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囊胚注射转基因ES细胞制作嵌合体的研究 被引量：2
1
作者 付志新 刘宗平 +2 位作者 梁建兰 李善刚 陈学进 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期149-154,共6页
在小鼠胚胎成纤维细胞制作的饲养层上培养并成功的维持了携带LacZ基因的胚胎干细胞系（S8），在此基础上，以S8为供体细胞，以远交系昆明白小鼠3．5d胚胎为受体，通过显微注射法将供体细胞转移到受体的囊胚腔内，经过恢复培养，移植到... 在小鼠胚胎成纤维细胞制作的饲养层上培养并成功的维持了携带LacZ基因的胚胎干细胞系（S8），在此基础上，以S8为供体细胞，以远交系昆明白小鼠3．5d胚胎为受体，通过显微注射法将供体细胞转移到受体的囊胚腔内，经过恢复培养，移植到代孕鼠昆明白雌鼠的子宫中；后代在嵌合体出生一周后进行判定。本试验用8～13代的S8细胞共注射胚胎597枚，经1～3h恢复培养，有585枚胚胎重新具有膨大的囊胚腔，细胞轮廓分明，滋养层细胞间连接也清晰可见，胚胎成活率为97％；胚胎移植后，代孕母鼠共移植胚胎228枚，经17～19d的妊娠期后，产仔37只（2只死胎），产仔率为16％；有35只仔鼠（雄鼠18只，雌鼠17只）存活到可以判断毛色，共获得8只S8细胞毛色嵌合体小鼠，嵌合体的产生率为21．6％。结果表明用S8细胞经囊胚注射后能够获得嵌合体，并且嵌合体明显发生了性偏离现象。本试验为国内利用囊胚注射携带LacZ基因的胚胎干细胞获得嵌合体小鼠的首例报道。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 囊胚注射 LACZ基因 胚胎移植 嵌合体小鼠
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肿瘤坏死因子α转换酶(TACE)在早孕小鼠子宫内膜的表达规律 被引量：2
2
作者 杨洁玉 李彤 +3 位作者 杨戎 谢怡 魏莎莉 郗强 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期454-459,共6页
目的:探讨肿瘤坏死因子α转换酶(TACE)在胚胎植入过程中的作用。方法:①用RT-PCR及免疫组化方法分别检测未孕(n=10)及孕d1-7小鼠(n=10×7)子宫内膜TACE mRNA和蛋白的表达;②向妊娠小鼠(n=6)左侧子宫角注射TACE抗体,观察TACE对胚胎... 目的:探讨肿瘤坏死因子α转换酶(TACE)在胚胎植入过程中的作用。方法:①用RT-PCR及免疫组化方法分别检测未孕(n=10)及孕d1-7小鼠(n=10×7)子宫内膜TACE mRNA和蛋白的表达;②向妊娠小鼠(n=6)左侧子宫角注射TACE抗体,观察TACE对胚胎着床数的影响。并以右侧为自身对照和注射生理盐水为手术对照组(n=6)。结果:①TACE mRNA在早孕期小鼠子宫内膜的表达明显高于未孕期,且随妊娠天数的增加而逐渐增加,于孕d4达高峰,随后渐降。免疫组化结果与RT-PCR一致;②子宫角TACE抗体注射后胚胎植入数目明显减少。结论:在小鼠妊娠早期,TACE表达增高,其在胚泡植入中可能发挥着重要作用。 展开更多
关键词 TACE 子宫内膜 着床 RT-PCR 免疫组化 宫角注射
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不同精子来源及授精方式对剩余胚胎继续囊胚培养结局的影响 被引量：9
3
作者 郑炜炜 谭玉梅 +6 位作者 祝晓丽 陈瑞玲 谭颖 姜荣华 刘善文 吴铮 宋革 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期845-851,共7页
目的:探讨不同精子来源及不同授精方式对胚胎继续发育能力的影响。方法:分析499例患者499个取卵周期剩余胚胎继续培养形成囊胚的情况,按精子来源不同分为供精IVF(D-IVF)组和夫精IVF(H-IVF)组,按授精方式不同分为IVF组和ICSI组,ICSI组按... 目的:探讨不同精子来源及不同授精方式对胚胎继续发育能力的影响。方法:分析499例患者499个取卵周期剩余胚胎继续培养形成囊胚的情况,按精子来源不同分为供精IVF(D-IVF)组和夫精IVF(H-IVF)组,按授精方式不同分为IVF组和ICSI组,ICSI组按精子来源分为新鲜精液组、附睾精子和睾丸精子组,比较不同精子来源及授精方式获得剩余胚胎的囊胚形成率、胚胎利用率和无囊胚移植率。结果:① D-IVF组和H-IVF组受精率、卵裂率、优质胚胎率、第3日和第5日胚胎种植率、临床妊娠率和流产率均无统计学差异(P>0.05),组间剩余胚胎囊胚形成率、胚胎利用率和无囊胚移植率亦无统计学差异(P>0.05);②ICSI组与IVF组比较,其受精率较高(P<0.05),但优质胚胎率显著下降,有统计学差异(55.11%vs 61.30%,P<0.05),组间第3日卵裂期胚胎和剩余胚胎囊胚种植率、临床妊娠率无统计学差异(P>0.05),但ICSI组与IVF组比较,其剩余胚胎囊胚形成率、胚胎利用率稍低,无囊胚移植率较IVF组稍高,差异有统计学意义(56.13%vs 65.32%,48.18%vs 55.39%,21.68%vs 13.20%,P<0.05)。③新鲜精液组的优质胚胎率、胚胎利用率显著低于附睾精子和睾丸精子组(P<0.05),各组囊胚移植的种植率和临床妊娠率无统计学差异(P>0.05)。结论:D-IVF可获得H-IVF相似的结局,其剩余胚胎都有较高的发育潜能,ICSI获得的剩余胚胎发育潜能低于IVF组。附睾精子和睾丸精子ICSI后获得的胚胎比新鲜精液精子ICSI后胚胎发育潜能高。针对不同的授精方式可能需要制定相应的剩余胚胎囊胚培养标准。 展开更多
