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视频图像修复算法的研究 被引量:4
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作者 韩军 闵有刚 +1 位作者 宋海华 邵志一 《电视技术》 北大核心 2007年第7期72-74,82,共4页
对旧的视频资料的修复进行了探讨,分析了10种损坏特征的视频源,提出了以自动修复、半自动修复以及交互式修复相结合的修复方案。同时,针对视频图像损坏特征中较复杂的水平与垂直条带、局部颜色失真和斑点提出了具体的修复方法。
关键词 视频修复 斑点检测 垂直条带 视频损坏特征
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改进的斑点检测算法 被引量:5
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作者 吴冏 张然然 +1 位作者 魏舒罕 丁友东 《计算机工程与设计》 CSCD 北大核心 2010年第22期4851-4854,共4页
为了最大化斑点检测中正确检测率与错误检测率之间的比值,改进了简单排序差分算法(SROD)的斑点判别准则,并提出新的斑点检测方法。针对同一帧图像中不同的斑点区域,使用自适应阈值迭代算法,使得每个斑点区域能够自动收敛到合适的阈值,... 为了最大化斑点检测中正确检测率与错误检测率之间的比值,改进了简单排序差分算法(SROD)的斑点判别准则,并提出新的斑点检测方法。针对同一帧图像中不同的斑点区域,使用自适应阈值迭代算法,使得每个斑点区域能够自动收敛到合适的阈值,同时采用纹理匹配方法克服了在斑点区域由于运动估计不准确而导致的偏差。通过对人工随机添加斑点的图像序列进行测试,实验结果表明,改进的方法比原有算法取得了更好的检测效果。 展开更多
关键词 影像修复 斑点检测 运动估计 纹理匹配 自适应多阈值
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运动图像序列中的斑点检测算法 被引量:2
3
作者 张然然 庞海波 张怡 《计算机工程》 CAS CSCD 2013年第8期227-230,共4页
传统运动图像斑点检测算法通过降低阈值来提高正确检测率,但较高的错误检测率直接影响其后的斑点修复结果。为最大化正确检测率与错误检测率之间的比值,在SROD检测算法的基础上提出改进的斑点检测算法。引入自适应多阈值的概念,对同一... 传统运动图像斑点检测算法通过降低阈值来提高正确检测率,但较高的错误检测率直接影响其后的斑点修复结果。为最大化正确检测率与错误检测率之间的比值,在SROD检测算法的基础上提出改进的斑点检测算法。引入自适应多阈值的概念,对同一帧图像中的不同斑点进行自动收敛,找到合适的阈值,采用纹理匹配方法减小斑点区域中由于运动矢量估计导致的偏差。对实际破损以及人工添加斑点的图像序列进行性能评估,结果表明,改进算法能在得到较高正确检测率的同时降低错误检测率。 展开更多
关键词 斑点检测 自适应多阈值 纹理匹配 迭代算法 视频修复 运动矢量估计
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影像资料数字化修复系统的研究 被引量:1
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作者 张然然 张怡 《计算机与现代化》 2013年第3期160-164,共5页
结合胶片电影的特点,提出基于胶片电影的数字化修复系统框架。其中斑点检测算法通过引入纹理匹配方法达到了提高正确检测率与错误检测率比值的目的。对于亮度闪烁,本文提出基于运动补偿及阈值法的闪烁修正方法,提高了算法效率并降低了... 结合胶片电影的特点,提出基于胶片电影的数字化修复系统框架。其中斑点检测算法通过引入纹理匹配方法达到了提高正确检测率与错误检测率比值的目的。对于亮度闪烁,本文提出基于运动补偿及阈值法的闪烁修正方法,提高了算法效率并降低了误检测率。对于垂直划痕,提出基于Canny理论和时空域特征的垂直划痕检测算法,实现准确地获取垂直划痕的长度、起始点位置与终点位置信息,提高了有限长度划痕的正确检测率。 展开更多
关键词 视频修复 视频增强 斑点检测 亮度闪烁修正 垂直划痕检测
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一种改进的基于MRF模型的斑块检测算法 被引量:1
5
作者 徐进 孙军 +1 位作者 王兴东 翟广涛 《中国图象图形学报》 CSCD 北大核心 2009年第11期2401-2405,共5页
