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酸敏感离子通道在大鼠佐剂性关节炎关节软骨中的表达 被引量:13
1
作者 袁凤来 陈飞虎 +4 位作者 黄学应 李霞 吴繁荣 阮晶晶 李俊 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期321-324,I0001,共5页
目的 检测酸敏感离子通道(ASICs)在大鼠佐剂性关节炎关节软骨中的表达情况。方法大鼠右侧后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(CFA)诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠模型,用半定量反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和Westernblot方法检测ASICs在A... 目的 检测酸敏感离子通道(ASICs)在大鼠佐剂性关节炎关节软骨中的表达情况。方法大鼠右侧后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(CFA)诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠模型,用半定量反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和Westernblot方法检测ASICs在AA大鼠关节软骨的表达。结果经半定量RT—PCR分析,ASIC1a、ASIC2a和ASIC3在AA大鼠关节软骨中的表达量明显高于正常组.差异有统计学意义(P〈0.01);Westernblot进一步检测显示蛋白表达的变化与mRNA变化一致。结论AA大鼠关节软骨中ASICs的表达增多,可能与关节软骨破坏有关。 展开更多
关键词 关节炎 实验性 离子通道 软骨 关节 反转录聚合酶链反应 印迹法 蛋白质
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增殖抑制基因HSG与乳腺癌浸润和转移的相关性 被引量:5
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作者 付玉环 姜广建 夏庆安 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第12期1128-1131,共4页
目的:研究增殖抑制基因(HSG)在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌发生、发展、浸润和转移的关系.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)方法检测46例乳腺癌组织、27例乳腺增生组织、30例乳腺纤维腺瘤组织和18... 目的:研究增殖抑制基因(HSG)在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌发生、发展、浸润和转移的关系.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)方法检测46例乳腺癌组织、27例乳腺增生组织、30例乳腺纤维腺瘤组织和18例癌旁正常乳腺组织中HSG mRNA及其蛋白的表达情况.结果:46例乳腺癌组织中HSG mRNA及其蛋白的相对表达水平和表达率分别为(0.87±0.14)和43.48%,(0.67±0.11)和45.65%,其表达率显著低于癌旁正常乳腺组织的(1.28±0.09)和83.33%,(1.17±0.36)和88.89%;乳腺纤维腺瘤的(1.36±0.19)和86.67%,(1.23±0.28)和90.00%;乳腺增生组织的(1.19±0.12)和70.37%,(0.93±0.24)和74.07%(P<0.05).相关性分析表明,HSG的表达与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移和ER有关(P<0.05),而与患者的年龄、肿瘤大小和TNM分期等无相关性(P>0.05).结论:乳腺癌患者HSG的低表达,更易发生淋巴结转移,提示HSG不仅与乳腺癌的发生发展有关,而且与乳腺癌的浸润和转移密切相关,可作为预测乳腺癌转移的重要生物学指标. 展开更多
关键词 基因 抑制 乳腺肿瘤 逆转录聚合酶链反应 印迹法 蛋白质
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葫芦素E对人乳腺癌细胞抑制作用及其机制的探讨 被引量:4
3
作者 蓝天 徐谦 +3 位作者 刘卫国 金洪传 毛伟敏 王晓稼 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第14期1065-1069,共5页
