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应用基因枪法获得抗大麦黄矮病毒转基因小麦 被引量:14
1
作者 成卓敏 吴茂森 +3 位作者 夏光敏 陈惠民 何小源 周广和 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期116-121,共6页
以我国特有的大麦黄矮病毒 GPV株系的外壳蛋白 ( CP)基因为材料 ,设计合成了分别含有 Act启动子或 Emu启动子的植物表达载体 p PPI2、p PPI3和 p PPI5。采用基因枪法分别转化小麦幼胚和愈伤组织。诱导成苗后进行 PCR检测 ,T0 代阳性率为... 以我国特有的大麦黄矮病毒 GPV株系的外壳蛋白 ( CP)基因为材料 ,设计合成了分别含有 Act启动子或 Emu启动子的植物表达载体 p PPI2、p PPI3和 p PPI5。采用基因枪法分别转化小麦幼胚和愈伤组织。诱导成苗后进行 PCR检测 ,T0 代阳性率为 18%。对转基因苗的后代进行进一步检测 ,部分转基因苗阳性株至 T3代 PCR检测阳性率为 10 0 % ,PCR结果 CP探针杂交呈阳性反应 ,序列测定结果与 GPV CP基因序列一致 ,表明 GPV CP基因已整合到小麦基因组中。室内抗病性鉴定结果 ,虽然转基因植株全部发病 ,但对大麦黄矮病毒 GPV株系具有一定的延迟发病作用。 展开更多
关键词 基因枪法 大麦 黄矮病毒 转基因小麦
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基因枪介导的高羊茅基因转化体系的建立 被引量:12
2
作者 马生健 曾富华 +2 位作者 徐碧玉 卢向阳 吴志华 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期691-693,共3页
用高羊茅 (FestucaarundinaceaSchreb .)种胚离体诱导的胚性愈伤组织作受体进行了基因枪的轰击试验 ,确定了以轰击 2枪 ,子弹距可裂圆片 6cm ,子弹距轰击受体 6cm为最佳轰击参数 ,建立了基因枪优化转化方案 ,获得了遗传稳定的抗除草剂PP... 用高羊茅 (FestucaarundinaceaSchreb .)种胚离体诱导的胚性愈伤组织作受体进行了基因枪的轰击试验 ,确定了以轰击 2枪 ,子弹距可裂圆片 6cm ,子弹距轰击受体 6cm为最佳轰击参数 ,建立了基因枪优化转化方案 ,获得了遗传稳定的抗除草剂PPT的转化植株。随机抽取的转化植株的Bar基因PCR检测、总DNA点杂交 ,皆成阳性 ,除草剂PPT抗性试验表明 ,转化植株比对照有了更强的抗性。 展开更多
关键词 基因枪介导 高羊茅基因 转化体系 种胚 离体诱导 草坪草
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玉米优良自交系愈伤组织基因枪转化的研究 被引量:10
3
作者 李慧芬 何锶洁 +4 位作者 王兴智 李芬 李良材 何孟元 田文忠 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第4期397-402,共6页
利用基因枪将Bt基因导入玉米E28幼胚愈伤组织中,在潮霉素浓度为5mg/L选择培养基上,经过35天的继代和分化2次选择及45天继代连续3次选择后分化再生成植株。PCR及Southem分子杂交结果表明,潮霉素基因及Bt基因已导入并整合到玉米基因... 利用基因枪将Bt基因导入玉米E28幼胚愈伤组织中,在潮霉素浓度为5mg/L选择培养基上,经过35天的继代和分化2次选择及45天继代连续3次选择后分化再生成植株。PCR及Southem分子杂交结果表明,潮霉素基因及Bt基因已导入并整合到玉米基因组中,E282次选择的转化频率达到7.8%,显著地高于3次选择2.9%的转化频率,选择至再生的时间缩短25天;自交系Pal372次选择的转化频率为13.3%,显著高于3次选择的转化频率(9.3%),选择至再生时间缩短30天。部分转化植株已经结实。 展开更多
关键词 玉米 优良自交系 基因枪 BT基因 愈伤组织
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基因枪法在水稻工程育种中的应用 被引量:7
4
作者 黄大年 高振宇 +2 位作者 华志华 汪晓玲 薛锐 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2001年第3期283-287,共5页
至今 ,基因枪法以其实用性和有效性应用于水稻工程育种已有十几年。本文阐述了其在水稻工程育种的六个主要领域的应用现状 ,同时评价了外源基因在转基因水稻中的稳定性和对转基因水稻主要农艺性状的影响。当然 ,基因枪法的转化效率还有... 至今 ,基因枪法以其实用性和有效性应用于水稻工程育种已有十几年。本文阐述了其在水稻工程育种的六个主要领域的应用现状 ,同时评价了外源基因在转基因水稻中的稳定性和对转基因水稻主要农艺性状的影响。当然 ,基因枪法的转化效率还有待提高 ,随着转不同基因的工程水稻的日益增多 ,进一步的安全性试验显得十分必要 ,它是转基因水稻商品化的前提。 展开更多
