正交实验法优化发酵蜈蚣粉中总黄酮提取工艺 被引量：17

1

作者 王彦多 刘春雨 +3 位作者 吕世洁 王颖 王立娜 王集会 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期183-186,192,共5页

目的:采用正交实验法优化发酵蜈蚣粉总黄酮回流提取工艺。方法:在对发酵蜈蚣粉中总黄酮提取条件进行单因素实验的基础上,以提取温度(A)、料液比(B)和提取时间(C)为自变量,发酵蜈蚣粉总黄酮得率为因变量,利用正交实验法探究最佳提取工艺... 目的:采用正交实验法优化发酵蜈蚣粉总黄酮回流提取工艺。方法:在对发酵蜈蚣粉中总黄酮提取条件进行单因素实验的基础上,以提取温度(A)、料液比(B)和提取时间(C)为自变量,发酵蜈蚣粉总黄酮得率为因变量,利用正交实验法探究最佳提取工艺条件。同时采用MTT体外抗肿瘤实验方法,研究发酵蜈蚣粉提取物对肺腺癌A549细胞的抑制作用。结果:影响发酵蜈蚣粉总黄酮得率提取因素的大小次序为:料液比>提取温度>提取时间,在此次实验中,发酵蜈蚣粉最佳提取工艺为:提取温度80℃,料液比1∶40(g∶m L),提取时间2.5 h,在此条件下发酵蜈蚣粉中总黄酮得率为1.970%;提取获得的不同浓度的发酵蜈蚣醇提液对肺腺癌A549细胞的抑制率均大于顺铂,具有较优良的抗肿瘤活性。 展开更多

关键词 发酵蜈蚣粉 正交实验 回流提取 总黄酮 mtt法 肺腺癌A549细胞株

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人脑胶质瘤细胞株SHG-44放射敏感性的测定方法探讨 被引量：6

2

作者 李莉 许昌韶 +2 位作者 周菊英 徐晓婷 罗加林 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第3期419-421,共3页

目的探讨MTT法、细胞计数Kit8(CCK8)法在进行人脑胶质瘤细胞株SHG44细胞放射敏感性测定时能否替代集落形成试验法。方法运用3种方法分别在0、1、2、3、4、6、8、10Gy8个不同剂量点照射后检测其存活分数,采用统计学检查分析3种方法所得... 目的探讨MTT法、细胞计数Kit8(CCK8)法在进行人脑胶质瘤细胞株SHG44细胞放射敏感性测定时能否替代集落形成试验法。方法运用3种方法分别在0、1、2、3、4、6、8、10Gy8个不同剂量点照射后检测其存活分数,采用统计学检查分析3种方法所得存活分数的相关性。结果在一定照射剂量内(照射剂量≤3Gy时),MTT法、CCK8法与克隆形成法相关性较好,而超出该剂量范围时的相关性差。经直线回归分析,3种方法均不存在高度线性相关。CCK8和MTT法相比无更好的相关性。结论集落形成法仍然是测定放射敏感性的“金标准”,MTT法等其他方法可以提供参考,但无法替代集落形成法。 展开更多

关键词 mtt法 细胞计数Kit-8法 集落形成试验 SHG-44细胞 放射治疗

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全冠修复材料对人牙龈成纤维细胞的毒性 被引量：5

3

作者 马红 刘梅 +1 位作者 章非敏 王娟 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2008年第5期510-514,共5页

目的:观察镍铬合金、金合金、铸造陶瓷对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFC)的毒性。方法:制备镍铬合金、金合金、铸造陶瓷的细胞培养基浸提液,采用四唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT法)... 目的:观察镍铬合金、金合金、铸造陶瓷对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFC)的毒性。方法:制备镍铬合金、金合金、铸造陶瓷的细胞培养基浸提液,采用四唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT法)测定材料对HGFC生长的影响;在材料周围接种HGFC,观察细胞的生长情况。采用Stata9.1软件对实验结果进行析因分析。结果:金合金的细胞相对增殖率为1.016、1.014、0.824、0.796,镍铬合金的细胞相对增殖率为1.028、1.079、0.903、0.809,铸造陶瓷的细胞相对增殖率为1.018、1.030、0.924、0.818。金合金和镍铬合金对细胞相对增殖率的影响有统计学差异(P=0.021),但金合金与铸造陶瓷、镍铬合金与铸造陶瓷之间无统计学差异(P>0.05)。金合金、镍铬合金和铸造陶瓷的细胞毒性级别(cytotoxical grade,CG)为0-1级。倒置显微镜观察3种材料周围均有细胞生长,镍铬合金周围有细胞坏死带产生。结论:镍铬合金与HGFC直接接触引起的细胞损伤比析出的金属离子对细胞损伤大。金合金和铸造陶瓷具有良好的生物相容性。 展开更多

