茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血的保护作用 被引量：26

1

作者 王继生 邱宗荫 +3 位作者 夏永鹏 李惠芝 任凌燕 张莉 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期138-141,共4页

目的:研究茅莓总皂苷(TGRP)对局灶性脑缺血的保护作用。方法:采用大脑中动脉阻塞(MACO)法制备大鼠局灶性脑缺血模型;脑梗死区重量用TTC染色法测定,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及细胞凋亡均采用测试... 目的:研究茅莓总皂苷(TGRP)对局灶性脑缺血的保护作用。方法:采用大脑中动脉阻塞(MACO)法制备大鼠局灶性脑缺血模型;脑梗死区重量用TTC染色法测定,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及细胞凋亡均采用测试药盒测定。结果:TGRP 10,20 mg.kg-1可改善大鼠异常神经症状,使MACO大鼠的SOD,GSH-Px活力提高,MDA生成减少,减少脑皮层细胞凋亡数。结论:TGRP对脑梗死有保护作用,其作用机制可能与抗自由基、抑制细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 茅莓总皂苷 大脑中动脉阻塞 超氧化物歧化酶 丙二醛 谷胱甘肽过氧化物酶 凋亡

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一氧化氮合酶、p38MAPK、Caspase-3介导缺氧神经细胞凋亡机制的研究 被引量：21

2

作者 陈春美 杨卫忠 +3 位作者 王春华 石松生 蓝佛琳 涂献坤 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期213-215,共3页

目的探讨缺氧引起PC12细胞凋亡和NOS、p38MAPK和Caspase-3在缺氧后神经细胞凋亡中的共同作用机制。方法应用噻唑蓝（MTT）法测定缺氧对PC12细胞的生长抑制率，荧光显微镜观察缺氧对PC12细胞损伤，比色法测定PC12细胞在缺氧环境下乳酸脱... 目的探讨缺氧引起PC12细胞凋亡和NOS、p38MAPK和Caspase-3在缺氧后神经细胞凋亡中的共同作用机制。方法应用噻唑蓝（MTT）法测定缺氧对PC12细胞的生长抑制率，荧光显微镜观察缺氧对PC12细胞损伤，比色法测定PC12细胞在缺氧环境下乳酸脱氢酶（LDH）活性，流式细胞术（FCM）检测缺氧PC12细胞NT阳性细胞百分比，以及细胞周期改变和细胞凋亡率，RT-PCR半定量分析nNOS、iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA的表达。结果MTT法测定缺氧抑制PC12细胞生长趋势；AO荧光染色缺氧24h时PC12细胞可见凋亡小体；缺氧时间延长，LDH渗出量增多，NT阳性细胞百分比增大，S期细胞增多，细胞凋亡率升高，缺氧24h调亡率达到45．67％；PCR结果分析显示nNOS mRNA在缺氧早期表达，iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA主要在缺氧晚期表达。结论缺氧能够引起PC12细胞凋亡现象，nNOS、iNOS分别在缺氧早期和晚期发挥神经毒性作用，NOS，p38MAPK和Caspase-3三种基因共同介导缺氧后PC12细胞凋亡。 展开更多

关键词 缺氧 脱噬作用 P38MAPK CASPASE-3

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龟鹿二仙胶汤含药血清对体外软骨细胞表型BMSCs凋亡的影响 被引量：9

3

作者 李文顺 李楠 +8 位作者 王和鸣 李西海 詹红生 石印玉 汤亭亭 戴克戎 李月平 王永强 张林 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2009年第1期5-7,共3页

目的:观察龟鹿二仙胶汤含药血清干预软骨细胞表型化骨髓质基质干细胞(BMSCs)凋亡的影响。方法:抽取兔骨髓液,经体外分离、纯化、培养获得免BMSCs,将龟鹿二仙胶汤含药血清诱导出的软骨细胞表型化BMSCs,用IL-1β诱导凋亡,分别于24h、48h、... 目的:观察龟鹿二仙胶汤含药血清干预软骨细胞表型化骨髓质基质干细胞(BMSCs)凋亡的影响。方法:抽取兔骨髓液,经体外分离、纯化、培养获得免BMSCs,将龟鹿二仙胶汤含药血清诱导出的软骨细胞表型化BMSCs,用IL-1β诱导凋亡,分别于24h、48h、72h后,采用透射电子显微镜、免疫荧光组织化学、流式细胞仪等实验技术,研究龟鹿二仙胶汤对软骨表型化BMSCs凋亡的影响。结果:龟鹿二仙胶汤能减少软骨表型化BMSCs凋亡的数量及程度,降低细胞凋亡率。结论:龟鹿二仙胶汤可以明显抑制或逆转软骨表型化BMSCs凋亡,能显著延缓软骨表型化BMSCs的凋亡。 展开更多