目的:研究葫芦素E(CuE)体外对人乳腺癌Bcap-37和MDA-MB-231细胞增殖的影响及其相关分子机制。方法:采用MTT法观察不同浓度CuE(0、0.1、1.0、10.0和100.0μmol/L)作用不同时间(24、48和72h)后对乳腺癌Bcap-37和MDA-MB-231细胞的影响;流... 目的:研究葫芦素E(CuE)体外对人乳腺癌Bcap-37和MDA-MB-231细胞增殖的影响及其相关分子机制。方法:采用MTT法观察不同浓度CuE(0、0.1、1.0、10.0和100.0μmol/L)作用不同时间(24、48和72h)后对乳腺癌Bcap-37和MDA-MB-231细胞的影响;流式细胞仪检测CuE对乳腺癌细胞周期分布和细胞凋亡的影响;用蛋白质印迹法测定CuE处理后乳腺癌细胞内Pro-Caspase-3、cleaved Caspase-3及cleaved PARP蛋白水平的变化。结果:MTT结果显示CuE可显著抑制乳腺癌细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性,P<0.05。在CuE(0.1、1.0、10.0和100.0μmol/L)作用24h后,Bcap-37和MDA-MB-231细胞增殖抑制范围分别为17%~44%和12%~56%;而在作用48和72h后Bcap-37和MDA-MB-231细胞抑制率分别为24%~87%、36%~89%和33%~89%、61%~94%。流式细胞仪检测显示,CuE诱导乳腺癌细胞G2/M期阻滞和细胞凋亡。荧光显微镜显示,CuE处理组乳腺癌细胞出现典型的细胞核固缩现象。蛋白质印迹法结果显示,经CuE处理后乳腺癌细胞内cleaved Caspase-3及cleaved PARP蛋白水平上调,而Pro-Caspase-3水平则下降。结论:CuE可抑制乳腺癌细胞Bcap-37和MDA-MB-231细胞的增殖,并呈CuE浓度和时间依赖性,其抑制作用可能与诱导细胞凋亡和G2/M周期阻滞有关。 展开更多
关键词 葫芦素E 乳腺肿瘤 凋亡 印迹法 蛋白质
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用蛋白印迹技术初步评价肝母细胞瘤血管内皮生长因子表达的意义 被引量:3
4
作者 高红 王贵新 +1 位作者 王维林 张可仞 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2006年第2期61-64,共4页
目的通过观察小儿肝母细胞瘤(pedo-hepatoblastoma)组织中血管内皮生长因子C(vascular endothelial cell growth factor C,VEGF-C)及其受体Flt4(又称VEGF-R3)蛋白的表达,初步评价其生物学行为间的关系及检测的意义。方法用蛋白印迹技术... 目的通过观察小儿肝母细胞瘤(pedo-hepatoblastoma)组织中血管内皮生长因子C(vascular endothelial cell growth factor C,VEGF-C)及其受体Flt4(又称VEGF-R3)蛋白的表达,初步评价其生物学行为间的关系及检测的意义。方法用蛋白印迹技术检测26例小儿肝母细胞瘤、瘤旁肝组织及20例正常对照组织中蛋白的表达。结果19例肝母细胞瘤有明显的VEGF-C蛋白印迹(73.1%),7例瘤旁肝组织中有不同程度的VEGF-C蛋白印迹(26.9%);21例肝母细胞瘤有明显的Flt4蛋白印迹(80.8%),6例瘤旁肝组织中有不同程度的Flt4蛋白印迹(23.1%)。20例正常对照组织中均不与VEGF-C和Flt4反应,而没有蛋白表达。结论VEGF-C和Flt4在肝母细胞瘤中呈高表达,可能在肝母细胞瘤分化、浸润及病理组织类型中起作用;其蛋白的检测可能有一定的临床意义。 展开更多
关键词 肝胚细胞瘤 血管内皮生长因子 印迹法 蛋白质
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免疫组织化学和免疫印迹法诊断dystrophin相关的临床表现良性肌病 被引量:2
5
作者 吴冬燕 陈琳 +6 位作者 赵燕环 任海涛 关鸿志 魏妍平 刘智 钱敏 郭玉璞 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期45-50,共6页
目的探讨免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和免疫印迹(Westernblot)法在诊断dystrophin表达异常的临床表现相对良性肌病中的价值。方法收集4例肌肉活体组织检查标本显示dystrophin表达异常、临床表现良性的肌病患者的病史... 目的探讨免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和免疫印迹(Westernblot)法在诊断dystrophin表达异常的临床表现相对良性肌病中的价值。方法收集4例肌肉活体组织检查标本显示dystrophin表达异常、临床表现良性的肌病患者的病史、临床特点,并对肌肉组织标本分别行组织学、IHC(dys—N、dys—R及dys—C)染色,同时进行Western blot分析。