斑块是一种常见的电影胶片损伤。提出了一种基于马尔可夫随机场(MRF)的改进的多步斑块检测及验证算法(MDV)。MDV检测算法分3个步骤。第1步将斑点检测索引算法(SDIp)和等级顺序差分检测算法(ROD)相结合以提高斑块检测算法的检全率。第2... 斑块是一种常见的电影胶片损伤。提出了一种基于马尔可夫随机场(MRF)的改进的多步斑块检测及验证算法(MDV)。MDV检测算法分3个步骤。第1步将斑点检测索引算法(SDIp)和等级顺序差分检测算法(ROD)相结合以提高斑块检测算法的检全率。第2步的改进的MRF算法以第1步检测结果为运算定义域,大大减小了MRF算法的运算量。第2步随后在原始帧和运动补偿帧分别进行MRF算法检测,并通过添加去噪因子降低了改进的MRF算法的误检率。第3步通过时域的匹配技术将斑块进一步去伪存真。实验结果表明,在与现有的算法的对比中,该方法不仅有着更高的检全率和更低的误检率,而且计算速度也大大提高。 展开更多
关键词 数字电影修复 斑块检测 马尔可夫随机场
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一种基于改进的SROD算法的电影胶片斑块检测技术 被引量:1
6
作者 龙振兴 徐进 +1 位作者 余松煜 陈立 《中国图象图形学报》 CSCD 北大核心 2008年第10期1829-1832,共4页
电影胶片由于长期存放和多次播放,产生了灰尘、污垢、霉斑、图像抖动、划痕、闪烁、噪声、变色、模糊等问题,其中由灰尘、污垢等引起的斑块是出现最频繁的损伤之一。为了快速有效地对这些斑块进行检测,提出了一种检测电影胶片斑块损伤... 电影胶片由于长期存放和多次播放,产生了灰尘、污垢、霉斑、图像抖动、划痕、闪烁、噪声、变色、模糊等问题,其中由灰尘、污垢等引起的斑块是出现最频繁的损伤之一。为了快速有效地对这些斑块进行检测,提出了一种检测电影胶片斑块损伤的技术,该技术首先用改进的SROD算法对受损帧的斑块进行初步检测,然后通过两次EM估计算法对检测结果进行后处理来消除噪声的影响,同时确定斑块位置及其边缘信息。实验结果显示,该技术不仅可以有效地检测斑块,而且算法简单快速。 展开更多
关键词 电影胶片 斑块检测 EM算法
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基于统计学的老电影斑点自适应检测方法 被引量:1
7
作者 何凯 吕亮 孟春芝 《天津大学学报(自然科学与工程技术版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期427-432,共6页
传统基于ROD的斑点检测算法在对不同帧或当前帧的不同区域进行检测时,所采取的阈值是固定不变的,缺乏自适应性,同时也在很大程度上影响了检测效果.为了解决上述问题,提出了一种基于统计学的自适应阈值检测方法.传统检测方法仅计算各孤... 传统基于ROD的斑点检测算法在对不同帧或当前帧的不同区域进行检测时,所采取的阈值是固定不变的,缺乏自适应性,同时也在很大程度上影响了检测效果.为了解决上述问题,提出了一种基于统计学的自适应阈值检测方法.传统检测方法仅计算各孤立点之间的灰度级差异,而该算法则是计算各点邻域块内的灰度级差异,同时利用阈值迭代及帧间的统计特性的方法来确定每一帧图像的最优阈值,提高了算法的自适应性.仿真实验结果表明,该算法的斑点检测效果比传统方法更加准确,自适应性也更高. 展开更多
关键词 老电影修复 斑点检测 局部标准差 自适应阈值
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基于边缘检测的快速斑点识别算法
8
作者 谢丹桂 刘军清 +1 位作者 孙水发 雷帮军 《三峡大学学报(自然科学版)》 CAS 2010年第6期84-88,共5页
针对珍贵视频影像中的斑点识别与修复问题,提出了一种基于边缘检测的斑点识别算法.首先利用边缘检测算法提取当前帧的大致边缘,然后依据边缘像素,利用提出的正反扫描方法和局部运动估计的SROD算法识别出斑点全部像素点.实验表明,提出的... 针对珍贵视频影像中的斑点识别与修复问题,提出了一种基于边缘检测的斑点识别算法.首先利用边缘检测算法提取当前帧的大致边缘,然后依据边缘像素,利用提出的正反扫描方法和局部运动估计的SROD算法识别出斑点全部像素点.实验表明,提出的算法时间复杂度是SROD算法和Gullu MK算法的1/4到1/2,而斑点识别效果有较明显的改善,为后续斑点修复提供了快速准确的定位信息. 展开更多
关键词 斑点识别 边缘检测 简化的等级排列差分算法 影视资料
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哈密瓜细菌性果斑病菌快速检测方法的建立 被引量:25
9
作者 回文广 赵廷昌 +2 位作者 Schaad N W 孙福在 王建荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2495-2501,共7页