关键词 BMSCS TGF-Β3 诱导分化 龟鹿二仙胶汤 IL-1β 凋亡

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同型半胱氨酸对海马神经元细胞HT22的毒性作用及其机制的探讨 被引量：7

4

作者 刘军 肖颂华 +1 位作者 刘中霖 吕瑞妍 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期670-673,共4页

目的探讨同型半胱氨酸对海马神经元细胞系HT22细胞的毒性作用及其可能的相关机制。方法使用不同浓度的同型半胱氨酸（0、0．5、1．0、1．5、2．0、2．5mmol／L）作用于分化培养后的HT22细胞，采用MTS分析检测细胞活力的变化，并同时使... 目的探讨同型半胱氨酸对海马神经元细胞系HT22细胞的毒性作用及其可能的相关机制。方法使用不同浓度的同型半胱氨酸（0、0．5、1．0、1．5、2．0、2．5mmol／L）作用于分化培养后的HT22细胞，采用MTS分析检测细胞活力的变化，并同时使用N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂MK801和美金刚进行干预处理，进一步检测其对细胞活力的影响：使用Hoechst33342和PI染色观察细胞死亡的形态学变化。结果同型半胱氨酸对分化培养后的HT22细胞具有剂量反应关系的毒性作用，半数有效浓度约在1．25mmol／L。Hoechst33342和PI染色结果显示低浓度同型半胱氨酸（1．0mmol／L）主要引起细胞凋亡，而随着同型半胱氨酸浓度的增加（2．0mmol／L），细胞则主要以坏死的形式存在。NMDA受体拮抗剂MK801和美金刚可有效的抑制同型半胱氨酸的神经细胞毒性，分别在10μmol／L浓度时显示最为明显的抑制作用，同单纯同型半胱氨酸作用组相比差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论同型半胱氨酸对海马神经元细胞系HT22细胞具有明显的毒性作用，主要导致细胞的凋亡和坏死；其产生的神经毒性在很大程度上是通过激活NMDA受体起作用的。对于同型半胱氨酸-NMDA受体之间的作用的进一步研究将会提供神经元坏死的一个重要的研究方向。 展开更多

关键词 同型半胱氨酸 HT22细胞 细胞凋亡 N-甲基-D-天冬氨酸受体

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一氧化氮合酶反义RNA重组腺相关病毒载体体内抑制脑缺血神经细胞凋亡的研究 被引量：6

5

作者 石松生 杨卫忠 +5 位作者 陈春美 王春华 易海波 陈晓斌 蔡冬生 杨意堃 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期471-473,共3页

目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS）在脑缺血时抑制神经细胞凋亡的作用机制。方法运用MACO法建立脑缺血模型，闭塞1h后分别经右侧... 目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS）在脑缺血时抑制神经细胞凋亡的作用机制。方法运用MACO法建立脑缺血模型，闭塞1h后分别经右侧颈内动脉缓慢注入重组病毒载体（rAAV-AsnNOS、rAAV-AsiNOS和rAAV-LaeZ），继续闭塞大脑中动脉，每只转染病毒滴度为1×10^10个病毒颗粒／ml，并于分别缺血早期（缺血5h）和缺血晚期（缺血25h）时处死模型，流式细胞术（FCM）检测硝基酪氨酸（NT）阳性细胞百分比和细胞凋亡率，逆转录反应系统（RT-PCR）分析nNOS、iNOS，p38MAPK，Caspase-3 mRNA的表达。结果在脑缺血早期，rAAV-AsnNOS组的NT阳性百分比、凋亡率以及nNOS、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组的低均降低，差异有统计学意义；在脑缺血晚期，rAAV-AsiNOS组的NT阳性百分率、凋亡率以及nNOS、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组低，差异有统计学意义。结论在体内缺血动物模型中，rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS重组病毒载体能够分别在缺血早期和晚期通过抑制NOS表达，从而抑制p38MAPK和Caspase-3基因的表达，抑制缺血后神经细胞凋亡的发生。 展开更多