结果4例患者中2例主要表现为肢体无力,另2例主要表现为单纯的肌肉疼痛和血清CK升高。组织学显示2例为明显肌源性改变,可见肌纤维萎缩、肥大及分裂现象,另2例仅见肌纤维轻度大小不等。IHC发现1例患者肌纤维膜dys—N无表达,dys—R及dys—C显示肌纤维膜清晰着色,Westernblot示dys—R及dys-C条带较健康对照淡,dys—N条带完全缺失;3例IHC显示患者dys—R无表达,ays—N及dys—C显示肌纤维膜清晰着色,其中2例Western blot示dys—R条带完全缺失,dys-C及dys—N条带相对分子质量改变。结论利用3种抗dystrophin抗体进行肌肉组织IHC标记可以减少漏诊,Western blot对进一步确定dystrophin蛋白异常类型是十分必要的。 展开更多
关键词 肌疾病 肌营养不良蛋白 免疫组织化学 印迹法 蛋白质
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二肽基肽酶-4在瘢痕疙瘩中的表达情况研究
6
作者 梁仲尧 岑瑛 《中国美容医学》 CAS 2022年第1期87-89,共3页
目的:探讨二肽基肽酶-4(DPP4)在瘢痕疙瘩中的表达情况。方法:分别获取切除术后的瘢痕疙瘩组织及正常皮肤组织,然后通过蛋白免疫印迹方法、定量聚合酶链反应,比较二者DPP4基因在蛋白和mRNA水平上表达的差异。结果:与正常皮肤组织相比,DPP... 目的:探讨二肽基肽酶-4(DPP4)在瘢痕疙瘩中的表达情况。方法:分别获取切除术后的瘢痕疙瘩组织及正常皮肤组织,然后通过蛋白免疫印迹方法、定量聚合酶链反应,比较二者DPP4基因在蛋白和mRNA水平上表达的差异。结果:与正常皮肤组织相比,DPP4蛋白在瘢痕疙瘩组织中的表达高于正常皮肤,差异有统计学意义(P<0.05),DPP4基因在mRNA水平上的表达高于正常皮肤(P<0.05)。结论:DPP4在瘢痕疙瘩中的表达上升,DPP4可能在促进成纤维细胞活化、纤维化形成方面有一定作用。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 纤维化 二肽基肽酶-4 实时聚合酶链反应 蛋白免疫印迹 基因表达 成纤维细胞
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缺氧对骨肉瘤细胞MG63核干细胞因子表达调节及其机制的探讨 被引量:1
7
作者 刘郁东 郑启新 +3 位作者 吴宏斌 郭晓东 李景峰 郝少飞 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期191-195,共5页
目的:探讨缺氧对骨肉瘤细胞MG63核干细胞因子(NS)表达的调节及其机制。方法:反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测缺氧对NS转录和蛋白表达的影响;蛋白质印迹法检测在雷帕霉素抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达或激酶抑制剂... 目的:探讨缺氧对骨肉瘤细胞MG63核干细胞因子(NS)表达的调节及其机制。方法:反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测缺氧对NS转录和蛋白表达的影响;蛋白质印迹法检测在雷帕霉素抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达或激酶抑制剂预处理后NS在缺氧下的变化,检测NS调节的下游因子p53和活性Caspase-3蛋白表达的变化。结果:缺氧6、12和24 h后NS蛋白表达分别升高了1.26(P>0.05)、1.58(P<0.05)和1.92倍(P<0.01),NS的转录分别升高了1.33(P>0.05)、1.49(P<0.05)和1.54倍(P<0.05)。蛋白激酶B(Akt)抑制剂wortmannin逆转了缺氧对NS的上调,而细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂U0126、蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89和雷帕霉素则没有逆转缺氧对NS的上调。Akt活性在缺氧6、12和24 h后分别升高了1.51(P>0.05)、1.56(P<0.05)和1.23倍(P>0.05)。尽管缺氧上调了NS的表达,但NS的下游因子p53与活性Caspase-3蛋白表达在缺氧后无明显变化。结论:缺氧通过增强Akt的活性上调了NS的表达。 展开更多
关键词 骨肿瘤 缺氧 核干细胞因子 蛋白激酶B 印迹法 蛋白质
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人phb1基因在哺乳动物细胞株中的转染定位和表达
8
