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生化药物质量控制中生物测定的作用与局限 被引量:9
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作者 李湛军 徐康森 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期297-301,共5页
综述生物测定在药品质量控制中的应用与局限。尽管应用逐渐减少,但生物测定在生化药物质量控制中对鉴别、纯度、安全、活性、效价和稳定性等方面仍发挥重要作用,直到被其他更好的能保证临床用药安全、有效的方法所取代。
关键词 生物测定 质量控制 应用与局限
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烟芽夜蛾囊泡病毒3h株编码的3H-117蛋白能干扰AcMNPV的口服活性 被引量:1
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作者 李诗薇 欧阳依依 +4 位作者 杨长锦 童悦 甘佳敏 黄国华 于欢 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期131-144,共14页
【目的】囊泡病毒是一类体液传播的昆虫病毒,具有特殊的致病历程和良好的生防应用潜力。烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)是我国分离的第一株囊泡病毒,其编码的3H-117蛋白被报道为HvAV-3h病毒粒子的结... 【目的】囊泡病毒是一类体液传播的昆虫病毒,具有特殊的致病历程和良好的生防应用潜力。烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)是我国分离的第一株囊泡病毒,其编码的3H-117蛋白被报道为HvAV-3h病毒粒子的结构蛋白。【方法】为了进一步探究3h-117基因的功能,本研究以Bac-to-Bac昆虫表达系统为研究平台,将3h-117插入到苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nuclepolyhedrovirus,AcMNPV)的基因组中,成功构建了具有口服活性的重组病毒AcMNPV-117。【结果】通过与野生型病毒(AcMNPV-Egfp)的比较,证实在感染Sf9细胞72–96 h后,AcMNPV-117的出芽型病毒粒子产量以及病毒DNA的拷贝数显著降低,且AcMNPV-117的多角体明显增大。进一步的生测结果表明,AcMNPV-117对三龄甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)的90%致死浓度明显高于AcMNPV-Egfp。此外,被病毒感染的甜菜夜蛾幼虫生长相对健康幼虫明显减缓,且试虫的日均取食量也因病毒的感染而被抑制。共聚焦结果表明,3H-117与AcMNPV-117感染后宿主细胞核骨架的聚集过程相关,提示3H-117在囊泡病毒感染过程中可能具有瓦解宿主细胞核的功能。【结论】本研究的结果进一步验证了3h-117的功能,为囊泡病毒的分子生物学研究奠定了基础。 展开更多
关键词 烟芽夜蛾囊泡病毒3h株 重组杆状病毒 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 Bac-to-Bac昆虫表达系统 生物活性测定
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长效缩宫素的生物效价测定方法研究 被引量:1
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作者 谷舒怡 黄坚 唐黎明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期165-170,共6页
目的:对中国药典记载的缩宫素生物测定法进行改良,建立长效缩宫素的生物效价测定方法,考察长效缩宫素受体激动剂卡贝缩宫素的生物效价。方法:采用大鼠离体子宫平滑肌实验法。分别配制缩宫素标准品、巧特欣~(Duratocin~,卡贝缩宫素... 目的:对中国药典记载的缩宫素生物测定法进行改良,建立长效缩宫素的生物效价测定方法,考察长效缩宫素受体激动剂卡贝缩宫素的生物效价。方法:采用大鼠离体子宫平滑肌实验法。分别配制缩宫素标准品、巧特欣~(Duratocin~,卡贝缩宫素市售产品)和卡贝缩宫素至0.01 IU·mL^(-1)。试验中缩宫素标准品、巧特欣~选取0.42 mL、0.6 mL 2个体积,按随机区组设计的次序轮流注入dS_1、dS_2、dT_1、dT_2 4个剂量。每次注入dT_1或dT_2后,均注入2~3次dS_2和1次dS_1进行洗脱,观察子宫收缩幅度,当子宫对dS_1、dS_2产生的收缩幅度呈剂量相关时,继续进样,重复4组。按上述方法卡贝缩宫素选取0.44、0.6 mL 2个体积进行试验,记录各剂量所致子宫收缩的高度y(mm),按中国药典生物检定统计程序量反应平行线2.2法分析处理计算效价及实验误差。结果:3次试验回归显著(p<0.01),偏离平行不显著(p>0.05),可靠性测验通过。测得巧特欣~实际效价为10.316 IU·mg^(-1),平均可信限率为6.412%;同法测得卡贝缩宫素实际效价为8.962 IU·mg^(-1),平均可信限率为3.837%。结论:本试验在中国药典中缩宫素生物测定法的基础上,建立了长效缩宫素生物效价的测定方法并测定了缩宫素受体激动剂卡贝缩宫素的生物效价。 展开更多
关键词 缩宫素 卡贝缩宫素 生物效价 生物检定 离体子宫试验 标准改进
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量反应平行线法在溶栓胶囊蚓激酶效价测定方法学研究中的应用 被引量:17
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作者 董培智 朴晋华 +3 位作者 党爱华 王婷婷 张蕻 张志伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1410-1414,共5页
