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农杆菌介导的苏云金杆菌抗虫基因cryIA(b)和cryIA(c)在水稻中的遗传转化及蛋白表达 被引量:70
1
作者 项友斌 梁竹青 +4 位作者 高明尉 舒庆尧 叶恭银 成雄鹰 I.Altosaar 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期494-500,共7页
通过农杆菌介导法用含有抗潮霉素和 G U S 基因的双元载体将杀虫结晶蛋白基因cry I A( b) 和cry I A(c) 导入到籼、粳稻幼穗愈伤组织中,然后经过在含有不同浓度潮霉素的培养基上进行数次筛选,获得一批 Bt 转基... 通过农杆菌介导法用含有抗潮霉素和 G U S 基因的双元载体将杀虫结晶蛋白基因cry I A( b) 和cry I A(c) 导入到籼、粳稻幼穗愈伤组织中,然后经过在含有不同浓度潮霉素的培养基上进行数次筛选,获得一批 Bt 转基因株。经 P C R、 Southern 杂交及 Western 印迹分析证实此二基因已整合进水稻中,饲虫试验结果表明,转基因株具有100 % 杀虫率。 展开更多
关键词 水稻 农杆菌介导 杀虫基因 杀虫蛋白表达 转基因
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Bt基因表达载体的构建及对茶树遗传转化的研究 被引量:29
2
作者 骆颖颖 梁月荣 《茶叶科学》 CAS CSCD 2000年第2期141-147,共7页
用限制性内切酶HindⅢ和BglⅡ从pGA4 71质粒中切取Bt基因并转入载体pCAMBIA2 30 1中 ,构建后的质粒含Bt基因、intron -GUS基因和NPTⅡ基因。将构建后的质粒转化大肠杆菌 ,通过三亲交配法分别导入农杆菌菌株LBA4 4 0 4、EHA10 5、pRi1583... 用限制性内切酶HindⅢ和BglⅡ从pGA4 71质粒中切取Bt基因并转入载体pCAMBIA2 30 1中 ,构建后的质粒含Bt基因、intron -GUS基因和NPTⅡ基因。将构建后的质粒转化大肠杆菌 ,通过三亲交配法分别导入农杆菌菌株LBA4 4 0 4、EHA10 5、pRi15834中。以茶树叶片、愈伤组织为转化的受体材料 ,用农杆菌介导法将其转入茶树中 ,获得了GUS瞬间表达。以潮霉素作为愈伤组织筛选的选择性试剂 ,效果明显优于卡那霉素 ,适宜浓度为 2 0 μ/ml;以卡那霉素作为茶树叶片材料的筛选试剂 ,50 μ/ml为宜。 展开更多
关键词 茶树 遗传转化 质粒构建 BT抗虫基因
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植物转基因技术的过去、现在和未来 被引量:12
3
作者 屈聪玲 贺榆婷 +2 位作者 王瑞良 杨致荣 王兴春 《山西农业科学》 2017年第8期1376-1380,1383,共6页
植物转基因技术是植物基因功能解析和农作物遗传改良的重要手段之一。首先回顾了植物转基因技术的诞生和发展历程,然后系统介绍了载体、选择标记基因和植物转基因常用的农杆菌介导法的研究进展。最后,结合对拟南芥和谷子转基因的研究分... 植物转基因技术是植物基因功能解析和农作物遗传改良的重要手段之一。首先回顾了植物转基因技术的诞生和发展历程,然后系统介绍了载体、选择标记基因和植物转基因常用的农杆菌介导法的研究进展。最后,结合对拟南芥和谷子转基因的研究分析了目前植物转基因存在的难题,并展望了植物转基因技术未来的发展方向和趋势,以期为植物转基因技术的研究与应用提供借鉴。 展开更多
关键词 植物转基因技术 农杆菌介导法 选择标记基因 植物离体再生
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油菜植株再生和农杆菌介导遗传转化的影响因素 被引量:4
4
作者 沈奇 高媛媛 赵德刚 《山地农业生物学报》 2006年第5期377-381,433,共6页
根据甘蓝型油菜不同品系下胚轴分化能力的不同,选用再生率及苗质均较好的特选4号作为受体材料,研究了各因素对其再生及转化效率的影响。结果表明,6d苗龄的下胚轴分化能力较强。以MS+6-BA(3mg·L^-1)+NAA(0.1mg·L^-1)... 根据甘蓝型油菜不同品系下胚轴分化能力的不同,选用再生率及苗质均较好的特选4号作为受体材料,研究了各因素对其再生及转化效率的影响。结果表明,6d苗龄的下胚轴分化能力较强。以MS+6-BA(3mg·L^-1)+NAA(0.1mg·L^-1)+AgNO3(6mg·L^-1)作为分化培养基诱导频率最高。培养基中添加5mg·L^-1Kan(卡那霉素)就能筛选出转化芽苗;顸培3d的下胚轴在稀释10倍的农杆菌菌液(OD0.4~0.5)侵染30s后共培2(1获得的转化率最高。根据上述条件的优化,建立了以常规种特选4号下胚轴为转化受体的良好的再生及转化体系,转化率可达8%。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 植株再生 遗传转化 农杆菌介导法 影响因素
