人羊膜间充质干细胞的分离与鉴定 被引量：1

1

作者 崔冬冰 何志旭 +2 位作者 李永念 舒莉萍 王黎龙 《贵阳医学院学报》 CAS 2014年第1期8-11,17,共5页

目的：探讨从人胎盘组织中分离羊膜间充质干细胞（hAMSCs）。方法：收集剖宫产足月胎儿胎盘，采用组织块贴壁法分离出羊膜问充质干细胞并传代培养，对P1-P3代细胞进行细胞形态的观察，用流式细胞仪检测细胞膜表面阳性分子CD73．APC、CD9... 目的：探讨从人胎盘组织中分离羊膜间充质干细胞（hAMSCs）。方法：收集剖宫产足月胎儿胎盘，采用组织块贴壁法分离出羊膜问充质干细胞并传代培养，对P1-P3代细胞进行细胞形态的观察，用流式细胞仪检测细胞膜表面阳性分子CD73．APC、CD90-FITC、CIM4．PE、CDl05．Cy5．5和阴性分子CDllb-PE、CDl9．PE、CD34-PE、CD45-PE、HLA-DR-PE，并采用六孔板法检测细胞增殖情况。结果：hAMSCs的细胞形态呈成纤维状，hAMSCs在培养3-d达到对数增长期，通过流式检测，发现细胞可表达CD73、CD90、CD44和CDl05，未表达CDllb、CDl9、CD34,CD45、HLA-DR。结论：从体外成功分离培养出人羊膜间充质干细胞。 展开更多

关键词 干细胞 细胞培养 胎盘 羊膜间充质干细胞 分离与鉴定

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人羊膜上皮细胞与人羊膜间充质干细胞生物学特性对比 被引量：3

2

作者 甘文婷 孙新 陆琰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期1120-1124,共5页

目的:比较人羊膜上皮细胞(human amnion epithelial cells,h AECs)与人羊膜间充质干细胞(human amnion mesenchymal stem cells,h AM SCs)的生物学特性。方法:从足月剖宫产胎盘上剥离羊膜组织,采用低速胰蛋白酶-胶原酶消化法,分别分离获... 目的:比较人羊膜上皮细胞(human amnion epithelial cells,h AECs)与人羊膜间充质干细胞(human amnion mesenchymal stem cells,h AM SCs)的生物学特性。方法:从足月剖宫产胎盘上剥离羊膜组织,采用低速胰蛋白酶-胶原酶消化法,分别分离获取h AECs及h AMSCs,观察此两种细胞的增殖生长情况,采用免疫荧光染色、流式细胞术、逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、诱导分化染色等方法对两种细胞进行生物学特性鉴定及对比。结果:h AECs为圆形或椭圆形,呈铺路石样生长,最多传至5代;h AMSCs为成纤维细胞样的长梭形,呈放射状或漩涡状分布生长,可传至30代左右。h AECs表达上皮细胞标志角蛋白19(cytokeratin19,CK19),部分表达波形蛋白;h AM SCs表达波形蛋白,不表达CK19。两种细胞均表达CD29、CD44、CD73、CD90、OCT-4、Nanog。h AECs不表达CD105,成骨及成脂诱导阳性。结论:h AECs和h AM SCs均具有某些干细胞特性,h AECs不能无限增殖,其生长增殖及分化能力均低于h AM SCs。 展开更多

关键词 人羊膜上皮细胞 人羊膜间充质干细胞 生物学特性

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人羊膜间充质干细胞改善高龄小鼠睾丸功能的实验研究 被引量：1

3

作者 张月鑫 刘菡文 +8 位作者 施陈楠 宁松 周静 李楚玉 杨晓玉 覃莲菊 刘嘉茵 胡艳秋 崔毓桂 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2021年第4期265-271,F0003,共8页