目的:建立蚓激酶的效价测定方法,并引入生物检定统计法控制实验误差。方法:用标准曲线法和生物检定的量反应平行线法统计计算效价,从方法耐用性、专属性、线性范围、供试品处理方法、精密度、重复性、溶液稳定性、回收率、统计计算方... 目的:建立蚓激酶的效价测定方法,并引入生物检定统计法控制实验误差。方法:用标准曲线法和生物检定的量反应平行线法统计计算效价,从方法耐用性、专属性、线性范围、供试品处理方法、精密度、重复性、溶液稳定性、回收率、统计计算方法等方面对溶栓胶囊中蚓激酶效价测定的琼脂糖纤维蛋白平板法进行了方法学研究。结果:不同琼脂糖、不同纤维蛋白原对本法测定影响较小,阴性对照无干扰;本法线性范围为12.5~400 U,精密度RSD 3.2%,重复性RSD 8.3%,回收率97.0%,RSD 16.6%;供试品溶液在4℃下72 h内稳定;用本法可以将测定误差由60%~70%降低到2%左右。结论:琼脂糖纤维蛋白平板法可以快速、简便、准确地测定蚓激酶的活性,用生物检定的量反应平行线法可以控制测定的误差。 展开更多
关键词 蚓激酶 效价 琼脂糖纤维蛋白平板法 生物检定 量反应平行线法
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生物活性检测方法的方法学研究概述 被引量:2
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作者 杜颖 李娜 +2 位作者 韩璐 段丽 谭德讲 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期921-930,共10页
生物活性检测方法在生物制品研发和质量控制中发挥着关键作用,近年来对该类方法的方法学研究也取得了长足进展。本文首先回顾生物活性检测方法研究的历史进程;其次,对国内外的药典、法规及技术指南中的生物活性检测方法内容进行梳理;最... 生物活性检测方法在生物制品研发和质量控制中发挥着关键作用,近年来对该类方法的方法学研究也取得了长足进展。本文首先回顾生物活性检测方法研究的历史进程;其次,对国内外的药典、法规及技术指南中的生物活性检测方法内容进行梳理;最后,对生物活性检测方法学相关的最新进展进行概述和分析,包括分析方法生命周期、分析目标概要等新概念的介绍。希望本文能为药品行业相关人员全面了解国内外药品生物活性检测方法及其相关指导原则提供参考。同时,也希望为药品研发人员建立科学、可靠的生物活性检测方法提供理论支持。 展开更多
关键词 生物活性检测方法 药典 指南 生物检定统计 方法学 分析方法生命周期(APL) 分析目标概要(ATP)
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土壤样品中粘细菌的分离鉴定及其生物活性检测 被引量:5
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作者 肖蓉 文也 +5 位作者 唐少军 赵新民 丁学知 胡胜标 夏立秋 孙运军 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1429-1437,共9页
【目的】从土壤样品中分离粘细菌,对其进行纯化、归类与鉴定,以丰富粘细菌菌种资源;对纯化得到的粘细菌进行抑菌、杀虫及抗肿瘤生物活性的分析,为粘细菌次级代谢产物的开发奠定基础。【方法】采用灭活大肠杆菌和滤纸片诱导子实体法从土... 【目的】从土壤样品中分离粘细菌,对其进行纯化、归类与鉴定,以丰富粘细菌菌种资源;对纯化得到的粘细菌进行抑菌、杀虫及抗肿瘤生物活性的分析,为粘细菌次级代谢产物的开发奠定基础。【方法】采用灭活大肠杆菌和滤纸片诱导子实体法从土样中分离粘细菌,结合形态观察、生理生化特征和16S r DNA基因序列同源性分析,对分离到的各菌株进行鉴定并归类。通过平板扩散法、昆虫口服毒性测试、肿瘤细胞毒性实验等方法,检测粘细菌代谢产物生物活性。【结果】共分离得到35株粘细菌,初步分类为:粘球菌属(Myxococcus)9株;珊瑚球菌属(Corallococcus)9株;侏囊菌属(Nannocystis)11株;堆囊菌属(Sorangium)6株。从其中纯化得到8株粘细菌,对其进行了鉴定并命名。发现了具有高效且广谱的肿瘤细胞毒性效应菌株S22,S51和S55也具同样的细胞毒性;另外,还发现具有肿瘤细胞毒性的菌株S20和S22对枯草芽胞杆菌和白色念珠菌也具有较好的抑菌活性。【结论】土壤中存在丰富的粘细菌资源,发现了具有肿瘤细胞毒性的弱小珊瑚球菌与具有抑菌和强抗肿瘤活性的大孢珊瑚球菌,粘细菌是活性天然产物与新药开发的重要资源。 展开更多
关键词 粘细菌 分离鉴定 生物活性
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典型内分泌干扰物的检测技术 被引量:1
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作者 关小红 张静 +2 位作者 梁丽萍 仇保华 杜鹃山 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期32-40,共9页
内分泌干扰物的检测对保障环境中人和动物的安全非常必要.概述了环境中痕量内分泌干扰物的检测进展,主要的检测技术包括生物法和质谱法.生物法是判定化合物是否为内分泌干扰物及其雌激素活性大小的非常有前景的方法,该方法主要分为整体... 内分泌干扰物的检测对保障环境中人和动物的安全非常必要.概述了环境中痕量内分泌干扰物的检测进展,主要的检测技术包括生物法和质谱法.生物法是判定化合物是否为内分泌干扰物及其雌激素活性大小的非常有前景的方法,该方法主要分为整体器官法、细胞法和非细胞法3类.在内分泌干扰物定量分析方面,质谱法的灵敏度和准确度都很高,但样品预处理过程对整个测试结果的准确性影响很大,为此,又开发出了多种高效、快速的新型萃取技术.最新的检测技术将生物法和质谱法串联结合,达到同时测定雌激素活性和化合物浓度及其结构的目的.内分泌干扰物后期的研究主要可以从以下几方面开展:内分泌干扰物源头的减少、敏感群体最大暴露剂量的确定、污染区域的修复和大区域环境中内分泌干扰物的迁移转化机制等. 展开更多
关键词 内分泌干扰物 检测 生物基础实验法 质谱法 萃取
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