作者 邢昕 刘晓颖 +3 位作者 武标 汪云飞 朱恒锐 范礼斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第2期161-164,共4页
目的构建带Flag标签的phb1真核表达载体,将其转染至COS7细胞中观察phb1蛋白在细胞内的定位,并转染至HEK293T细胞检测其表达。方法以含人phb1全长cDNA序列的质粒pLenti6-phb1为模板,用PCR方法扩增phb1全长序列,连接至T载体,构建pUCm-T-ph... 目的构建带Flag标签的phb1真核表达载体,将其转染至COS7细胞中观察phb1蛋白在细胞内的定位,并转染至HEK293T细胞检测其表达。方法以含人phb1全长cDNA序列的质粒pLenti6-phb1为模板,用PCR方法扩增phb1全长序列,连接至T载体,构建pUCm-T-phb1,KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入真核表达载体pCDNA3中,将重组表达质粒pCDNA3-Flag-phb1转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位。转染至HEK293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测。结果经测序鉴定,成功构建了真核表达载体pCDNA3-Flag-phb1,转染后荧光显微镜观察phb1在COS7细胞中主要定位于胞质;经Western blot检测phb1基因在HEK293T细胞中能够有效表达。结论实验结果为进一步了解phb1的功能打下了基础。 展开更多
关键词 基因表达 转染 印迹法 蛋白质 哺乳动物
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人血管抑素AK(1—3)基因的克隆表达、纯化及活性鉴定
9
作者 王云龙 王国强 +3 位作者 李智涛 路晓娅 李玉林 王真 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期191-193,共3页
目的克隆人AngiostatinK(1-3)基因,获得有活性的重组人血管抑素蛋白,为进一步开发应用奠定基础。方法以人新鲜肝脏组织为材料,通过RT—PCR得到人Angiostatin基因的AK(1—3)片段。构建重组质粒pET30a—Angiostatin,转化表达菌Ros... 目的克隆人AngiostatinK(1-3)基因,获得有活性的重组人血管抑素蛋白,为进一步开发应用奠定基础。方法以人新鲜肝脏组织为材料,通过RT—PCR得到人Angiostatin基因的AK(1—3)片段。构建重组质粒pET30a—Angiostatin,转化表达菌Rosetta(DE3),对转化子进行诱导表达,利用Ni—NTA亲和层析纯化目的产物,并验证其活性。结果获得了人Angiostatin基因AK(1-3)片段的正确序列,表达和纯化了人血管抑素蛋白,表达量占菌体总蛋白的30%,纯化后证明表达产物具有较高纯度(达到90%)。结论AngiostatinK(1-3)可在原核融合蛋白表达载体中表达,且得到有活性的目的蛋白。 展开更多
关键词 血管生成抑制剂 包涵体 基因表达 印迹法 蛋白质
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ATDC蛋白在大肠癌中的表达及意义
10
作者 邓军 吴珂 +3 位作者 李航 童强 卢晓明 王国斌 《腹部外科》 2012年第3期179-181,共3页
目的探讨共济失调性毛细血管扩张D组互补基因(ATDC)表达在大肠癌的发生发展中的作用及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测大肠癌病人癌组织和正常大肠组织中的ATDC蛋白表达和定位,Westernblot和RT-PCR定量ATDC蛋白的表达水平... 目的探讨共济失调性毛细血管扩张D组互补基因(ATDC)表达在大肠癌的发生发展中的作用及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测大肠癌病人癌组织和正常大肠组织中的ATDC蛋白表达和定位,Westernblot和RT-PCR定量ATDC蛋白的表达水平,分析ATIX;蛋白和临床病理参数之间的关系。结果ATDC蛋白在正常组织和癌组织表达差异有统计学意义(P〈0.05),癌组织中ATDC表达在性别、年龄、Dukes分期因素之间差异无统计学意义,在淋巴结转移及分化程度因素间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论ATDC在癌组织中表达升高提示其可能参与了肿瘤的发生发展。检测ATDC表达对于大肠癌的诊断和判断预后有一定的意义。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 基因调控网络 免疫组织化学 印迹法 蛋白质 逆转录聚合酶链反应 共济失调性毛细血管扩张D组互补基因
