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自絮凝工业酒精酵母营养缺陷型的筛选和鉴定 被引量：1
1
作者 李倩 赵心清 +3 位作者 贺雷雨 张秋美 李宁 白凤武 《工业微生物》 CAS CSCD 2009年第5期44-48,共5页
运用紫外诱变方法成功获得了自絮凝酵母的营养缺陷型突变体,并且优化了诱变方法,证明了通过紫外诱变也可获得自絮凝酵母的营养缺陷型突变体。实验证明,较低的致死率更容易获得突变体,利用制霉菌素的富集可明显减少非缺陷型背景。本实验... 运用紫外诱变方法成功获得了自絮凝酵母的营养缺陷型突变体,并且优化了诱变方法,证明了通过紫外诱变也可获得自絮凝酵母的营养缺陷型突变体。实验证明,较低的致死率更容易获得突变体,利用制霉菌素的富集可明显减少非缺陷型背景。本实验获得了组氨酸和尿嘧啶营养缺陷型各一株,其中组氨酸缺陷型菌株失去絮凝特性,而尿嘧啶缺陷型保持了良好的絮凝特性。继代实验表明,二株突变体均可以稳定遗传。并利用交配型PCR方法证明了絮凝酵母及其两株突变体与其酿酒酵母亲本类似,均为交配型杂合体。 展开更多
关键词 絮凝酵母 工业酒精酵母 营养缺陷型 紫外诱变 交配型
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乙酸渗漏型丙酮酸高产菌的选育 被引量：11
2
作者 刘立明 李寅 +2 位作者 堵国成 钱崎峰 陈坚 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期10-14,共5页
对Torulopsis glabrata WSH-IP303进行NTG诱变,挑选以乙酸为补充碳源的平板上透明圈较大的菌落,经初筛和复筛,发现T.glabrata WSH-LQ307生产丙酮酸能力强且稳定。以乙酸为补充碳源摇瓶培养48h,其丙酮酸产量(46.2g/L)比出发菌株(38.3g/L... 对Torulopsis glabrata WSH-IP303进行NTG诱变,挑选以乙酸为补充碳源的平板上透明圈较大的菌落,经初筛和复筛,发现T.glabrata WSH-LQ307生产丙酮酸能力强且稳定。以乙酸为补充碳源摇瓶培养48h,其丙酮酸产量(46.2g/L)比出发菌株(38.3g/L)提高了21％。采用该菌株在5L发酵罐上进行4批发酵实验,丙酮酸产量在64h最高可达68.7g/L,对葡萄糖的转化率为0.651g/g。 展开更多
关键词 光滑球拟酵母 丙酮酸发酵 丙酮酸脱羧酶 乙酸渗漏型 丙酮酸高产菌 选育
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桃红平菇原生质体诱变营养缺陷型突变体 被引量：4
3
作者 杨崇林 张鉴铭 《中国食用菌》 1992年第2期20-21,共2页
从桃红平菇单核菌丝分离出原生质体铺于含0.6mol/l蔗糖的CM表面,经紫外线处理一定时间后,培养7—10天后长出的菌落被转于MM之上,在其上生长十分缓慢或停止的菌落通过各种营养添加物测其营养需求,最后得到一个需要补充丙氨酸和天冬氨酸... 从桃红平菇单核菌丝分离出原生质体铺于含0.6mol/l蔗糖的CM表面,经紫外线处理一定时间后,培养7—10天后长出的菌落被转于MM之上,在其上生长十分缓慢或停止的菌落通过各种营养添加物测其营养需求,最后得到一个需要补充丙氨酸和天冬氨酸才能正常生长的双缺突变体。试验表明,该突变体能很好地分离出原生质体,且在含0.6mol/l蔗糖的MM上不能再生,因而具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 桃红平菇 原生质体 突变体
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粪产碱菌的Tn5转座诱变及吲哚乙酸生物合成特性的研究 被引量：11
4
作者 李法峰 平淑珍 +1 位作者 苏宝林 林敏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期551-555,共5页