目的:探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSC)改善高龄雄性小鼠睾丸功能的作用。方法:以36周龄雄性小鼠为高龄模型组,10周龄小鼠为年轻对照组。31只高龄模型组小鼠随机分为5组,分别为生理盐水对照组、1%人血清白蛋白对照组和治疗组,其中生理盐... 目的:探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSC)改善高龄雄性小鼠睾丸功能的作用。方法:以36周龄雄性小鼠为高龄模型组,10周龄小鼠为年轻对照组。31只高龄模型组小鼠随机分为5组,分别为生理盐水对照组、1%人血清白蛋白对照组和治疗组,其中生理盐水对照组3只,其余各组每组7只。治疗组小鼠尾静脉注射hAMSC,剂量分别为3.4×10^(6)细胞/kg(低剂量组)、6.7×10^(6)细胞/kg(中剂量组)、1.4×10^(7)细胞/kg(高剂量组)。每周注射1次,治疗4次后小鼠继续饲养,5周后取血检测小鼠血清睾酮水平;行附睾内精子的分析;免疫荧光检测睾丸组织内STEM121和CD105的表达和定位,观察睾丸组织病理学改变,检测类固醇激素生成急性调节蛋白(StAR)、17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)的表达水平。结果:与年轻雄鼠比较,治疗前高龄雄鼠体质量增加、睾丸体质比下降、睾周脂肪质量增加(均P<0.01),血清睾酮水平下降(P<0.05),精子活动率降低、正常形态精子率下降(均P<0.05)。治疗前高龄雄鼠的精子计数、睾丸组织StAR和17β-HSD蛋白表达水平与年轻雄鼠比较差异无统计学意义(均P>0.05)。hAMSC治疗后,睾丸间质区可见STEM121和CD105表达的细胞;高剂量组血清睾酮水平升高(P<0.05);睾丸组织StAR蛋白表达无显著差异(P>0.05),但高剂量组17β-HSD蛋白表达上调(P<0.05)。中剂量组和高剂量组睾丸组织的生精小管细胞层数较人血清白蛋白对照组增多(P<0.05)。结论:初步实验结果表明,hAMSC对睾丸衰老具有保护作用,并促进雄激素合成。 展开更多

关键词 间充质基质细胞 羊膜 衰老 生育力 间质干细胞移植 人羊膜间充质干细胞 睾丸衰老 生精功能 睾酮合成

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EGF对hAMSCs基因表达谱影响及生物信息学分析 被引量：3

4

作者 庞希宁 李彩虹 +5 位作者 施萍 王竟 刘晓玉 张涛 张殿宝 赵峰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第11期1391-1397,共7页

目的探讨表皮生长因子(EGF)对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)基因表达谱影响及分子机制。方法采用基因表达谱测序(Illumina RNA-Seq)技术和生物信息学分析方法,对100 ng/mL EGF干预前后的hAMSCs基因表达测序比对,确定hAMSCs基因表达谱,RT-... 目的探讨表皮生长因子(EGF)对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)基因表达谱影响及分子机制。方法采用基因表达谱测序(Illumina RNA-Seq)技术和生物信息学分析方法,对100 ng/mL EGF干预前后的hAMSCs基因表达测序比对,确定hAMSCs基因表达谱,RT-PCR检测进行验证。结果筛选出差异表达基因104个(FDR≤0.001和|log2Ratio|≥1),其中上调差异表达基因56个,下调差异表达基因48个;GO生物学过程富集分析26个生物学过程具有显著性差异(P≤0.05);KEGG信号通路富集分析细胞因子与细胞因子相互作用信号通路具有显著性差异(Q≤0.05),RT-PCR检测验证与基因表达谱结果一致。结论 EGF干预hAMSCs引起基因表达谱的变化,显著差异表达的基因和信号通路可能在hAMSCs增殖和迁移及促进创伤修复过程中具有重要作用。 展开更多

