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生酮基古龙酸菌及其分子生物学研究进展
1
作者 杨立霞 朱欣杰 +1 位作者 修建新 李锦 《河北化工》 2011年第12期11-15,共5页
生酮基古龙酸菌是两步发酵法生产维生素C(VC)过程中的关键菌株,其能够充分转化L-山梨糖生成2-KGA,KV菌的转化代谢机制和氧化还原酶系一直是VC生产中的研究热点。KV菌的全基因组序列已经测定完成,基因注释工作正在积极推进。综述了VC生... 生酮基古龙酸菌是两步发酵法生产维生素C(VC)过程中的关键菌株,其能够充分转化L-山梨糖生成2-KGA,KV菌的转化代谢机制和氧化还原酶系一直是VC生产中的研究热点。KV菌的全基因组序列已经测定完成,基因注释工作正在积极推进。综述了VC生产研究进展、两步发酵法及KV菌发子生物学研究进展。指出随着研究工作的深入,越来越多的在转化L-山梨糖生成2-KGA过程中起关键作用的醇醛脱氢酶被发现。KV菌分子生物学方面的进展为革新VC生产工艺,大幅度降低生产成本,为我国的VC产业在竞争中获胜奠定了基础。 展开更多
关键词 2-酮基-L-古龙酸 L-山梨糖 醇醛脱氢酶 两步发酵法 生酮基古龙酸DSM4025
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酮古龙酸菌醇醛脱氢酶基因的克隆及表达 被引量：2
2
作者 姜泽慧 熊向华 +2 位作者 张惟材 何建勇 汪建华 《生物技术通讯》 CAS 2009年第5期629-631,共3页
目的:从酮古龙酸菌SCB329株中分离山梨糖生物氧化相关酶的基因并进行表达验证。方法:根据酮古龙酸菌SCB329株基因组序列设计引物,通过PCR从SCB329株基因组中扩增醇醛脱氢酶基因aadh;构建载体pBMP3-aadh并在大肠杆菌中表达,经活性染色、... 目的:从酮古龙酸菌SCB329株中分离山梨糖生物氧化相关酶的基因并进行表达验证。方法:根据酮古龙酸菌SCB329株基因组序列设计引物,通过PCR从SCB329株基因组中扩增醇醛脱氢酶基因aadh;构建载体pBMP3-aadh并在大肠杆菌中表达,经活性染色、体外转化反应等方法考察表达产物的活性。结果:目的产物能够催化山梨糖、葡萄糖、果糖、木糖等多种含羟基及羰基化合物脱氢,并能将L-山梨糖直接转化为2-酮基-L-古龙酸。结论:从酮古龙酸菌SCB329株中分离到一种醇醛脱氢酶基因,可为该菌株糖酸转化机制的研究提供帮助。 展开更多
关键词 醇醛脱氢酶 酮古龙酸菌 活性染色 体外转化反应
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朝鲜族、鄂伦春族醇代谢酶基因多态性与酒依赖的研究 被引量：10
3
作者 范建华 崔玉华 +10 位作者 田成华 周儒伦 周朝凤 王晶 单松丘 康正姬 滕旭东 夏国岩 姚万国 魏晓杰 周蒙寅 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 1998年第4期209-212,共4页
目的了解醇脱氢酶（ＡＤＨ）和醛脱氢酶（ＡＬＤＨ）基因多态性与朝鲜族和鄂伦春族酒依赖发病的相互关系。方法采用耳血聚合酶链反应及等位基因特异性寡核苷酸杂交方法，检测ＡＤＨ和ＡＬＤＨ基因型在酒依赖患者（朝鲜族５５例，鄂伦春... 目的了解醇脱氢酶（ＡＤＨ）和醛脱氢酶（ＡＬＤＨ）基因多态性与朝鲜族和鄂伦春族酒依赖发病的相互关系。方法采用耳血聚合酶链反应及等位基因特异性寡核苷酸杂交方法，检测ＡＤＨ和ＡＬＤＨ基因型在酒依赖患者（朝鲜族５５例，鄂伦春族３１例）与正常对照者（朝鲜族５０名，鄂伦春族３７名）人群中的分布频率。结果在酒依赖组与正常对照组之间，朝鲜族仅ＡＬＤＨ２基因频率的分布差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１），而鄂伦春族的ＡＤＨ３基因频率分布和ＡＬＤＨ２基因频率分布的差异有非常显著性和显著性（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），两个民族的ＡＤＨ２基因频率分布差异均无显著性。结论提示朝鲜族酒依赖的发生与ＡＬＤＨ２基因有关，鄂伦春族则为ＡＬＤＨ２和ＡＤＨ３基因共同影响酒依赖的发生。 展开更多
