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褐藻胶裂解酶研究进展 被引量:7
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作者 栾明鉴 何熹 +2 位作者 林荣芳 姚艳艳 赵祥忠 《食品工业》 CAS 2021年第8期214-217,共4页
褐藻胶是存在于各种海洋棕色海藻中的天然多糖,褐藻胶寡糖由褐藻胶裂解酶降解产生,由于其低分子量和具有未来发展前景的生物学活性而受到越来越多的关注。其中,褐藻胶裂解酶生物降解法是目前最绿色环保的方法,该文介绍了影响褐藻胶裂解... 褐藻胶是存在于各种海洋棕色海藻中的天然多糖,褐藻胶寡糖由褐藻胶裂解酶降解产生,由于其低分子量和具有未来发展前景的生物学活性而受到越来越多的关注。其中,褐藻胶裂解酶生物降解法是目前最绿色环保的方法,该文介绍了影响褐藻胶裂解酶活性的因素,褐藻胶裂解酶分子生物学方面研究进展,以及在食品、医药等行业的应用研究。 展开更多
关键词 褐藻胶 褐藻胶裂解酶 酶活 分子生物学 应用研究
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褐藻酸降解菌A7的发酵及产酶条件研究 被引量:6
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作者 褚洪蕊 唐景春 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期93-96,共4页
以海藻废弃物堆肥中分离到的薄壁杆菌属(Gracillibacillus)的褐藻酸降解菌A7为研究对象,对该菌的生长及产酶条件进行了研究。结果表明,该菌的最适产酶条件为:温度30℃,海藻酸钠的质量分数0.5%,pH9.5,NaCl浓度0.5mol/L,以蛋白胨为主要氮... 以海藻废弃物堆肥中分离到的薄壁杆菌属(Gracillibacillus)的褐藻酸降解菌A7为研究对象,对该菌的生长及产酶条件进行了研究。结果表明,该菌的最适产酶条件为:温度30℃,海藻酸钠的质量分数0.5%,pH9.5,NaCl浓度0.5mol/L,以蛋白胨为主要氮源。在最佳条件下培养96h达到最高酶活力12.79U/mL。 展开更多
关键词 褐藻酸降解菌 褐藻酸裂解酶 产酶条件 薄壁杆菌属(Gracillibacillus)
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褐藻寡糖的酶法制备及其在水产养殖中的应用 被引量:1
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作者 黄哲 胡睿同 +5 位作者 王连顺 丛玉婷 卢亚楠 王丽 王华 杨国军 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第2期139-145,共7页
褐藻寡糖(AOS)是一类由2~10个单糖分子经相同或不同糖苷键连接而成的低分子量聚合物。褐藻胶裂解酶是酶法制备AOS的重要工具,酶法制备的AOS在纯度、性能、结构方面优于其他方法制备的AOS。文章综述了褐藻胶裂解酶的来源、结构及酶学性质... 褐藻寡糖(AOS)是一类由2~10个单糖分子经相同或不同糖苷键连接而成的低分子量聚合物。褐藻胶裂解酶是酶法制备AOS的重要工具,酶法制备的AOS在纯度、性能、结构方面优于其他方法制备的AOS。文章综述了褐藻胶裂解酶的来源、结构及酶学性质,总结了酶法制备的AOS在饲料添加剂、微藻培育、免疫调节、抗氧化和抗菌等水产养殖方面的应用,对褐藻胶裂解酶的研究方向以及AOS在水产养殖中的应用前景进行了展望,为褐藻胶裂解酶、AOS在水产养殖中的应用提供参考。 展开更多
关键词 褐藻寡糖 褐藻胶裂解酶 酶法制备 水产养殖 生物活性 免疫调节
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一株海藻多糖降解菌的分离鉴定及产酶条件优化 被引量:5
4
作者 朱大玲 唐啸龙 +4 位作者 张宝玉 杨振芳 王乐普 秦乐宁 张蕾 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期99-107,共9页