关键词 表皮生长因子 人羊膜间充质干细胞 基因表达谱 测序 生物信息学

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人羊膜间充质干细胞来源外泌体的提取与鉴定 被引量：3

5

作者 陈萌 赵峰 +4 位作者 李莹 张焜 张涛 王瑞 庞希宁 《解剖科学进展》 2020年第2期218-221,共4页

目的探索人羊膜间充质干细胞来源外泌体(hAMSC-Exos)的分离、纯化与鉴定方法,为外泌体的生物学功能研究奠定基础。方法由废弃的羊膜提取间充质干细胞;采取改良超速离心法分离、纯化培养液上清中的hAMSC-Exos;透射电镜观察、纳米粒子跟... 目的探索人羊膜间充质干细胞来源外泌体(hAMSC-Exos)的分离、纯化与鉴定方法,为外泌体的生物学功能研究奠定基础。方法由废弃的羊膜提取间充质干细胞;采取改良超速离心法分离、纯化培养液上清中的hAMSC-Exos;透射电镜观察、纳米粒子跟踪分析技术(NTA)、Western blot和流式细胞术用于hAMSC-Exos的鉴定外泌体。结果成功用改良超速离心法分离出hAMSC-Exos,透射电镜(TEM)下观察呈中间凹陷的茶杯样结构;NTA结果显示样品直径符合外泌体直径大小;Western blot和流式细胞术证实外泌体表面特异性蛋白CD9、CD63、CD81表达阳性。结论建立了hAMSC-Exos的提取纯化及鉴定方法,为它后续的研究提供依据。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 外泌体 提取与鉴定

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人羊膜间充质干细胞培养上清液对痤疮丙酸杆菌体外抑菌实验初探 被引量：1

6

作者 犹忠萍 曾霓 +3 位作者 张红 曾文心 代敏 曹碧兰 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1124-1128,共5页

目的初步探究人羊膜间充质干细胞培养上清液在体外是否具有抑制痤疮丙酸杆菌生长的作用。方法采用机械分离联合二酶消化法分离获取人羊膜间充质干细胞并进行传代培养,同时收集原代至5代细胞培养上清液体外作用于痤疮丙酸杆菌。通过抹药... 目的初步探究人羊膜间充质干细胞培养上清液在体外是否具有抑制痤疮丙酸杆菌生长的作用。方法采用机械分离联合二酶消化法分离获取人羊膜间充质干细胞并进行传代培养,同时收集原代至5代细胞培养上清液体外作用于痤疮丙酸杆菌。通过抹药法观察细菌生长情况、打孔法测量抑菌圈大小,根据美国临床和实验室标准协会抗菌药物体外药敏实验进行判断。结果原代至2代培养上清液直接抹药组有细菌生长,且无抑菌圈产生,但3~5代上清液抹药组无细菌生长,且抑菌圈大小均值分别为29. 50mm、30. 65mm、30. 00mm,组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05);克痤隐酮组抑菌圈均值为54. 58mm,3~5代上清液与克痤隐酮打孔组相比差异有显著统计学意义(P <0. 001)。结论人羊膜间充质干细胞培养上清液从第3代开始具有抑制痤疮丙酸杆菌生长的作用,抑菌效果稳定,但抑菌能力弱于克痤隐酮。 展开更多

关键词 痤疮 痤疮丙酸杆菌 人羊膜间充质干细胞培养上清液 药敏实验

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PEI-SPIO标记的人羊膜间充质干细胞移植对小鼠创伤愈合影响的实验研究 被引量：1

