目的筛选慢性乙型肝炎(chron ic hepatitis B,CHB)患者与无症状乙型肝炎病毒携带者(asymptom atic HBVcarriers,ASCs)表达差异的基因。方法分离CHB及ASCs的外周血单个核细胞(peripheral b lood mononuc lear cells,PBMC)并提取RNA,SMAR...目的筛选慢性乙型肝炎(chron ic hepatitis B,CHB)患者与无症状乙型肝炎病毒携带者(asymptom atic HBVcarriers,ASCs)表达差异的基因。方法分离CHB及ASCs的外周血单个核细胞(peripheral b lood mononuc lear cells,PBMC)并提取RNA,SMART技术合成cDNA,采用抑制消减杂交(suppression subtractive hybrid ization,SSH)技术构建差异表达基因cDNA文库,进一步采用dot b lot筛选,得到差异表达的基因。结果经过筛选共获得了22个阳性克隆,通过序列分析,发现它们代表22个基因,在CHB表达增高的基因多是和炎症相关,在ASCs表达增高的基因中,多为新基因。结论成功构建了CHB与ASCs的消减文库并初步分析这些差异表达基因的意义,对于阐明CHB的发病机制及其治疗都有重要意义。展开更多
文摘目的筛选慢性乙型肝炎(chron ic hepatitis B,CHB)患者与无症状乙型肝炎病毒携带者(asymptom atic HBVcarriers,ASCs)表达差异的基因。方法分离CHB及ASCs的外周血单个核细胞(peripheral b lood mononuc lear cells,PBMC)并提取RNA,SMART技术合成cDNA,采用抑制消减杂交(suppression subtractive hybrid ization,SSH)技术构建差异表达基因cDNA文库,进一步采用dot b lot筛选,得到差异表达的基因。结果经过筛选共获得了22个阳性克隆,通过序列分析,发现它们代表22个基因,在CHB表达增高的基因多是和炎症相关,在ASCs表达增高的基因中,多为新基因。结论成功构建了CHB与ASCs的消减文库并初步分析这些差异表达基因的意义,对于阐明CHB的发病机制及其治疗都有重要意义。
