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Adult human neural stem cell therapeutics: Current developmental status and prospect 被引量:10
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作者 Hyun Nam Kee-Hang Lee +1 位作者 Do-Hyun Nam Kyeung Min Joo 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2015年第1期126-136,共11页
Over the past two decades, regenerative therapies using stem cell technologies have been developed for various neurological diseases. Although stem cell therapy is an attractive option to reverse neural tissue damage ... Over the past two decades, regenerative therapies using stem cell technologies have been developed for various neurological diseases. Although stem cell therapy is an attractive option to reverse neural tissue damage and to recover neurological deficits, it is still under development so as not to show significant treatment effects in clinical settings. In this review, we discuss the scientific and clinical basics of adult neural stem cells(a NSCs), and their current developmental status as cell therapeutics for neurological disease. Compared with other types of stem cells, a NSCs have clinical advantages, such as limited proliferation, inborn differentiation potential into functional neural cells, and no ethical issues. In spite of the merits of a NSCs, difficulties in the isolation from the normal brain, and in the in vitro expansion, have blocked preclinical and clinical study using a NSCs. However, several groups have recently developed novel techniques to isolate and expand a NSCs from normal adult brains, and showed successful applications of a NSCs to neurological diseases. With new technologies for a NSCs and their clinical strengths, previous hurdles in stem cell therapies for neurological diseases could be overcome, to realize clinically efficacious regenerative stem cell therapeutics. 展开更多
关键词 adult neural stem cell NEUROLOGICAL diseases stem cell therapy PRECLINICAL TRIAL Clinical TRIAL
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mfat-1转基因小鼠通过促进神经干细胞增殖修复缺氧缺血性脑损伤
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作者 刘雨桐 张何 +3 位作者 蔡皓然 陈雨沐 杨海元 王盈 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第11期1483-1490,共8页
目的:验证mfat-1转基因小鼠是否通过促进成体神经干细胞增殖修复缺氧缺血性脑损伤。方法:在体外实验中,分离并培养mfat-1转基因小鼠和同窝阴性鼠的成体神经干细胞,进行氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)造... 目的:验证mfat-1转基因小鼠是否通过促进成体神经干细胞增殖修复缺氧缺血性脑损伤。方法:在体外实验中,分离并培养mfat-1转基因小鼠和同窝阴性鼠的成体神经干细胞,进行氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)造模,检测神经干细胞增殖情况;在体内实验中,对mfat-1转基因小鼠及其同窝阴性对照小鼠进行缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)造模,检测成体神经干细胞的增殖能力。结果:成功构建HIBD小鼠模型和神经干细胞体外培养体系。mfat-1转基因小鼠来源的成体神经干细胞的增殖能力较野生型小鼠来源的成体神经干细胞更强;与野生型小鼠比较,mfat-1转基因小鼠神经干细胞增殖能力显著增强且行为学改善。结论:mfat-1转基因小鼠通过促进神经干细胞增殖修复小鼠HIBD。 展开更多
关键词 mfat-1 成体神经干细胞 缺氧缺血性脑损伤 增殖
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18α-GA激活Nrf2对成体神经干细胞的影响 被引量:1