从大型褐藻藻体分离获得一株具有高效降解琼胶和褐藻胶能力的革兰氏阴性菌菌株ST-6。16S rDNA序列分析结果表明,该菌株与海绵假单胞菌的相似度达到99%,NJ法构建系统进化树也与海绵假单胞菌归为一类,鉴定为海绵假单胞菌Pseudomonas pacha... 从大型褐藻藻体分离获得一株具有高效降解琼胶和褐藻胶能力的革兰氏阴性菌菌株ST-6。16S rDNA序列分析结果表明,该菌株与海绵假单胞菌的相似度达到99%,NJ法构建系统进化树也与海绵假单胞菌归为一类,鉴定为海绵假单胞菌Pseudomonas pachastrellae ST-6。在2216E培养基、30℃培养条件下,海绵假单胞菌ST-6的生长曲线表明,接种10~48 h为菌株的指数生长期,48~72 h为生长稳定期。产酶结果表明,菌株ST-6在指数生长期时菌液的胞外琼胶酶相对酶活力较高,在接种48 h时,菌液的琼胶酶相对酶活力最高为249.15 U/m L。此外,发现菌株ST-6的琼胶酶和褐藻胶酶的分泌类型分别为非诱导型和诱导型。采用单因素分析法对其生长和产酶条件进行分析,结果表明,海绵假单胞菌ST-6最适生长条件为:温度25~35℃,33值5~9;最适产琼胶酶条件为:温度30℃,33值为7,琼胶浓度0.3%。最适产褐藻胶酶条件为:温度35℃,33值为9。在温度30℃、339和褐藻酸钠浓度0.15%的培养条件下,海绵假单胞菌ST-6获得最高胞外褐藻胶酶相对酶活力为135.54 U/m L。 展开更多
关键词 海绵假单胞菌 琼胶酶酶活 褐藻胶酶酶活 3 5-二硝基水杨酸比色法 产酶条件优化
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产褐藻胶裂解酶海洋细菌的筛选和鉴定 被引量:2
5
作者 宋鑫 秦送玉 +3 位作者 朱军 黄惠琴 孙前光 鲍时翔 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期907-912,共6页
褐藻胶是广泛存在于各种褐藻中的一类多糖物质,其降解产物褐藻寡糖具有抗肿瘤、抗凝血、抗氧化和促进植物根部生长等作用,应用前景广阔。本研究以褐藻胶为单一碳源,从腐烂的马尾藻及其生境底泥中共筛选获得褐藻胶降解细菌18株。采用95%... 褐藻胶是广泛存在于各种褐藻中的一类多糖物质,其降解产物褐藻寡糖具有抗肿瘤、抗凝血、抗氧化和促进植物根部生长等作用,应用前景广阔。本研究以褐藻胶为单一碳源,从腐烂的马尾藻及其生境底泥中共筛选获得褐藻胶降解细菌18株。采用95%酒精处理褐藻胶裂解酶检测平板,水解圈与菌落的直径比值(D/d)≥5的有13株,D/d≥8的有3株。采用DNS法测定细菌的褐藻胶裂解酶活力,菌株DB15913的活力最高,达到15.42 U/mL。依据菌体形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析,鉴定菌株DB15913为Cobetia amphilecti。 展开更多
关键词 马尾藻属 褐藻胶裂解酶 鉴定 Cobetia amphilecti 酶活力
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海洋假单胞杆菌褐藻胶裂解酶基因在大肠杆菌中的高效表达和活性检测 被引量:1
6
作者 张瑾 赵玉然 +3 位作者 梁君妮 李兆杰 杨文鸽 薛长湖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期5-9,共5页
利用PCR方法从假单胞杆菌基因组DNA扩增胞外褐藻胶裂解酶的全基因和缺损片段,构建表达质粒pQE30-aly32和pQE30-aly165,并在大肠杆菌M15中成功表达。表达的重组蛋白大部分存在于包涵体中,经洗涤,变性和复性,镍柱亲和层析纯化,获得... 利用PCR方法从假单胞杆菌基因组DNA扩增胞外褐藻胶裂解酶的全基因和缺损片段,构建表达质粒pQE30-aly32和pQE30-aly165,并在大肠杆菌M15中成功表达。表达的重组蛋白大部分存在于包涵体中,经洗涤,变性和复性,镍柱亲和层析纯化,获得了电泳纯的Aly32和Aly165。酶活性检测发现,仅Aly165具有较强活性,108u/mg,该酶对poly(G)和poly(M)都有活性,对poly(M)更敏感。对表达体系进行优化,确定IPTG的最佳浓度为0.6mmol/L,最佳诱导菌液密度0D600为0.5~0.6,最佳表达时间为3h,28℃低温诱导可以提高重组辱白的可溶幛.可溶悻辱白相对轰狄量缺到25%. 展开更多
关键词 褐藻胶裂解酶 大肠杆菌 表达 酶活性 体系优化
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微泡菌属ALW5褐藻胶裂解酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性 被引量:2