关键词 酒精依赖 醇脱氢酶 醛脱氢酶 基因多态性 朝鲜族
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酒精代谢酶基因型在日本双生子中的分布 被引量：3
4
作者 屈卫东 山县然太朗 +4 位作者 吴德生 张本忠 张英宁 浅香昭雄 饭岛纯夫 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期88-90,共3页
目的为预防酒精相关性疾病发生，调查了酒精代谢酶控制基因在日本双生子中的分布。方法以饱和酚法提取ＤＮＡ，应用限制性片段长度多态性分析技术检测了９２个日本双生子的酒精脱氢酶２（ＡＤＨ２）和乙醛脱氢酶２（ＡＬＤＨ２）基因型... 目的为预防酒精相关性疾病发生，调查了酒精代谢酶控制基因在日本双生子中的分布。方法以饱和酚法提取ＤＮＡ，应用限制性片段长度多态性分析技术检测了９２个日本双生子的酒精脱氢酶２（ＡＤＨ２）和乙醛脱氢酶２（ＡＬＤＨ２）基因型，根据基因型差异筛选敏感个体。结果ＡＤＨ２和ＡＬＤＨ２基因分布符合Ｈａｒｄｙｗｅｉｎｂｅｒｇ等式。ＡＤＨ２基因的３种基因型分别是ＡＤＨ２１／ＡＤＨ２１（１．１％）、ＡＤＨ２１／ＡＤＨ２２（４４．６％）和ＡＤＨ２２／ＡＤＨ２２（５４．３％）。ＡＬＤＨ２的基因型分别为ＡＬＤＨ２１／ＡＬＤＨ２１（４１．３％）、ＡＬＤＨ２１／ＡＬＤＨ２２（３９．１％）和ＡＬＤＨ２２／ＡＬＤＨ２２（１９６％）。ＡＤＨ２和ＡＬＤＨ２基因频率分别为０．２５５、０．７４５和０６０９、０３９１。结论异常纯合的ＡＤＨ２基因和纯合的ＡＬＤＨ２基因占优势。个体携有ＡＤＨ２１／ＡＤＨ２２和ＡＬＤＨ２１／ＡＬＤＨ２１、ＡＤＨ２２／ＡＤＨ２２和ＡＬＤＨ２１／ＡＬＤＨ２１者可视为敏感个体。 展开更多
关键词 基因型 醇脱氢酶 醛脱氢酶 酒精代谢酶 酒精中毒
原文传递
大肠杆菌醛醇脱氢酶的纯化、分析及其在乙酰辅酶A测定中的应用
5
作者 孙梅好 刘杰 +2 位作者 袁熹 蒲首丞 巩菊芳 《浙江师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2022年第1期82-87,共6页
为了连续测定乙酰辅酶A合成酶(acetyl-CoA synthetase,ACS)催化的乙酰辅酶A(acetyl coenzyme A,Ac-CoA)合成,探讨以醛醇脱氢酶(aldehyde/alcohol dehydrogenase,AdhE)为偶联酶检测ACS活性的可行性.以大肠杆菌(Escherichia coli K12)基... 为了连续测定乙酰辅酶A合成酶(acetyl-CoA synthetase,ACS)催化的乙酰辅酶A(acetyl coenzyme A,Ac-CoA)合成,探讨以醛醇脱氢酶(aldehyde/alcohol dehydrogenase,AdhE)为偶联酶检测ACS活性的可行性.以大肠杆菌(Escherichia coli K12)基因组为模板扩增、克隆AdhE基因,通过原核表达、纯化获得AdhE,对其进行了酶学动力学分析,并进一步以AdhE为偶联酶对ACS活性进行了测定.结果发现:AdhE的k_(cat)为13.8 min-1,Ac-CoA和NADH的K_(m)分别为52.8和73.4μmol·L^(-1);ACS的k_(cat)为10.5 min^(-1),乙酸和ATP的K_(m)分别为1.31和0.15 mmol·L^(-1).表明基于AdhE的Ac-CoA检测体系切实可用,为Ac-CoA合成反应的连续测定奠定了良好的基础. 展开更多
关键词 醛醇脱氢酶 原核表达 乙酰辅酶A合成酶 酶活偶联测定
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ALDH2基因对酒精性心肌病影响的评价 被引量：4
6