【目的】哈密瓜细菌性果斑病在中国为新发生的病害,其病原菌为燕麦食酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.Citrulli),危害瓜果造成品质下降。该病为典型的种传细菌性病害,因此种子检疫成为防治此病害的重要手段。【方法】通过实验,将... 【目的】哈密瓜细菌性果斑病在中国为新发生的病害,其病原菌为燕麦食酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.Citrulli),危害瓜果造成品质下降。该病为典型的种传细菌性病害,因此种子检疫成为防治此病害的重要手段。【方法】通过实验,将生物学、免疫学和分子生物学检测技术有机结合,建立了一套针对哈密瓜果斑病的种子带菌检测方法Bio-IMS-Real-timePCR。【结果】经过人工模拟种子带菌检测实验,结果表明该方法可成功地检测出1000粒种子中的1粒带菌种子(带菌量约为1.04×105CFU/种子,经计算,可以检测的最初浓度为2CFU·ml-1ASCM培养液),且信号较强。【结论】该检测方法的建立,大大提高了对哈密瓜细菌性果斑病菌检测的精度,也为生产实践中哈密瓜果斑病的防治提供了重要的技术支持。 展开更多
关键词 哈密瓜细菌性果斑病 快速 检测
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哈蜜瓜细菌性果斑病种子带菌血清学检测技术的初探 被引量:12
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作者 王政 胡俊 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第1期20-23,共4页
 本文对内蒙古哈蜜瓜细菌性果斑病(Acidovoraxavenaesubsp.Citrulli)进行了种子带菌血清学检测技术的研究。试验中制备了Acidovoraxavenaesubsp.Citrulli菌体抗血清,应用此抗血清进行载玻片凝集反应、试管凝集反应、琼胶双相扩散和免...  本文对内蒙古哈蜜瓜细菌性果斑病(Acidovoraxavenaesubsp.Citrulli)进行了种子带菌血清学检测技术的研究。试验中制备了Acidovoraxavenaesubsp.Citrulli菌体抗血清,应用此抗血清进行载玻片凝集反应、试管凝集反应、琼胶双相扩散和免疫分离法等试验。结果表明,载玻片凝集反应和试管凝集反应不能用来直接测定种子抽提液中的病原菌;琼胶双相扩散不能用来检测种子中的潜伏细菌;免疫分离法可用来检测种子中的潜伏细菌,灵敏度为102~3cfu/ml。 展开更多
关键词 细菌性果斑病 检测技术 种子带菌 血清学 哈蜜瓜 试管凝集反应 免疫分离法 直接测定 sp. sub 抗血清 载玻片 内蒙古 病原菌 抽提液 灵敏度 试验 扩散 双相 琼胶
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巢式PCR快速检测西瓜细菌性果斑病菌 被引量:15
11
作者 王婧 毕阳 +4 位作者 朱艳 韩舜愈 祝霞 盛文军 李敏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期284-291,共8页
【目的】建立nested-PCR方法,快速检测西瓜种子中的燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac),为西瓜细菌性果斑病(bacterial fruit blotch of watermelon,WFB)的防控提供技术支持。【方法】根据Aac BOX短重复序列的PC... 【目的】建立nested-PCR方法,快速检测西瓜种子中的燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac),为西瓜细菌性果斑病(bacterial fruit blotch of watermelon,WFB)的防控提供技术支持。【方法】根据Aac BOX短重复序列的PCR产物设计两对引物BX-L1/BX-R5和BX-L1/BX-S-R2,建立以BX-L1/BX-R5为外侧引物,BX-L1/BX-S-R2为内侧引物的nested-PCR,以5μL样品处理液于99℃高温裂解10 min,再放置冰上冷却5 min,以所释放病原DNA为模板进行PCR扩增,采用50μL反应体系:5μL 10×PCR buffer(25 mmol·L-1MgCl2),4μL dNTP(D4030RA,2.5 mmol·L-1),引物(5μmol·L-1)各3μL,0.4μL Taq DNA酶(DR001B,5 U·μL-1),通过退火温度优化,反应条件为:引物BX-L1/BX-R5各3μL进行第一轮扩增,95℃,2 min;95℃,30 s;65℃,45s;72℃,1 min;35个循环;72℃,延伸7 min;取扩增后的产物1μL为模板,以引物BX-L1/BX-S-R2各3μL进行第二轮扩增,95℃,2 min;95℃,30 s,66℃,45 s,72℃,1 min,30个循环,72℃,7 min。