水禽新现疾病的发生概况和防制思路 被引量：6

1

作者 张大丙 《中国兽药杂志》 2009年第10期42-45,共4页

介绍了目前水禽新出现疾病水禽流感、鸭病毒性肝炎、禽副粘病毒、呼肠孤病毒病、圆环病毒、鸭传染性浆膜炎的发生概况和病原学特点,提出了防制策略。

关键词 水禽 禽流感 鸭病毒性肝炎 禽副粘病毒 呼肠孤病毒病 圆环病毒 鸭传染性浆膜炎 防制

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表达2.3.2.1d分支H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸭瘟病毒的构建和评价 被引量：5

2

作者 王波 赵玉博 +6 位作者 胡玉珍 丁蕾蕾 陈普成 焦晨晨 姜永萍 陈化兰 柳金雄 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1262-1267,共6页

为研究H5亚型禽流感病毒(AIV)HA基因重组鸭瘟病毒(DEV)载体活疫苗,本研究利用DEV疫苗株多片段体外拯救系统,将我国H5亚型AIV 2.3.2.1d分支代表病毒CK/LN/SD007株的血凝素(HA)基因插入DEV基因组中,构建了重组DEV,对其进行PCR、间接免疫... 为研究H5亚型禽流感病毒(AIV)HA基因重组鸭瘟病毒(DEV)载体活疫苗,本研究利用DEV疫苗株多片段体外拯救系统,将我国H5亚型AIV 2.3.2.1d分支代表病毒CK/LN/SD007株的血凝素(HA)基因插入DEV基因组中,构建了重组DEV,对其进行PCR、间接免疫荧光实验、western blot和传至15代后的遗传稳定性试验。结果显示,构建了一株表达CK/LN/SD007株HA基因的重组DEV,并且HA基因能够在重组病毒中正确表达并稳定遗传,命名为rDEV H5-12;将rDEV H5-12和亲本病毒DEV疫苗株接种鸡胚成纤维细胞(CEF)后,收集96 h内不同时间点的病毒样品,检测TCID50并绘制生长曲线。结果显示,rDEV H5-12在CEF中的生长曲线和亲本病毒DEV疫苗株无显著差异;rDEV H5-12以105 TCID50免疫SPF鸭2周后,进行DEV和AIV攻毒保护试验。结果显示,rDEV H5-12一次免疫SPF鸭后2周即能诱导对DEV强毒和AIV(CK/LN/SD007)攻击的完全保护,即免疫组SPF鸭在观察期内无排毒,无死亡,对照组SPF鸭在观察期内全部排毒,而且死亡;rDEV H5-12以105 TCID50免疫SPF鸭2次后,每周采集血清进行血凝抑制(HI)抗体效价检测。结果显示,rDEV H5-12首免SPF鸭后2周,多数鸭HI抗体转阳,加强免疫后1周,HI抗体水平达到高峰(HI抗体最高水平为25),随后HI抗体缓慢下降,至加强免疫后第7周,37.5%的鸭HI抗体仍为阳性。以上结果表明,拯救的表达H5亚型AIV HA基因的重组鸭瘟病毒(rDEV H5-12),可作为防控鸭瘟和水禽流感的二联活疫苗候选株。本研究为DE和水禽H5亚型AI的防控提供了新思路。 展开更多

关键词 重组鸭瘟病毒 禽流感 活载体疫苗

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新城疫与禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活苗免疫效力试验 被引量：2

3

作者 刘慧谋 张泉 +1 位作者 蒋彩霞 张如宽 《中国家禽》 北大核心 2002年第2期14-16,共3页

用新城疫病毒(NDV)LaSota株与禽流感病毒(AIV)F株尿囊腔接种非免疫鸡胚。取72～120小时死亡鸡胚液,灭活后分别制成新城疫油乳剂灭活苗、禽流感(H9亚型)油乳剂灭活苗、新城疫与禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活苗。免疫7日龄非免疫雏鸡,一... 用新城疫病毒(NDV)LaSota株与禽流感病毒(AIV)F株尿囊腔接种非免疫鸡胚。取72～120小时死亡鸡胚液,灭活后分别制成新城疫油乳剂灭活苗、禽流感(H9亚型)油乳剂灭活苗、新城疫与禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活苗。免疫7日龄非免疫雏鸡,一周后开始检测ND、AI血凝抑制(HI)抗体,两周时各免疫组鸡的抗体效价都达到6log2以上,3周达到高峰,后维持在较高水平达45天以上。在65日龄进行攻毒,结果单苗和二联苗免疫鸡全部得到保护。 展开更多