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作者 杨娜 赵云鹤 +2 位作者 黄菲菲 刘琦玮 陆利 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1738-1745,共8页
目的:明确18α-甘草次酸(18α-GA)对核因子E2相关因子2(Nrf2)的激活作用,观察上调Nrf2对成体神经干细胞(a NSCs)增殖和分化能力的影响,探讨维持a NSCs活力的有效途径。方法:体外培养新生、成年和老年小鼠的侧脑室室膜下区神经干细胞(NSC... 目的:明确18α-甘草次酸(18α-GA)对核因子E2相关因子2(Nrf2)的激活作用,观察上调Nrf2对成体神经干细胞(a NSCs)增殖和分化能力的影响,探讨维持a NSCs活力的有效途径。方法:体外培养新生、成年和老年小鼠的侧脑室室膜下区神经干细胞(NSCs),观察随年龄增长NSCs中Nrf2的表达变化。以18α-GA作用a NSCs,用real-time PCR和Western blot实验比较18α-GA组与DMSO对照组a NSCs的Nrf2表达变化。构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的Nrf2-shRNA慢病毒载体(LV)感染a NSCs,用real-time PCR和Western blot实验检测shRNA对Nrf2的沉默效率。将a NSCs按照干预条件不同分为DMSO组、18α-GA组、LV-GFP组和LV-Nrf2-shRNA组,运用Brd U掺入实验、Tuj1免疫荧光染色、CCK-8实验、Hoechst 33342/PI双染色和活性氧簇(ROS)水平测定等方法评价18α-GA是否通过激活Nrf2对a NSCs的增殖、分化、细胞活力、细胞凋亡以及氧化应激水平产生影响。结果:随年龄增长,成年和老年小鼠a NSCs的Nrf2 mRNA表达水平较新生小鼠NSCs显著降低(P<0.01),但a NSCs的ROS水平显著高于新生小鼠NSCs(P<0.05)。应用18α-GA后,a NSCs的Nrf2 mRNA与蛋白表达水平较DMSO组明显升高(P<0.01),并且a NSCs的Brd U阳性率也显著增加(P<0.01)。2 mg/L 18α-GA作用后,a NSCs的Tuj1阳性率和细胞活力较DMSO组显著升高(P<0.05),而凋亡率和ROS水平显著下降(P<0.05和P<0.01)。但是,敲减a NSCs的Nrf2并应用18α-GA干预后,LV-Nrf2-shRNA组Brd U阳性率、Tuj1阳性率以及细胞活力均较LV-GFP组显著下降(P<0.05),ROS水平却显著上升(P<0.05)。结论:18α-GA可能通过激活Nrf2提高a NSCs的抗氧化能力,促进a NSCs增殖和分化,维持a NSCs潜能。 展开更多
关键词 18α-甘草次酸 成体神经干细胞 核因子E2相关因子2 细胞增殖 细胞分化 小鼠
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惊厥后大鼠海马神经再生与凋亡的动态变化 被引量:1
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作者 李听松 郭艺 +2 位作者 蒋莉 张晓萍 何志慧 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第3期444-448,共5页
探讨惊厥持续状态(status convulsion,SC)后大鼠海马神经再生与凋亡的动态变化。建立成年Wistar鼠30minSC模型,在SC后1天至56天的6个时间点上处死动物,处死前1天均腹腔注射5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU);采用免疫... 探讨惊厥持续状态(status convulsion,SC)后大鼠海马神经再生与凋亡的动态变化。建立成年Wistar鼠30minSC模型,在SC后1天至56天的6个时间点上处死动物,处死前1天均腹腔注射5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU);采用免疫组织化学方法动态检测BrdU、nestin的表达,确定神经干细胞增殖水平;双重荧光染色标记nestin/TUNEL,确定新生神经干细胞存活时间。与对照组相比,BrdU阳性细胞数目于SC后第7天在CA1区达增殖高峰,28天降至正常水平;于SC后第28天在齿状回达增殖高峰,56天降至正常水平;在SC后第7天,CA3区有大量的BrdU阳性细胞;BrdU和nestin阳性细胞数目无统计学差异。在SC后的前3天,CA1区新增殖的神经细胞呈TUNEL阳性;齿状回新增殖细胞始终表现TUNEL阴性。上述结果提示:SC后能激活自体神经干细胞原位增殖,并且部分新生细胞向损伤区域迁移。 展开更多
关键词 惊厥持续状态 成体神经干细胞 增殖 凋亡
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利用CRISPR/Cas9建立PIN1基因敲除的成体神经干细胞系 被引量:1
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作者 胡廷栋 王蒙 +3 位作者 刘晓蕊 杨海元 戴一凡 王盈 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期483-488,521,共7页
目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除成体神经干细胞(neural stem cell,NSC)PIN1基因,建立PIN1基因敲除的成体神经干细胞系。方法:取8周龄C57BL/6小鼠脑室下区的脑组织进行体外培养;设计靶向小鼠PIN1基因的单导向RNA(single guide RNA... 目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除成体神经干细胞(neural stem cell,NSC)PIN1基因,建立PIN1基因敲除的成体神经干细胞系。方法:取8周龄C57BL/6小鼠脑室下区的脑组织进行体外培养;设计靶向小鼠PIN1基因的单导向RNA(single guide RNA,sgRNA),以PX330质粒为骨架,构建PIN1的Cas9打靶载体,转染小鼠的成体神经干细胞,通过puro筛选和测序鉴定获得PIN敲除的单克隆细胞;利用免疫荧光染色和Western blot测定PIN1蛋白表达水平,免疫荧光染色鉴定神经干细胞的特征性标志物巢蛋白(Nestin)的表达,Beta Ⅲ Tubulin免疫荧光染色鉴定神经干细胞分化为神经元的能力。结果:成功构建PIN1基因的Cas9/sgRNA表达载体,转染后获得PIN1敲除的神经干细胞克隆9个。免疫荧光染色及Western blot显示PIN1蛋白无表达,免疫荧光染色显示PIN1敲除的神经干细胞Nestin阳性,神经干细胞分化培养时可部分分化为BetaⅢTubulin阳性的神经元细胞。结论:CRISPR/Cas9基因编辑技术可实现对小鼠成体神经干细胞PIN1基因的编辑。在PIN1基因敲除后PIN1蛋白无表达,初步表型分析显示,神经干细胞仍表达特征性标志物Nestin,并具有向神经元分化的能力。 展开更多