关键词 基因枪法 水稻 工程育种 外源基因 生物安全性 应用
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用基因枪法将抗除草剂基因导入小麦栽培品种的研究 被引量:3
5
作者 赵虹 李名扬 +1 位作者 裴炎 董玉梅 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2002年第4期457-461,共5页
利用基因枪法将抗除草剂bar基因导入西南地区的 3个小麦栽培品种 ,共获得 7个转基因植株 ,转化频率在 0 .45 %~ 1 .2 %之间 ,转化周期缩短至 3个月左右。对抗性植株进行PCR和PCR_Southern杂交检测 ,初步确定bar基因已导入小麦基因组。... 利用基因枪法将抗除草剂bar基因导入西南地区的 3个小麦栽培品种 ,共获得 7个转基因植株 ,转化频率在 0 .45 %~ 1 .2 %之间 ,转化周期缩短至 3个月左右。对抗性植株进行PCR和PCR_Southern杂交检测 ,初步确定bar基因已导入小麦基因组。做转基因植株叶片对除草剂PPT的抗性试验 ,有 4株呈抗性 ,3株呈部分抗性 ,表明bar基因已在小麦植株中得到表达。 展开更多
关键词 基因枪法 抗除草剂基因 小麦 栽培品种 基因导入 BAR
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大豆成熟种子胚尖基因枪法转化体系的优化 被引量:13
6
作者 叶美 张敏 +4 位作者 杨素欣 邵群 安海龙 曹子谊 冯献忠 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期20-23,共4页
以山东省主栽大豆品种"荷豆12"成熟种子胚尖为材料,探讨了6-BA和潮霉素浓度等因素对基因枪法遗传转化的影响,并通过报道基因GUS检测了外源基因的表达和整合情况。结果表明:经5 mg.L-16-BA诱导16 h,"荷豆12"胚尖的... 以山东省主栽大豆品种"荷豆12"成熟种子胚尖为材料,探讨了6-BA和潮霉素浓度等因素对基因枪法遗传转化的影响,并通过报道基因GUS检测了外源基因的表达和整合情况。结果表明:经5 mg.L-16-BA诱导16 h,"荷豆12"胚尖的再生丛生芽数目、丛生芽的伸长速率等综合指标最佳;5~15 mg.L-1的潮霉素多步梯度筛选可以提高转化筛选效率。基因枪转化后的胚尖组织和转基因植株后代的叶片中均可以观察到GUS基因的表达;通过分子鉴定证明外源GUS基因插入到转基因后代的基因组中。 展开更多
关键词 大豆 成熟种子胚尖 基因枪法 遗传转化
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基因枪在肿瘤基因治疗中的应用价值 被引量:9
7
作者 查园园 林晨 +3 位作者 梁萧 付明 张雪艳 吴旻 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期522-525,共4页
目的 研究基因枪经小鼠皮肤转移基因的效率、被转基因的表达量、表达时间 ,以及对小鼠肿瘤的治疗效果 ,探讨作为一种新的基因转移工具 ,基因枪在基因治疗中应用的可能性。方法 (1)用荧光显微镜观察基因枪对体外培养细胞系的基因转导... 目的 研究基因枪经小鼠皮肤转移基因的效率、被转基因的表达量、表达时间 ,以及对小鼠肿瘤的治疗效果 ,探讨作为一种新的基因转移工具 ,基因枪在基因治疗中应用的可能性。方法 (1)用荧光显微镜观察基因枪对体外培养细胞系的基因转导效率和被转基因表达时间 ;(2 )通过基因枪向小鼠皮肤转Lac Z基因后 ,取转基因部位的皮肤做冰冻切片进行 β gal染色 ,观察转基因蛋白在皮肤中表达的部位 ;(3)用ELISA法检测向小鼠皮肤转mGM CSF基因后 ,血清中的转基因蛋白表达量 ,并取转基因部位的皮肤做病理切片 ,通过观察局部病理改变 ,推测转基因蛋白在局部的表达情况 ;(4 )用基因枪向小鼠腹部皮肤转mGM CSF 10d后 ,用肿瘤细胞攻击 ,观察肿瘤生长情况 ;(5 )在小鼠右腋下接种肿瘤细胞 ,1周后进行转基因或注射瘤苗治疗 ,观察肿瘤生长情况。结果  (1)基因枪能有效地对体外培养的各种肿瘤细胞系转基因 ,转导基因的效率是 16 .5 %± 9.0 % ,被转基因可获得较长时间的瞬时表达 ;(2 )小鼠皮肤冰冻切片染色结果显示 ,基因枪可有效地将外源基因导入到皮肤表皮 4~ 5层 ;(3)ELISA结果显示 ,经皮肤转基因后 ,血清中GM CSF蛋白水平显著升高 ,最高可达对照组的12 .5倍。小鼠皮肤病理切片可见到炎性浸润 。 展开更多
关键词 生物弹道学 肿瘤 基因治疗 基因枪
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Over-expression of an Arabi-dopsisd δ-OAT gene enhances salt and drought tolerance in transgenic rice 被引量:11
8