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褐角苔遗传转化体系的建立
5
作者 黄丹 彭涛 +4 位作者 姜山 王顺莉 李旭强 马怀富 盛福源 《广西科学》 CAS 北大核心 2024年第3期469-477,共9页
本研究旨在筛选适用于农杆菌(Agrobacterium)介导的角苔植物遗传转化体系,为今后研究早期陆生植物的进化提供理论基础。实验使用携带p CAMBIA1305.2质粒的农杆菌AGL1菌株对褐角苔(Folioceros fuciformis)外植体进行侵染,将潮霉素作为筛... 本研究旨在筛选适用于农杆菌(Agrobacterium)介导的角苔植物遗传转化体系,为今后研究早期陆生植物的进化提供理论基础。实验使用携带p CAMBIA1305.2质粒的农杆菌AGL1菌株对褐角苔(Folioceros fuciformis)外植体进行侵染,将潮霉素作为筛选标记,通过比较外植体预培养时间、菌液OD值、菌液添加量、乙酰丁香酮(AS)浓度和共培养时间来构建该物种的遗传转化体系。结果表明,褐角苔抗性植株筛选所用潮霉素的最适浓度为15 mg/L,预培养4 d的外植体侵染后状态最好。最佳侵染条件为共培养基中添加80μL OD600为0.8的农杆菌菌液,AS浓度为100μmol/L,共培养时间为3 d。通过潮霉素筛选、PCR、实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色鉴定获得转基因植株褐角苔。研究结果可为后续角苔植物基因功能的研究提供技术支持。 展开更多
关键词 褐角苔 外植体 农杆菌介导法 遗传转化体系
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常见的植物转基因技术及方法研究进展 被引量:3
6
作者 徐丽萍 刘树英 +1 位作者 于淼 刘洪章 《北方园艺》 CAS 北大核心 2014年第20期184-188,共5页
该研究总结了目前最常见的几种植物转基因方法:基因枪法、农杆菌介导法、花粉管通道法、聚乙二醇介导法、病毒介导法的遗传转化原理,及其适用范围、应用实例和发展过程,并对每一种方法的优缺点进行了归纳和总结。
关键词 转基因方法 基因枪法 农杆菌介导法 花粉管通道法 聚乙二醇介导法 病毒介导法
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农杆菌介导的玉米自交系Z21遗传转化体系的研究 被引量:4
7
作者 李韩帅 周秒依 +3 位作者 杨凤玲 李婷 白琪林 刘亚 《山西农业科学》 2018年第4期517-521,547,共6页
农杆菌介导的玉米幼胚遗传转化效率一直是影响玉米转基因研究的重要因素。针对玉米自交系Z21,在外植体大小、农杆菌浓度和共培养时间等多个方面进行了探究。结果表明,在幼胚大小1.5~2.0 mm、农杆菌浓度OD_(600)为0.9~1.2、共培养3 d的... 农杆菌介导的玉米幼胚遗传转化效率一直是影响玉米转基因研究的重要因素。针对玉米自交系Z21,在外植体大小、农杆菌浓度和共培养时间等多个方面进行了探究。结果表明,在幼胚大小1.5~2.0 mm、农杆菌浓度OD_(600)为0.9~1.2、共培养3 d的条件下,Z21的外源基因表达效率最高。通过优化影响农杆菌介导转化的各种因素,初步建立了玉米自交系Z21的高效遗传转化体系。 展开更多
关键词 玉米 农杆菌介导法 GUS染色 转化效率
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利用农杆菌介导法将抗草甘膦基因转入玉米自交系H99的研究 被引量:4
8
作者 韩平安 吴新荣 +7 位作者 孙瑞芬 石海波 薛春雷 常悦 唐宽刚 梁亚晖 任芹勇 李晓东 《北方农业学报》 2020年第2期21-26,共6页
【目的】利用转基因手段培育抗除草剂玉米品种以解决草害问题。【方法】采用农杆菌介导法对玉米自交系H99的幼胚进行遗传转化研究,进行单因素试验,分别设置不同胚的大小、农杆菌的菌液浓度和共培养时间处理,比较分析转基因幼胚GUS的瞬... 【目的】利用转基因手段培育抗除草剂玉米品种以解决草害问题。【方法】采用农杆菌介导法对玉米自交系H99的幼胚进行遗传转化研究,进行单因素试验,分别设置不同胚的大小、农杆菌的菌液浓度和共培养时间处理,比较分析转基因幼胚GUS的瞬时表达率。【结果】幼胚大小1.5~2.0 mm、农杆菌的侵染浓度OD_(600)为0.4、侵染5 min、共培养3 d,GUS的瞬时表达率最高。PCR检测证明成功获得7株阳性转基因苗,且抗性鉴定实验证明转基因苗具有草铵膦抗性。【结论】为玉米转基因技术体系优化和培育抗除草剂新品种提供了理论参考。 展开更多
关键词 玉米 抗草甘膦基因(EPSPS) 农杆菌介导法 遗传转化 GUS染色