关键词 H9亚型 二联油乳剂灭活苗 新城疫 禽流感 免疫保护力 鸡

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鹅禽流感免疫程序研究 被引量：4

4

作者 杨峻 邵华斌 +6 位作者 艾地云 王红琳 罗青平 张蓉蓉 罗玲 廖永洪 温国元 《湖北农业科学》 北大核心 2008年第4期449-451,共3页

为了科学制定鹅的禽流感疫苗免疫程序,进行了5方面的试验。结果表明,雏鹅首免后3周可测定出AI-HI抗体,4周达到高峰,AI-HI抗体为4.8log2,6周开始下降。产蛋鹅免疫后4周抗体达到高峰9～11 log2,直到8个月抗体水平仍然维持在7～9 log2。1... 为了科学制定鹅的禽流感疫苗免疫程序,进行了5方面的试验。结果表明,雏鹅首免后3周可测定出AI-HI抗体,4周达到高峰,AI-HI抗体为4.8log2,6周开始下降。产蛋鹅免疫后4周抗体达到高峰9～11 log2,直到8个月抗体水平仍然维持在7～9 log2。1日龄雏鹅母源抗体AI-HI价为9.3log2,28日龄降至4 log2以下。试验所用的3个厂家的疫苗首次免疫雏鹅的抗体水平上升无明显差异,二次免疫抗体水平上升有明显差异。二次免疫的免疫鹅体内抗体消长情况测定结果表明,以每只1.5mL的免疫效果最好,免疫持续期可达8个月。 展开更多

关键词 鹅 禽流感 灭活疫苗 H5亚型 免疫程序

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H9N2亚型禽流感流行分析及疫苗毒株的筛选 被引量：3

5

作者 刘东 宫晓 +2 位作者 刘晓东 梁俊超 师东方 《中国动物检疫》 CAS 2013年第6期45-50,共6页

本研究旨在筛选新型免疫原性好、广谱的优秀H9亚型禽流感病毒疫苗株。通过H9N2分子流行病学调查对分离得到的37株禽流感H9N2亚型病毒进行HA基因分子遗传进化及其关键位点分析,利用交叉HI效价及鸡胚中和试验分析毒株间毒力及其相关性,制... 本研究旨在筛选新型免疫原性好、广谱的优秀H9亚型禽流感病毒疫苗株。通过H9N2分子流行病学调查对分离得到的37株禽流感H9N2亚型病毒进行HA基因分子遗传进化及其关键位点分析,利用交叉HI效价及鸡胚中和试验分析毒株间毒力及其相关性,制备疫苗用毒株进行免疫攻毒保护试验。结果显示,从37株病毒中选出12株病毒作为代表,分为3个分支,同分支之间交叉HI效价及中和效价最高。HI试验及鸡胚中和试验均显示同分支毒株间的相关系数高。免疫攻毒保护试验显示同分支疫苗株安全性高。表明我国禽流感H9N2亚型情况复杂,且疫苗保护效果与疫苗株的抗原匹配性密切相关,生产多种分支H9疫苗株联合更有利于控制H9型禽流感, 展开更多

关键词 禽流感 疫苗 H9N2亚型禽流感毒株

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2006年鄱阳湖周边地区人群禽流感暴露及其感染状况调查 被引量：1

6

作者 程慧健 袁辉 +3 位作者 熊英 杨富强 宗俊 王健 《预防医学论坛》 2011年第3期195-196,共2页

[目的]了解鄱阳湖周边人群H5N1禽流感病毒暴露及其感染状况。[方法]2006年5月,江西省疾控中心在候鸟栖息地鄱阳湖周边新建县南叽乡和永修县三角乡鄱湖村抽取部分人群,进行流行病学调查和禽流感H5N1抗体水平检测。[结果]调查254人,85.04... [目的]了解鄱阳湖周边人群H5N1禽流感病毒暴露及其感染状况。[方法]2006年5月,江西省疾控中心在候鸟栖息地鄱阳湖周边新建县南叽乡和永修县三角乡鄱湖村抽取部分人群,进行流行病学调查和禽流感H5N1抗体水平检测。[结果]调查254人,85.04%家中饲养禽类,其中19.44%饲养的禽类出现过病、死现象;9.84%直接接触过湖区及周边的野禽,接触时均未采取任何防护措施;血清禽流感H5N1病毒抗体均为阴性。[结论]未发现鄱阳湖周边人群感染禽流感病毒H5N1的证据。 展开更多