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波形蛋白在肾细胞癌组织中的表达及其临床意义 被引量:4
11
作者 吴志新 何辉 宋天保 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2006年第11期1425-1427,共3页
目的:研究波形蛋白(v im entin)在肾细胞癌组织中的表达,从细胞骨架蛋白角度阐述肾细胞癌侵袭转移的可能机制。方法:应用W estern印迹法检测52例肾细胞癌组织及26例癌旁正常肾组织中v im entin的表达差异情况,并分析其与肾细胞癌分级、... 目的:研究波形蛋白(v im entin)在肾细胞癌组织中的表达,从细胞骨架蛋白角度阐述肾细胞癌侵袭转移的可能机制。方法:应用W estern印迹法检测52例肾细胞癌组织及26例癌旁正常肾组织中v im entin的表达差异情况,并分析其与肾细胞癌分级、分期之间的关系。结果:肾细胞癌组织中v im entin的表达阳性率显著高于癌旁正常肾组织。对v im entin蛋白条带的灰度值分析显示,v im entin的相对表达水平与肾细胞癌的分级与分期均显著相关,随着肾细胞癌分级、分期水平的增高,其相对表达量也逐渐增多。结论:v im entin可能在肾细胞癌的进展和转移过程中发挥重要作用,并可能为早期监测肾细胞癌发生及判断预后提供依据。 展开更多
关键词 肾肿瘤/病理生理学 波形蛋白 印迹法 Far-western
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RNAi沉默KPNA2对人膀胱癌细胞系5637转移潜能的影响 被引量:6
12
作者 史本涛 苏博兴 +3 位作者 方冬 何群 李学松 周利群 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第11期832-835,845,共5页
目的探讨RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)沉默KPNA2(karyopherin a2)基因表达对人膀胱癌细胞系5637迁移和侵袭能力的影响。方法实验分为siRNA敲低组和阴性对照组。siRNA敲低组设计合成靶向KPNA2序列的小分子干扰RNA(small interferi... 目的探讨RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)沉默KPNA2(karyopherin a2)基因表达对人膀胱癌细胞系5637迁移和侵袭能力的影响。方法实验分为siRNA敲低组和阴性对照组。siRNA敲低组设计合成靶向KPNA2序列的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用LipofectaminTM2000方法瞬时转染膀胱癌细胞系5637;阴性对照组采用无关序列RNA采集。转染后48h,应用蛋白质印迹法检测KPNA2的蛋白表达;Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果蛋白质印迹法检测结果显示,膀胱癌5637细胞转染KPNA2特异性siRNA 48h,与阴性对照组相比较,敲低组细胞KPNA2蛋白表达水平下降92.1%,差异有统计学意义,P=0.004 3。Transwell实验检测结果显示,敲低组细胞迁移能力明显受到抑制,细胞抑制率为61.7%,差异有统计学意义,P=0.038;敲低组细胞侵袭能力也明显受到抑制,细胞抑制率为58.6%,差异有统计学意义,P=0.026。结论靶向KPNA2的特异siRNA能够下调KPNA2在膀胱癌5637细胞中的蛋白表达水平,有效抑制膀胱癌5637细胞的迁移和侵袭能力。以KPNA2为靶点的RNA干扰技术有望成为膀胱癌基因治疗的新方法。 展开更多
关键词 膀胱癌 KPNA2 RNA干扰 迁移 侵袭 印迹法 蛋白质
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人核小体结合蛋白1小分子干扰RNA重组慢病毒抑制非激素依赖性前列腺癌体内生长的实验研究 被引量:5
13
作者 蒋宁 周利群 +1 位作者 姚鲲 黄晨 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2010年第2期25-28,共4页