关键词 成体神经干细胞 CRISPR/Cas9 PIN1
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组织块法体外分离培养大鼠脊髓成体神经干细胞 被引量:1
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作者 张辉 张硕 +3 位作者 江正 余涛 钟林 尹宗生 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第12期1815-1818,共4页
取8月龄SD大鼠脊髓,分组织块法和细胞悬液法培养,测量神经干细胞球出现的时间、数量、直径。MTT法鉴定增殖能力及免疫荧光染色鉴定分化神经元和星型胶质细胞的比例。组织块组在神经干细胞球出现的时间、数量及增殖能力上与细胞悬液组比... 取8月龄SD大鼠脊髓,分组织块法和细胞悬液法培养,测量神经干细胞球出现的时间、数量、直径。MTT法鉴定增殖能力及免疫荧光染色鉴定分化神经元和星型胶质细胞的比例。组织块组在神经干细胞球出现的时间、数量及增殖能力上与细胞悬液组比较差异有统计学意义,两组在分化细胞比例上差异无统计学意义。 展开更多
关键词 组织块培养 成体神经干细胞 脊髓 大鼠
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海马腹侧成体神经干细胞在急性社交压力恐惧记忆消退中的作用
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作者 张亦舒 马学珠 +1 位作者 张璐 景玉宏 《兰州大学学报(医学版)》 2021年第6期28-34,共7页
目的探讨海马腹侧区成体神经干细胞在社交压力相关的伤害性记忆消退过程中是否发挥作用。方法将C57B/L成年雄性小鼠分为3组:对照组、急性社交压力组和海马腹侧区X线照射联合急性社交压力组。其中海马腹侧区X线照射联合急性社交压力组小... 目的探讨海马腹侧区成体神经干细胞在社交压力相关的伤害性记忆消退过程中是否发挥作用。方法将C57B/L成年雄性小鼠分为3组:对照组、急性社交压力组和海马腹侧区X线照射联合急性社交压力组。其中海马腹侧区X线照射联合急性社交压力组小鼠在社交压力刺激前第5、3、1天分别用X线照射海马腹侧区。在急性社交压力刺激后第7天通过行为学测试检测小鼠的社交时间、探索距离;通过免疫荧光组织化学技术检测小鼠海马区双肾上腺皮质激素阳性细胞数量;通过实时聚合酶链反应技术检测小鼠海马区脑源性神经营养因子(BDNF)、胰岛素样生长因子2 (IGF2)和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的表达水平。结果急性社交压力组小鼠在急性社交压力刺激后第7天社交时间和探索距离均减少(P<0.05),海马腹侧区X线照射联合社交压力组社交时间和探索距离减少更明显(P<0.01);急性社交压力组和海马腹侧区X线照射联合急性社交压力组小鼠海马区双肾上腺皮质激素阳性细胞均减少,其中海马腹侧区X线照射联合急性社交压力组减少更明显(P<0.01);急性社交压力组小鼠海马区BDNF表达量明显下调(P<0.01),海马腹侧区X线照射联合急性社交压力组IGF2表达量明显下调(P<0.01)。结论损伤海马腹侧区成体神经干细胞会导致社交压力相关的伤害性记忆消退延迟,表明海马腹侧区神经干细胞参与了伤害性信息处理。 展开更多
关键词 伤害性记忆消退 成体神经干细胞 急性社交压力记忆
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高血糖影响海马GSK3β-β-catenin信号抑制大鼠海马颗粒下区成体神经干细胞再生
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作者 祁楚楚 马学珠 +3 位作者 陈海超 高丽萍 尹洁 景玉宏 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期430-434,共5页
目的:探讨持续高血糖对大鼠海马颗粒下区(subgranular zone,SGZ)神经干细胞状态的影响及可能机制。方法:SD大鼠注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导1型糖尿病模型,腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,Brd U)标记新生细... 目的:探讨持续高血糖对大鼠海马颗粒下区(subgranular zone,SGZ)神经干细胞状态的影响及可能机制。方法:SD大鼠注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导1型糖尿病模型,腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,Brd U)标记新生细胞。利用免疫组化法检测海马SGZ区Ki67,5-溴脱氧尿嘧啶核/双皮质素(bromodeoxyuridine/doublecortin,Brd U/DCX)标记的阳性细胞。利用免疫印迹法检测海马胰岛素受体β(insulin receptorβ,IRβ),糖元合成酶激酶3β(pho-glycogen synthase kinase-3β,GSK3β),β-链蛋白(β-Catenin)表达水平。结果:STZ注射大鼠胰岛素降低,血糖升高;糖尿病大鼠海马区Ki67阳性细胞,Brd U/DCX阳性细胞和对照组比较明显减少,海马区IRβ,pho-GSK3β,β-Catenin表达水平和对照组比较显著下降(P<0.05)。结论:STZ诱导的1型糖尿病大鼠海马SGZ区新生细胞增值能力下降,细胞分化异常,这一变化和海马区胰岛素信号下调,GSK3β活化,β-Catenin降解增加有关。 展开更多
关键词 1型糖尿病 神经干细胞 GSK3Β 大鼠
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高原环境对小鼠成体神经发生的影响
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作者 刘兵峰 郑雪 +4 位作者 郭萍敬 许文强 范力 王建林 赵善廷 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期28-32,共5页