关键词 禽流感 暴露人群 感染 鄱阳湖

原文传递

北京市某区1例人感染H7N9禽流感病毒的HA和NA基因特征分析 被引量：1

7

作者 吴杨 牛桓彩 +5 位作者 庄鹏 李东迅 刘重程 李飒 舒高林 潘阳 《实用预防医学》 CAS 2020年第6期667-671,共5页

目的了解北京市某区1例人感染H7N9禽流感病毒基因特征,为禽流感病例的早期发现、疫情控制提供参考。方法提取病例临床样本病毒核酸,反转录扩增后进行病毒血凝素基因(hemagglutinin, HA)、神经氨酸酶基因(neuraminidase, NA)序列测定。... 目的了解北京市某区1例人感染H7N9禽流感病毒基因特征,为禽流感病例的早期发现、疫情控制提供参考。方法提取病例临床样本病毒核酸,反转录扩增后进行病毒血凝素基因(hemagglutinin, HA)、神经氨酸酶基因(neuraminidase, NA)序列测定。获得的病毒序列与全球流感共享数据库中H7N9禽流感病毒株进行序列分析,比较该病毒与北京市既往发现株和其他省市毒株同源性,构建系统发育树,并对部分耐药位点和糖基化位点进行分析。结果北京市某区1例H7N9禽流感病毒为低致病性禽流感。HA、NA与北京既往发现的29株毒株氨基酸同源性为97.2%~100%和96.8%~100%,基于系统进化分析与之最为相近的疫苗株为A/Hunan/02650/2016。HA蛋白受体结合位点发生了G186V、Q226L突变,HA和NA的糖基化位点均未发生变化。结论该区出现的H7N9病毒与北京地区既往发现H7N9毒株具有高度同源性,部分氨基酸位点存在变异,但未发生耐药突变。 展开更多

关键词 H7N9 禽流感 序列分析

原文传递

百色市高致病性禽流感的综合防制 被引量：1

8

作者 蒙振亩 赵聪 卢少坤 《大众科技》 2013年第6期200-203,共4页

高致病性禽流感传播速度快,发病率、死亡率高,危害严重。百色市采取强有力的行政和技术综合防制措施,成功阻击疫情发生流行。分析认为,加强领导是前提,健全体系是基础,内防外堵是手段,落实"免疫、普查、监测、检疫、消毒"等... 高致病性禽流感传播速度快,发病率、死亡率高,危害严重。百色市采取强有力的行政和技术综合防制措施,成功阻击疫情发生流行。分析认为,加强领导是前提,健全体系是基础,内防外堵是手段,落实"免疫、普查、监测、检疫、消毒"等综合防控技术措施是关键。 展开更多

关键词 禽流感 防制

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人类禽流行性感冒疫苗的研究展望

9

作者 雷达 艾立新 +1 位作者 丁国允 邓红樱 《中国计划免疫》 2005年第5期414-417,共4页

通过回顾人类禽流行性感冒(流感)疫苗的研究进展,展望疫苗的使用前景,探讨可能存在的问题。综述人类禽流感疫苗的研究现状,提出:基因工程疫苗是人类禽流感疫苗的发展方向,但在疫苗从实验室走向使用的过程中仍存在一些问题。为安全、有... 通过回顾人类禽流行性感冒(流感)疫苗的研究进展,展望疫苗的使用前景,探讨可能存在的问题。综述人类禽流感疫苗的研究现状,提出:基因工程疫苗是人类禽流感疫苗的发展方向,但在疫苗从实验室走向使用的过程中仍存在一些问题。为安全、有效、快速应对下一次疫情,应全面评估疫苗安全性,正确面对成本-效益问题,从法律、人力、物力、资金和技术层面支持疫苗研究、生产,提高疫苗生产力,正确评价疫苗的适用人群。 展开更多

关键词 禽流行性感冒 疫苗 免疫保护

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中国禽流感流行株的分离鉴定 被引量：130

10

作者 唐秀英 田国斌 +2 位作者 赵传删 周金法 于康震 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第1期1-5,共5页