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根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究 被引量:4
9
作者 冯晓东 陈国梁 +1 位作者 乔璟 常海飞 《延安大学学报(自然科学版)》 2014年第1期54-57,共4页
采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明:进行遗传转化的合适条件为:愈伤诱导培养基MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在... 采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明:进行遗传转化的合适条件为:愈伤诱导培养基MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4~0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化. 展开更多
关键词 骏枣 农杆菌 遗传转化 愈伤组织
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两种转基因方法对转GmXTH抗旱基因大豆根系的影响
10
作者 张瀚竹 张野 +1 位作者 杜叶垚 宋阳 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第13期4278-4286,共9页
为分析干旱胁迫下,两种不同方法得到的转基因大豆抗旱性差异,本试验选用农杆菌介导法得到的转GmXTH基因大豆品系OEA1、OEA2、OEA3、OEA4和花粉管通道转化得到的转基因大豆品系OET1、OET2、OET3、OET4和对照M18为试验材料,设置不同浓度... 为分析干旱胁迫下,两种不同方法得到的转基因大豆抗旱性差异,本试验选用农杆菌介导法得到的转GmXTH基因大豆品系OEA1、OEA2、OEA3、OEA4和花粉管通道转化得到的转基因大豆品系OET1、OET2、OET3、OET4和对照M18为试验材料,设置不同浓度梯度的PEG-6000模拟干旱胁迫的实验环境,鉴定苗期抗旱能力的差异。结果表明,随着干旱胁迫加重,两种不同转基因方法得到的转基因株系间叶片含水量、POD活性、SOD活性、丙二醛含量之间无显著差异,转基因大豆品系的抗旱能力比对照M18有显著提高,但不同转基因方法得到的大豆品系之间的抗旱能力无差异。 展开更多
关键词 大豆 根系 农杆菌介导法 花粉管通道 抗旱
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ZmGDH基因克隆及在玉米中的遗传转化 被引量:3
11
作者 曹爽 单晓辉 +7 位作者 张松 田雅娴 李贺 刘宏魁 吴颖 苏胜忠 李世鹏 原亚萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期3957-3962,共6页
本研究从抗冷玉米自交系W9816中克隆了Zm GDH基因。分析发现该基因与其他植物中的谷氨酸脱氢酶基因(GDH)基因具有较高的同源性,其中与高粱同源性达到95.38%。对抗冷玉米自交系W9816进行4℃冷处理,分别在处理后0、6 h、12 h、24 h和48 h... 本研究从抗冷玉米自交系W9816中克隆了Zm GDH基因。分析发现该基因与其他植物中的谷氨酸脱氢酶基因(GDH)基因具有较高的同源性,其中与高粱同源性达到95.38%。对抗冷玉米自交系W9816进行4℃冷处理,分别在处理后0、6 h、12 h、24 h和48 h取材,采用q RT-PCR方法测定不同冷处理时间下Zm GDH在根、茎、叶中的表达情况,结果发现在不同组织中Zm GDH基因对不同时长的冷诱导响应存在显著的差异。另外通过农杆菌介导法对玉米骨干自交系Y423愈伤组织进行了Zm GDH基因的转化,PCR检测鉴定阳性转化植株,最终统计阳性转化率为4.3%。对T0代阳性植株进行q RT-PCR表达量分析,证明了阳性转化植株中Zm GDH基因的高表达。本研究所获得的Zm GDH转基因材料可用于Zm GDH基因的生物功能分析及抗冷转基因玉米新种质创制。 展开更多
关键词 克隆 谷氨酸脱氢酶(GDH) 农杆菌介导法 冷胁迫 玉米
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农杆菌介导的山苍子遗传转化体系的构建 被引量:1
12
作者 王民炎 俞文仙 +5 位作者 赵耘霄 陈益存 高暝 吴立文 吴善群 汪阳东 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2022年第5期71-80,共10页