作者 WU Liangqi, FAN Zhanmin, GUO Lei, LI Yongqing, ZHANG Wenjing, QU Li-Jia & CHEN Zhangliang The National Laboratory of Protein Engineering and Plant Genetic En-gineering, College of Life Sciences, Peking University, Beijing 100871, China Correspondence should be addressed to Qu Li-Jia (e-mail: qulj@pku. edu.cn) 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2003年第23期2594-2600,共7页
d-OAT, ornithine--aminotransferase, is the key enzyme involved in proline biosynthesis. In this study the Arabidopsis d -OAT gene was transferred into rice (Oryza sativa L. ssp japonica cv. Zhongzuo 321), whose succes... d-OAT, ornithine--aminotransferase, is the key enzyme involved in proline biosynthesis. In this study the Arabidopsis d -OAT gene was transferred into rice (Oryza sativa L. ssp japonica cv. Zhongzuo 321), whose successful integration was demonstrated by PCR and Southern blot analysis. The over-expression of the gene in transgenic rice was also confirmed. Biochemical analysis showed that, under salt or drought stress conditions, proline contents in the leaves and roots in transgenic rice plants were 5- to 15-fold of those in non-transgenic controls. Under stress conditions, germinating rate of transgenic lines is higher than that of controls. Although the growth of rice plants tested were more and more retarded with the increasing of NaCl concentration, the transgenic plants grow faster compared to the controls under the same stress condition. Meanwhile, the resistance to KCl and MgSO4 stresses was also found enhanced in trans-genic rice. Furthermore, the over-expression of d -OAT also improved the yield of transgenic plants under stress condi-tions. The average yield per plant of transgenic lines in-creases about 12%—41% more than that of control lines under 0.1 mol/L NaCl stress. These data indicated that the over-expression of d -OAT, with the accumulation of proline, resulted in the enhancement of salt and drought tolerance and an increase of rice yield, which is of significance in agri-culture. 展开更多
关键词 转基因大米 抗旱能力 脯氨酸 农业
原文传递
水稻基因工程育种及其进展 被引量:2
9
作者 向珣朝 李平 王世全 《西南科技大学学报》 CAS 2004年第2期107-113,共7页
总结了水稻基因工程育种的主要内容 ,介绍了其技术体系 (特别是近年有关实验方法的改进 )。及其研究进展。
关键词 水稻 基因工程 育种 基因枪法 农杆菌介导法 嵌合基因 基因转移