关键词 脑缺血 一氧化氮合酶 脱噬作用 重组腺相关病毒载体 反义寡核苷酸类

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BAG-1蛋白及其在多种肿瘤中表达的临床意义研究进展 被引量：2

6

作者 曲莉莉 刘晓晴 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2006年第5期480-483,共4页

BAG-1基因(Bc l-2-assoc iated athanogene 1)系抗凋亡基因,其蛋白为一种多功能结合蛋白,可与Bc l-2蛋白、热休克蛋白Hsp70和Hsc70、类固醇激素受体等多种信号因子相互作用,发挥调节细胞增殖、抑制细胞凋亡等重要功能。BAG-1在多种肿瘤... BAG-1基因(Bc l-2-assoc iated athanogene 1)系抗凋亡基因,其蛋白为一种多功能结合蛋白,可与Bc l-2蛋白、热休克蛋白Hsp70和Hsc70、类固醇激素受体等多种信号因子相互作用,发挥调节细胞增殖、抑制细胞凋亡等重要功能。BAG-1在多种肿瘤(如乳腺癌、结直肠癌、肺癌等)中均有不同程度表达,且表达意义不尽相同,可作为肿瘤早期诊断、预后判断及指导治疗的生物学指标之一。本文综述了BAG-1蛋白及其在多种肿瘤中表达的研究进展。 展开更多

关键词 BAG-1 肿瘤 细胞凋亡

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一氧化氮合酶反义RNA重组腺相关病毒载体体外提高PC12细胞耐缺氧的能力 被引量：1

7

作者 杨卫忠 陈春美 +4 位作者 王春华 石松生 黄勇 宋施委 王锐 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期731-733,共3页

目的探讨2种分别携带神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iN- OS)反义RNA重组腺相关病毒载体(rAAV-/mnNOS和rAAV-AsiNOS)提高PC12细胞耐氧能力和抑制PC12细胞凋亡的作用机制。方法将PC12细胞培养基换成分别含有rAAV-AsnNOS... 目的探讨2种分别携带神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iN- OS)反义RNA重组腺相关病毒载体(rAAV-/mnNOS和rAAV-AsiNOS)提高PC12细胞耐氧能力和抑制PC12细胞凋亡的作用机制。方法将PC12细胞培养基换成分别含有rAAV-AsnNOS、rAAV-Asi- NOS和rAAV-LacZ(携带β-半乳糖苷酶的结构基因重组腺相关病毒载体)的10%胎牛血清DMEM,设立对照组,测定不同rAAV转染后PC12细胞在不同缺氧时间下细胞生长趋势和乳酸脱氢酶(LDH)活性改变,流式细胞仪(FCM)测定细胞凋亡率,FCM和半定量RT-PCR分别分析nNOS、iN- OS、p38MAPK和Caspase-3阳性细胞百分比和mRNA的表达。结果一定感染复数的rAAV对PC12细胞生长趋势无明显影响;转染rAAV-AsnNOS的PC12细胞在缺氧1～6 h时LDH活性、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3阳性细胞百分比和mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组均降低;转染rAAV-AsiNOS的PC12细胞在缺氧6～24h时LDH活性、细胞凋亡率以及iNOS、p38MAPK和Caspase-3阳性细胞百分比和mRNA表达量也均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsnNOS组降低。结论在体外神经细胞缺氧模型中,转染后PC12细胞能够耐受缺氧损伤;转染rAAV-AsnNOS病毒载体的PC12细胞能够在缺氧早期抑制nNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达,转染rAAV-AsiNOS病毒载体的PC12细胞能够在缺氧晚期抑制iNOS、p38MAPK和Caspase- 3的表达。 展开更多

关键词 缺氧 一氧化氮合酶 脱噬作用 重组腺相关病毒载体

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黄连素对脑缺血再灌注后细胞cyclinD1、CDK4表达的影响 被引量：1

8

作者 游哲斌 张洁 +3 位作者 张德贤 袁作辉 徐福强 车永哲 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2008年第8期788-792,共5页

