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香烟烟雾提取物诱导呼吸道上皮细胞间质性转化的实验研究 被引量：3
1
作者 刘振峰 刘建英 +3 位作者 刘代顺 周国旗 陈乾 王海霞 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第3期318-321,共4页
目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)在呼吸道上皮细胞间质性转化(EMT)中的作用,为进一步研究香烟烟雾提取物在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道重构发生机制提供新的线索。方法用不同浓度(0%、0.5%、1.0%、2.5%、5.0%,其中浓度0作为对照组)的CSE刺... 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)在呼吸道上皮细胞间质性转化(EMT)中的作用,为进一步研究香烟烟雾提取物在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道重构发生机制提供新的线索。方法用不同浓度(0%、0.5%、1.0%、2.5%、5.0%,其中浓度0作为对照组)的CSE刺激呼吸道上皮细胞BEAS-2B72h,逆转录PCR检测E钙粘蛋白(E-cad)、N钙粘蛋白(N-cad)mRNA表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中TGF-β1浓度;用2.5%CSE刺激BEAS-2B细胞不同时长(0、12、24、48h,其中时间0h作为对照),倒置显微镜下观察细胞形态变化,逆转录PCR检测E-cad、N-cad、补体C3mRNA表达情况,ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1、过敏毒素C3a浓度。结果在不同浓度的CSE刺激BEAS-2B细胞72h后,CSE各浓度刺激组较对照组E-cad mRNA表达下调,N-cad mRNA表达增加,且呈浓度依赖性(P<0.05);ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1水平,CSE各浓度刺激组较对照组增加(P<0.05);2.5%CSE在不同时间点作用BEAS-2B细胞,刺激组细胞呈梭形改变,CSE各时间段刺激组较对照组E-cad mRNA表达减少,补体C3、N-cad mRNA表达增加,且呈时间依赖性(P<0.05),CSE各时间段刺激组细胞培养上清液中TGF-β1、C3a水平较对照组增加(P<0.05)。结论 CSE可诱导正常的呼吸道上皮细胞BEAS-2B发生EMT,补体C3激活可能参与此过程。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 香烟烟雾提取物 呼吸道上皮细胞 上皮间质转化 过敏毒素c3a
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过敏毒素C3a在健康人气道上皮间质转化中的作用研究
2
作者 李竹 刘代顺 +2 位作者 吴凯峰 丁宏伟 刘建英 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第34期4757-4762,共6页
目的观察过敏毒素C3a在正常人气道上皮间质转化(EMT)中的作用及其相关分子机制。方法培养正常人气道上皮细胞BEAS-2B,分为对照组,重组人(rhC3a)刺激组,rhC3a+C3a受体拮抗剂(C3aRA)的拮抗组,通过显微镜观察细胞形态学变化情况;四甲基偶... 目的观察过敏毒素C3a在正常人气道上皮间质转化(EMT)中的作用及其相关分子机制。方法培养正常人气道上皮细胞BEAS-2B,分为对照组,重组人(rhC3a)刺激组,rhC3a+C3a受体拮抗剂(C3aRA)的拮抗组,通过显微镜观察细胞形态学变化情况;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力;ELISA检测细胞上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)的蛋白表达情况;RT-PCR检测C3a受体(C3aR)和EMT相关指标mRNA变化情况;Western blot检测C3aR、Smad2/3、p38-MAPK蛋白表达情况。结果 30、50nmol/L rhC3a刺激组细胞形态由正常鹅卵石样变为梭形,加入1μmol/L C3aRA拮抗组细胞形态较对照组比较无明显改变。50nmol/L rhC3a刺激组的细胞增殖较对照组降低(P=0.047);30nmol/L rhC3a刺激组中TGF-β1蛋白水平较对照组升高(P<0.05),C3aR mRNA及蛋白水平较对照组均升高(P<0.05),p-Smad2/3、p-p38-MAPK蛋白水平较对照组升高(P<0.05),加入1μmol/L C3aRA可以降低以上指标表达(P<0.05)。30nmol/L rhC3a刺激组中α-平滑肌肌动蛋白、N-钙黏蛋白mRNA表达上调,E-钙黏蛋白mRNA表达下降,加入1μmol/L C3aRA可以拮抗这一过程(P<0.05)。结论过敏毒素C3a通过结合C3aR,诱导正常人气道上皮细胞发生EMT,其机制可能是通过激活Smad2/3、p38-MAPK通路来参与。 展开更多
关键词 气道重塑 纤维化 过敏毒素c3a 上皮间质转化
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血液净化材料在体外静态接触血浆时血浆中C3a des Arg生成的研究 被引量：5
3
作者 黄嘉 程莉萍 +1 位作者 乐以伦 魏启欧 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期385-389,共5页
用放射免疫分析法研究了五种血液净化材料 :磺化聚醚砜 ,聚醚砜 ,聚砜 ,聚甲基丙烯酸甲酯和醋酸纤维素与人血浆在 37℃温育 30、6 0、90、12 0min后 ,血浆中补体C3激活产物C3adesArg的生成情况。结果发现 :醋酸纤维素、聚甲基丙烯酸甲... 用放射免疫分析法研究了五种血液净化材料 :磺化聚醚砜 ,聚醚砜 ,聚砜 ,聚甲基丙烯酸甲酯和醋酸纤维素与人血浆在 37℃温育 30、6 0、90、12 0min后 ,血浆中补体C3激活产物C3adesArg的生成情况。结果发现 :醋酸纤维素、聚甲基丙烯酸甲酯、聚醚砜、聚砜在与血浆温育后 ,血浆中C3adesArg的浓度依次降低 ;以醋酸纤维素激活补体C3的情况最严重 ;磺化聚醚砜的最低 ,并且磺化度越大 ,C3adesArg的浓度越小。说明聚醚砜材料作为血液净化材料有较优异的补体相容性 ,并且通过磺化可大大提高聚醚砜的补体相容性。放免分析法检测材料激活补体C3是一种方便可靠的检测手段 ,可作为开发生物材料时对有应用前景的生物材料的筛选和评价。 展开更多
关键词 血液净化材料 补体激活 过敏毒素c3a-des-Arg
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