关键词 人牙龈成纤维细胞 四唑盐比色分析法 镍铬合金 金合金 铸造陶瓷

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稳定高表达人野生型DNApolβ食管癌细胞Ec9706的生物学特征 被引量：1

4

作者 李敏 付庆 +1 位作者 赵国强 董子明 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第2期201-203,共3页

目的:建立稳定高表达人野生型DNA聚合酶beta(polβ)的食管癌细胞系Ec9706,并对该细胞系的生物学特征进行分析。方法:脂质体转染法将人野生型polβ重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入Ec9706细胞,荧光显微镜观察转染效果,经G418筛... 目的:建立稳定高表达人野生型DNA聚合酶beta(polβ)的食管癌细胞系Ec9706,并对该细胞系的生物学特征进行分析。方法:脂质体转染法将人野生型polβ重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入Ec9706细胞,荧光显微镜观察转染效果,经G418筛选得到稳定转染细胞系。RT-PCR方法检测转染细胞polβmRNA的表达水平,绘制生长曲线,软琼脂实验测细胞克隆形成率,MTT法测转染前后细胞对顺铂的敏感性。结果:荧光显微镜下转染细胞荧光强,转染效率高,RT-PCR结果表明转染细胞的polβ表达较空载体转染细胞、对照细胞增加。转染前后细胞生长速度接近,转染细胞周期分布发生改变,多被阻滞在S期,在软琼脂实验中克隆形成率增加,对顺铂的敏感性降低。结论:成功建立了稳定高表达人野生型polβ的Ec9706细胞系,polβ的高表达与细胞的细胞周期分布、恶性增殖能力及耐药性有一定关系。 展开更多

关键词 DNA聚合酶beta 转染 细胞周期 食管癌细胞 四甲基偶氮唑蓝

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CD44^+CD24^-高表达的乳腺癌细胞系BICRH1对不同类型抗肿瘤药物敏感性研究

5

作者 焦园园 张艳华 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期1712-1715,共4页

目的考察乳腺癌细胞系BICRH1中乳腺癌干细胞表面标志物CD44+CD24-的表达及其药物敏感性。方法流式细胞及荧光共聚焦显微镜考察BICRH1中CD44+CD24-表达情况,MTT法考察BICRH1对不同类型抗肿瘤药物敏感性。结果乳腺癌细胞系BICRH1表面CD44+... 目的考察乳腺癌细胞系BICRH1中乳腺癌干细胞表面标志物CD44+CD24-的表达及其药物敏感性。方法流式细胞及荧光共聚焦显微镜考察BICRH1中CD44+CD24-表达情况,MTT法考察BICRH1对不同类型抗肿瘤药物敏感性。结果乳腺癌细胞系BICRH1表面CD44+CD24-表达比率在95%以上。MTT结果显示,5-氟尿嘧啶及顺铂在48h时对细胞生长无抑制作用,在72h时对细胞生长的IC50值均在50μmol.L-1以上;多柔比星在48h与72h时IC50值分别为3.4及1.3μmol.L-1;米托蒽醌在48h与72h时IC50值分别为4.7及2.6μmol.L-1;硼替佐米在48h与72h时IC50值均小于10nmol.L-1;曲妥珠单抗在48h与72h时对细胞生长均无抑制效应。结论 BICRH1是一株乳腺癌干细胞标志物CD44+CD24-高表达的细胞系,该细胞对抗代谢剂5-氟尿嘧啶、DNA交联剂顺铂及表皮生长因子受体Her-2靶向药物曲妥珠单抗均耐药,对蒽环类药物多柔比星及米托蒽醌中度敏感,对蛋白酶体抑制剂硼替佐米高度敏感,这些结果提示蒽环类可以用于乳腺癌干细胞的治疗,硼替佐米是乳腺癌干细胞靶向治疗中一个非常有潜力的药物。 展开更多