目的探讨黄连素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织CDK4和cyclin D1表达的调节以及黄连素可能的脑保护作用机制。方法50只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为给药组（n=15）、正常组（n=5）、假手术组（n=15）和模型组（n=15）。用线栓... 目的探讨黄连素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织CDK4和cyclin D1表达的调节以及黄连素可能的脑保护作用机制。方法50只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为给药组（n=15）、正常组（n=5）、假手术组（n=15）和模型组（n=15）。用线栓法建立局灶性脑缺血模型，缺血1h后再灌注1d，3d，5d，用HE染色观察缺血再灌注后脑组织的形态学变化，免疫组化方法检测缺血中心区和半暗带Bcl-2、cyclin D1和CDK4的表达。结果HE染色显示给药组3d和5d动物脑组织半暗带神经元数目丢失少于模型组。免疫组化表明给药组1d与模型组比较Bcl-2免疫阳性细胞数没有明显区别，给药组3d和5d与模型组比较，半暗带Bcl-2免疫阳性细胞增加．差异有统计学意义（P〈0．05），但cyclinD1与CDK4免疫阳性细胞减少。结论大鼠局灶性脑缺血时，黄连素抑制半暗带神经元细胞周期蛋白cyclinD1与CDK4的表达．表明黄连素可能具有一定的神经保护作用。其可能机制为通过抑制cyclinD1的表达，并阻止其从细胞质转入细胞核内．从而阻断级联反应．抵抗cyclinD1介导的细胞凋亡。 展开更多

关键词 黄连素 CYCLIN D1 局灶性脑缺血 CDK4 细胞凋亡

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抗肿瘤药物纳米胶束制剂对人肝癌干细胞作用的研究

9

作者 肖丽丽 梁暖 徐晖 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2016年第5期434-436,共3页

目的探讨抗肿瘤药物纳米胶束对肝癌干细胞的作用。方法培养Hep G2人肝癌细胞株,利用OCT-4的抗体对所获细胞样品进行免疫分拣,逆转录PCR检测OCT-4 mRNA水平,确认所培养的细胞高表达OCT-4,获得高表达OCT-4的肝癌干细胞。制备表阿霉素纳米... 目的探讨抗肿瘤药物纳米胶束对肝癌干细胞的作用。方法培养Hep G2人肝癌细胞株,利用OCT-4的抗体对所获细胞样品进行免疫分拣,逆转录PCR检测OCT-4 mRNA水平,确认所培养的细胞高表达OCT-4,获得高表达OCT-4的肝癌干细胞。制备表阿霉素纳米胶束。实验分组为表阿霉素组、表阿霉素纳米胶束组及空白对照组。用药后采用原位末端标记法检测肿瘤组织细胞凋亡;利用免疫组化检测核增殖抗原(PCNA)的表达。结果获得了高表达OCT-4的肝癌干细胞株;制备表阿霉素纳米胶束,分散性好。表阿霉素纳米胶束组能诱导细胞凋亡,与未用药对照组及表阿霉素组相比均差异显著(P<0.05);表阿霉素纳米胶束组能抑制癌细胞增值,降低PCNA的表达,与未用药对照组、表阿霉素组相比均差异有统计学意义(P<0.05)。结论表阿霉素纳米胶束能诱导细胞凋亡,并能降低PCNA的表达。 展开更多

关键词 肝癌干细胞 表阿霉素 纳米胶束 PCNA 凋亡

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纳米胶束对高表达CD44的肝癌干细胞作用的实验研究

10

作者 陈志奇 梁暖 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2015年第6期494-497,共4页

目的探讨抗肿瘤药物纳米胶束对肝癌干细胞及移植瘤的作用。方法培养Hep G2人肝癌细胞株,利用CD44的抗体对所获细胞样品进行免疫分拣,逆转录PCR检测CD44 mRNA水平。肝癌干细胞接种于Balb/c裸小鼠脾脏,建立人肝癌移植瘤模型。制备表阿霉... 目的探讨抗肿瘤药物纳米胶束对肝癌干细胞及移植瘤的作用。方法培养Hep G2人肝癌细胞株,利用CD44的抗体对所获细胞样品进行免疫分拣,逆转录PCR检测CD44 mRNA水平。肝癌干细胞接种于Balb/c裸小鼠脾脏,建立人肝癌移植瘤模型。制备表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束。小鼠随机分为表阿霉素组、三氧化二砷组、表阿霉素纳米胶束组、三氧化二砷纳米胶束组及空白对照组(n=13)。用药后采用原位末端标记法检测肿瘤组织细胞凋亡;利用免疫组化观察移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,观察各组裸鼠移植瘤体积变化及抑瘤率。结果表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束组细胞凋亡增加,与未用药对照组及表阿霉素及三氧化二砷组相比均差异显著(P<0.05);表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束组传代移植瘤肿瘤新生血管生成减少,VEGF表达降低,与未用药对照组、表阿霉素及三氧化二砷组相比均差异有统计学意义(P<0.05)。表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束组移植瘤瘤体体积减小,抑瘤率升高。结论表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束能诱导细胞凋亡,降低VEGF的表达,缩小肿瘤体积、增加抑瘤率。 展开更多