7
作者 吴丽云 倪辉 +3 位作者 李鹤宾 肖安风 蔡慧农 朱艳冰 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期79-87,共9页
利用褐藻胶为唯一碳源的选择性培养基,从腐烂海带分离产褐藻胶裂解酶菌株。采用16S r RNA基因序列分析,对其进行分类鉴定;采用DNS-还原糖法测定褐藻胶裂解酶活性,对其酶学性质进行研究;通过测定酶解产物清除DPPH自由基、·OH自由基... 利用褐藻胶为唯一碳源的选择性培养基,从腐烂海带分离产褐藻胶裂解酶菌株。采用16S r RNA基因序列分析,对其进行分类鉴定;采用DNS-还原糖法测定褐藻胶裂解酶活性,对其酶学性质进行研究;通过测定酶解产物清除DPPH自由基、·OH自由基和还原能力来评价其抗氧化活性。结果表明:获得1株产褐藻胶裂解酶菌株ALW5,16S rRNA基因序列分析显示该菌株归属于微泡菌属。菌株ALW5产胞外褐藻胶裂解酶,酶的最适反应温度45℃,最适pH 7.0;在50℃下处理30 min,可保留63%的酶活性,在55℃时酶的稳定性差;在pH 4.0~11.0条件下处理30 min,可保留60%以上的酶活性,pH稳定性范围宽;10 mmol/L的K^+、Na^+和Mg^(2+)对酶有明显的激活作用,而Ca^(2+)、Co^(2+)、Cu^(2+)、Ni^(2+)、Ba^(2+)、Zn^(2+)、Fe^(2+)、Fe3+和Al3+均对酶有不同程度的抑制作用;除了EDTA和SDS,酶对其余抑制剂和去污剂具有好的抗性。褐藻胶裂解酶酶解产物对DPPH自由基和·OH自由基的半数抑制剂量IC50分别为10.3 mg/m L和2.9 mg/m L,还原能力较强,具有良好的抗氧化能力。 展开更多
关键词 微泡菌属 褐藻胶裂解酶 酶学性质 酶解产物 抗氧化活性
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Diversity of culturable alginate lyase-excreting bacteria associated with Sargassum
8
作者 Xiaomeng Sun Zhao Xue +3 位作者 Cui Chen Shoujin Fan Huihui Fu Peng Wang 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2023年第6期70-77,共8页
Large numbers of bacteria live on the surface of various brown algae and can produce alginate lyases to consume alginate,an important component of the cell wall of brown algae.Sargassum is a genus of the largest canop... Large numbers of bacteria live on the surface of various brown algae and can produce alginate lyases to consume alginate,an important component of the cell wall of brown algae.Sargassum is a genus of the largest canopyforming brown algae of more than 150 species,which are widely distributed in tropical and subtropical environments.However,our knowledge about the epiphytic bacteria and the alginate lyase-excreting bacteria from Sargassum is still primitive.Here,we investigated the diversity of the culturable epiphytic bacteria and alginate-degrading bacteria from Sargassum samples collected from