目的探讨重组慢病毒介导的人核小体结合蛋白1(NSBP1)基因沉默对非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145移植瘤生长的抑制作用及机制。方法慢病毒lentivirus-NSBP1转染非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145。用转染细胞成瘤,观察抑瘤效果。运用实时... 目的探讨重组慢病毒介导的人核小体结合蛋白1(NSBP1)基因沉默对非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145移植瘤生长的抑制作用及机制。方法慢病毒lentivirus-NSBP1转染非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145。用转染细胞成瘤,观察抑瘤效果。运用实时RT-PCR和Western blot方法检测移植瘤中NSBP1、cyclinB1与Bcl-2的mRNA和蛋白的表达。结果体内实验证实NSBP1表达水平的降低,对肿瘤细胞在裸鼠体内成瘤率没有影响,但对肿瘤的生长有明显抑制作用。同时随着NSBP1表达水平的降低,cyclinB1和Bcl-2的mRNA及蛋白的表达也降低。结论NSBP1-RNAi-lentivirus重组慢病毒能有效抑制DU145细胞移植瘤的生长,NSBP1可能通过调控cyclinB1、Bcl-2基因的变化影响肿瘤细胞的生长。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 RNA 小分子干扰 HMGN1蛋白质 慢病毒属 印迹法 蛋白质
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血液光量子疗法影响热休克蛋白表达的研究 被引量:3
14
作者 张君岚 孙树汉 +1 位作者 黄善生 凌亦凌 《中国全科医学》 CAS CSCD 2000年第2期108-109,共2页
目的 探讨血液光量子疗法对细胞HSP70表达的影响及血液光量子疗法治疗作用的机理。方法 利用不同剂量紫外线 (UV)照射体外培养的小鼠巨噬细胞 ,进行HSP70表达的Northern印迹分析 ;并用不同剂量UV照射大鼠血液后回输进行HSP70合成的Wes... 目的 探讨血液光量子疗法对细胞HSP70表达的影响及血液光量子疗法治疗作用的机理。方法 利用不同剂量紫外线 (UV)照射体外培养的小鼠巨噬细胞 ,进行HSP70表达的Northern印迹分析 ;并用不同剂量UV照射大鼠血液后回输进行HSP70合成的Western印迹分析。结果 小剂量UV (30秒钟 )照射后细胞内HS P70mRNA稍有增多 ,增大剂量 (1分钟 )后其表达明显增多 ;UV照射血液回输可引起大鼠肺、肝组织HSP70合成增多 ,但与未照射的血液回输所致HSP70增多无明显差异。结论 血液光量子疗法能够诱导细胞内HSP70表达增多 ,且与UV照射剂量有关 ;UV照射血液与未照射血液回输均可引起体内HSP70合成增多。 展开更多
关键词 血液光量子疗法 热休克蛋白 NORTHERN western
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G蛋白在快速老化痴呆小鼠SAMP8脑组织中的表达 被引量:3
15
作者 阚伯红 张海霞 +1 位作者 于建春 韩景献 《天津医药》 CAS 北大核心 2010年第11期980-982,共3页
目的:观察在不同月龄小鼠SAMP8皮质和海马中G蛋白的表达情况。方法:利用Western-blot方法检测Gαq/11、Gαi和GαS蛋白在8月龄和18月龄快速老化痴呆小鼠SAMP8的表达,并以正常老化小鼠SAMR1作为对照研究。结果:与同月龄SAMR1相比,Gαq/11... 目的:观察在不同月龄小鼠SAMP8皮质和海马中G蛋白的表达情况。方法:利用Western-blot方法检测Gαq/11、Gαi和GαS蛋白在8月龄和18月龄快速老化痴呆小鼠SAMP8的表达,并以正常老化小鼠SAMR1作为对照研究。结果:与同月龄SAMR1相比,Gαq/11、Gαi和Gαs蛋白在8月龄小鼠SAMP8皮质和海马组织中的表达无明显异常(P>0.05),而到18月龄时,SAMP8皮质部位Gαq/11表达量低于SAMR1(P<0.05),海马部位Gαq/11和Gαi的表达量低于SAMR1(P<0.05)。结论:18月龄SAMP8脑组织中Gαq/11和Gαi的异常表达参与了阿尔茨海默病(AD)的病理进展,并有望作为AD治疗的一个靶点。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 GTP结合蛋白质类 印迹法 蛋白质 小鼠 模型 动物
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基因表达谱芯片筛选破裂性腹主动脉瘤组织中的差异表达基因
16
作者 杨军 胡新华 +3 位作者 张宏伟 刘程伟 张志深 张强 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2006年第7期555-559,共5页