7

作者 刘晓玉 潘伯臣 庞希宁 《解剖科学进展》 CAS 2021年第5期513-516,共4页

目的研究PEI-SPIO标记的人羊膜间充质干细胞(human amnion mesenchymal stem cells,hAMSCs)移植对小鼠创伤愈合的影响。方法酶消化法分离hAMSCs后PEI-SPIO标记,普鲁士蓝染色检测hAMSCs的标记率,WST-1检测标记细胞增殖能力,透射电镜观察... 目的研究PEI-SPIO标记的人羊膜间充质干细胞(human amnion mesenchymal stem cells,hAMSCs)移植对小鼠创伤愈合的影响。方法酶消化法分离hAMSCs后PEI-SPIO标记,普鲁士蓝染色检测hAMSCs的标记率,WST-1检测标记细胞增殖能力,透射电镜观察标记细胞内铁离子的分布,建立小鼠全皮层创伤模型,皮内移植PEI-SPIO标记的hAMSCs,观察创面愈合及移植的hAMSCs的迁移情况。结果 PEI-SPIO标记对hAMSCs细胞形态无明显改变,标记率99%,PEI-SPIO标记浓度小于10μg/ml时,对hAMSCs的增殖无影响。体内实验证明PEI-SPIO标记的hAMSCs皮内移植能促进小鼠皮肤创伤愈合,普鲁士蓝染色可示踪移植的PEI-SPIO标记的hAMSCs。结论 PEI-SPIO可以作为hAMSCs治疗创伤愈合的标记物。 展开更多

关键词 PEI-SPIO 人羊膜间充质干细胞 干细胞移植 创伤愈合

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人羊膜间充质干细胞无血清培养方法的建立 被引量：1

8

作者 刘晓玉 施萍 +1 位作者 潘伯臣 庞希宁 《基础医学与临床》 2021年第8期1181-1185,共5页

目的建立一种人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)的无血清培养方法。方法用胰蛋白酶-胶原蛋白酶两步消化法分离人羊膜间充质干细胞,用含1×ITS、0.5%人血清白蛋白、10 ng/mL bFGF、100μg/mL L-ascorbic acid、100 U/mL青链霉素及2.5μg/m... 目的建立一种人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)的无血清培养方法。方法用胰蛋白酶-胶原蛋白酶两步消化法分离人羊膜间充质干细胞,用含1×ITS、0.5%人血清白蛋白、10 ng/mL bFGF、100μg/mL L-ascorbic acid、100 U/mL青链霉素及2.5μg/mL两性霉素B的DMEM/F12无血清培养基进行培养,倒置相差显微镜下观察细胞形态及增殖状态,免疫荧光技术检测细胞表型,WST法测定细胞增殖曲线,细胞划痕伤口闭合试验检测无血清培养的细胞迁移能力,实时定量PCR检测生长因子VEGF、KGF、PDGF和IGF-1的表达。结果无血清培养并纯化扩增的人羊膜间充质干细胞呈梭形,表达细胞表面标志物CD73和CD90,不表达CD45和CD34。细胞增殖曲线为S形,对数增殖期的平均倍增时间为72 h,与胎牛血清培养的人羊膜间充质干细胞相比,迁移能力增强,生长因子VEGF、KGF、PDGF和IGF-1表达上调(P<0.05)。结论建立了一种人羊膜间充质干细胞的无血清培养方法,为临床应用提供实验依据。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞(hAMSCs) 无血清培养 增殖 迁移