the coastal seawaters of Shandong Province,China.In total,37 strains belonging to 21 genera in 3 phyla were isolated,including 15 previously unreported genera,of which Vibrio(6/37)and Pseudoalteromonas(5/37)are the dominant genera.Eight strains,mainly Vibrio and Pseudoalteromonas species,were further identified as alginate lyase-excreting strains that can utilize alginate for growth.The extracellular alginolytic activity of the 8 strains was determined,and strains Vibrio sp.C42and Pseudoalteromonas sp.M9 showed the highest activity.These results provide a better understanding of brown algae epiphytes and alginate-degrading bacteria,and are fundamental for further studies on the interactions between brown algae and their epiphytes. 展开更多
关键词 SARGASSUM EPIPHYTE alginate lyase-excreting bacteria alginolytic activity
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海藻酸钠裂解酶酶活测定方法研究 被引量:1
9
作者 郑明亮 郑诨龙 +1 位作者 孟春 王航 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第7期246-251,共6页
应用酶反应动力学原理对海藻酸钠裂解酶酶活测定反应体系和反应条件进行系统研究,以改进海藻酸钠裂解酶的测定方法。本实验采用紫外吸收法测定酶活,改良后的酶活测定方法为:300μL底物溶液(海藻酸钠2.2%,KCl 5 mmol/L,0.1 mol/L Na2HPO4... 应用酶反应动力学原理对海藻酸钠裂解酶酶活测定反应体系和反应条件进行系统研究,以改进海藻酸钠裂解酶的测定方法。本实验采用紫外吸收法测定酶活,改良后的酶活测定方法为:300μL底物溶液(海藻酸钠2.2%,KCl 5 mmol/L,0.1 mol/L Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液,pH7.0)加入50μL稀释至2.4~30 U/mL的酶液,于37℃水浴静置反应20 min后用冰浴终止反应,反应液稀释20倍后在235 nm处测定吸光度。每份底物溶液均需用新枪头移取以提高精密度,使移液误差小于2%。本酶活测定方法的相对标准偏差小于5%。 展开更多
关键词 海藻酸钠裂解酶 酶反应动力学 改进 酶活测定
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丁香假单孢菌重组褐藻胶裂解酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性 被引量:1
10
作者 吴丽云 朱艳冰 +3 位作者 银小倩 李鹤宾 倪辉 肖安风 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第11期38-45,共8页
