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肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分的干预效应 被引量：5
1
作者 邱冰峰 都金星 +2 位作者 申定珠 陈高峰 刘平 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期513-518,共6页
目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 75只SD雄性大鼠,采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型,假手术组(Sham... 目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 75只SD雄性大鼠,采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型,假手术组(Sham)仅作胆总管分离,不作胆总管结扎。大鼠BDL术后1周随机分为对照组(M)与干预组(Y组,经灌胃给予黄芪汤组分4周),Sham组于术后1周末随机抽取5只大鼠处死取材,M组分别于术后1、2、3、4周末随机抽取5只大鼠做动态观察,余下各组大鼠均于术后第5周末处死取材。观测肝脏组织学及羟脯氨酸(Hyp)含量;激光共聚焦显微镜观察肝组织胆管上皮细胞标志物角蛋白-7(CK7)与肝细胞特异性抗原(HepPar)共定位,Western blot检测CK7、HepPar的蛋白表达,IPP软件分析肝组织天狼猩红胶原染色。结果随着造模时间推移,M组大鼠肝组织肝细胞Hep Par阳性细胞逐渐减少(Sham>M1周>M2周>M3周>M4周>M5周),胆管上皮细胞(CK7阳性细胞)及纤维化程度、Hyp含量、CK7蛋白表达均逐渐增加(Sham<M1周<M2周<M3周<M4周<M5周),CK7/Hep Par共定位细胞于术后1周即见增加,术后3周达到峰值,然后渐趋减少,肝组织Hep par蛋白表达量与CK7蛋白表达量呈显著负相关,Hep Par阳性细胞表达量与CK7阳性细胞表达量、胶原沉积程度均呈显著负相关,而CK7阳性细胞表达量与胶原沉积程度呈显著正相关;与M组比较,Y组大鼠死亡率、CK7阳性细胞、纤维化程度、肝组织Hyp含量、CK7蛋白表达量均显著下降(P<0.01),Hep Par阳性细胞及Hep Par蛋白表达含量显著增加。结论肝细胞向胆管上皮细胞转分化可能是继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成过程中的关键病理环节,抑制肝细胞向胆管上皮细胞转分化可能是黄芪汤组分有效干预继发性胆汁淤积性肝纤维化的主要效应机制之一。 展开更多
关键词 继发性胆汁淤积性肝纤维化 肝细胞 胆管上皮细胞 转分化 黄芪汤
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胆道闭锁肝内胆管上皮细胞凋亡与增殖的实验研究 被引量：1
2
作者 黄磊 魏明发 +1 位作者 冯杰雄 魏昊 《临床外科杂志》 2004年第6期358-360,F003,共4页
目的　研究胆道闭锁 (biliaryatresia ,BA)肝内胆管上皮细胞凋亡与增殖情况 ,探讨其与BA的关系。方法　应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记技术(TUNEL法 )和Ki -67免疫组化染色方法 ,观察 3 8例胆道闭锁患儿与 1... 目的　研究胆道闭锁 (biliaryatresia ,BA)肝内胆管上皮细胞凋亡与增殖情况 ,探讨其与BA的关系。方法　应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记技术(TUNEL法 )和Ki -67免疫组化染色方法 ,观察 3 8例胆道闭锁患儿与 16例正常对照儿童肝内胆管上皮细胞凋亡与增殖情况。结果　胆道闭锁患儿肝内胆管上皮细胞凋亡指数为 (5 1.74±19 .93 ) %明显高于正常对照 (12 .3 4± 19.3 2 ) % (P <0 .0 1) ,增殖指数 (19.0 4± 9.78) %相对正常对照 (12 .68± 15 .5 6) %有所升高 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。肝细胞凋亡指数和增殖指数分别与正常对照相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。BA胆管上皮细胞凋亡指数明显高于增殖指数 (P <0 .0 1) ,而肝细胞凋亡指数与增殖指数比较则无统计学差别 (P >0 .0 5 )。正常对照组胆管上皮细胞凋亡指数与增殖指数相比也无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　胆道闭锁的发生及其进行性发展与肝内胆管上皮细胞凋亡增殖不平衡有关 ,该疾病可能是一种波及整个胆管系统的全胆道病变。 展开更多
