捕获ELISA方法的建立 被引量：18
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作者 范晴 谢芝勋 +5 位作者 谢志勤 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢丽基 罗思思 《动物医学进展》 北大核心 2015年第2期21-24,共4页
用兔抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)多抗作为包被抗体,BVDV NS3单克隆抗体作为捕获抗体,建立了检测BVDV抗原的捕获ELISA方法,对各项反应条件进行优化,最终获得最佳工作条件为兔多抗1∶1 600稀释包被,NS3单抗1∶2 000稀释,酶标抗体工作浓度为1... 用兔抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)多抗作为包被抗体,BVDV NS3单克隆抗体作为捕获抗体,建立了检测BVDV抗原的捕获ELISA方法,对各项反应条件进行优化,最终获得最佳工作条件为兔多抗1∶1 600稀释包被,NS3单抗1∶2 000稀释,酶标抗体工作浓度为1∶4 000稀释。特异性和敏感性试验结果表明,该方法对牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛分支杆菌无特异性交叉反应,其最低可检测7.9×103个TCID50的病毒量,与RT-PCR方法的相比较,符合率为100%。所建立的BVDV抗原捕获ELISA方法快速、特异、敏感,可用于BVDV抗原的检测。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 NS3单克隆抗体 ELISA
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检测牛5种腹泻病毒的多重RT-PCR方法的建立及应用 被引量：15
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作者 孙吉 岳华 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期209-218,共10页
牛A群轮状病毒(BRVA)、牛冠状病毒(BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛诺瓦病毒(BNoV)和牛纽布病毒(BNeV)是引起犊牛腹泻的常见病毒,且临床上多存在混合感染的情况。本试验的目的是建立可以同时检测上述5种病毒的多重PCR方法。通过设计... 牛A群轮状病毒(BRVA)、牛冠状病毒(BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛诺瓦病毒(BNoV)和牛纽布病毒(BNeV)是引起犊牛腹泻的常见病毒,且临床上多存在混合感染的情况。本试验的目的是建立可以同时检测上述5种病毒的多重PCR方法。通过设计引物,优化反应体系和条件,成功建立了可同时检测BRVA、BCoV、BVDV、BNoV和BNeV的多重PCR方法。该方法只特异性检出目标病毒,而对牛星状病毒、牛嵴病毒、牛细小病毒、产肠毒素大肠杆菌、沙门菌和空肠弯曲杆菌等腹泻病原均无扩增,具有良好的特异性和稳定性。对BRVA、BCoV、BVDV、BNoV、BNeV的最低检测下限分别为1.63×10^(5)、2.0×10^(6)、1.9×10^(5)、1.96×10^(5)和2.0×10^(5)copies·μL^(-1)。比较试验表明,该多重RT-PCR方法与检测单一病毒的RT-PCR方法的符合率为100%。利用该方法对2019—2020年采集自川西北草原的220份牦牛腹泻样本的检测结果表明,BRV的检出率为40.5%、BNoV的检出率为5.9%、BNeV的检出率为4.5%,而BVDV和BCoV无检出。本研究建立的多重RT-PCR方法可同时检测犊牛腹泻粪便样品中的5种常见腹泻病毒,为牛腹泻的快速诊断提供了技术支持。 展开更多
关键词 牛A群轮状病毒 牛冠状病毒 牛病毒性腹泻病毒 牛诺瓦病毒 牛纽布病毒 多重RT-PCR
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