在此条件下对梯度Aac菌悬液、模拟带菌种子提取液进行特异性、灵敏性及重复性检验,对不同带菌率的西瓜种子提取液进行检测。【结果】引物BX-L1/BX-R5和BX-L1/BX-S-R2在检测不同来源的Aac菌株时都产生了预期大小的片段,并且对其近源种燕麦嗜酸菌卡特莱兰亚种(A.avenae subsp.cattleyae)、魔芋假单胞菌(A.avenae subsp.konjaci)及其不相关菌株未扩增出目标片段。以BX-L1/BX-R5为外侧引物,BX-L1/BX-S-R2为内侧引物的nested-PCR,对Aac纯菌液和模拟带菌种子提取液的最低检测限4.7×101cfu/mL,比direct-PCR灵敏度高出1 000倍。当西瓜种子带菌率在0.1%—0.5%时,nested-PCR阳性检测率为66.7%;当种子带菌率为1%—10%时,nested-PCR的阳性检测率为83%—100%。【结论】以BX-L1/BX-R5为外侧引物,BX-L1/BX-S-R2为内侧引物的nested-PCR方法,能够快速、高效检测携带微量Aac的西瓜种子,检测结果重现性高。 展开更多
关键词 西瓜细菌性果斑病 西瓜种子 PCR 检测
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西瓜细菌性果斑病菌在不同场所存活期的检测 被引量:12
12
作者 李艳嫦 孔静月 +3 位作者 吴九玲 王琳 任小平 刘琼光 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期332-336,共5页
选择西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)的抗利福平菌株RifAac,通过人工模拟接种试验,采用选择性平板分离、菌落PCR(Bio-PCR)和常规PCR方法,观察该病原细菌在西瓜种子、土壤、病残体和田水中的存活期。结果表明... 选择西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)的抗利福平菌株RifAac,通过人工模拟接种试验,采用选择性平板分离、菌落PCR(Bio-PCR)和常规PCR方法,观察该病原细菌在西瓜种子、土壤、病残体和田水中的存活期。结果表明,果斑病细菌在种子表面可存活4~5个月,在田水中可存活2个月,在不含植物残体的土壤中可存活8个月,在含西瓜残体的土壤中可以存活12个月以上。 展开更多
关键词 西瓜细菌性果斑病 燕麦嗜酸菌西瓜亚种 存活期 菌落PCR 检测
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中国柑橘叶斑驳病毒和碎叶病毒发生状况及其分子特性研究 被引量:10
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作者 项周 程桥 +2 位作者 谢宗周 王国平 洪霓 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期113-119,共7页
柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus,CLBV)和柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)均可侵染柑橘的不同种。为明确CLBV及CTLV在中国柑橘上的发生状况和分子特性,采用RT-PCR技术对来源于中国7个省的342份和346份柑橘样品进... 柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus,CLBV)和柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)均可侵染柑橘的不同种。为明确CLBV及CTLV在中国柑橘上的发生状况和分子特性,采用RT-PCR技术对来源于中国7个省的342份和346份柑橘样品进行检测,检出率分别为9.6%和11.0%。对14个CLBV分离物和15个CTLV分离物的外壳蛋白(Coat protein,CP)基因部分序列分析显示,CLBV分离物间cp核苷酸和编码氨基酸序列相似性分别为82.1%~100%和88.1%~100%,CTLV分离物的cp核苷酸和编码氨基酸序列相似性分别为89.5%~100%和92.5%~100%。测定的14个CLBV分离物在系统进化树中聚为2个组;而CTLV分离物分组不明显,该病毒的系统进化与寄主来源无明显关系。 展开更多