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基因枪转化甘蓝型油菜小孢子体系的建立 被引量:5
10
作者 林良斌 熊兴华 +3 位作者 祁永琼 董娜 马占强 肖关丽 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第1期5-8,28,共5页
以甘蓝型油菜花油3号、湘油15号为材料,优化了甘蓝型油菜小孢子再生胚状体的条件,建立起甘蓝型油菜小 孢子的高效再生体系。在主花序第1朵花开后第4 d从主花序上取4.0-4.5 mm花蕾,每mL NLN培养基接种1个花 蕾的小孢子,在32℃起始热激培... 以甘蓝型油菜花油3号、湘油15号为材料,优化了甘蓝型油菜小孢子再生胚状体的条件,建立起甘蓝型油菜小 孢子的高效再生体系。在主花序第1朵花开后第4 d从主花序上取4.0-4.5 mm花蕾,每mL NLN培养基接种1个花 蕾的小孢子,在32℃起始热激培养36 h,胚状体产生频率最高,花油3号达24.80个胚状体/花蕾,湘油15号达16.50 个胚状体/花蕾。用基因枪转化甘蓝型油菜花油3号和湘油15号的小孢子,PCR-Southem检测证明获得了转基因植 株。在小孢子培养前进行基因枪轰击及在胚状体诱导培养时进行筛选,转化频率较高,花油3号可达2.1株转基因植 株/花蕾,湘油15号可达1.2株转基因植株/花蕾。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 小孢子 遗传转化 基因枪
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Gus基因在佛手叶片中的瞬间表达 被引量:4
11
作者 郭卫东 周春丽 +1 位作者 路梅 谢选松 《浙江师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第4期425-428,共4页
采用基因枪法对佛手(Citrus medicaL.var.sarcodactylis(Noot)Swingle)嫩叶和老叶叶盘进行了Gus基因转化和瞬时表达研究,分析了轰击距离、叶片组织特性对转化效果的影响.结果显示,在7.584 5×106Pa轰击压力下,采用6 cm轰击靶距转化... 采用基因枪法对佛手(Citrus medicaL.var.sarcodactylis(Noot)Swingle)嫩叶和老叶叶盘进行了Gus基因转化和瞬时表达研究,分析了轰击距离、叶片组织特性对转化效果的影响.结果显示,在7.584 5×106Pa轰击压力下,采用6 cm轰击靶距转化嫩叶可获得比较高的Gus基因瞬间表达频率;老叶的转化效果比嫩叶差;增加轰击次数并不一定能提高瞬间表达频率. 展开更多
关键词 佛手 基因枪 GUS基因 瞬时表达
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TRANSIENT EXPRESSION OF EXOGENOUS GUS GENE IN PORPHYRA YEZOENSIS (RHODOPHYTA) 被引量:3
12
作者 匡梅 王素娟 +2 位作者 李瑶 沈大箴 曾呈奎 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 1998年第S1期56-61,共6页
Electroporation, PEG, PEG plus electroporation and Biolistics methods were tested ingene transformation of P. yezoensis. The exogenous gus was from plasmid of pBI121 and pCAMBI-A1301, both contain the CaMV35S promoter... Electroporation, PEG, PEG plus electroporation and Biolistics methods were tested ingene transformation of P. yezoensis. The exogenous gus was from plasmid of pBI121 and pCAMBI-A1301, both contain the CaMV35S promoter. The receptors included the prooplasts, tissues and free-liv-ing conchocelis filaments of P. yezoensis. Several factors, for example, the voltage, capacitance and bi-valent cations, etc., were studied. Results show that these four methods are all efficient for gene transfor-mation in P. yezoensis; and that PEG is the best one, with transformation efficiency of up to 4 ×10-5.GUS activity was detected 26 days after transfation by using PEG method. 展开更多