分别从广东、四川、新疆等地禽流感（ＡＩ）血检阳性、发病率高、产蛋率下降的鸡群中采集１８６份病料，先后分离到６株Ａ型流感病毒。这些分离株可在鸡胚中传代，可凝集鸡红细胞，血凝价达１６０～１２８０倍。不被新城疫、减蛋综合症... 分别从广东、四川、新疆等地禽流感（ＡＩ）血检阳性、发病率高、产蛋率下降的鸡群中采集１８６份病料，先后分离到６株Ａ型流感病毒。这些分离株可在鸡胚中传代，可凝集鸡红细胞，血凝价达１６０～１２８０倍。不被新城疫、减蛋综合症、败血支原体阳性血清所抑制。用这些分离毒株制成琼脂扩散（ＡＧＰ）抗原与禽流感标准阳性血清可出现白色沉淀线。分别将分离毒株与ＡＩ标准分型血清Ｈ１～Ｈ１４、Ｎ１～Ｎ９进行ＨＩ、ＮＩ试验，结果川和川农株均为Ｈ４Ｎ６，西昌１和２株及Ｓｈ株均为Ｈ９Ｎ２，新疆石河子（石）株为Ｈ１４Ｎ５。分离株分别做脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）、静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）测定，结果所有分离株ＩＣＰＩ介于０２４～１４８之间，ＩＶＰＩ介于０１５～０５６之间．通过电镜观察，可见直径为８０～１２０ｎｍ球状或杆状典型的禽流感病毒．经联机检索，从新疆石河子ＡＩ阳性鸡场产蛋下降的鸡群中分离出的Ｈ１４Ｎ５株为国内外首次从鸡中分离出的Ｈ１４亚型禽流感病毒。将某单位送检的禽流感鹅体分离株（Ｇ１株和Ｇ２株）做了血清型和毒力测定，试验结果认定，Ｇ１和Ｇ２株均为Ａ型禽流感病毒Ｈ５Ｎ１亚型，Ｇ１、Ｇ２株对鸡均达到高致病力毒株标准。 展开更多

关键词 禽流感 病毒分离 亚型鉴定

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神经氨酸酶茎部氨基酸缺失对H5N1亚型禽流感病毒生物学特性的影响 被引量：14

11

作者 王曲直 龙进学 +2 位作者 胡顺林 吴艳涛 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期542-546,共5页

近年来H5N1亚型禽流感病毒（AIV）神经氨酸酶（NA）茎部15—20个氨基酸的自发缺失时有报道，突变对于AIV生物学特性的影响还没有得到系统研究。应用反向遗传操作技术，拯救获得5株具有不同NA茎部长度的H5N1／PR8重组AIV。重组病毒的内... 近年来H5N1亚型禽流感病毒（AIV）神经氨酸酶（NA）茎部15—20个氨基酸的自发缺失时有报道，突变对于AIV生物学特性的影响还没有得到系统研究。应用反向遗传操作技术，拯救获得5株具有不同NA茎部长度的H5N1／PR8重组AIV。重组病毒的内部基因和血凝素（HA）基因来源相同，NA基因来源不同，并在NA茎部进行20个氨基酸的删除或添加突变。通过研究其生物学特性发现，5株重组病毒在SPF鸡胚中繁殖良好，其EID50、MDT和平均病毒滴度相似；NA茎部长短影响病毒的解凝能力，长茎病毒红细胞解脱能力比短茎病毒强；NA茎部15或20个氨基酸删除突变提高了重组病毒在MDCK细胞上的繁殖能力，短茎病毒释放出的病毒粒子数量是长茎病毒的10。100倍，释放时间提前6．10h，短茎病毒在MDCK细胞上形成的空斑也明显比长茎病毒的空斑大。实验结果揭示了AIVNA茎部氨基酸缺失突变的生物学意义，NA茎部15或20个氨基酸删除突变增强了AIV的细胞适应性，可能与现阶段H5N1亚型AIV宿主范围进一步扩大有关。利用反向遗传技术成功拯救了5株H5N1／PR8重组流感病毒，为流感病毒基因功能研究和重组疫苗研究建立了技术平台。通过对AIVNA茎部氨基酸的删除突变提高了病毒在MDCK细胞上的繁殖产量，为流感病毒细胞苗的生产提供了新的思路。 展开更多

关键词 H5N1亚型禽流感病毒 神经氨酸酶茎部 氨基酸删除突变 反向遗传操作技术

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TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒 被引量：19

