目的探讨结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发凋亡的影响。方法取健康成人外周血分离中性粒细胞,加 Mtb-Ag 培养24 h,或用核因子κB(NF-κB)抑制剂 N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理30 min 后,膜联蛋白 V(AnnexinV/PI)...目的探讨结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发凋亡的影响。方法取健康成人外周血分离中性粒细胞,加 Mtb-Ag 培养24 h,或用核因子κB(NF-κB)抑制剂 N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理30 min 后,膜联蛋白 V(AnnexinV/PI)染色,流式细胞术观察细胞凋亡情况;并用凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测 Mtb-Ag 刺激0、1、2、4、6、24 h 后,中性粒细胞 NF-κB的 DNA 结合活性。结果加 Mtb-Ag(1.125 mg/ml)培养的中性粒细胞凋亡率(32%±3%)与中性粒细胞体外培养24 h 后自发凋亡率(55%±6%)相比,明显降低(P<0.05)。Mtb-Ag(1.125 mg/ml)作用中性粒细胞1 h 后明显可见 NF-κB活化,2 h NF-κB的 DNA 结合活性达高峰,24 h 回到静息水平;经 TPCK(30μmol/L)预处理后可阻断 Mtb-Ag 的抑制凋亡作用。结论经激活 NF-κB介导后,Mtb-Ag 对中性粒细胞自发凋亡有抑制作用。展开更多
Fas相关死亡功能域蛋白(Fas-associated death domain protein,FADD)是Fas/F asL系统信号转导通路中介导细胞凋亡的胞浆死亡信号蛋白。近年来对牛FADD研究逐渐深入,已成功克隆出牛FADD基因,并构建pAcGF-N1-bFADD融合蛋白表达载体等。通...Fas相关死亡功能域蛋白(Fas-associated death domain protein,FADD)是Fas/F asL系统信号转导通路中介导细胞凋亡的胞浆死亡信号蛋白。近年来对牛FADD研究逐渐深入,已成功克隆出牛FADD基因,并构建pAcGF-N1-bFADD融合蛋白表达载体等。通过对小鼠等模式生物的研究发现,FADD在细胞质内能以磷酸化形式存在并参与细胞增殖和有丝分裂等过程。除此之外,FADD蛋白在细胞周期进程、胚胎发育、炎症反应、肿瘤发生等生物学活动中具有一定作用。本文将从FADD基因分析、蛋白修饰及生物学功能入手,揭示FADD作为多功能蛋白对细胞增殖与凋亡平衡起到重要作用,是机体维持正常发育和活动的关键蛋白。为肉牛在育种和实践应用中,提高肉质和胴体性状提供候选基因。展开更多
文摘目的探讨结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发凋亡的影响。方法取健康成人外周血分离中性粒细胞,加 Mtb-Ag 培养24 h,或用核因子κB(NF-κB)抑制剂 N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理30 min 后,膜联蛋白 V(AnnexinV/PI)染色,流式细胞术观察细胞凋亡情况;并用凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测 Mtb-Ag 刺激0、1、2、4、6、24 h 后,中性粒细胞 NF-κB的 DNA 结合活性。结果加 Mtb-Ag(1.125 mg/ml)培养的中性粒细胞凋亡率(32%±3%)与中性粒细胞体外培养24 h 后自发凋亡率(55%±6%)相比,明显降低(P<0.05)。Mtb-Ag(1.125 mg/ml)作用中性粒细胞1 h 后明显可见 NF-κB活化,2 h NF-κB的 DNA 结合活性达高峰,24 h 回到静息水平;经 TPCK(30μmol/L)预处理后可阻断 Mtb-Ag 的抑制凋亡作用。结论经激活 NF-κB介导后,Mtb-Ag 对中性粒细胞自发凋亡有抑制作用。
文摘Fas相关死亡功能域蛋白(Fas-associated death domain protein,FADD)是Fas/F asL系统信号转导通路中介导细胞凋亡的胞浆死亡信号蛋白。近年来对牛FADD研究逐渐深入,已成功克隆出牛FADD基因,并构建pAcGF-N1-bFADD融合蛋白表达载体等。通过对小鼠等模式生物的研究发现,FADD在细胞质内能以磷酸化形式存在并参与细胞增殖和有丝分裂等过程。除此之外,FADD蛋白在细胞周期进程、胚胎发育、炎症反应、肿瘤发生等生物学活动中具有一定作用。本文将从FADD基因分析、蛋白修饰及生物学功能入手,揭示FADD作为多功能蛋白对细胞增殖与凋亡平衡起到重要作用,是机体维持正常发育和活动的关键蛋白。为肉牛在育种和实践应用中,提高肉质和胴体性状提供候选基因。