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丹参促进人羊膜间充质干细胞增殖的实验研究

9

作者 史恒瑞 董平 《健康研究》 CAS 2022年第2期194-197,203,F0003,共6页

目的观察不同浓度的丹参对人羊膜间充质干细胞(hAMCs)增殖的影响。方法分离获取人羊膜间充质干细胞,流式细胞仪检测第三代细胞表面CD29、CD34、CD44、CD45、CD73、CD166等表达情况,并结合光镜下观察细胞形态、免疫细胞化学染色法及Weste... 目的观察不同浓度的丹参对人羊膜间充质干细胞(hAMCs)增殖的影响。方法分离获取人羊膜间充质干细胞,流式细胞仪检测第三代细胞表面CD29、CD34、CD44、CD45、CD73、CD166等表达情况,并结合光镜下观察细胞形态、免疫细胞化学染色法及Western Blot法检测波形蛋白的表达情况来对细胞进行鉴定。在培养基中加入不同浓度的丹参,采用MTT法检测细胞增殖情况,细胞流式仪检测细胞周期并计算细胞的增殖指数。流式细胞仪再次检测细胞表面CD29、CD34、CD44、CD45、CD73、CD166等表达情况,对比观察细胞的表面抗原表达变化。结果人羊膜间充质干细胞高表达CD29、CD44、CD73、CD166,低表达CD34、CD45,高表达波形蛋白。MTT法显示培养基中加入丹参后细胞倍增时间缩短,细胞周期检测结果显示培养基中加入丹参后增殖指数升高,增殖后的细胞CD166表达率升高。结论在常规的完全培养基中加入适量的丹参,可以不同程度上促进人羊膜间充质干细胞的增殖,但可能会改变细胞表面抗原的表达率。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 丹参 增殖

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贫血小板血清对人羊膜间充质干细胞增殖分化的影响

10

作者 刘晓玉 潘伯臣 庞希宁 《解剖科学进展》 2019年第2期173-176,共4页

目的研究贫血小板血清(SPPP)对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)增殖分化的影响。方法利用酶消化法分离hAMSCs,制备SPPP培养hAMSCs,利用流式细胞术检测细胞表型,WST法绘制细胞生长曲线,诱导分化实验检测中胚层分化能力。结果 SPPP培养的hAMSC... 目的研究贫血小板血清(SPPP)对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)增殖分化的影响。方法利用酶消化法分离hAMSCs,制备SPPP培养hAMSCs,利用流式细胞术检测细胞表型,WST法绘制细胞生长曲线,诱导分化实验检测中胚层分化能力。结果 SPPP培养的hAMSCs表达CD73,CD90,CD105,不表达CD34,CD45,细胞倍增时间为72h,能够被诱导分化为骨,软骨,脂肪细胞。结论 SPPP作为hAMSCs的无动物源性成分培养基,为hAMSCs的细胞治疗及临床应用提供可能。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 贫血小板血清 增殖 分化

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人羊膜间充质干细胞培养方法的改进

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作者 崔冬冰 范安然 何志旭 《贵阳医学院学报》 CAS 2016年第4期414-417,426,共5页

目的：建立一种高效分离培养人羊膜间充质干细胞的方法。方法：分别用酶消化法、传统组织块贴壁法和改进的组织块贴壁法分离出h AMSCs,观察3种方法所获得h AMSCs细胞形态、获得时间,流式细胞学检测其免疫表型;并用不同的诱导体系将h AM... 目的：建立一种高效分离培养人羊膜间充质干细胞的方法。方法：分别用酶消化法、传统组织块贴壁法和改进的组织块贴壁法分离出h AMSCs,观察3种方法所获得h AMSCs细胞形态、获得时间,流式细胞学检测其免疫表型;并用不同的诱导体系将h AMSCs向成骨细胞、成神经细胞进行诱导分化,鉴定其分化潜能。结果：改进的组织块贴壁法获得h AMSCs细胞的纯度更高,传代次数更多,相同的培养时间里,获得的细胞数量是酶消化法的3-4倍,是传统组织块贴壁法的1-2倍;h AMSCs细胞高表达CD73、CD90、CD44和CD105,不表达CD11b、CD19、CD34、CD45、HLA-DR;茜素红染色和神经元特异性烯醇化酶检测证实h AMSCs细胞可诱导分化为成骨细胞和神经细胞。结论：改进的h AMSCs分离培养方法可获得较大数量细胞,且保留了向神经细胞或成骨细胞可分化潜能。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 细胞培养 鉴定 诱导

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Has_circ_0008717在羊膜间充质干细胞上清促血管生成中的作用研究

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作者 翟家彬 袁乙钦 +3 位作者 高洋 陆史俊 钱文慧 唐子春 《口腔生物医学》 2024年第2期91-96,共6页