目的:将丁香假单孢菌的褐藻胶裂解酶进行克隆表达和纯化,研究重组酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性,为进一步研究该酶的结构与功能奠定良好的基础。方法:利用PCR扩增褐藻胶裂解酶基因,将它克隆至表达载体pET-28a;表达产物用亲和层析... 目的:将丁香假单孢菌的褐藻胶裂解酶进行克隆表达和纯化,研究重组酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性,为进一步研究该酶的结构与功能奠定良好的基础。方法:利用PCR扩增褐藻胶裂解酶基因,将它克隆至表达载体pET-28a;表达产物用亲和层析纯化,研究重组酶的酶学性质;通过测定酶解产物的还原能力和清除ABTS·+和·OH自由基的能力,分析酶解产物的抗氧化活性。结果:来自丁香假单孢菌的重组褐藻胶裂解酶的分子质量为40.8 ku。该重组酶专一性降解聚甘露糖醛酸,酶的最适反应温度和pH分别为30℃和7.5,温度低于50℃时稳定。除了SDS和DTT,重组酶对其它抑制剂和去垢剂具有较好的抗性。酶解产物对ABTS·+和·OH自由基的半数抑制剂量IC50分别为1.56 mg/mL和0.56 mg/mL,还原能力较强。结论:该重组褐藻胶裂解酶的酶解产物有一定的抗氧化活性,具有应用潜力。 展开更多
关键词 丁香假单孢菌 褐藻胶裂解酶 酶学性质 抗氧化活性
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海藻酸钠裂解酶高产菌株的筛选、鉴定及产酶条件的优化 被引量:1
11
作者 王巧贞 潘信利 +5 位作者 杨玲 李菲 李喆 黄媛林 李翠梅 黄庶识 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第21期125-132,共8页
以海藻酸钠为唯一碳源培养基,对广西北海涠洲岛采集的马尾藻进行微生物的筛选和分离,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)进行海藻酸钠裂解酶相对酶活力测定,获得高产酶菌株M0101;依据形态、生理生化特征及16S rDNA序列分析对其进行鉴定,该菌... 以海藻酸钠为唯一碳源培养基,对广西北海涠洲岛采集的马尾藻进行微生物的筛选和分离,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)进行海藻酸钠裂解酶相对酶活力测定,获得高产酶菌株M0101;依据形态、生理生化特征及16S rDNA序列分析对其进行鉴定,该菌属于弧菌属,命名为Vibrio gangliei M0101;通过单因素实验确定了菌株M0101的产酶优化方案:海藻酸钠50 g/L,(NH_(4))_(2)SO_(4)2 g/L,K_(2)HPO_(4)1 g/L,NaCl 100 g/L,MgSO_(4)·7H_(2)O 1 g/L,FeSO_(4)·7H_(2)O 0.01 g/L,培养温度30℃,初始pH9.0,200 r/min;优化后菌株M0101产酶最大活性可达221.90 U/mL,相较于优化前最大酶活36.32 U/mL,优化后酶活力是优化前的6.11倍。表明M0101能高效水解高浓度海藻酸钠,是强耐盐的菌株,具有大规模制备海藻酸钠裂解酶的潜力。 展开更多
关键词 海藻酸钠裂解酶 高效水解 高耐盐 酶活力 产酶条件优化
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Shewanella haliotis BP-1海藻酸裂解酶基因的克隆表达
12
作者 黄桂媛 温顺华 +4 位作者 李锋 卢明倩 王巧贞 廖威 黄庶识 《广西科学》 CAS 2016年第3期228-233,共6页
【目的】了解海洋细菌Shewanella haliotis B P-1中海藻酸裂解酶降解海藻酸钠的生物活性。【方法】应用基因克隆和大肠杆菌异源表达技术,过量表达海藻酸裂解酶,将粗酶液通过 DEAE Sepharose FF柱分离纯化后检测其酶活性。【结果】从S.ha... 【目的】了解海洋细菌Shewanella haliotis B P-1中海藻酸裂解酶降解海藻酸钠的生物活性。【方法】应用基因克隆和大肠杆菌异源表达技术,过量表达海藻酸裂解酶,将粗酶液通过 DEAE Sepharose FF柱分离纯化后检测其酶活性。【结果】从S.haliotis BP-1菌株的基因组DNA中克隆得到一个大小为2157 bp的海藻酸裂解酶基因Alg17S ,该基因编码的海藻酸裂解酶 Alg17S属于PL17家族的蛋白,大小为79726 Da,其中包括N端26个氨基酸的信号肽,与Saccharophagus degradans 2-40菌株产生的海藻酸裂解酶 Alg17C 具有高度同源性,相似性为52%。经纯化后获得的重组酶 Alg17S和△snAlg17S(N端不含26个氨基酸的信号肽)均具有降解海藻酸钠的活性,但△snAlg17S对海藻酸钠的催化活性比 Alg17S高,其酶比活力高达9635 U/mg。【结论】重组海藻酸裂解酶△snAlg17S兼具高表达水平及高酶活性,是进一步研究海藻酸盐糖化和生物燃料生产的潜在的优势酶。 展开更多