作者 宁阳根 谢勇 +2 位作者 孙明 杨天伦 周宏研 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第18期2776-2779,共4页
目的研究ALDH2基因多态性与酒精性心肌病的关系。方法采用前瞻性研究,随机选择56例正常人和64例嗜酒的非酒精性心肌病及非酒精性肝病患者及82例酒精性心肌病患者为研究对象,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法检测ALDH2基因多态... 目的研究ALDH2基因多态性与酒精性心肌病的关系。方法采用前瞻性研究,随机选择56例正常人和64例嗜酒的非酒精性心肌病及非酒精性肝病患者及82例酒精性心肌病患者为研究对象,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法检测ALDH2基因多态性。结果嗜酒组和酒精性心肌病组ALDH2!1/!1型频率高于对照组(P<0.01),ALDH2!1/!2及ALDH2!2/!2型频率低于对照组(P<0.01)。嗜酒组和酒精性心肌病组ALDH2!1等位基因的频率高于对照组(P<0.01),ALDH2!2等位基因的频率低于对照组(P<0.01)。嗜酒组和酒精性心肌病组各种基因型频率及等位基因的频率无统计学差异。结论ALDH2基因多态性与嗜酒相关,ALDH2!1等位基因在嗜酒的形成中起一定作用;ALDH2基因多态性与酒精性心肌病发生的关系未得到证实。 展开更多
关键词 醛脱氢酶 酒精性心肌病 基因多态性
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乙醇脱氢酶1B-rs1229984和乙醛脱氢酶2基因-rs671多态性实时荧光定量PCR检测方法的建立
7
作者 梁国威 邵冬华 +1 位作者 何美琳 刘洁 《医学研究杂志》 2017年第11期139-144,共6页
目的建立乙醇脱氢酶1B(ADH1B)基因rs1229984(G/A)和乙醛脱氢酶2基因rs671(G/A)多态性的实时荧光定量PCR分型方法。方法分别采用双Taq Man-MGB探针法建立ADH1B-rs1229984多态性,和ARMS-Taq Man探针法建立ALDH2-rs671多态性的实时荧光定量... 目的建立乙醇脱氢酶1B(ADH1B)基因rs1229984(G/A)和乙醛脱氢酶2基因rs671(G/A)多态性的实时荧光定量PCR分型方法。方法分别采用双Taq Man-MGB探针法建立ADH1B-rs1229984多态性,和ARMS-Taq Man探针法建立ALDH2-rs671多态性的实时荧光定量PCR分型方法。根据荧光定量PCR的循环阈值(Ct值)的差值ΔCt值判定等位基因型,并采用所建方法对345例中国汉族人进行了分型检测。结果所建方法对345例研究对象分型检测显示,ADH1B-rs1229984多态性的GG(ADH1B*1/*1)、GA(ADH1B*1/*2)和AA(ADH1B*2/*2)型的ΔCt值(ΔCt=G型Taq Man-MGB探针Ct值-A型Taq Man-MGB探针Ct值)分别为-13.72±1.33(40例)、0.50±0.17(150例)和6.62±0.54(155例);ALDH2-rs671的GG(ALDH2*1/*1)、GA(ALDH2*1/*2)和AA(ALDH2*2/*2)型的ΔCt值(ΔCt=G引物反应体系Ct值-A引物反应体系Ct值)分别为-15.30±0.84(239例)、0.17±0.45(96例)和15.86±0.74(10例)。345例研究对象中,ADH1B*1/*2和ALDH2*1/*1(31.3%)、ADH1B*2/*2和ALDH2*1/*1(28.7%)是2个等位基因的主要组合型(60%),未见ADH1B*1/*1和ALDH2*2/*2组合型。结论所建分型检测方法皆具有闭管、一步检测、准确和高通量等特点。 展开更多
关键词 乙醇脱氢酶1B 乙醛脱氢酶2 基因多态性 荧光定量PCR
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