目的:探究has_circ_0008717在人羊膜间充质干细胞上清(hAMSC-CM)促进人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成过程中的作用。方法:通过划痕实验、Transwell实验及成管实验检测hAMSC-CM对HUVECs迁移及成管能力的影响,实时荧光定量RT-PCR筛选上... 目的:探究has_circ_0008717在人羊膜间充质干细胞上清(hAMSC-CM)促进人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成过程中的作用。方法:通过划痕实验、Transwell实验及成管实验检测hAMSC-CM对HUVECs迁移及成管能力的影响,实时荧光定量RT-PCR筛选上调的circRNA(has_circ_0008717);小干扰RNA(siRNA)下调HUVECs内has_circ_0008717水平后,实时荧光定量RT-PCR检测血管内皮生长因子A(VEGFA)表达水平变化,划痕实验、Transwell实验及成管实验观察其对hAMSC-CM促进HUVECs迁移及成管的影响。结果:hAMSC-CM可明显促进HUVECs迁移及成管能力(P<0.05),HUVECs中has_circ_0008717升高最为明显(P<0.05),而敲低has_circ_0008717可明显抑制hAMSC-CM促进HUVECs迁移、成管和VEGFA的表达(P<0.05)。结论:hAMSC-CM可通过has_circ_0008717增强HUVECs的成管能力。 展开更多

关键词 has_circ_0008717 羊膜间充质干细胞 血管生成 血管内皮生长因子A

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血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞利于超长随意皮瓣的成活 被引量：11

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作者 金文虎 周爱婷 +3 位作者 吴中桓 范振海 王达利 魏在荣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第21期3349-3356,共8页

背景:研究证实血管内皮生长因子能够诱导新生血管形成,人羊膜间充质干细胞也可通过多种机制改善皮瓣移植的缺血再灌注损伤。因此,用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞为促进皮瓣成活提供了可能。目的:探索局部应用血管内皮生... 背景:研究证实血管内皮生长因子能够诱导新生血管形成,人羊膜间充质干细胞也可通过多种机制改善皮瓣移植的缺血再灌注损伤。因此,用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞为促进皮瓣成活提供了可能。目的:探索局部应用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞对超长比例随意皮瓣成活的影响。方法:将30只成年SD大鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组10只,在其背部左右分别构建2 cm×8 cm超长缺血随意皮瓣模型,皮瓣蒂部位于髂棘水平,分别为Ⅰ-left,Ⅰ-right,Ⅱ-left,Ⅱ-right,Ⅲ-left,Ⅲ-right。皮瓣掀起后即刻,Ⅰ-left、Ⅱ-left注射0.5m LLG-DMEM培养基划分为对照组,Ⅰ-right、Ⅲ-left注射0.5m L细胞浓度为1×10~9 L^(-1)的人羊膜间充质干细胞悬液划分为实验组1,Ⅱ-right、Ⅲ-right注射0.5 mL细胞浓度为1×109L-1转染血管内皮生长因子基因的人羊膜间充质干细胞悬液划分为实验组2,每个皮瓣共注射5点,每点注射0.1m L。移植后即刻、24,48h以及4,7d,激光多普勒血流监测仪监测皮瓣中部和蒂部的血流灌注值,移植后7d观察各组皮瓣的成活率,取成活皮瓣组织通过组织学观察各组皮瓣毛细血管密度,荧光显微镜观察人羊膜间充质干细胞在皮瓣内的分布及存活状况,Westernblot检测皮瓣组织中血管内皮生长因子蛋白水平。结果与结论:①实验组2皮瓣成活率、血流灌注值、皮瓣毛细血管密度明显高于实验组1及对照组,实验组1皮瓣成活率、血流灌注值、皮瓣毛细血管密度明显高于对照组,差异有显著性意义(P <0.05);②在荧光显微镜下观察发现,实验组1、实验组2皮瓣组织内有CM-Dil标记的人羊膜间充质干细胞;③各组皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达均呈阳性,实验组2皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达明显高于实验组1及对照组,实验组1皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达明显高于对� 展开更多