12

作者 卢亦愚 严菊英 +3 位作者 冯燕 徐昌平 史雯 茅海燕 《中国病毒学》 CSCD 2006年第5期472-476,共5页

建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量RT-PCR方法,用于检测H5亚型禽流感病毒。针对H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异... 建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量RT-PCR方法,用于检测H5亚型禽流感病毒。针对H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异性、敏感性与准确性;并通过体外克隆技术建立病毒基因拷贝数进行定量分析。结果表明:引物与探针的优化浓度分别640nmol/L和480nmol/L,体系具有良好的保守性和特异性,与其他呼吸道病毒均无交叉反应。方法检测灵敏度为100拷贝/反应,标准曲线线性范围为107～102拷贝/反应,从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,操作简便,重现性好。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法特异、敏感、快速,适合于临床实验室进行H5亚型禽流感病毒的快速定量检测。 展开更多

关键词 荧光定量RT-PCR TAQMAN-MGB探针 H5亚型禽流感病毒(AIV H5)

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新型人感染H7N9型禽流感病毒研究进展 被引量：15

13

作者 陈雅 朱进 冯振卿 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第7期759-763,共5页

人感染新型H7N9型禽流感自2013年确诊以来全国蔓延,表现出极高的致病率及致死率,引发了极大的关注。该病由新型H7N9型禽流感病毒引起,该病毒基因突变率高,一旦发生对人类呼吸道上皮受体的适应性突变,极易导致暴发性大流行。文中从H7N9... 人感染新型H7N9型禽流感自2013年确诊以来全国蔓延,表现出极高的致病率及致死率,引发了极大的关注。该病由新型H7N9型禽流感病毒引起,该病毒基因突变率高,一旦发生对人类呼吸道上皮受体的适应性突变,极易导致暴发性大流行。文中从H7N9型禽流感的流行病学特征、病原学特征、感染患者的特征、检测措施及防治策略等方面对目前的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 H7N9禽流感病毒 基因突变 流行病学 临床特征 治疗 疫苗

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利用Rde/ET技术构建表达H5亚型禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒 被引量：10

14

作者 兰德松 石星明 +6 位作者 王云峰 刘长军 王玫 崔红玉 田国彬 李继松 童光志 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期78-84,共7页

【目的】本研究以火鸡疱疹病毒(HVT)BAC分子克隆为平台,构建表达禽流感HA基因的重组火鸡疱疹病毒,以开发新型病毒活载体疫苗。【方法】利用Red/ET重组技术,经过两步法重组:第一步,用两端带有50bp大小左、右同源臂a和b的选择标记基因rpsL... 【目的】本研究以火鸡疱疹病毒(HVT)BAC分子克隆为平台,构建表达禽流感HA基因的重组火鸡疱疹病毒,以开发新型病毒活载体疫苗。【方法】利用Red/ET重组技术,经过两步法重组:第一步,用两端带有50bp大小左、右同源臂a和b的选择标记基因rpsL-neo表达盒替换HVT基因组US2区;第二步,用两端带有同样的50 bp左、右同源臂a和b的HA基因表达盒替换选择标记基因rpsL-neo表达盒。在含有氯霉素和链霉素双抗性的平板上筛选阳性克隆,经卡那霉素抗性反向筛选和PCR进一步鉴定,鉴定正确的克隆命名为pHVT-HA。提取并纯化pHVT-HA DNA,转染原代鸡胚成纤维细胞(CEF),以完成重组病毒的拯救。【结果】命名为pHVT-HA3的BAC克隆转染CEF后第4天,出现病毒噬斑,噬斑形态与野生型HVT相似,获得拯救的重组病毒,命名为rHVT-HA3,将重组病毒rHVT-HA3在CEF上连续传代培养,经PCR和间接免疫荧光检测表明,重组病毒在连续传代过程中仍能稳定表达HA蛋白。【结论】本研究以HVT BAC为平台,利用Red/ET重组技术,构建了表达禽流感A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)毒株的血凝素(HA)基因的重组火鸡疱疹病毒,为新型禽流感重组活载体疫苗开发奠定基础。 展开更多

关键词 火鸡疱疹病毒 细菌人工染色体 Red/ET克隆 禽流感病毒 HA基因

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基于PubMed数据库人禽流感研究的文献计量分析 被引量：8