关键词 biolistics ELECTROPORATION GUS PEG PORPHYRA YEZOENSIS
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基因枪介导小麦条锈菌毒性突变的研究 被引量:4
13
作者 张如佳 王阳 +2 位作者 王美南 井金学 李振岐 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2007年第5期87-91,共5页
为了得到带有明确遗传标记的毒性突变菌株,应用基因枪转化技术,以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体,以含有潮霉素抗性基因(Hyg)的质粒为插入载体,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行了研究。结果表明,当小麦条锈菌夏孢子萌动2 h... 为了得到带有明确遗传标记的毒性突变菌株,应用基因枪转化技术,以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体,以含有潮霉素抗性基因(Hyg)的质粒为插入载体,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行了研究。结果表明,当小麦条锈菌夏孢子萌动2 h,可裂膜承载压力为1 100 Psi时进行轰击转化,所得的小麦条锈菌夏孢子在含有潮霉素的培养基上萌发率最高,为36.09%。进一步将转化的小麦条锈菌夏孢子进行扩繁,在筛选品种上筛选,将筛选到的突变体在其上继代培养4代,获得了两个稳定的毒性突变菌株MM-2、MM-3。MM-2菌株对南大2419的毒性减弱,反应型由野生菌系的4型变为2型;MM-3菌株在南大2419的反应型由野生菌系的4型变为2、3型,毒性发生分化。采用中国鉴别寄主对突变体的毒性研究表明,各突变菌株的毒性均较原始菌系发生了明显改变。进一步用Hyg基因特异PCR在两个突变菌系中均扩增到目的片段,表明MM-2、MM-3的突变是由Hyg基因插入引起的。 展开更多
关键词 小麦条锈菌 基因枪 毒性变异 插入突变
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基因枪介导的骨形态发生蛋白2基因转染治疗陈旧性骨缺损 被引量:4
14
作者 朱小萌 王翀 +2 位作者 宋兴华 詹玉林 李文举 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第11期1680-1686,共7页
背景:体内外研究都已证实骨形态发生蛋白具有调节成骨细胞和成软骨细胞的分化、诱导异位骨形成、促进骨折愈合、控制哺乳动物骨骼不同形态特征形成的功能。目的:使用含有骨形态发生蛋白2基因真核表达质粒的基因枪进行局部基因注射以治... 背景:体内外研究都已证实骨形态发生蛋白具有调节成骨细胞和成软骨细胞的分化、诱导异位骨形成、促进骨折愈合、控制哺乳动物骨骼不同形态特征形成的功能。目的:使用含有骨形态发生蛋白2基因真核表达质粒的基因枪进行局部基因注射以治疗陈旧骨缺损。方法:72只新西兰大白兔建立陈旧兔桡骨中段骨缺损模型,按所截骨长度均分1.5 cm组、2.0 cm和2.5 cm组。各组又随机分为治疗组(骨形态发生蛋白2基因转染组)和对照组(自然愈合组)。于转染后1,3,8,9周拍摄X射线平片,1,3,8和9周取骨折间软组织行骨形态发生蛋白2的Western blot检测,于1,3,8和9周时取标本大体观察,评价愈合情况。结果与结论:①大体标本观察发现治疗组骨痂生成量多于对照组。②治疗组转染后1,3,8,9周的Lane-Sandhu X射线评分优于对照组,差异均有显著性意义(P<0.05)。③骨形态发生蛋白2浓度定量,各时间点治疗组骨形态发生蛋白2浓度优于对照组,差异均有显著性意义(P<0.05)。结果说明应用基因枪介导骨形态发生蛋白2基因局部转移治疗陈旧骨缺损效果明确。 展开更多
关键词 组织构建 骨组织工程 骨细胞 陈旧性骨缺损 愈合 骨形态发生蛋白2 基因转染 基因枪 国家自然科学基金
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不同方式递送质粒DNA诱导体内表达效果的实验研究 被引量:4
15
作者 张亮 李潇潇 +4 位作者 韩刚 董金凯 阎瑾琦 肖毅 于继云 《军医进修学院学报》 CAS 2010年第1期48-49,60,共3页