关键词 柑橘叶斑驳病毒 柑橘碎叶病毒 检测 系统进化分析
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我国瓜类细菌性果斑病研究新进展 被引量:8
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作者 季苇芹 叶云峰 +3 位作者 张爱萍 杨玉文 关巍 赵廷昌 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2022年第9期1-8,共8页
瓜类细菌性果斑病(Bacterial fruit blotch of melons,BFB)是由西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)引起的严重危害西瓜、甜瓜等葫芦科作物的检疫性种传病害。目前,尚未发现免疫或高抗的西瓜、甜瓜商用品种,也缺乏针对性防治药剂,如何高效... 瓜类细菌性果斑病(Bacterial fruit blotch of melons,BFB)是由西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)引起的严重危害西瓜、甜瓜等葫芦科作物的检疫性种传病害。目前,尚未发现免疫或高抗的西瓜、甜瓜商用品种,也缺乏针对性防治药剂,如何高效防治该病害是亟需攻克的生产难题。为了实现瓜类细菌性果斑病的高效防治,科研工作者对果斑病展开了一系列研究并取得较大进展。笔者主要就近5年我国对瓜类细菌性果斑病在病原鉴定、检测方法、致病机制及防治技术等方面的研究进展进行综述,以便于研究者全面了解果斑病的研究现状,并为今后果斑病的研究和防治提供参考。 展开更多
关键词 瓜类细菌性果斑病 致病机制 检测方法 防治技术
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免疫捕捉PCR法检测西瓜种子带细菌性果斑病菌 被引量:7
15
作者 徐福寿 王笑 +2 位作者 谢关林 苏婷 余山红 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期215-218,共4页
为提高免疫捕捉PCR法检测瓜种携带西瓜细菌性果斑病菌的灵敏度并明确浙江省主要市售西瓜种子的带菌情况,以有效阻止该检疫性病害的扩散和蔓延。利用5种缓冲液配制浸提液并用免疫捕捉PCR法对国内市售的23批瓜种的18个品种进行了实际检测... 为提高免疫捕捉PCR法检测瓜种携带西瓜细菌性果斑病菌的灵敏度并明确浙江省主要市售西瓜种子的带菌情况,以有效阻止该检疫性病害的扩散和蔓延。利用5种缓冲液配制浸提液并用免疫捕捉PCR法对国内市售的23批瓜种的18个品种进行了实际检测。结果表明,3-N-吗啡啉乙磺酸(MOPS)缓冲液最适宜于作少量瓜种的免疫捕捉PCR法检测的浸提液,来自病区的浙蜜4号、早佳84-24和寿山王3个品种的种子检测到西瓜果斑病菌,病菌主要附着在种皮上。有效阻止病区种子流入无病区及防治病种交互感染健种是该病检疫的关键。 展开更多
关键词 西瓜 细菌性果斑病 种子 免疫捕捉PCR 检测
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甜瓜细菌性果斑病菌检测技术研究进展 被引量:5
16
作者 闻慧 刘兴洋 +1 位作者 李国英 张力群 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第20期6182-6183,6185,共3页
综述了近年来甜瓜细菌性果斑病害检测技术的研究进展,强调了检测技术的发展对我国入世以后植物病害检测检疫的重大意义。
关键词 种传细菌性病害 细菌性果斑痛 检测
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甜瓜种子细菌性果斑病菌PCR检测方法的研究 被引量:4
17
作者 李菊芬 林涛 马国斌 《上海农业学报》 2020年第2期77-81,共5页
以携带细菌性果斑病菌(Acidovoras avenae subsp.citrulli)的甜瓜种子为材料,比较了不同引物、不同种子处理方式、不同浸提液及不同提取时间对细菌性果斑病菌PCR及实时荧光定量PCR检测结果的影响.结果表明:以完整带菌种子浸提液为模板进... 以携带细菌性果斑病菌(Acidovoras avenae subsp.citrulli)的甜瓜种子为材料,比较了不同引物、不同种子处理方式、不同浸提液及不同提取时间对细菌性果斑病菌PCR及实时荧光定量PCR检测结果的影响.结果表明:以完整带菌种子浸提液为模板进行PCR扩增,操作最简单且特异条带亮度最高,“种壳+种仁”处理次之,而以磨碎种子浸提液为模板,未能扩增出特异条带.以无菌水作为浸提液的PCR扩增效果明显优于磷酸缓冲液和液体KB培养基,浸提时间以3-12 h为宜.实时荧光定量PCR检测结果与普通PCR一致.在3对特异引物中,引物BX-L1/BX-S-R2的普通PCR扩增效果最佳,引物SEQID4m/SEQID5更适用于实时荧光定量PCR检测. 展开更多