关键词 抗肿瘤药物 乳腺癌干细胞 CD44+CD24- 流式细胞术 荧光共聚焦显微镜 四氮唑蓝比色法

原文传递

荧光染色药敏法在急性白血病中的研究

6

作者 孔宪明 缪金明 +5 位作者 欧阳仁荣 肖家祁 丁建青 朱佑明 胡宝瑜 童善庆 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第8期435-438,共4页

目的：研究荧光染色药敏法在急性白血病中的应用。材料和方法：用新建立的荧光染色法及甲基噻唑基四唑染色（ＭＴＴ）法检测１５例初治及复发的急性白血病病例对７种常用化疗药物的体外敏感性。结果：荧光染色及ＭＴＴ法与体内疗效的阳... 目的：研究荧光染色药敏法在急性白血病中的应用。材料和方法：用新建立的荧光染色法及甲基噻唑基四唑染色（ＭＴＴ）法检测１５例初治及复发的急性白血病病例对７种常用化疗药物的体外敏感性。结果：荧光染色及ＭＴＴ法与体内疗效的阳性符合率分别为：１００％，８６％，阴性符合率分别为：６７％，６０％；特异性分别为１００％，７５％；敏感性分别为：７８％，７５％；准确率分别为８５％，６９％。结论：荧光染色法简便，快速，经济，敏感，较ＭＴＴ法具一定优越性，对指导急性白血病的个体化治疗有较高实用价值。 展开更多

关键词 急性白血症 荧光染色药敏法 药物疗法

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CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验结果的影响 被引量：7

7

作者 管莹 夭建华 +4 位作者 高茜 曾婉俐 黄海涛 李雪梅 缪明明 《化学与生物工程》 CAS 2012年第9期43-46,共4页

考察了CHO细胞初始接种密度对体外细胞毒性试验结果的影响。通过细胞倍增试验检测不同初始接种密度下CHO细胞倍增时间的差异,并分别采用中性红比色法及MTT比色法检测CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验结果的影响。结果表明,CHO细胞初... 考察了CHO细胞初始接种密度对体外细胞毒性试验结果的影响。通过细胞倍增试验检测不同初始接种密度下CHO细胞倍增时间的差异,并分别采用中性红比色法及MTT比色法检测CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验结果的影响。结果表明,CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验的结果存在一定影响:以2×104～6×104个·mL-1为细胞初始接种密度,CHO细胞在48h内生长速度较为稳定;以4×104～6×104个·mL-1为细胞初始接种密度,中性红比色法毒性试验结果较为稳定;以2×104～4×104个·mL-1为细胞初始接种密度,MTT比色法细胞毒性试验结果较为稳定。在不同的细胞毒性试验中选择适合的细胞初始接种密度有助于提高细胞毒性试验结果的可重复性。 展开更多

关键词 细胞初始接种密度 中性红比色法 mtt比色法 细胞毒性

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非小细胞肺癌体外化疗敏感试验影响因素的研究 被引量：4

8

作者 徐萌 李金瀚 《临床肿瘤学杂志》 CAS 1998年第1期8-11,共4页

目的:研究非小细胞肺癌对化疗药物原发敏感情况及药敏试验相关影响因素.方法:采用MTT比色法测定31例非小细胞肺癌标本对9种化疗药物的敏感性,每种药物设3个浓度等级,根据每种药物的抑制率进行分析.结果:31例肺癌标本对9种化疗药物的敏... 目的:研究非小细胞肺癌对化疗药物原发敏感情况及药敏试验相关影响因素.方法:采用MTT比色法测定31例非小细胞肺癌标本对9种化疗药物的敏感性,每种药物设3个浓度等级,根据每种药物的抑制率进行分析.结果:31例肺癌标本对9种化疗药物的敏感程度依次为:异长春花硷83.87%、长春新碱77.42%、丝裂霉素74.19%、阿霉素69.72%、卡铂69.72%、顺铂61.29%、足叶乙甙58.06%、氨甲喋呤22.58%、5-氟脲嘧啶19.35%;足叶乙甙和阿霉素对肺鳞癌抑制率明显高于肺腺癌;足叶乙甙和顺铂对低分化肺癌抑制率明显高于中高分化肺癌.结论:体外药敏试验受到多因素影响,药敏结果能够较好指导临床化疗. 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 足叶乙甙 化疗药物 体外化疗 阿霉素 敏感试验 顺铂 标本 抑制率 药敏结果