关键词 胆道闭锁 胆管上皮细胞 凋亡 细胞增殖
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吉非替尼对表皮生长因子受体在胆管上皮细胞中表达的影响及意义
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作者 吴兴武 徐亮 +3 位作者 秦昱 侯昌映 徐茂林 李富宇 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2010年第5期469-473,共5页
目的通过观察吉非替尼对肝内病变胆管上皮细胞中表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,探讨抑制胆管上皮细胞过度增殖的可行性。方法选择双流县第一人民医院2006年8月至2008年8月期间住院需要手术的肝内胆管结石患者共61例,年龄25～65岁(平... 目的通过观察吉非替尼对肝内病变胆管上皮细胞中表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,探讨抑制胆管上皮细胞过度增殖的可行性。方法选择双流县第一人民医院2006年8月至2008年8月期间住院需要手术的肝内胆管结石患者共61例,年龄25～65岁(平均46.92岁),随机分为治疗组和对照组。治疗组30例,术中在病变胆管内留置细导管,术后灌注吉非替尼溶液;对照组31例只作T管引流。分别于术中、术后6周和12周行胆道镜碎石及取石的同时,活检灌注处的病变胆管壁组织,行HE染色、免疫组化和RT-PCR检测,观察组织学变化和EGFR的表达。结果术中,2组胆管壁病理组织学改变及EGFR蛋白和mRNA表达无明显差异。术后6周和12周,治疗组的胆管黏膜上皮和黏膜下腺体增殖程度均较对照组明显减弱,EGFR蛋白表达较对照组明显减弱,EGFR mRNA表达明显低于对照组(P<0.05)。结论 EGFR在慢性增生性胆管炎中呈过表达状态,术后局部持续给予吉非替尼治疗能够特异性地阻断EGFR的激活和表达,能有效地抑制术后胆管上皮细胞的过度增殖。 展开更多
关键词 肝内胆管结石 吉非替尼 表皮生长因子受体 胆管上皮细胞 慢性增生性胆管炎 免疫组化法 实时聚合酶链式反应法
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体外诱导骨髓间充质干细胞向胆管上皮样细胞分化 被引量：7
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作者 张诚 杨玉龙 +3 位作者 林美举 史力军 张洪威 李婧伊 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第1期17-22,共6页
背景:肝外胆管和胆囊上皮细胞的分离、纯化相对比较容易,但是胆管上皮细胞在体外易失去增殖能力,难以提供基础研究所需的细胞量,限制了胆管修复等基础研究的进程。虽然骨髓间充质干细胞可以转化为肝细胞,但是尚无体外培养骨髓间充质干... 背景:肝外胆管和胆囊上皮细胞的分离、纯化相对比较容易,但是胆管上皮细胞在体外易失去增殖能力,难以提供基础研究所需的细胞量,限制了胆管修复等基础研究的进程。虽然骨髓间充质干细胞可以转化为肝细胞,但是尚无体外培养骨髓间充质干细胞分化为胆管上皮细胞的报道。目的:探讨体外诱导骨髓间充质干细胞分化为胆管上皮细胞的可行性。方法:采取全骨髓贴壁筛选法体外分离并纯化大鼠骨髓间充质干细胞后,在第3代骨髓间充质干细胞培养基中加入肝细胞生长因子和表皮生长因子,倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞的形态学变化,免疫荧光检测不同时间CK19的表达情况。结果与结论:在肝细胞生长因子和表皮生长因子的诱导下,骨髓间充质干细胞由梭形逐渐变为多边形、三角形;免疫荧光检查显示诱导第4周细胞膜开始表达CK19,诱导第6周CK19表达率明显提高。结果表明在两种细胞因子联合诱导下骨髓间充质干细胞能够转化为胆管上皮样细胞,从而为骨髓间充质干细胞修复损伤胆管提供了一个新思路。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 肝细胞生长因子 表皮生长因子 胆管上皮细胞 CK19 干细胞图片文章
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