目的比较不同途径递送质粒DNA至Balb/c小鼠体内所诱导的报告基因表达效果。方法将编码荧光素酶(1uc3蛋白的重组质粒(pGL-3-CMV)或空载体质粒pGL-3-basic以肌肉注射或电脉冲方法将10μg或100μg上述质粒注入小鼠股四头肌,基因枪法... 目的比较不同途径递送质粒DNA至Balb/c小鼠体内所诱导的报告基因表达效果。方法将编码荧光素酶(1uc3蛋白的重组质粒(pGL-3-CMV)或空载体质粒pGL-3-basic以肌肉注射或电脉冲方法将10μg或100μg上述质粒注入小鼠股四头肌,基因枪法以三枪接种质粒于小鼠腹部(2μg质粒DNA/4.5Mpa/枪)。于质粒注入后24~144h,检测小鼠体内的荧光素酶活性。结果肌肉注射10μg的小鼠未检测到荧光素酶的表达;肌肉注射100μg、电脉冲法递送10μg和100μg质粒的小鼠,接种后48h体内荧光素酶活性达到峰值,递送100μg的小鼠体内表达量明显高于10μg的小鼠。基因枪免疫小鼠在接种24h达到峰值。结论电脉冲和基因枪介导的基因递送方式基因表达水平远远高于传统注射方法,是基因疫苗免疫递送的可靠方法。 展开更多
关键词 基因递送 质粒 DNA 荧光素酶基因 生物弹道技术
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基因枪转染IgHV1-GM-CSF基因在树突细胞中的表达 被引量:2
16
作者 李绵洋 朱平 +2 位作者 王红霞 蔡鹏 达万明 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1066-1069,共4页
目的探讨基因枪颗粒轰击转染人树突细胞(DC)的方法,以及基因枪转染基因疫苗质粒IgHV1-GM-CSF/pcDNA3.0在DC中的表达。方法利用Ficoll密度梯度法分离人外周血单个核细胞(PBMC),贴壁方法获取单核细胞作为DC前体,在重组GM-CSF和IL-4的支持... 目的探讨基因枪颗粒轰击转染人树突细胞(DC)的方法,以及基因枪转染基因疫苗质粒IgHV1-GM-CSF/pcDNA3.0在DC中的表达。方法利用Ficoll密度梯度法分离人外周血单个核细胞(PBMC),贴壁方法获取单核细胞作为DC前体,在重组GM-CSF和IL-4的支持下诱导培养为用于转染的未成熟DC(i mDC);制备人免疫球蛋白重链基因可变区家族的框架区基因疫苗质粒和增强绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)。设定不同的转染条件,采用基因枪方法将pEGFP质粒转染入DC,荧光显微镜下分别计数绿色荧光阳性细胞数和细胞总数,计算转染率;台盼蓝染色计数活细胞,计算细胞存活率;比较基因枪、脂质体及电转染3种方法的转染效率。以基因枪方法在最佳条件下将IgHV1-GM-CSF/pcDNA3.0及pEGFP质粒共转染DC,提取细胞RNA,RT-PCR方法检测IgHV1-GM-CSF的表达,ELISA方法检测GM-CSF的表达。结果选择基因枪转染的优化条件为:转染压力120psi、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)浓度0.02mg/ml、微载体负载量(MLQ)0.5mg金/子弹、DNA负载率(DLR)1.5μg质粒DNA/子弹。基因枪转染的效率为10.5%±2.4%(n=3),电转染方法为45.2%±5.6%(n=3),而脂质体方法只有个别DC表达荧光蛋白,三者比较差异有统计学意义(P<0.01)。基因枪方法转染的DC能够保持其特殊细胞形态,细胞表面标志在转染中无明显变化,而电转染后细胞大量死亡。应用基因枪转染方法,基因疫苗质粒IgHV1-GM-CSF/pcDNA3.0在DC中得到瞬时表达。结论基因枪颗粒轰击可使基因疫苗在DC中成功表达,是临床细胞免疫治疗中DC转染的一种可行选择。 展开更多
关键词 生物弹道技术 树突细胞 转染
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棉花不同外植体对卡那霉素敏感性的研究 被引量:2
17
作者 马玲玲 魏延宏 +1 位作者 朱华国 张薇 《生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期50-53,共4页
在基因枪法介导的棉花转化前,对3种棉花外植体新海13号茎尖、新陆早33号茎尖和新陆早33号胚性愈伤组织进行卡那霉素(Kana)的敏感性测试,选择合适的Kana筛选浓度和合适的筛选时间。设置不同浓度卡那霉素的培养基,分别对棉花3种外植体的... 在基因枪法介导的棉花转化前,对3种棉花外植体新海13号茎尖、新陆早33号茎尖和新陆早33号胚性愈伤组织进行卡那霉素(Kana)的敏感性测试,选择合适的Kana筛选浓度和合适的筛选时间。设置不同浓度卡那霉素的培养基,分别对棉花3种外植体的生长情况、反应现象和试验数据进行记录、观察。结果表明:在基因枪法介导的棉花转化体系中,新海13号茎尖的Kana筛选浓度为120 mg/L、筛选时间约为35 d;新陆早33号茎尖的Kana浓度选择为90 mg/L,筛选时间约为20 d;新陆早33号的胚性愈伤组织的Kana筛选浓度约为60 mg/L。新陆早33号胚性愈伤组织的Kana敏感性强于其茎尖,新陆早33号茎尖的Kana敏感性强于新海13号茎尖。 展开更多
关键词 棉花 基因枪 卡那霉素 茎尖 胚性愈伤组织
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基因枪介导pVAX1-2PFcGB融合肿瘤抗原基因疫苗小鼠体内抑瘤活性研究 被引量:2
18