粪产碱菌 (Alcaligenesfaecalis)A1 50 1的吲哚乙酸 (IAA)合成需要外源色氨酸参与。在不含色氨酸的限制性培养基中 ,A1 50 1能良好生长 ,但不能合成IAA ,表明在A1 50 1中存在一条依赖于色氨酸的IAA合成途径。A1 50 1的IAA合成具有菌体... 粪产碱菌 (Alcaligenesfaecalis)A1 50 1的吲哚乙酸 (IAA)合成需要外源色氨酸参与。在不含色氨酸的限制性培养基中 ,A1 50 1能良好生长 ,但不能合成IAA ,表明在A1 50 1中存在一条依赖于色氨酸的IAA合成途径。A1 50 1的IAA合成具有菌体密度依赖特性。采用Tn5转座诱变技术构建A1 50 1的突变库 ,从 350 0多株Tn5转染子中分离到一株色氨酸营养缺陷型突变株AT63。该Tn5突变株在不含色氨酸的限制性培养基上不能生长 ,但仍能进行IAA的生物合成 ,每毫升菌体密度等于 1 0的突变株菌体的IAA合成量为 2 2 4 μg。对突变株AT63的研究表明在A1 50 1中至少存在两条IAA合成途径 :一条以色氨酸为合成前体 ,另一条以吲哚 - 3-磷酸甘油为前体。southern杂交结果表明突变株中Tn5插入位点可能位于编码色氨酸合成酶基因上。 展开更多
关键词 粪产碱菌A1501 Tn5诱变 吲哚乙酸
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酱油工业生产菌沪酿3042基因工程转化体系的构建 被引量：6
5
作者 李方方 潘力 曾沛斌 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期94-95,99,共3页
以工业酿造常用菌株米曲霉沪酿3042为出发菌株,采用紫外诱变和氯酸钾压迫相结合的方法,得到硝酸盐营养缺陷型(niaD-)宿主菌,将含有niaD基因的载体转化到该宿主中,转化率为0.7个转化子/μgDNA,相对比较低,但转化子传代数次后遗传仍很稳定... 以工业酿造常用菌株米曲霉沪酿3042为出发菌株,采用紫外诱变和氯酸钾压迫相结合的方法,得到硝酸盐营养缺陷型(niaD-)宿主菌,将含有niaD基因的载体转化到该宿主中,转化率为0.7个转化子/μgDNA,相对比较低,但转化子传代数次后遗传仍很稳定,该转化体系可用于工业生产菌沪酿3042的遗传改造。 展开更多
关键词 米曲霉 niaD^- 筛选 转化
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费氏中华根瘤菌腺嘌呤缺陷突变株的构建与筛选 被引量：4
6
作者 谢波 陈大松 +1 位作者 李友国 周俊初 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期45-49,共5页
构建出费氏中华根瘤菌嘌呤合成酶基因purL的基因置换载体pHN70 1 ,purL内部NotⅠ XhoⅠ片段被luxAB基因取代 ,造成正常基因的破坏。用该载体对野生型费氏中华根瘤菌HH1 0 3进行purL的基因置换 ,筛选到腺嘌呤缺陷型突变株P82 5。波动实... 构建出费氏中华根瘤菌嘌呤合成酶基因purL的基因置换载体pHN70 1 ,purL内部NotⅠ XhoⅠ片段被luxAB基因取代 ,造成正常基因的破坏。用该载体对野生型费氏中华根瘤菌HH1 0 3进行purL的基因置换 ,筛选到腺嘌呤缺陷型突变株P82 5。波动实验和连续转接试验结果表明该突变菌株表型十分稳定。purL表达载体pBBR PG在P82 5中可恢复其在基本培养基上的生长情况 ,证明突变株确实为purL单基因破坏。盆栽结瘤实验结果表明 。 展开更多
关键词 费氏中华根瘤菌 嘌呤缺陷型 基因置换 基因工程微生物
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双孢蘑菇的单孢分离和单孢杂交研究 被引量：2
7
作者 许旭萍 李惠珍 《中国食用菌》 1995年第5期12-14,共3页