[目的]筛选适合山苍子愈伤组织分化的激素比例,研究其对抗生素的耐受性,构建山苍子遗传转化体系。[方法]以山苍子无菌苗茎段诱导的愈伤组织为试验材料,研究不同激素浓度配比对山苍子愈伤组织诱导不定芽及不定芽生根的影响,探讨愈伤组织... [目的]筛选适合山苍子愈伤组织分化的激素比例,研究其对抗生素的耐受性,构建山苍子遗传转化体系。[方法]以山苍子无菌苗茎段诱导的愈伤组织为试验材料,研究不同激素浓度配比对山苍子愈伤组织诱导不定芽及不定芽生根的影响,探讨愈伤组织对潮霉素和头孢霉素的临界筛选浓度,并通过农杆菌介导法将外源基因导入山苍子愈伤组织中。[结果]筛选出诱导愈伤组织不定芽分化培养基为:MS+2.0 mg·L^(-1)6-BA+0.01 mg·L^(-1)IBA+0.05 mg·L^(-1)TDZ,分化率为16.67%~36.67%;不定芽生根培养基为1/2MS+0.5 mg·L^(-1)IAA,生根率为97.33%。遗传转化初期筛选抗性愈伤组织的潮霉素浓度为5 mg·L^(-1)(约7~10 d),通过逐步增加潮霉素浓度至30 mg·L^(-1)进行筛选培养,头孢霉素最适浓度为300 mg·L^(-1)。采用农杆菌介导法将外源基因转入愈伤组织中,并设计PCR引物进行鉴定,共检测16株抗性苗均含有目的条带,表明目的基因已插入山苍子基因组中,转化率为0.67%。通过Southern检测表明,目的片段已插入山苍子愈伤组织中。[结论]初步建立山苍子再生及遗传转化体系,且已获得多个基因的抗性愈伤组织,为进一步开展基因功能研究及遗传改良提供技术支持。 展开更多
关键词 山苍子 再生 抗生素 遗传转化 农杆菌介导法
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农杆菌介导水稻遗传转化的影响因素及应用研究进展 被引量:2
13
作者 陈思 张从合 +4 位作者 王慧 吴浩然 杨力 黄艳玲 管昌红 《现代农业科技》 2023年第5期1-4,8,共5页
在水稻遗传转化过程中,农杆菌介导转化法与其他方法相比优势较多,比如转入的外源DNA结构完整及表达比较稳定、操作简便、转化率高等,已被广泛应用于转基因技术中。本文对根癌农杆菌介导水稻遗传转化的原理、影响遗传转化的因素进行了综... 在水稻遗传转化过程中,农杆菌介导转化法与其他方法相比优势较多,比如转入的外源DNA结构完整及表达比较稳定、操作简便、转化率高等,已被广泛应用于转基因技术中。本文对根癌农杆菌介导水稻遗传转化的原理、影响遗传转化的因素进行了综述,并探讨了农杆菌介导转化法的应用前景。 展开更多
关键词 水稻 根癌农杆菌 农杆菌介导转化法 遗传转化
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Current and future editing reagent delivery systems for plant genome editing 被引量:17
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作者 Yidong Ran Zhen Liang Caixia Gao 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2017年第5期490-505,共16页
Many genome editing tools have been developed and new ones are anticipated; some have been extensively applied in plant genetics, biotechnology and breeding, especially the CRISPR/Cas9 system. These technologies have ... Many genome editing tools have been developed and new ones are anticipated; some have been extensively applied in plant genetics, biotechnology and breeding, especially the CRISPR/Cas9 system. These technologies have opened up a new era for crop improvement due to their precise editing of user-specified sequences related to agronomic traits. In this review, we will focus on an update of recent developments in the methodologies of editing reagent delivery, and consider the pros and cons of current delivery systems. Finally, we will reflect on possible future directions. 展开更多