关键词 肝癌干细胞 表阿霉素 纳米胶束 VEGF 三氧化二砷 凋亡

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氯化甲基汞对大鼠脑神经细胞凋亡及P^(53)基因表达的影响 被引量：10

11

作者 许传杰 李志超 +3 位作者 毕晓颖 董丽波 王立馨 张红宇 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期285-286,共2页

选用Ｗｉｓｔａｒ系雄性大鼠，经皮下注射给予１０ｍｇ／Ｋｇ体重氯化甲基汞（ＣＨ３ＨｇＣｌ），连续７天，第１５天取其脑组织，利用细胞和分子生物学技术进行ＤＮＡ电泳和流式细胞术（ＦＣＭ）分析。实验结果，染毒组大鼠脑组织ＤＮ... 选用Ｗｉｓｔａｒ系雄性大鼠，经皮下注射给予１０ｍｇ／Ｋｇ体重氯化甲基汞（ＣＨ３ＨｇＣｌ），连续７天，第１５天取其脑组织，利用细胞和分子生物学技术进行ＤＮＡ电泳和流式细胞术（ＦＣＭ）分析。实验结果，染毒组大鼠脑组织ＤＮＡ电泳呈现特征性梯形电泳带；ＦＣＭ分析染毒组大鼠脑神经细胞的凋亡率、Ｐ５３基因表达率显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结果表明：ＣＨ３ＨｇＣｌ以诱导凋亡方式导致脑神经细胞损伤，Ｐ５３基因参与ＣＨ３ＨｇＣｌ诱导脑神经细胞凋亡的基因调控过程。 展开更多

关键词 氯化甲基汞 神经细胞 细胞凋亡 P^53基因

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人参皂苷Rh2对人急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞诱导凋亡的作用及其机制 被引量：8

12

作者 聂柳 彭罕鸣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1111-1117,共7页

目的:探讨人参皂苷Rh2诱导人急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)Jurkat细胞的凋亡及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的Rh2(0、10、20、40和80μg/ml)对Jurkat细胞增殖活性的影响,并计... 目的:探讨人参皂苷Rh2诱导人急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)Jurkat细胞的凋亡及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的Rh2(0、10、20、40和80μg/ml)对Jurkat细胞增殖活性的影响,并计算48h下Rh2对Jurkat细胞的半抑制浓度(IC50);采用形态学方法及Hoechst33258荧光染色观察IC50剂量下Rh2共培养48h的Jurkat细胞凋亡状况。后将细胞实验分为4组:对照组、Rh2(IC50)组、PI3K抑制剂LY294002(50μmol/l)组以及Rh2(IC50)+LY294002(50μmol/l)组。同步培养48h后,采用PI单染和AnnexinV-FITC/PI双染分别检测Jurkat细胞凋亡及细胞周期变化;采用Western blot检测各组Jurkat细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Cleaved-Caspase3,细胞周期相关蛋白CyclinD1以及PI3K/AKT信号通路相关蛋白AKT、p-AKT的表达水平。结果:Rh2(10-80μg/ml)呈剂量-时间依赖性抑制Jurkat细胞增殖(r48h=0.999,P<0.01;r80μg/ml=0.991,P>0.05),并伴有明显的细胞凋亡形态学改变。流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,Rh2组和LY294002组细胞凋亡率显著增加,且细胞多数被阻滞在G0/G1期;而与Rh2组和LY294002组比较,Rh2+LY294002组细胞凋亡及细胞阻滞现象更为显著。Western blot结果显示,与对照组比较,Rh2能显著促进BAX、Cleaved-Caspase3蛋白表达,抑制BCL-2、CyclinD1及p-AKT的表达,且LY294002对这一效应具有显著的促进作用。结论:Rh2能够呈时间-剂量依赖性地诱导Jurkat细胞的凋亡;且能对Jurkat细胞产生明显的G0/G1期阻滞;这可能与Rh2抑制PI3K/AKT通路进而介导的一系列凋亡信号级联反应密切相关。 展开更多

关键词 人参皂苷RH2 急性T淋巴细胞白血病 细泡凋亡 PI3K/AKT通路

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NOS反义RNA重组腺相关病毒载体体内提高脑细胞耐缺血能力的实验研究 被引量：2

