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继发性甲状旁腺功能亢进患者血清对内皮细胞的影响及Klotho蛋白的保护作用 被引量：1
1
作者 陈铖 俞香宝 +6 位作者 孙彬 曾鸣 赵秀芬 钱军 刘佳 邢昌赢 毛慧娟 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期504-512,共9页
目的：观察继发性甲状旁腺功能亢进（SHPT）患者血清对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增生、凋亡、一氧化氮（NO）合成的影响,并探讨Klotho蛋白的保护作用及机制. 方法：分别收集15例健康人、10例不伴SHPT的CKD 5期患者、15例SHPT拟手术治... 目的：观察继发性甲状旁腺功能亢进（SHPT）患者血清对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增生、凋亡、一氧化氮（NO）合成的影响,并探讨Klotho蛋白的保护作用及机制. 方法：分别收集15例健康人、10例不伴SHPT的CKD 5期患者、15例SHPT拟手术治疗的患者混合血清,体外培养HUVEC.以健康人血清为正常对照,观察SHPT患者血清、不伴SHPT的CKD5期患者血清处理细胞24h后对细胞增生的影响（CCK-8）,观察不同浓度、不同时间SHPT血清对HUVEC增生的影响.在10％ SHPT血清环境下,以不同浓度Klotho蛋白干预24h,检测HUVEC增生、凋亡（流式细胞术）、NO合成（硝酸盐还原法）.加/不加PD98059[细胞外调节蛋白激酶（ERK） 1/2抑制剂],检测总ERK（t-ERK）、磷酸化ERK（p-ERK）（Western印迹法检测）. 结果：不伴SHPT的CKD 5期患者血清和SHPT患者血清均可抑制细胞增生,且SHPT血清对于细胞增生的抑制作用较不伴SHPT的CKD5期患者血清显著（P＜0.05）.在一定浓度范围内（5％～20％）,随着SHPT血清浓度增加,细胞增生受抑制（P＜0.05）,呈现浓度依赖性.10％ SHPT血清处理细胞6h、12h、24h,随着处理时间延长,细胞增生受抑制（P＜0.05）,呈现时间依赖性.50～ 100 ng/ml Klotho蛋白干预可部分恢复10％ SHPT血清处理后HUVEC的增生活力（P＜0.05）、抑制其凋亡,并上调p-ERK表达,且可被PD98059阻断.SHPT血清作用下,HUVEC中NO合成减少（P＜0.05）,Klotho蛋白干预可促进NO合成（P＜0.05）. 结论：SHPT血清抑制HUVEC增生和NO合成.Klotho蛋白可部分拮抗SHPT血清对HUVEC增生的抑制作用,并促进NO合成,其促进HUVEC增生的机制可能与其抗凋亡作用及上调p-ERK有关. 展开更多
关键词 继发性甲状旁腺功能亢进 人脐静脉内皮细胞 KLOTHO蛋白 凋亡 外调节蛋白激酶 一氧化氮
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