目的采用表达谱基因芯片技术筛选破裂性腹主动脉瘤组织中的差异表达基因。方法选取破裂性腹主动脉瘤组织标本6例,以年龄、性别构成、动脉瘤直径等相仿的6例未破裂腹主动脉瘤作对照。抽提总RNA,纯化mRNA后逆转录制备杂交探针,采用含有4 ... 目的采用表达谱基因芯片技术筛选破裂性腹主动脉瘤组织中的差异表达基因。方法选取破裂性腹主动脉瘤组织标本6例,以年龄、性别构成、动脉瘤直径等相仿的6例未破裂腹主动脉瘤作对照。抽提总RNA,纯化mRNA后逆转录制备杂交探针,采用含有4 096种人类基因全长cDNA的表达谱芯片进行差异表达谱分析,通过Northern blot或Western blot反向验证部分差异表达基因。结果在破裂性腹主动脉瘤组织中发现差异表达基因共有124条,上调的基因89条,下调的基因35条;共存性基因有42条,其中上调基因29条,下调基因13条。差异表达的基因有与基质代谢、炎性因子及粘附分子、细胞凋亡、原癌基因或抑癌基因、细胞信号和传递蛋白、细胞骨架和运动蛋白相关基因表达密切相关的多种基因参与。通过Northern blot等方法反向验证基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂2基因,证实在腹主动脉瘤组织中存在基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂2的mRNA及蛋白产物的差异表达。结论应用表达谱基因芯片筛选破裂性腹主动脉瘤中的差异表达基因,可能为其发病机制及防治的研究提供新思路。 展开更多
关键词 生物医学工程学 腹主动脉瘤 NORTHERN blotwestern blot 基因表达 基因芯片 基质金属蛋白酶 金属蛋白酶组织抑制剂
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真核细胞起始因子4E在喉鳞癌中的表达
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作者 张海利 王斌全 +2 位作者 温树信 皇甫辉 柴向斌 《山西医药杂志(上半月)》 CAS 2008年第5期413-414,共2页
目的通过检测真核细胞起始因子4E(eIF4E)在喉鳞癌中的表达,探讨其与喉鳞癌的关系。方法采用免疫组织化学法检测52例喉鳞癌组织、20例喉黏膜不典型增生组织、30例喉良性增生组织及10例正常喉黏膜组织中eIF4E基因蛋白的表达情况;用Western... 目的通过检测真核细胞起始因子4E(eIF4E)在喉鳞癌中的表达,探讨其与喉鳞癌的关系。方法采用免疫组织化学法检测52例喉鳞癌组织、20例喉黏膜不典型增生组织、30例喉良性增生组织及10例正常喉黏膜组织中eIF4E基因蛋白的表达情况;用Western-blot法检测20例新鲜喉鳞癌标本的癌中心区(TC)、过渡区(TR)及病理证实的无癌区(TF)中eIF4E的表达情况。结果eIF4E在喉鳞癌中表达的阳性率为100%,显著高于对照组。eIF4E在喉鳞癌的无癌区、过渡区及中心区的表达水平呈进行性增高。结论过度表达的eIF4E是喉鳞癌恶性改变及判断其恶性程度的一个分子标志。 展开更多
关键词 真核细胞起始因子4E 免疫组织化学 印迹法 far—western 喉肿瘤
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XAF1基因对顺铂诱导肺腺癌A549细胞凋亡作用的研究 被引量:1
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作者 朱传东 王礼学 +4 位作者 郭晶晶 耿杰 徐瀚峰 张全安 郑勤 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第19期1499-1502,1512,共5页
目的:通过顺铂诱导人肺腺癌细胞A549的凋亡,研究X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis protein associated factor-1,XAF1)基因在A549细胞中的表达情况,初步探讨该基因在凋亡中的作用。方法:采用4μg/mL... 目的:通过顺铂诱导人肺腺癌细胞A549的凋亡,研究X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis protein associated factor-1,XAF1)基因在A549细胞中的表达情况,初步探讨该基因在凋亡中的作用。方法:采用4μg/mL浓度的顺铂处理A549细胞,MTT法检测细胞的增殖抑制率;AnnexinⅤ/7-AAD检测A549细胞凋亡情况;RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测A549凋亡后XAF1mRNA和蛋白的表达;Caspase-3试剂盒检测A549细胞凋亡后Caspase-3的活性。