目的:探索和研究我国青藏高原高海拔生存环境对于小鼠海马齿状回成体神经干细胞增殖和新生细胞分化的影响。方法:健康成年昆明小鼠分为两组,一组为1519 m海拔高度的兰州对照组,另一组为4547 m海拔高度的青藏高原沱沱河高原环境组。运用B... 目的:探索和研究我国青藏高原高海拔生存环境对于小鼠海马齿状回成体神经干细胞增殖和新生细胞分化的影响。方法:健康成年昆明小鼠分为两组,一组为1519 m海拔高度的兰州对照组,另一组为4547 m海拔高度的青藏高原沱沱河高原环境组。运用BrdU腹腔注射和免疫荧光组织化学相结合的方法研究和比较不同环境中齿状回内成体神经干细胞的增殖和新生细胞的分化。结果:高原环境组的BrdU免疫阳性细胞数与低海拔对照组相比减少了40%(P=0.001),而高原环境组小鼠齿状回中的BrdU/Prox-1标记的双阳性细胞在BrdU标记的阳性细胞中的百分比与对照组相比没有显著的差异(P=0.211),并且两组小鼠齿状回中90%以上的BrdU阳性细胞同时也被Prox-1标记。结论:在青藏高原的高海拔低氧环境中,小鼠海马内成体神经干细胞的增殖明显受抑制,然而新生的细胞向颗粒细胞的分化并没有受到明显的影响。 展开更多
关键词 成体神经干细胞 低氧 齿状回 PROX-1 BRDU
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Heterogeneous populations of neural stem cells contribute to myelin repair 被引量:4
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作者 Rainer Akkermann Felix Beyer Patrick Küry 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期509-517,共9页
As ingenious as nature's invention of myelin sheaths within the mammalian nervous system is, as fatal can be damage to this specialized lipid structure. Long-term loss of electrical insulation and of further supporti... As ingenious as nature's invention of myelin sheaths within the mammalian nervous system is, as fatal can be damage to this specialized lipid structure. Long-term loss of electrical insulation and of further supportive functions myelin provides to axons, as seen in demyelinating diseases such as multiple sclerosis (MS), leads to neurodegeneration and results in progressive disabilities. Multiple lines of evidence have demon-strated the increasing inability of oligodendrocyte precursor cells (OPCs) to replace lost oligodendrocytes (OLs) in order to restore lost myelin. Much research has been dedicated to reveal potential reasons for this regeneration deficit but despite promising approaches no remyelination-promoting drugs have successfully been developed yet. In addition to OPCs neural stem cells of the adult central nervous system also hold a high potential to generate myelinating OLs. There are at least two neural stem cell niches in the brain, the subventricular zone lining the lateral ventricles and the subgranular zone of the dentate gyrus, and an additional source of neural stem cells has been located in the central canal of the spinal cord. While a substantial body of literature has described their neurogenic capacity, still little is known about the oligodendrogenic potential of these cells, even if some animal studies have provided proof of their contribution to remyelination. In this review, we summarize and discuss these studies, taking into account the different niches, the heterogeneity within and between stem cell niches and present current strategies of how to promote stem cell-mediated myelin repair. 展开更多
关键词 HETEROGENEITY OLIGODENDROCYTE NEUROREGENERATION multiple sclerosis inhibitors intracellular proteinlocalization adult neural stem cell niche REMYELINATION
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