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水貂阿留申病毒VP2蛋白主要抗原表位基因原核表达及其检测应用
被引量：
13
1
作者
曾祥伟
华育平
梁冬莹
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期1088-1090,共3页
将构建好的重组质粒pMD-VP2a、pMD-VP2b分别经双酶切获得基因片段VP2a、VP2b,分别将其定向插入到原核表达载体pMAL-c2中,构建原核表达载体pMAL-VPa和pMAL-VPb。阳性重组质粒转化宿主菌TB1,经IPTG诱导,两段基因均获得表达;Westernblot分...
将构建好的重组质粒pMD-VP2a、pMD-VP2b分别经双酶切获得基因片段VP2a、VP2b,分别将其定向插入到原核表达载体pMAL-c2中,构建原核表达载体pMAL-VPa和pMAL-VPb。阳性重组质粒转化宿主菌TB1,经IPTG诱导,两段基因均获得表达;Westernblot分析表明表达蛋白具有良好的抗原性。用KCI染色后,切胶回收的方法对表达蛋白进行纯化,以纯化的目的蛋白作为诊断抗原初步建立了水貂阿留申的VP2-CIEP诊断方法。结果表明该方法具有较高的灵敏性和特异性,与传统的CIEP方法的检出符合率达94.3%。
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关键词
水貂阿留申病毒
vp
2
蛋白抗原表位基因
原核表达
vp
2
-CIEP
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职称材料
猪细小病毒VP2蛋白的主要抗原表位基因的原核表达及检测应用
被引量：
10
2
作者
李斐
曹瑞兵
+5 位作者
周斌
郑其升
魏建超
李鹏
任雪枫
陈溥言
《中国病毒学》
CSCD
2005年第5期507-510,共4页
将构建好的重组质粒PET-VP2Ⅰ转化宿主菌BL21,利用IPTG(1mmol/L)诱导实现了PET-VP2Ⅰ蛋白主要抗原域VP2Ⅰ融合蛋白的高效表达。通过Western-blot检测证明表达的重组蛋白具有良好的免疫学活性。表达产物经HisBind层析柱纯化后作为诊断抗...
将构建好的重组质粒PET-VP2Ⅰ转化宿主菌BL21,利用IPTG(1mmol/L)诱导实现了PET-VP2Ⅰ蛋白主要抗原域VP2Ⅰ融合蛋白的高效表达。通过Western-blot检测证明表达的重组蛋白具有良好的免疫学活性。表达产物经HisBind层析柱纯化后作为诊断抗原初步建立了检测PPV抗体的间接ELISA方法。结果表明:抗原的最佳包被浓度为3.5μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶40,待检血清阳性标准初步定为OD490>0.51,且待检血清的OD490值与阴性血清的OD490值的比值大于2.1。
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关键词
猪细小病毒
vp
2
蛋白的主要抗原域
原核表达
间接ELISA
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职称材料
题名
水貂阿留申病毒VP2蛋白主要抗原表位基因原核表达及其检测应用
被引量：
13
1
作者
曾祥伟
华育平
梁冬莹
机构
东北林业大学野生动物资源学院
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期1088-1090,共3页
基金
黑龙江省科技攻关项目(GB02B506)
黑龙江省博士后基金(LBH-Z06153)~~
文摘
将构建好的重组质粒pMD-VP2a、pMD-VP2b分别经双酶切获得基因片段VP2a、VP2b,分别将其定向插入到原核表达载体pMAL-c2中,构建原核表达载体pMAL-VPa和pMAL-VPb。阳性重组质粒转化宿主菌TB1,经IPTG诱导,两段基因均获得表达;Westernblot分析表明表达蛋白具有良好的抗原性。用KCI染色后,切胶回收的方法对表达蛋白进行纯化,以纯化的目的蛋白作为诊断抗原初步建立了水貂阿留申的VP2-CIEP诊断方法。结果表明该方法具有较高的灵敏性和特异性,与传统的CIEP方法的检出符合率达94.3%。
关键词
水貂阿留申病毒
vp
2
蛋白抗原表位基因
原核表达
vp
2
-CIEP
Keywords
Aleutianmink
disease
parvovirus
antigenic
region
of
vp
2
protein
prokaryotic
expression
vp
2
-CIEP
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪细小病毒VP2蛋白的主要抗原表位基因的原核表达及检测应用
被引量：
10
2
作者
李斐
曹瑞兵
周斌
郑其升
魏建超
李鹏
任雪枫
陈溥言
机构
南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室
江苏省畜牧兽医总站
出处
《中国病毒学》
CSCD
2005年第5期507-510,共4页
基金
国家"863"高技术发展计划资助项目(2001AA249012)
文摘
将构建好的重组质粒PET-VP2Ⅰ转化宿主菌BL21,利用IPTG(1mmol/L)诱导实现了PET-VP2Ⅰ蛋白主要抗原域VP2Ⅰ融合蛋白的高效表达。通过Western-blot检测证明表达的重组蛋白具有良好的免疫学活性。表达产物经HisBind层析柱纯化后作为诊断抗原初步建立了检测PPV抗体的间接ELISA方法。结果表明:抗原的最佳包被浓度为3.5μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶40,待检血清阳性标准初步定为OD490>0.51,且待检血清的OD490值与阴性血清的OD490值的比值大于2.1。
关键词
猪细小病毒
vp
2
蛋白的主要抗原域
原核表达
间接ELISA
Keywords
Porcine
parvovirus
（PPV）
Main
antigenic
region
of
vp
2
protein
Prokaryotic
expression
Indirect
ELISA
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
水貂阿留申病毒VP2蛋白主要抗原表位基因原核表达及其检测应用
曾祥伟
华育平
梁冬莹
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
13
下载PDF
职称材料
2
猪细小病毒VP2蛋白的主要抗原表位基因的原核表达及检测应用
李斐
曹瑞兵
周斌
郑其升
魏建超
李鹏
任雪枫
陈溥言
《中国病毒学》
CSCD
2005
10
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职称材料
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