结果:用4μg/mL浓度顺铂处理A549细胞2、12和24h后,A549细胞增殖抑制率分别为(3.40±0.65)%、(8.31±0.73)%和(14.72±0.24)%,与对照组(1.03±0.28)%相比均明显增高,P值分别为0.004、0.000和0.000,细胞增殖抑制率随时间增加而增强;A549细胞凋亡率分别为(4.35±0.95)%、(9.69±2.60)%和(22.35±1.24)%,与对照组(1.39±0.21)%相比均明显增加,P值分别为0.006、0.005和0.000,细胞凋亡率随顺铂作用时间延长而增加;实验组XAF1mRNA表达水平分别为(0.199±0.029)、(0.654±0.093)和(1.216±0.101),对照组为(0.091±0.020),XAF1mRNA表达水平随作用时间的延长呈增加趋势,P值分别为0.006、0.001和0.000;实验组XAF1蛋白表达水平分别为(0.322±0.041)、(0.508±0.014)和(0.901±0.014),对照组为(0.124±0.007),XAF1蛋白表达水平随作用时间的延长呈增加趋势,P值分别为0.001、0.000和0.000;Caspase-3活性(A405nm)分别为(34.745±3.781)、(69.524±3.096)和(94.787±5.429),对照组为(21.914±1.962),Caspase-3活性随顺铂作用时间的延长而增加。结论:顺铂诱导A549细胞凋亡可以引起XAF1表达增加,且随细胞凋亡水平的提高而增加,提示XAF1可能参与顺铂诱导人肺腺癌A549细胞的凋亡过程。 展开更多
关键词 肺肿瘤 顺铂 A549细胞 X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1 细胞凋亡 印迹法 蛋白质
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GFAP及PKC在电磁脉冲辐照大鼠额叶皮层中的表达及意义
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作者 邱联波 丁桂荣 +2 位作者 周艳 陈晨 丁军伟 《中华疾病控制杂志》 CAS 2011年第8期643-647,共5页
目的探讨胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)辐照成年雄性SD大鼠额叶皮层中的含量变化及其意义。方法将成年雄性SD大鼠随机分为假辐照组(... 目的探讨胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)辐照成年雄性SD大鼠额叶皮层中的含量变化及其意义。方法将成年雄性SD大鼠随机分为假辐照组(sham)和辐照组,辐照组又按辐照后取材时间不同分为0.5 h,1 h,3 h,6 h和12 h。采用免疫组化法分析EMP辐照后额叶皮层中GFAP表达情况,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)分析额叶皮层中总PKC含量;选用Western Blot法分析PKC(PKC-α,PKC-βⅠ,PKC-βⅡ),PKC-α和PKC-βⅡ蛋白含量。结果 EMP辐照后额叶皮层中GFAP阳性表达细胞数增加,胞体增大,且峰值均出现在辐照后3 h(P<0.05)。额叶皮层中总PKC含量在EMP辐照后0.5 h增加且达到峰值(P<0.05),之后逐渐恢复,至12 h达到假辐照组水平;Western Blot结果显示PKC及PKC-βⅡ在EMP辐照后0.5 h和1 h表达量增加(P<0.05),之后恢复至假辐照组水平,PKC-α在辐照各组与假辐照相比差异均不具有统计学意义(P>0.05)。结论在EMP辐照引起大鼠额叶皮层损伤过程中,PKC含量增加可能起重要作用。 展开更多
关键词 电磁脉冲 胶质纤维酸性蛋白 蛋白激酶C 酶联免疫吸附测定 印迹法 蛋白质
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HSVⅠ感染L-02细胞对核不均一性核糖核蛋白H2(hnRNP H2)表达影响 被引量:1
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作者 王赛锋 寸韡 +4 位作者 董承红 洪敏 刘龙丁 王蕾 李琦涵 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期18-22,共5页
单纯疱疹病毒(HSVⅠ)对宿主细胞转录及mRNA修饰翻译通路的调控是一个系统的、复杂的体系,探索其具体机制将有助于了解病毒复制过程及与宿主细胞之间的相互作用。基于2-DE分析,人正常肝细胞L-02细胞核不均一性核糖核蛋白H2(heterogeneous... 单纯疱疹病毒(HSVⅠ)对宿主细胞转录及mRNA修饰翻译通路的调控是一个系统的、复杂的体系,探索其具体机制将有助于了解病毒复制过程及与宿主细胞之间的相互作用。基于2-DE分析,人正常肝细胞L-02细胞核不均一性核糖核蛋白H2(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H2,hnRNP H2)在感染HSVⅠ前后存在表达差异,通过Western blot,Northern blot等技术方法验证其在病毒复制过程中不同时段对其表达影响。 展开更多
关键词 HSVⅠ 核不均一性核糖核蛋白H2(hnRNP H2) L-02 Northern blot
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