作者 马际尧 张亮 +8 位作者 阎瑾琦 高江平 贾锐 王浩 刘宁 韩刚 董金凯 田仁礼 于继云 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2008年第3期178-180,共3页
目的:探讨基因枪免疫pVAX1-2PFcGB融合肿瘤抗原基因疫苗对小鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:在基因枪介导下,向接种EMT6乳腺癌肿瘤细胞的Balb/c小鼠导入融合肿瘤抗原基因疫苗pVAX1-2PFcGB,通过观察计算免疫动物的成瘤时间、肿瘤体积、抑... 目的:探讨基因枪免疫pVAX1-2PFcGB融合肿瘤抗原基因疫苗对小鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:在基因枪介导下,向接种EMT6乳腺癌肿瘤细胞的Balb/c小鼠导入融合肿瘤抗原基因疫苗pVAX1-2PFcGB,通过观察计算免疫动物的成瘤时间、肿瘤体积、抑瘤率来评价该基因疫苗的抗肿瘤作用。结果:基因枪介导的pVAX1-2PFcGB融合肿瘤抗原基因疫苗能够明显推迟和抑制移植瘤的生长,显示出明显的抗肿瘤效果。结论:基因枪介导的DNA疫苗pVAX1-2PFcGB能够有效诱导机体的免疫应答,预防和抑制小鼠移植瘤的生长。 展开更多
关键词 生物弹道技术 DNA疫苗 肿瘤抗原
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输尿管镜气压弹道碎石术严重并发症的防治 被引量:1
19
作者 林考兴 王鑫洪 +1 位作者 李峰 陈超 《军医进修学院学报》 CAS 2010年第1期22-23,共2页
目的探讨输尿管镜气压弹道碎石严重并发症与预防措施。方法总结分析输尿管镜气压弹道碎石治疗患者的资料,统计并发症的发生和处理情况。结果输尿管穿孔3例,输尿管口损伤2例,输尿管黏膜下假道形成3例,输尿管断裂1例,输尿管全层黏膜撕脱1... 目的探讨输尿管镜气压弹道碎石严重并发症与预防措施。方法总结分析输尿管镜气压弹道碎石治疗患者的资料,统计并发症的发生和处理情况。结果输尿管穿孔3例,输尿管口损伤2例,输尿管黏膜下假道形成3例,输尿管断裂1例,输尿管全层黏膜撕脱1例。结论输尿管镜下取石术并发症的发生与手术者的技术操作密切相关,正确熟练地操作可有效减少并发症。 展开更多
关键词 输尿管镜 气压 生物弹道技术 碎石术 手术中并发症
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介导pcDNA-IGF-1质粒转染骨髓间充质干细胞两种方法比较 被引量:1
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作者 薄建成 张海宁 +3 位作者 杜青峰 姜岩 王英振 隋爱华 《青岛大学医学院学报》 CAS 2016年第5期505-507,511,共4页
目的比较阳离子聚合物Xfect与PDS-1000基因枪系统转染人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的转染效率及两种方法对细胞增殖能力的影响。方法应用贴壁法原代培养hBMSCs,取第3代细胞以流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD29、CD34、CD45、CD90,并分别... 目的比较阳离子聚合物Xfect与PDS-1000基因枪系统转染人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的转染效率及两种方法对细胞增殖能力的影响。方法应用贴壁法原代培养hBMSCs,取第3代细胞以流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD29、CD34、CD45、CD90,并分别用Xfect与PDS-1000基因枪系统将pcDNA-胰岛素样生长因子1(IGF-1)质粒转导入hBMSCs中。转染后在不同时间点使用倒置荧光显微镜观察绿色荧光,计数阳性细胞,计算细胞转染率及细胞漂浮率;以酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测IGF-1分泌量。结果 hBMSCs培养成功后,高表达CD29、CD90,低表达CD34、CD45。在转染后1、2d,两种方法细胞转染率差异有统计学意义(t=4.734、5.324,P〈0.05)。两种方法转染后细胞IGF-1分泌量均较转染前增加,但两种方法间比较差异有统计学意义(t=2.220-10.678,P〈0.05)。两种方法转染均有部分细胞脱落。结论两种方法均可将pcDNA-IGF-1基因转染入hBMSCs内,转染后细胞能分泌IGF-1。Xfect转染试剂转染效率较高,PDS-1000基因枪系统转染效率较低,两者对细胞都造成一定损伤。 展开更多
关键词 阳离子聚合物 生物弹道技术 转染 胰岛素样生长因子Ⅰ 质粒 骨髓祖代细胞
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