关键词 海藻酸裂解酶 克隆表达 酶活性测定 SHEWANELLA HALIOTIS BP-1
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Microbulbifer sp.SH-1依赖褐藻胶裂解酶AlgSH6、AlgSH7和AlgSH17协同增效降解褐藻
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作者 杨锦 崔丹丹 沈宏 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第33期4284-4294,共11页
褐藻是多糖、多酚、萜类等天然活性化合物的重要来源.然而,如何高效提取藻体内的活性物质是褐藻资源高值化利用的瓶颈问题.本文报道了一株高效降解褐藻的海洋细菌Microbulbifer sp.SH-1.该菌株在36 h内对海带、马尾藻、泡叶藻等褐藻的... 褐藻是多糖、多酚、萜类等天然活性化合物的重要来源.然而,如何高效提取藻体内的活性物质是褐藻资源高值化利用的瓶颈问题.本文报道了一株高效降解褐藻的海洋细菌Microbulbifer sp.SH-1.该菌株在36 h内对海带、马尾藻、泡叶藻等褐藻的降解率达76.21%~96.31%.全基因组测序及基因注释结果发现, Microbulbifer sp.SH-1的基因组大小为4.68 Mbp,共编码3788个基因,包含3个对褐藻降解起关键作用的褐藻胶裂解酶基因algsh6、algsh7和algsh17.异源表达结果显示,重组酶AlgSH6、AlgSH7和AlgSH17对褐藻胶的降解活性分别为1577.29、15608.53和1709.18 U/mg.分子对接、薄层色谱(thin layer chromatography, TLC)及电喷雾质谱(electrospray ionization mass spectrometry, ESI-MS)分析表明, AlgSH7为内切型褐藻胶裂解酶,降解产物为聚合度(degree of polymerization, DP) 2~5的不饱和寡糖;AlgSH6与AlgSH17兼具内切活性和外切活性,二者单一降解产物均包含褐藻胶单糖及DP 2~5的寡糖.值得注意的是, AlgSH6与AlgSH17酶组合能够完全降解褐藻胶为单糖.此外, 3种酶两两组合的酶活性比单酶活性提高了20.51%~61.55%,三酶组合的活性提高了136.41%.以上结果表明,菌株Microbulbifer sp.SH-1通过褐藻胶裂解酶AlgSH6、AlgSH7及AlgSH17共同作用实现褐藻的高效降解,这为褐藻资源的开发利用提供了科学依据. 展开更多
关键词 褐藻降解菌 Microbulbifer sp.SH-1 褐藻胶裂解酶 内外切活性 协同作用
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产褐藻胶裂解酶芽胞杆菌的筛选、鉴定及其降解效果评价 被引量:3
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作者 黄惠琴 宋鑫 +2 位作者 刘敏 胡永华 鲍时翔 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期54-58,共5页
褐藻胶是广泛存在于褐藻中的一类多糖,降解为褐藻寡糖后能表现出更多的生物活性。从海洋样品中筛选出产褐藻胶裂解酶芽胞细菌16株,基于形态、生理生化特征和16S r DNA系统发育分析初步鉴定菌株HB12274为解淀粉芽胞杆菌植物亚种(Bacillus... 褐藻胶是广泛存在于褐藻中的一类多糖,降解为褐藻寡糖后能表现出更多的生物活性。从海洋样品中筛选出产褐藻胶裂解酶芽胞细菌16株,基于形态、生理生化特征和16S r DNA系统发育分析初步鉴定菌株HB12274为解淀粉芽胞杆菌植物亚种(Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)。TLC结果显示,海藻酸钠经粗酶液降解形成2~7聚合度的褐藻寡糖和单糖,菌株与马尾藻叶片共培养时能明显降解叶状体结构。为褐藻胶裂解酶的生产和工业应用提供了新的菌株来源。 展开更多
关键词 褐藻胶裂解酶 筛选 鉴定 芽胞杆菌 酶活
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