全文增补中

SRB法急性白血病体外药敏试验适用性研究 被引量：1

9

作者 金静君 魏一生 +1 位作者 何萍 龙瑞斌 《福建医药杂志》 CAS 1999年第4期84-85,共2页

目的探索最简便、准确、敏感可靠的化疗药物敏感性试验，以指导临床急性白血病个体化治疗的药物选择。方法用ＳＲＢ法肿瘤药敏试验检测白血病细胞株ＨＬ_６０及１２例急性白血病对六种化疗药物的敏感性。结果ＳＲＢ法检测ＨＬ_６０细胞... 目的探索最简便、准确、敏感可靠的化疗药物敏感性试验，以指导临床急性白血病个体化治疗的药物选择。方法用ＳＲＢ法肿瘤药敏试验检测白血病细胞株ＨＬ_６０及１２例急性白血病对六种化疗药物的敏感性。结果ＳＲＢ法检测ＨＬ_６０细胞对六种药物中的五种均敏感；１２例急性白血病患者ＳＲＢ法检测结果：体外敏感预测值（ＰＶ＋）为７５％，体外抗药预测值（ＰＶ－）为６６．６７％。结论ＳＲＢ法急性白血病体外药敏试验可用于临床白血病病人个体化治疗时选择敏感性高的药物。 展开更多

关键词 急性 白血病 药敏试验 SRB法 mtt法

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急性髓性白血病体外药敏、p170表达和细胞代谢的关系 被引量：3

10

作者 于秋菊 马兰 +2 位作者 郭翠艳 殷雨明 陈松 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期99-101,共3页

目的　了解急性髓性白血病 (AML)体外药敏实验、p170表达和细胞代谢的关系。 方法　用MTT法检测 2 7例AML患者体外药敏实验 ,同时检测其白血病细胞代谢和P170的表达 ,观察比较药敏结果、P170表达、细胞代谢之间及与临床化疗结果间的关... 目的　了解急性髓性白血病 (AML)体外药敏实验、p170表达和细胞代谢的关系。 方法　用MTT法检测 2 7例AML患者体外药敏实验 ,同时检测其白血病细胞代谢和P170的表达 ,观察比较药敏结果、P170表达、细胞代谢之间及与临床化疗结果间的关系。结果　体外药敏实验与临床治疗效果有相关性 ,二者的总符合率 81.9% ,阳性符合率 88.9% ,阴性符合率 6 6 .7%。细胞代谢与临床化疗疗效相关 ,细胞代谢高 ,对化疗反应好 ,缓解率高 ;细胞代谢与体外药敏实验和P170表达无相关性。P170表达与临床疗效相关 ,P170表达阳性组缓解率低于表达阴性组。结论　MTT体外药敏实验、P170表达和细胞代谢可以辅助提高临床判断耐药的准确性 ,可为临床选药提供依据。 展开更多

关键词 药物敏感性mtt检测 细胞代谢 多药耐药相关糖蛋白 急性髓性白血病

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急性髓系白血病患者体外药敏试验和多药耐药基因mdrl的表达及其临床意义 被引量：2

11

作者 张锑 张春青 +3 位作者 纪春岩 刘传方 乔颖 徐从高 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期259-262,共4页