13

作者 杨卫忠 陈春美 +4 位作者 王春华 石松生 陈建屏 黄勇 蔡冬生 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期291-295,共5页

目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV—AsnNOS和rAAV-AsiNOS）提高脑细胞耐受缺血能力的作用机制。方法应用立体定位技术将预处理好的病毒载体转染至将要梗... 目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV—AsnNOS和rAAV-AsiNOS）提高脑细胞耐受缺血能力的作用机制。方法应用立体定位技术将预处理好的病毒载体转染至将要梗死侧的基底节区，转染病毒滴度为2×10^9mL～，并将SD大鼠分为4组：即rAAV-AsnNOS组，rAAV-AsiNOS组，rAAV—LacZ组和对照组；处理后运用MACO建立缺血模型，每组分为缺血早期和缺血晚期，流式细胞术（FCM）检测NT阳性细胞百分比和细胞凋亡率，逆转录反应系统（RT-PCR）分析nNOS、iNOS，p38MAPK，Caspase-3 mRNA的表达。结果一定剂量的重组病毒载体转染到大鼠海马区域，无神经损伤症状；转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血早期（缺血1～6h），NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV—AsiNOS组降低；转染rAAV—AsiNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血晚期（缺血24—72h），NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsnNOS组降低，差异有统计学意义。结论转染重组病毒载体后动物模型脑神经细胞能够耐受缺血损伤，转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血早期抑制nNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达，转染rAAV—AsiNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血晚期抑制iNOS、038MAPK和Caspase-3的表达，从而在缺血后抑制神经细胞凋亡的发生。 展开更多

关键词 脑缺血 一氧化氮合酶 凋亡 重组腺相关病毒载体

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金纳多对遗传性视网膜色素变性的治疗作用

14

作者 何俊萍 《中国临床实用医学》 2010年第4期96-97,共2页

目的观察抗凋亡剂金纳多（EGb761）对视网膜色素变性的RCS大鼠的作用，探讨其对视网膜变性神经元保护的可能机制。方法在RCS大鼠出生后腹腔内注射EGb761，从感光细胞开始凋亡时观察EGb761对神经元的保护作用，并探讨EGb761的作用机制。... 目的观察抗凋亡剂金纳多（EGb761）对视网膜色素变性的RCS大鼠的作用，探讨其对视网膜变性神经元保护的可能机制。方法在RCS大鼠出生后腹腔内注射EGb761，从感光细胞开始凋亡时观察EGb761对神经元的保护作用，并探讨EGb761的作用机制。结果在RCS大鼠视网膜变性的早期，EGb761对神经元起保护作用，可以使感光细胞得到更多存留。EGb761是通过抑制FasL的表达，减少神经元细胞凋亡，对视网膜变性有保护作用。结论EGB761能抑制感光细胞早期神经元的凋亡，可作为治疗遗传性视网膜色素变性的一种理想药物。 展开更多

关键词 RCS大鼠 视网膜色素变性 金纳多 凋亡 FASL蛋白 BCL-2蛋白

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运动对心肌细胞中凋亡调控基因的影响 被引量：3

15

作者 董昆 王大鹏 《燕山大学学报》 CAS 2005年第6期552-556,共5页

研究运动对心肌细胞中调控基因Bcl-2、Bax和p53的影响以探讨凋亡调控基因对运动引起心肌细胞凋亡的作用。以大鼠中等运动强度训练、一次性力竭运动和过度训练为运动模型,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术观察了大鼠心肌细胞中调控... 研究运动对心肌细胞中调控基因Bcl-2、Bax和p53的影响以探讨凋亡调控基因对运动引起心肌细胞凋亡的作用。以大鼠中等运动强度训练、一次性力竭运动和过度训练为运动模型,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术观察了大鼠心肌细胞中调控基因Bcl-2、Bax和p53mRNA的表达。长期中等强度的运动可造成大鼠心肌细胞中凋亡调控基因Bcl-2mRNA表达明显增加,可抑制心肌细胞凋亡;而力竭运动和过度训练可引起心肌细胞中Bcl-2mRNA表达下降和调控基因Bax、p53mRNA表达显著升高以及凋亡调控基因Bcl-2/Bax比值显著下降,可促进心肌细胞凋亡。心肌细胞中凋亡调控基因Bcl-2、Bax和p53在不同运动后的不同表达对心肌细胞凋亡的发生有明显的调控作用。 展开更多