关键词 甜瓜种子 细菌性果斑病 PCR检测
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Application of droplet digital PCR in detection of seed-transmitted pathogen Acidovorax citrulli 被引量:2
18
作者 LU Yu ZHANG Hai-jun +6 位作者 ZHAO Zi-jing WEN Chang-long WU Ping SONG Shun-hua YU Shuan-cang Luo Lai-xin XU Xiu-lan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第2期561-569,共9页
Bacterial fruit blotch caused by Acidovorax citrulli is a serious threat to cucurbit industry worldwide.The pathogen is seedtransmitted,so seed detection to prevent distribution of contaminated seed is crucial in dise... Bacterial fruit blotch caused by Acidovorax citrulli is a serious threat to cucurbit industry worldwide.The pathogen is seedtransmitted,so seed detection to prevent distribution of contaminated seed is crucial in disease management.In this study,we adapted a quantitative real-time PCR(qPCR)assay to droplet digital PCR(ddPCR)format for A.citrulli detection by optimizing reaction conditions.The performance of ddPCR in detecting A.citrulli pure culture,DNA,infested watermelon/melon seed and commercial seed samples were compared with multiplex PCR,qPCR,and dilution plating method.The lowest concentrations detected(LCD)by ddPCR reached up to 2 fg DNA,and 102 CFU mL–1 bacterial cells,which were ten times more sensitive than those of the qPCR.When testing artificially infested watermelon and melon seed,0.1%infestation level was detectable using ddPCR and dilution plating method.The 26 positive samples were identified in 201 commercial seed samples through ddPCR,which was the highest positive number among all the methods.High detection sensitivity achieved by ddPCR demonstrated a promising technique for improving seed-transmitted pathogen detection threshold in the future. 展开更多
关键词 bacterial fruit blotch Acidovorax citrulli droplet digital PCR seed detection quantitative real-time PCR
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柑橘叶斑驳病毒的逆转录重组酶聚合酶扩增检测 被引量:2