关键词 genome editing DNA RNA RNP and virus delivery agrobacterium-mediated transformation biolistic method protoplast transfeetion ttransgene-free genome edited plant
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农杆菌介导的转ICE1基因提高水稻的耐寒性 被引量:12
15
作者 向殿军 张瑜 殷奎德 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期482-486,共5页
利用农杆菌介导的转基因技术,成功地将通过RT-PCR克隆的拟南芥ICE1基因导入垦鉴稻10号中,经PCR和Southern检测确认目的基因已整合到水稻基因组中。潮霉素抗性测定结果表明,与未转基因水稻相比,T1代表现出对潮霉素较高的抗性和孟德尔式... 利用农杆菌介导的转基因技术,成功地将通过RT-PCR克隆的拟南芥ICE1基因导入垦鉴稻10号中,经PCR和Southern检测确认目的基因已整合到水稻基因组中。潮霉素抗性测定结果表明,与未转基因水稻相比,T1代表现出对潮霉素较高的抗性和孟德尔式的单位点遗传。抗寒能力检测结果表明,在同等低温胁迫条件下T1代转基因株系的死亡率明显低于未转基因对照。脯氨酸含量增幅明显高于未转基因对照。上述结果表明,转ICE1水稻提高了抗寒能力。 展开更多
关键词 ICE1基因 水稻 遗传转化 农杆菌介导 耐寒性 脯氨酸含量
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广谱抗稻瘟病基因Pi9对籼稻的转化研究 被引量:11
16
作者 潘素君 戴良英 +1 位作者 刘雄伦 王国梁 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第5期650-654,共5页
通过农杆菌介导法,将由CaMv35s启动子启动的广谱抗稻瘟病基因Pi9转入5个籼稻品种(丰源B、湘晚籼13号、R996、527、1701)的愈伤组织中,所用质粒为pCAMBIA1301,pCAMBIA1301的T-DNA区含有潮霉素(hygmycin)抗性基因和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)... 通过农杆菌介导法,将由CaMv35s启动子启动的广谱抗稻瘟病基因Pi9转入5个籼稻品种(丰源B、湘晚籼13号、R996、527、1701)的愈伤组织中,所用质粒为pCAMBIA1301,pCAMBIA1301的T-DNA区含有潮霉素(hygmycin)抗性基因和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因。以潮霉素作为筛选剂对籼稻愈伤组织进行筛选,结果表明,不同品种在转化过程中抗性愈伤率在73.9% ̄83.3%之间,获得的部分抗性苗经PCR检测为阳性,阳性植株的转化率差异显著,其转化率为5.7% ̄25.9%之间,对获得的抗性苗和T2代幼苗的根和叶进行GUS组织化学染色分析,有些抗性苗和T2代幼苗的根和叶呈蓝色反应,表明广谱抗稻瘟病基因Pi9基因已整合到水稻基因组并能正常表达。对T2代进行稻瘟病小种接种试验,结果显示了抗性分离。并且建立了一套较为有效的水稻遗传转化体系。 展开更多
关键词 广谱抗稻瘟病基因Pi9 籼稻 农杆菌介导法 抗性分离
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利用农杆菌介导法获得转cry2A抗虫基因水稻的研究 被引量:11
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作者 吴振映 柳絮 +2 位作者 王文英 姚方印 刘开启 《山东农业科学》 2011年第5期1-3,7,共4页
稻纵卷叶螟等鳞翅目害虫对cry2A*编码的Bt毒性蛋白有明显的排斥效应,从而可达到抗虫的效果。本研究利用农杆菌介导法,将载有cry2A*基因的pC-2A质粒转入受体水稻品种镇稻88基因组内,获得转基因植株。由于cry2A*与抗Basta基因紧密连锁,通... 稻纵卷叶螟等鳞翅目害虫对cry2A*编码的Bt毒性蛋白有明显的排斥效应,从而可达到抗虫的效果。本研究利用农杆菌介导法,将载有cry2A*基因的pC-2A质粒转入受体水稻品种镇稻88基因组内,获得转基因植株。由于cry2A*与抗Basta基因紧密连锁,通过Basta抗性筛选,进而得到转cry2A*基因阳性株。PCR和AGE分析结果表明,外源基因cry2A*已成功整合到镇稻88基因组内。田间试验结果显示转基因阳性植株有明显的抗虫效果。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 cry2A*基因 水稻 抗虫性