关键词 运动 心肌 凋亡调控基因

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自噬在巨噬细胞清除凋亡淋巴细胞中的作用 被引量：7

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作者 何韬 谭玉珍 王海杰 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期514-518,共5页

目的研究巨噬细胞吞噬凋亡淋巴细胞后自噬结构的形态学特征,探讨自噬对巨噬细胞清除凋亡细胞的作用。方法用环磷酰胺诱导淋巴细胞凋亡。在扫描电子显微镜下观察巨噬细胞吞噬凋亡细胞的形态学变化,透射电镜下观察巨噬细胞内的自噬前体、... 目的研究巨噬细胞吞噬凋亡淋巴细胞后自噬结构的形态学特征,探讨自噬对巨噬细胞清除凋亡细胞的作用。方法用环磷酰胺诱导淋巴细胞凋亡。在扫描电子显微镜下观察巨噬细胞吞噬凋亡细胞的形态学变化,透射电镜下观察巨噬细胞内的自噬前体、自噬体和自噬溶酶体的结构特点,用图像分析仪测量自噬结构的断面面积。以单丹磺酰尸胺(MDC)染色法标记巨噬细胞的自噬体,在激光扫描共焦显微镜下观察和定量分析。结果巨噬细胞活跃地吞噬凋亡淋巴细胞、凋亡细胞核、凋亡小体或其他细胞碎片,形成异噬体。与对照组比较,吞噬凋亡细胞组的自噬细胞及其自噬体数目增多,自噬前体、自噬体和自噬溶酶体与细胞质的断面面积之比增大。许多自噬体内可见凋亡小体或其他细胞碎片,这些自噬体的体积较大,多位于细胞膜下。未观察到含有整个凋亡细胞或凋亡细胞核的自噬体。结论巨噬细胞清除凋亡淋巴细胞时自噬功能显著增强。自噬对于凋亡淋巴细胞的清除起着重要的直接和间接作用。 展开更多

关键词 巨噬细胞 淋巴细胞 凋亡细胞 异噬 自噬 激光扫描共焦显微镜

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血必净对活化诱导T细胞凋亡的调节 被引量：3

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作者 常文秀 曹书华 +1 位作者 高红梅 王勇强 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期965-970,共6页

目的观察活化诱导对脾脏T淋巴细胞凋亡、凋亡相关基因mRNA表达及caspase3活性的影响，以及活血化瘀中药的调节作用。方法提取BALB／c小鼠脾脏T淋巴细胞并培养，以ConA＋IL-2诱导T细胞活化凋亡，MTT法检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测... 目的观察活化诱导对脾脏T淋巴细胞凋亡、凋亡相关基因mRNA表达及caspase3活性的影响，以及活血化瘀中药的调节作用。方法提取BALB／c小鼠脾脏T淋巴细胞并培养，以ConA＋IL-2诱导T细胞活化凋亡，MTT法检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞凋亡率，RT—PCR检测Fas、FasL、Bcl-2、Bax、IL-2mRNA表达水平，分光光度法测定caspase3酶活性，并观察活血化瘀中药对上述各项指标的影响。结果活化T淋巴细胞于诱导18h后凋亡率明显增加，于诱导6h时未见FasL、Bax mRNA表达，Fas、Bcl-2 mRNA表达无明显变化；于诱导18h后Fas、FasL、Bax mRNA表达升高，Bcl-2 mRNA表达下降，caspase3活性增高。活血化瘀中药可降低T细胞凋亡，并可分别降低Fas、FasL、Bax mRNA表达，提高Bcl-2mRNA表达，减轻caspase3酶活性。在活化诱导早期（6h）促进T淋巴细胞内IL-2mRNA表达，在晚期（18h）减少IL-2mRNA表达。结论过度活化是脾脏T淋巴细胞异常凋亡的诱发因素，而凋亡的发生与Fas、FasL、Bax、Bcl-2mRNA表达的改变有关。活血化瘀中药可通过调节IL-2及凋亡相关基因mRNA表达而减轻脾脏T淋巴细胞凋亡，同时可以促进T淋巴细胞的增殖活性。 展开更多

关键词 活化诱导 T淋巴细胞 凋亡相关基因

原文传递

功能失调性子宫出血和细胞凋亡与bcl-2及bax基因表达的关系 被引量：1

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作者 王娟 胡双九 《黑龙江医学》 2007年第10期724-726,共3页