15

作者 纪征 任淑敏 朱启贞 《中华医学图书情报杂志》 CAS 2010年第6期70-73,79,共5页

从文献发表年限、文种、期刊、文献著者、国家地区分布、研究内容等方面进行了文献计量学研究,并对人禽流感研究文献的时间分布、文种分布、核心期刊分布、核心作者分布、国家和地区分布和文献类型分布等进行了探讨和对其发展动态和趋... 从文献发表年限、文种、期刊、文献著者、国家地区分布、研究内容等方面进行了文献计量学研究,并对人禽流感研究文献的时间分布、文种分布、核心期刊分布、核心作者分布、国家和地区分布和文献类型分布等进行了探讨和对其发展动态和趋势进行了预测研究。 展开更多

关键词 人禽流感 文献计量学 信息分析

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2012～2015年H9N2亚型AIV分离株HA基因的克隆及序列分析 被引量：8

16

作者 叶贺佳 梁昭平 +2 位作者 彭特 仇微红 许利娜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期1148-1155,共8页

为了解近年来中国部分地区H9N2亚型禽流感病毒流行特点及遗传进化情况,利用RT-PCR方法扩增2012～2015年分离的17株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因片段,并进行序列测定和遗传进化分析,同时对HA蛋白的裂解位点、受体结合位点和潜在的糖基化... 为了解近年来中国部分地区H9N2亚型禽流感病毒流行特点及遗传进化情况,利用RT-PCR方法扩增2012～2015年分离的17株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因片段,并进行序列测定和遗传进化分析,同时对HA蛋白的裂解位点、受体结合位点和潜在的糖基化位点进行分析.结果显示,17株H9N2亚型禽流感病毒HA基因核苷酸和推导的氨基酸同源性分别为87％～100％和75％～100％,均属于Y280-1ike亚系毒株.HA基因裂解位点均为非连续碱性氨基酸,属于低致病力毒株.HA基因受体结合位点149、198、234和235位氨基酸存在变异,其中,16株分离毒株的234位氨基酸由Q突变为L,表现出人流感病毒受体结合特征.潜在糖基化位点分析结果显示,11株病毒在218位氨基酸处缺失1个糖基化位点,4株病毒在492位氨基酸处缺失1个糖基化位点,17株病毒在313位氨基酸处增加1个糖基化位点.研究结果表明,应加强对H9N2亚型AIV的流行病学监测,关注疫苗毒株与流行毒株的差异. 展开更多

关键词 H9N2亚型禽流感病毒 HA基因 克隆 序列分析

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甲型H7N9流感病毒多重PCR-酶联免疫吸附检测方法的建立及应用 被引量：7

17

作者 章倩云 焦永军 +2 位作者 刘丹丹 祁贤 宋勇春 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第10期1380-1383,1387,共5页

目的建立一种快捷灵敏的禽流感病毒PCR-ELISA检测技术。方法针对禽流感病毒M基因（M）、H7基因（H7）、N9基因（N9）3个基因片段的保守序列,通过生物素与地高辛的特异性标记,最后通过酶联免疫吸附反应判断PCR扩增的有无。结果M、H7、N9 ... 目的建立一种快捷灵敏的禽流感病毒PCR-ELISA检测技术。方法针对禽流感病毒M基因（M）、H7基因（H7）、N9基因（N9）3个基因片段的保守序列,通过生物素与地高辛的特异性标记,最后通过酶联免疫吸附反应判断PCR扩增的有无。结果M、H7、N9 3个基因片段所能检测的最低拷贝数分别为1.43×103copy/μl、1.04×102copy/μl、8.80×103copy/μl,其敏感度比普通PCR扩增提高了10倍~100倍,且不同流感病毒亚型之间、不同种属病毒之间均不存在交叉反应现象。另外还检测了114份临床标本,结果与鸡胚培养匹配率达100.0%。结论本文通过特异性和敏感性实验显示此方法灵敏度高、特异性强,且操作简单,可以广泛地应用于流感病毒的实验室检测。 展开更多

关键词 禽流感病毒 PCR-酶联免疫吸附试验 检测 分型

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2017～2018年山东省H9N2亚型禽流感病毒HA基因的遗传进化分析 被引量：7

