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红麻酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)酵母双杂交诱饵载体构建及自激活检测
被引量：
2
1
作者
张高阳
邓接楼
+1 位作者
黄思齐
李德芳
《中国麻业科学》
2018年第2期75-78,共4页
酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)是超长链脂肪酸合成过程中的限速酶,参与超长链脂肪酸和蜡质的合成,在植物抗旱和应对生物胁迫反应中发挥重要调控作用。研究采用PCR方法从红麻中(茎皮)分离KCS基因片段,将该基因按正确方式插入酵母双杂交表达质粒...
酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)是超长链脂肪酸合成过程中的限速酶,参与超长链脂肪酸和蜡质的合成,在植物抗旱和应对生物胁迫反应中发挥重要调控作用。研究采用PCR方法从红麻中(茎皮)分离KCS基因片段,将该基因按正确方式插入酵母双杂交表达质粒pGBKT7中,酶切鉴定正确后,用PEG/Li Ac方法转化酵母MaV203,经抗性筛选后,用X-Gal对转化酵母进行自激活检测。结果表明,KCS基因的DNA结合结构域与酵母GAL4转录因子的上游激活位点(UAS)结合,可激活报告基因半乳糖苷酶的表达。经删除KCS基因DNA binding区域后重新转化酵母,结果表明,不携带KCS基因DNA binding区域的截短蛋白可以作为诱饵蛋白来研究与之相互作用的蛋白。
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关键词
酮脂酰辅酶A合成酶
酵母双杂交
自激活
红麻
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题名
红麻酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)酵母双杂交诱饵载体构建及自激活检测
被引量：
2
1
作者
张高阳
邓接楼
黄思齐
李德芳
机构
江西上饶师范学院生命科学学院
中国农业科学院麻类研究所
出处
《中国麻业科学》
2018年第2期75-78,共4页
基金
江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ161047)
农业部麻类生物学与加工重点实验室开放课题(201602)
上饶师范学院2014年博士科研启动基金(001055)
文摘
酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)是超长链脂肪酸合成过程中的限速酶,参与超长链脂肪酸和蜡质的合成,在植物抗旱和应对生物胁迫反应中发挥重要调控作用。研究采用PCR方法从红麻中(茎皮)分离KCS基因片段,将该基因按正确方式插入酵母双杂交表达质粒pGBKT7中,酶切鉴定正确后,用PEG/Li Ac方法转化酵母MaV203,经抗性筛选后,用X-Gal对转化酵母进行自激活检测。结果表明,KCS基因的DNA结合结构域与酵母GAL4转录因子的上游激活位点(UAS)结合,可激活报告基因半乳糖苷酶的表达。经删除KCS基因DNA binding区域后重新转化酵母,结果表明,不携带KCS基因DNA binding区域的截短蛋白可以作为诱饵蛋白来研究与之相互作用的蛋白。
关键词
酮脂酰辅酶A合成酶
酵母双杂交
自激活
红麻
Keywords
ketoacyl
coenzyme
A
synthetase
Y2H
auto
-
actiation
Hibiscus
cannabinus
分类号
S563.5 [农业科学—作物学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
红麻酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)酵母双杂交诱饵载体构建及自激活检测
张高阳
邓接楼
黄思齐
李德芳
《中国麻业科学》
2018
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