关键词 剩余胚胎 囊胚 供精 体外受精(IVF) 卵胞质内单精子注射(ICSI)
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解冻周期序贯移植在反复种植失败患者中的应用 被引量：4
4
作者 张印峰 姚汝强 +1 位作者 韩莹 张云山 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期33-35,共3页
目的探讨胚胎序贯移植法是否能够提高反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)患者的临床妊娠率。方法回顾性分析128例行常规体外受精或卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)的RIF患者,按不同的移植法分为3组:解冻周期... 目的探讨胚胎序贯移植法是否能够提高反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)患者的临床妊娠率。方法回顾性分析128例行常规体外受精或卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)的RIF患者,按不同的移植法分为3组:解冻周期序贯移植36例,卵裂期移植45例,囊胚期移植47例。分析比较3组患者一般资料及胚胎和妊娠结局。结果解冻周期序贯移植组临床妊娠率(72.2%)及持续妊娠率(69.4%)明显高于卵裂期胚胎移植组(44.4%,37.8%)及囊胚期胚胎移植组(48.9%,44.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论解冻周期序贯移植法能够有效提高RIF患者的妊娠率,对于RIF患者序贯移植可作为一种有效的可供选择的移植手段,该方案避免了取消移植的可能性并对有较多移植胚胎数的患者有效。 展开更多
关键词 反复种植失败(RIF) 囊胚移植 解冻周期 体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET) 序贯移植
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卵丘颗粒细胞骨形发生蛋白-15、6信号通路分子表达对受精卵发育能力的影响
5
作者 林典梁 全松 +2 位作者 康跃凡 余爱丽 林元 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期233-239,共7页
目的探讨卵丘颗粒细胞骨形态发生蛋白(BMP)-15、BMP-6信号通路分子表达对受精卵发育能力的影响。方法收集2012年4月~2014年6月,因男性不育症行卵泡浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕的119例病例,456份单个卵子的卵丘颗粒细胞,采用免疫... 目的探讨卵丘颗粒细胞骨形态发生蛋白(BMP)-15、BMP-6信号通路分子表达对受精卵发育能力的影响。方法收集2012年4月~2014年6月,因男性不育症行卵泡浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕的119例病例,456份单个卵子的卵丘颗粒细胞,采用免疫细胞化学,Western blotting方法检测颗粒细胞BMP-15、BMP-6信号通路分子蛋白的表达,采用Real-time PCR方法检测BMP-15、BMP-6信号分子基因表达。比较分析卵子ICSI后发育形成囊胚组与非囊胚组卵丘颗粒细胞BMP-15、BMP-6信号分子表达差异。结果对两组卵丘颗粒细胞,进行了免疫细胞化学,Real-time PCR,Western blotting分析,结果发现,BMP-15、BMP-6、AKL2、AKL6、BMPRⅡ、Smad1、Samd4、Smad5、Samd8及E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)在两组颗粒细胞中均有表达,其中BMP-15、BMP-6、AKL2、AKL6、BMPRⅡ、Smad1 Samd4及ZEB1表达,组间比较差异具有显著性(经Bonferroni校正P<0.005)。而Smad5、Samd8表达,组间比较差异无显著性(P>0.05)。结论卵丘颗粒细胞BMP-15、BMP-6、AKL2、AKL6、BMPRⅡ、Smad1、Samd4及ZEB1信号通路分子可能通过信号通路的调控作用,对受精卵发育能力产生影响。 展开更多
关键词 囊胚 卵丘颗粒细胞 骨形态发生蛋白 卵泡浆内单精子显微注射技术 女性
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