18

作者 高斌 张帅 +5 位作者 魏志鹏 李旭冬 宋存鑫 曾帅 唐熠 刁有祥 《中国家禽》 北大核心 2019年第6期21-26,共6页

为了解山东省H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的变异情况,采用RT-PCR技术对24株山东分离株的HA基因进行扩增、测序和遗传进化分析。结果显示:分离株HA基因在遗传进化树中均属于欧亚分支的Y280-like分支,与A/DK/HK/Y280/97的HA基因核苷酸序列相... 为了解山东省H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的变异情况,采用RT-PCR技术对24株山东分离株的HA基因进行扩增、测序和遗传进化分析。结果显示:分离株HA基因在遗传进化树中均属于欧亚分支的Y280-like分支,与A/DK/HK/Y280/97的HA基因核苷酸序列相似性为89.1%～90.5%。HA裂解位点均只有一个碱性氨基酸(R),符合低致病性AIV的特征。所有毒株234位受体结合位点均为L(亮氨酸),呈现出典型的人流感病毒受体结合特性。另外,分离株均缺失218～220位糖基化位点且新增313～315位糖基化位点。研究表明,分离毒株HA基因在分子水平上发生了变异,要积极应对低致病性禽流感防控面临的新挑战。 展开更多

关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 HA基因 遗传进化分析

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H9N2亚型禽流感病毒对樱桃谷肉鸭的致病性 被引量：6

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作者 王蛟 刁有祥 +4 位作者 孙晓艳 郝东敏 刘鑫 葛平萍 鲁爱玲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1732-1737,共6页

为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)对樱桃谷肉鸭的致病性。本试验利用1株鸭源H9N2亚型AIV分别通过静脉注射和鼻内接种途径感染2周龄健康樱桃谷肉鸭,观察感染鸭的症状、排毒规律及组织学变化,流式细胞术分析外周血CD4+和CD8+T细胞变化规律... 为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)对樱桃谷肉鸭的致病性。本试验利用1株鸭源H9N2亚型AIV分别通过静脉注射和鼻内接种途径感染2周龄健康樱桃谷肉鸭,观察感染鸭的症状、排毒规律及组织学变化,流式细胞术分析外周血CD4+和CD8+T细胞变化规律,实时荧光定量(RT-qPCR)检测脾脏中细胞因子的表达水平,并测定血清HI抗体效价。结果显示,攻毒后,静脉注射组鸭出现体质量增长显著缓慢、呼吸道症状以及全身性感染,而鼻内接种组鸭无明显临床症状,仅发生局部感染;两攻毒组鸭泄殖腔较气管排毒量高且排毒时间长;外周血CD8+T细胞显著升高,并且脾脏IFNA、IFNB、IFNG和IL2表达水平上调,IL1B和IL6表达水平仅在静脉注射组上调;血清HI抗体水平低且维持时间短。结果表明,在实验室条件下,H9N2亚型AIV对樱桃谷肉鸭致病力较弱,仅静脉接种组引起鸭体质量增长缓慢及呼吸系统出血、淋巴细胞浸润。 展开更多

关键词 H9N2亚型禽流感 樱桃谷肉鸭 流式细胞术 实时荧光定量

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1株HA蛋白S145变异H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定与HA基因序列分析 被引量：5

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作者 彭特 许利娜 +3 位作者 张思远 胡秀美 苏子由 叶贺佳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期676-681,共6页

从山东某发病养殖场采集疑似病料,经RT-PCR检测为H9N2亚型禽流感阳性,采用鸡胚尿囊腔接种法分离病毒(SD089),并进行HA、HI试验和HA基因扩增、测序以及序列的同源性和遗传进化分析。结果显示,分离的SD089株具有血凝特性但不能被H9亚型禽... 从山东某发病养殖场采集疑似病料,经RT-PCR检测为H9N2亚型禽流感阳性,采用鸡胚尿囊腔接种法分离病毒(SD089),并进行HA、HI试验和HA基因扩增、测序以及序列的同源性和遗传进化分析。结果显示,分离的SD089株具有血凝特性但不能被H9亚型禽流感标准阳性血清所抑制,其HA基因推导的氨基酸序列与参考毒株相比,第145位由S漂变为N,导致增加糖基化位点NGT,表明S145是血凝抑制抗体结合位点。SD089株属于BJ94分支,与2010―2014年大部分山东流行毒株的核苷酸和氨基酸序列相似性分别为88.9%~97.5%和89.9%~99.6%,而与疫苗株SD696分别降至88.0%和89.1%。试验表明,分离的SD089株HA基因在分子水平上发生了变异,S145位点的突变提示低致病性禽流感的防制面临新的挑战。 展开更多

关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 HA基因 S145位点 遗传进化

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