19
作者 段玉 许建建 +3 位作者 马志敏 宾羽 周常勇 宋震 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1904-1912,共9页
【目的】建立柑橘叶斑驳病毒(citrus leaf blotch virus,CLBV)逆转录重组酶聚合酶扩增(reverse transcription-recombinase polymerase amplification,RT-RPA)的快速检测体系,为该病毒提供快速、简便的检测方法。【方法】以CLBV ORF1保... 【目的】建立柑橘叶斑驳病毒(citrus leaf blotch virus,CLBV)逆转录重组酶聚合酶扩增(reverse transcription-recombinase polymerase amplification,RT-RPA)的快速检测体系,为该病毒提供快速、简便的检测方法。【方法】以CLBV ORF1保守序列为靶标,通过设计、筛选特异性检测引物、优化反应温度和反应时长等条件建立CLBV的RT-RPA检测体系。分别以感染CLBV、柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)、柑橘黄化脉明病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)、柑橘裂皮类病毒(citrus exocortis viroid,CEVd)、柑橘碎叶病毒(citrus tatter leaf virus,CTLV)、柑橘鳞皮病毒(citrus psorosis virus,CPsV)、温州蜜柑萎缩病毒(satsuma dwarf virus,SDV)、柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc)和柑橘黄龙病菌亚洲种(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)的柑橘核酸为模板,应用该体系进行RT-RPA扩增,评价检测特异性;利用CLBV阳性样品核酸的10倍浓度梯度稀释模板,比较RT-RPA、RT-PCR和RT-qPCR的检测灵敏度;通过比较上述3种方法对72份柑橘样品的CLBV检出率,检验所建立RT-RPA法的适用性。【结果】以感染了CLBV的柑橘核酸样品为模板,通过对设计的3对引物筛选试验、6个温度和5个反应时长的梯度试验,建立了CLBV的RT-RPA检测体系,明确引物RCLBV-F/RCLBV-R2能够特异扩增CLBV ORF1序列,且扩增效果良好,目的片段大小为144 bp,反应最适温度为40℃,反应最佳时长为30 min。在感染CLBV、CTV、CYVCV、CEVd、CTLV、CPsV、SDV、Xcc和CLas的柑橘样品、健康对照和空白对照中,该体系仅在CLBV侵染样品中扩增出预期大小的特异性目的条带,说明建立的RT-RPA检测体系特异性强;灵敏度检测结果表明,RT-RPA和RT-PCR的检测灵敏度相当,但低于RT-qPCR;所建立的RT-RPA方法在72份柑橘样品中检测出11份样品为CLBV阳性,检出率为15.28%,该结果与普通RT-PCR和RT-qPCR检测方法的检测结果一致。【结论】建立了CLBV 展开更多
关键词 柑橘叶斑驳病毒 逆转录重组酶聚合酶扩增 快速检测
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一种新的西瓜果斑病种子带菌检测方法 被引量:1
20
作者 马艺荞 惠长敏 +4 位作者 王秀峰 王利波 陈莹 王永卓 王健鹂 《长江蔬菜》 2015年第20期91-94,共4页
通过采用病原菌分离、培养基富集培养与PCR技术建立了一套西瓜果斑病菌检测方法。结果表明,MOPS缓冲液对西瓜种子所带病菌分离效果最佳,且利用WFB1/WFB2引物对富集到的病菌进行PCR检测,都产生了预期360 bp片段;对BFB纯菌液和模拟带菌种... 通过采用病原菌分离、培养基富集培养与PCR技术建立了一套西瓜果斑病菌检测方法。结果表明,MOPS缓冲液对西瓜种子所带病菌分离效果最佳,且利用WFB1/WFB2引物对富集到的病菌进行PCR检测,都产生了预期360 bp片段;对BFB纯菌液和模拟带菌种子浸提液的最低检测限为1.0×102 cfu/m L。利用OD值法结合平板涂布记菌落数方法绘制西瓜细菌性果斑病病原菌浓度梯度标准曲线:Y=3.984 1x+0.088 1,R2=0.9991(Y×108cfu/m L)。该检测方法的建立,为西瓜生产中果斑病防治提供了重要技术支持。 展开更多
关键词 西瓜 细菌性果斑病 种子 检测
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