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农杆菌介导慈竹4CL基因遗传转化梁山慈竹 被引量:10
18
作者 李晓瑞 胡尚连 +4 位作者 曹颖 卢学琴 任鹏 吴晓宇 周美娟 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期38-44,共7页
以梁山慈竹2种类型成熟胚的愈伤组织为材料,采用农杆菌遗传介导的方法,将已构建好的具有降低木质素含量的PBI121-4CL-RNAi表达载体导入愈伤组织,探讨愈伤组织预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间和温度对遗传转化的影响。研究... 以梁山慈竹2种类型成熟胚的愈伤组织为材料,采用农杆菌遗传介导的方法,将已构建好的具有降低木质素含量的PBI121-4CL-RNAi表达载体导入愈伤组织,探讨愈伤组织预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间和温度对遗传转化的影响。研究结果表明,淡黄色、颗粒状、疏松易碎的胚性愈伤组织是较好的遗传转化材料。以在愈伤组织培养基上预培养8天的淡黄色、颗粒状、疏松易碎的胚性愈伤组织为转化受体,在菌液浓度为OD600=0.05的EHA105中侵染20min后,在25℃、黑暗条件下共培养2天(共培养基表面加一层无菌滤纸),在含有卡那霉素为55mg.L-1的抗性筛选培养基上筛选30天,抗性愈伤组织率为90%,经PCR检测,慈竹4CL基因已导入梁山慈竹愈伤组织中。抗性愈伤组织在芽诱导培养基上诱导30天,可获得丛生芽,待丛生芽长至3~5cm后,在生根培养基上经过20~30天的诱导,可产生1~8条根,获得再生植株。经PCR检测,慈竹4CL基因已导入梁山慈竹再生植株中,获得了转基因植株,转化效率为9%。RT-PCR检测结果表明,转4CL基因的梁山慈竹愈伤组织和植株的内源4CL基因的表达受到抑制,且表达量比对照明显降低。 展开更多
关键词 梁山慈竹 愈伤组织 根癌农杆菌介导法 遗传转化
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农杆菌介导玉米幼胚遗传转化体系的建立 被引量:10
19
作者 孙传波 郭嘉 袁英 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第12期2743-2746,2762,共5页
以玉米(Zea mays L.)HiII的幼胚为外植体,β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)为报告基因,通过农杆菌介导转化法对影响遗传转化体系的外植体大小、农杆菌浓度、热预处理温度、侵染时间、共培养及恢复培养时间、抗生素、筛选剂等因素进行优... 以玉米(Zea mays L.)HiII的幼胚为外植体,β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)为报告基因,通过农杆菌介导转化法对影响遗传转化体系的外植体大小、农杆菌浓度、热预处理温度、侵染时间、共培养及恢复培养时间、抗生素、筛选剂等因素进行优化,以建立农杆菌介导玉米幼胚遗传转化体系。结果表明,幼胚大小为1.0~1.5 mm,农杆菌菌液的OD600 nm为0.5,40℃热处理3 min,侵染8 min,共培养3 d和恢复培养4 d,100 mg/L羧苄青霉素作为抑菌剂,双丙氨膦作为筛选剂时为最佳遗传转化条件。通过该优化体系已获得多种转基因玉米材料,表明该体系具有较高的可重复性和可靠性。 展开更多
关键词 农杆菌介导转化法 玉米(Zea mays L ) 幼胚 遗传转化 maize(Zea maysL )
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农杆菌介导转化豆科牧草百脉根影响因子 被引量:7
20
作者 张振霞 席嘉宾 +1 位作者 张惠霞 储成才 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期96-98,共3页
对农杆菌介导转化豆科牧草百脉根的相关影响因子进行了实验研究,结果表明:在百脉根农杆菌转化体系中,以农杆菌AGL1菌株、子叶转化受体、3d共培养时间以及25mg/L卡那霉素筛选质量浓度为最佳转化条件。研究还发现,头孢霉素对农杆菌AGL1菌... 对农杆菌介导转化豆科牧草百脉根的相关影响因子进行了实验研究,结果表明:在百脉根农杆菌转化体系中,以农杆菌AGL1菌株、子叶转化受体、3d共培养时间以及25mg/L卡那霉素筛选质量浓度为最佳转化条件。研究还发现,头孢霉素对农杆菌AGL1菌株的抑制作用要强于羧苄霉素。 展开更多
关键词 百脉根 遗传转化 农杆菌介导法 影响因子
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