关键词 超长缺血随意皮瓣模型 人羊膜间充质干细胞 血管内皮生长因子 基因转染 皮瓣成活率

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人羊膜来源干细胞的生物学特性及应用潜力 被引量：1

14

作者 靖金鹏 朱朝军 张朝晖 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期79-91,共13页

干细胞移植是一种有潜力的替代治疗方案,虽然大量实验模型研究已经证实了干细胞移植能够修复受损或退化的组织并恢复其功能,但是在实际治疗中仍面临诸多困难,如免疫排斥、伦理障碍以及致瘤性等。围产期干细胞可以解决干细胞治疗所面临... 干细胞移植是一种有潜力的替代治疗方案,虽然大量实验模型研究已经证实了干细胞移植能够修复受损或退化的组织并恢复其功能,但是在实际治疗中仍面临诸多困难,如免疫排斥、伦理障碍以及致瘤性等。围产期干细胞可以解决干细胞治疗所面临的问题,被认为是潜在的可靠干细胞来源。与其他干细胞相比,人羊膜来源干细胞(human amniotic stem cells,hAMSCs)具有显著优势。动物实验发现,hAMSCs具有高分化潜能以及免疫调节活性,在妇科疾病、神经系统疾病、肾脏疾病、肺部疾病、皮肤疾病、糖尿病、癌症等多种疾病的治疗中表现出了巨大潜力。随着科学的进步以及临床的迫切需求,hAMSCs的临床应用也逐渐突破了传统治疗的局限性。综述hAMSCs生物学研究进展及应用潜力,以期为hAMSCs的实验研究和临床应用提供理论依据。 展开更多

关键词 人羊膜来源干细胞 人羊膜上皮干细胞 人羊膜间充质干细胞 生物学特性

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人羊膜间充质干细胞静脉移植后在心肌梗死大鼠体内的定植及分化 被引量：2

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作者 王钰莹 方宁 +3 位作者 陈代雄 余丽梅 刘祖林 万雪 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1583-1586,共4页

目的观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响。方法SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只。分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征。制模... 目的观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响。方法SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只。分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征。制模后1 w经舌下静脉移植Brdu标记的hAD-MSCs,于移植后6 w将大鼠心脏取出并切片行组织病理学、免疫组织化学、双重免疫荧光染色等检测,以观察植入的细胞在MI区的定植、分化,在肝、脾中的分布情况。结果分离的hAD-MSCs具有典型的间充质干细胞表型特征,高表达CD44和波形蛋白;静脉移植后6 w,心脏MI区、肺脏和脾脏中均可见Brdu阳性细胞,但在肝脏中未见阳性细胞,移植的hAD-MSCs表达心肌特异蛋白连接蛋白-43和α-辅肌动蛋白。移植后6 w,移植组大鼠心功能没有进一步恶化。结论 hAD-MSCs经静脉移植能够定植于大鼠MI区域,可分化为心肌细胞,并改善心功能。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 心肌梗死 细胞移植

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体外诱导人羊膜间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞 被引量：2

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作者 赵玉洁 方宁 +4 位作者 陈代雄 余丽梅 喻皇飞 万卫红 赵春华 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1013-1016,共4页