多药耐药(MDR)是急性白血病化疗成功的主要障碍之一,其机理涉及诸多因素。建立能够体外准确预测化疗药物敏感性试验方法,在指导急性白血病治疗中具有重要意义。本文研究了42例急性白血病患者体外药敏检测(MTT法)和白血病细胞P-gp)抗原... 多药耐药(MDR)是急性白血病化疗成功的主要障碍之一,其机理涉及诸多因素。建立能够体外准确预测化疗药物敏感性试验方法,在指导急性白血病治疗中具有重要意义。本文研究了42例急性白血病患者体外药敏检测(MTT法)和白血病细胞P-gp)抗原的表达与白血病化疗疗效的关系。结果显示:药敏试验与治疗疗效有相关性,临床总符合率82.9%,阳性符合率78.9％,阴性符合率86.9％。认为P-gp的表达是一个有效的化疗耐药指标,白血病缓解病人P-gp阳性率高于初诊病人,P-gp阳性表达的患者完全缓解率明显低于P-gp阴性患者。 展开更多

关键词 药物敏感试验 mtt检测 多药耐药 多药耐药基因 MDRL基因 急性髓系白血病 P-gp抗原

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白血病细胞体外药敏试验的临床意义及其与m dr1表达关系的探讨 被引量：1

12

作者 韩晓凤 王燕婷 +4 位作者 韩洁英 陈芳源 缪金明 邵念贤 欧阳仁荣 《白血病》 1999年第6期326-329,共4页

目的　探讨白血病细胞体外药敏试验的临床意义及从敏感性和耐药性两个不同侧面，研究两者内在联系。方法　采用ＭＴＴ法对２７例急性白血病患者的白血病细胞进行了Ａｒａ－Ｃ、ＤＮＲ、Ｈａｒ、ＭＩＴ、ＶＰ１６、ＶＭ２６、ＶＣＲ及Ｈ... 目的　探讨白血病细胞体外药敏试验的临床意义及从敏感性和耐药性两个不同侧面，研究两者内在联系。方法　采用ＭＴＴ法对２７例急性白血病患者的白血病细胞进行了Ａｒａ－Ｃ、ＤＮＲ、Ｈａｒ、ＭＩＴ、ＶＰ１６、ＶＭ２６、ＶＣＲ及ＨＣ等８ 种常用化疗药物的体外敏感试验以及用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测了２２ 例患者多药耐药基因ｍ ｄｒ１ 的表达情况。结果　回顾性研究显示ＭＴＴ法体外药敏试验结果与临床疗效的总符合率为７７．３％ ，阳性符合率６１．５％ ，阴性符合率１００％ ，灵敏度１００％ ，特异度６４．３％ 。结论　ＭＴＴ法有一定的临床预测价值，是辅助临床用药选择的实验检测。ＭＤＲ相关药物ＤＮＲ、Ｈａｒ、ＭＩＴ、ＶＰ１６ 及ＶＭ２６ 体外药敏结果与ｍ ｄｒ１ 表达水平无相关性，提示可能存在其它的耐药机制。 展开更多

关键词 药敏试验 mttI地 多药耐药基因 白血病

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ATP生物发光法与MTT法检测卵巢癌体外化疗敏感性的比较 被引量：1

13

作者 韩国荣 唐引荣 +2 位作者 张林 方之勋 周芝芬 《铁道医学》 1999年第4期224-226,共3页

目的比较ATh法与MTT（四唑蓝）法对卵巢癌细胞体外化疗敏感性的预测价值。方法分别以ATP法和MTF法检测5种化疗药物对卵巢癌3AO细胞株的抑制作用。结果（1）ATP法与MTT法相关性良好（r＝0．9031）。（2）ATP法更加灵敏、稳定。ATP法在80... 目的比较ATh法与MTT（四唑蓝）法对卵巢癌细胞体外化疗敏感性的预测价值。方法分别以ATP法和MTF法检测5种化疗药物对卵巢癌3AO细胞株的抑制作用。结果（1）ATP法与MTT法相关性良好（r＝0．9031）。（2）ATP法更加灵敏、稳定。ATP法在80个细胞时即可测出发光强度的改变；而MTT法细胞数达300时才能测出OD值变化。试验所需细胞浓度，ATP法与MTT法分别为1×104－5×104个／ml和1×106-5×106个／ml，ATP法比MTT法低得多。结论ATP法作为检测卵巢癌细胞体外化疗敏感性的手段优于MTT法。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 化疗敏感性 ATP生物发光 四唑蓝比色法

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