本文采用一种较为简单易行、高效、选择性强的单孢分离法，分离获得双孢蘑菇的单孢菌林１５８株，并对这些单孢菌株的培养性状、菌丝间融合和自发营养缺陷型等进行研究。结果表明：来自同一子实体的许多单孢子在ＰＤＡ培养基上其菌丝体... 本文采用一种较为简单易行、高效、选择性强的单孢分离法，分离获得双孢蘑菇的单孢菌林１５８株，并对这些单孢菌株的培养性状、菌丝间融合和自发营养缺陷型等进行研究。结果表明：来自同一子实体的许多单孢子在ＰＤＡ培养基上其菌丝体形态、生长速度均有显著差异：单孢菌株之间的融合率为１８．１％；单孢菌株中存在自发营养缺陷型，自然发生率为１０．１５％；活蘑菇菌丝体及高浓度孢子悬液对于单孢子萌发均具明显的促进作用。 展开更多
关键词 单孢分离 单孢菌株 菌丝融合 双孢蘑菇 食用菌
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弗氏志贺菌ΔlysA突变株的构建及SILAC技术的应用尝试
8
作者 李月玥 刘先凯 +3 位作者 冯尔玲 王恒樑 陈福生 朱力 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期345-350,共6页
目的构建弗氏2a志贺菌301株赖氨酸营养缺陷型突变株,为将细胞培养条件下稳定同位素标记(SILAC)技术应用于志贺菌蛋白质组学研究奠定基础。方法采用λ-Red重组系统对弗氏2a志贺菌301株lysA基因进行缺失,对野生株和突变株进行基本的表型... 目的构建弗氏2a志贺菌301株赖氨酸营养缺陷型突变株,为将细胞培养条件下稳定同位素标记(SILAC)技术应用于志贺菌蛋白质组学研究奠定基础。方法采用λ-Red重组系统对弗氏2a志贺菌301株lysA基因进行缺失,对野生株和突变株进行基本的表型测评和毒力评价,并利用双向电泳技术比较二者在全菌蛋白表达谱上的差异,最后将突变株分别在含有12C6-赖氨酸和13C6-赖氨酸的培养基中培养,根据双向电泳胶图取对应蛋白点进行胶内酶切及MALDI-TOF/TOF分析。结果成功构建了301 lysA基因缺失突变株,蛋白鉴定结果显示所取对应蛋白点为同一蛋白,在质谱图上轻重同位素峰位移为6 amu。结论本研究所构建的赖氨酸营养缺陷型突变株适合进行SILAC分析。 展开更多
关键词 志贺菌 弗氏 赖氨酸营养缺陷型突变株 基因缺失 λ-Red重组系统 双向电泳 SILAC
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炭疽芽孢杆菌A16R株lysA基因缺失突变株的构建
9
作者 高飞 王东澍 +4 位作者 冯尔玲 朱力 王恒樑 廖祥儒 刘先凯 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期97-101,113,共6页
目的构建炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)A16R株lysA基因缺失突变株,为后续的定量蛋白质组学研究奠定基础。方法以炭疽杆菌活疫苗A16R株lysA基因为目的缺失基因,利用软件设计上下游同源臂以及抗性基因的引物,用同源重组酶将3个片段连... 目的构建炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)A16R株lysA基因缺失突变株,为后续的定量蛋白质组学研究奠定基础。方法以炭疽杆菌活疫苗A16R株lysA基因为目的缺失基因,利用软件设计上下游同源臂以及抗性基因的引物,用同源重组酶将3个片段连入质粒中,构建重组质粒,并将重组质粒导入炭疽杆菌A16R感受态细胞中,筛选炭疽杆菌A16R株lysA基因缺失突变株,对其进行验证。最后绘制缺失突变株和野生株生长曲线并进行生理生化分析。结果成功构建了重组质粒,经同源重组后获得lysA基因缺失突变株。鉴定表明目的基因已经丢失。结论成功获得炭疽杆菌A16R株lysA基因缺失突变株,为定量蛋白质组学研究奠定了基础,也为炭疽杆菌重要基因功能的研究建立了良好的技术平台。 展开更多
关键词 炭疽芽孢杆菌A16R株 同源重组 赖氨酸营养缺陷型
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