目的 探讨体外诱导人羊膜间充质干细胞（hAD-MSCs）向胰岛素分泌细胞分化潜能.方法 采用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离提取hAD-MSCs,流式细胞术分析和免疫细胞化学染色行表型鉴定.取第3代按2.5× 106个/ml或5×105个/ml细胞密度接... 目的 探讨体外诱导人羊膜间充质干细胞（hAD-MSCs）向胰岛素分泌细胞分化潜能.方法 采用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离提取hAD-MSCs,流式细胞术分析和免疫细胞化学染色行表型鉴定.取第3代按2.5× 106个/ml或5×105个/ml细胞密度接种6孔培养板或预置盖玻片的24孔培养板,在含10mmol/L尼克酰胺和N2补充物的无血清HG-DMEM培养基培养,未诱导组为含10％胎牛血清的LG-DMEM基础培养基.分别于体外诱导第7、14、21天采用免疫细胞化学法检测胰岛素和β2微球蛋白的表达,采用放射免疫法检测上清液中胰岛素含量,采用RT-PCR检测胰岛素mRNA和胰十二指肠同源异型盒因子1（PDX-1）mRNA的表达.结果 （1）hAD-MSCs高表达间充质干细胞表面标志CD29、CD44、CD73、CD166及波形蛋白；（2） hAD-MSCs诱导第7、14、21天胰岛素阳性细胞百分率分别为74.67％±1.53％、75.00％±1.00％、74.33％±1.53％,培养物上清液中胰岛素含量分别为（331.62±1.76）、（330.50±1.22）和（331.65±0.48） μIU/ml,各时点间比较无显著性差异（均P＞0.05）,而未诱导组仍未见胰岛素阳性细胞；培养上清也未检测到胰岛素；（3） hAD-MSCs诱导前后均有PDX-1 mRNA和蛋白表达,胰岛素基因mRNA表达仅见于诱导组；（4） hAD-MSCs诱导组和未诱导组各时点均有β2微球蛋白表达,其阳性细胞百分率组间差异无显著性（均P＞0.05）.结论 hAD-MSCs具有向胰岛素分泌细胞分化的能力,可能成为1型糖尿病细胞移植治疗的新的细胞供源. 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 胰岛素分泌细胞 诱导分化

原文传递

人参皂苷Rg1联合人羊膜间充质干细胞移植治疗卵巢功能不全的效用及机制

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作者 祝叶 张青云 +2 位作者 莫晓莉 张林 何连利 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第3期201-206,213,共7页

目的:评估人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1)联合人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)移植治疗卵巢功能不全(POI)的疗效优势。方法:共使用40只大鼠,随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、单纯hAD-MSCs治疗(hAD-MSCs)组和hAD-MSCs联合Rg1治疗(h... 目的:评估人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1)联合人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)移植治疗卵巢功能不全(POI)的疗效优势。方法:共使用40只大鼠,随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、单纯hAD-MSCs治疗(hAD-MSCs)组和hAD-MSCs联合Rg1治疗(hAD-MSCs+Rg1)组,每组10只,其中5只用于采集卵巢和血液等组织样本,另5只进行卵母细胞诱导和卵母细胞线粒体功能测定相关实验。模型组构建放疗辐射诱导的POI大鼠模型。结果:与Control组相比,Model组大鼠卵巢存在较大程度的卵泡耗竭和器质性病变,初级卵泡、次级卵泡、窦卵泡和排卵前卵泡均减少,卵巢指数下降,血清FSH升高,E2降低,卵巢组织TUNEL阳性细胞数量增加,ROS水平上升,卵母细胞线粒体膜电势降低,ATP生成量减少(P<0.05)。与单纯hAD-MSCs组相比,hAD-MSCs+Rg1联合组POI大鼠卵巢组织卵泡耗竭和器质性病变明显缓解,初级卵泡、次级卵泡、窦卵泡和排卵前卵泡明显增加,卵巢指数回升显著,血清FSH降低,E2回升,卵巢组织TUNEL阳性细胞数量明显下降,ROS水平明显降低,卵母细胞线粒体膜电势回升,ATP生成量回升显著(P<0.05)。结论:Rg1通过增强hAD-MSCs移植改善卵母细胞线粒体功能的机制并缓解POI大鼠模型疾病进展。 展开更多

关键词 人参皂苷RG1 人羊膜间充质干细胞 放疗 卵巢功能不全

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