目的研究功能失调性子宫出血与细胞凋亡及其相关基因表达产物的关系。方法应用TUNEL技术检测30例正常月经周期的增生期子宫内膜,28例简单增生,2例复杂增生子宫内膜标本的凋亡指数(AI)。应用免疫组化方法检测bcl-2及bax基因在子宫内膜的... 目的研究功能失调性子宫出血与细胞凋亡及其相关基因表达产物的关系。方法应用TUNEL技术检测30例正常月经周期的增生期子宫内膜,28例简单增生,2例复杂增生子宫内膜标本的凋亡指数(AI)。应用免疫组化方法检测bcl-2及bax基因在子宫内膜的表达。结果简单增生和复杂增生子宫内膜AI比正常增生期AI高(P<0.05);bcl-2基因在正常增生期表达比在简单增生和复杂增生表达略高,差异无显著性(P>0.05);bax基因在简单增生和复杂增生表达比在正常增生期表达高(P<0.05)。结论功能失调性子宫出血的发病与细胞凋亡有关,且与bcl-2,bax表达相关。 展开更多

关键词 功能失调性子宫出血 细胞凋亡 凋亡指数 基因表达

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坐骨神经震荡伤后腰髓一氧化氮及凋亡相关蛋白表达的变化 被引量：2

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作者 王贵波 李兵仓 +3 位作者 王建民 黄宏 许川 陈蕾 《中国临床康复》 CSCD 2003年第26期3570-3571,共2页

目的:探讨坐骨神经高速弹丸震荡伤后腰段脊髓一氧化氮(carbonmonoxide,NO)含量和一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)活性及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化及在细胞凋亡发生中的作用。方法:65只大耳白兔分为正常对照、高速弹丸震... 目的:探讨坐骨神经高速弹丸震荡伤后腰段脊髓一氧化氮(carbonmonoxide,NO)含量和一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)活性及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化及在细胞凋亡发生中的作用。方法:65只大耳白兔分为正常对照、高速弹丸震荡伤组(震荡伤组)和切割伤组。震荡伤组致伤靶点为兔右大腿外侧坐骨神经体表投影线中点,切割伤组在同一致伤水平切断坐骨神经。行腰段脊髓细胞凋亡定性定量检测、Bcl-2和Bax表达半定量分析、脊髓NO含量和NOS活性检测。结果:震荡伤组伤后1,2周可见脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)阳性运动神经元和胶质细胞,伤后3d,1,2周脊髓NO含量和NOS活性升高;伤后1dBcl-2高表达,伤后3dBax高表达。结论:震荡伤组细胞凋亡发生早、数量多,NO和NOS及Bcl-2、Bax表达变化与其发生有一定关系。 展开更多

关键词 坐骨神经震荡伤 一氧化氮 一氧化氮合酶 Bcl-2 BAX 蛋白表达

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松口蘑糖蛋白联合5-Fu体外对人肝癌细胞Bel-7402的影响及作用机理初探 被引量：2

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作者 魏元青 陶文沂 许泓瑜 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期60-65,共6页

采用MTT法研究了松口蘑抗肿瘤糖蛋白MTS03与化疗药物5-Fu单独及联合使用对人肝癌细胞Bel-7402的影响及对人正常肝细胞L-02的毒性作用,观察不同浓度配比及不同作用时间对细胞是否具有增效减毒的作用;采用扫描电镜观察MTS03作用后的Bel-7... 采用MTT法研究了松口蘑抗肿瘤糖蛋白MTS03与化疗药物5-Fu单独及联合使用对人肝癌细胞Bel-7402的影响及对人正常肝细胞L-02的毒性作用,观察不同浓度配比及不同作用时间对细胞是否具有增效减毒的作用;采用扫描电镜观察MTS03作用后的Bel-7402细胞形态.结果表明,MTS03与5-Fu在较低浓度单独使用对肿瘤细胞无显著差异,但两者联合使用增强了对肿瘤细胞的杀伤作用,而对正常细胞的作用较小,联合使用的q值均大于0.85,说明不存在拮抗作用.扫描电镜观察到凋亡小体的形成,随着剂量升高,凋亡小体增多.这一结果说明两者合用后MTS03增加了5-Fu对肝癌细胞的敏感性,同时降低了两者单一高剂量使用时引起的毒副作用,同时MTS03能诱导Bel-7402细胞膜皱缩和凋亡小体的形成. 展开更多

关键词 松口蘑 糖蛋白 抗肿瘤 协同增效 细胞毒性 凋亡

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