骨组织工程中干细胞的研究与应用 被引量：8

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作者 王晓锋 吴岩 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第19期3558-3565,共8页

背景:是否可以通过改进对已知的可以分化成骨的干细胞的培养方式或者寻找到新的干细胞,为骨组织工程找到更为合适的种子细胞。目的:从干细胞的分离培养、生物学特性及标志物等方面对各类干细胞的在骨组织工程中的应用进行综述。方法:以... 背景:是否可以通过改进对已知的可以分化成骨的干细胞的培养方式或者寻找到新的干细胞,为骨组织工程找到更为合适的种子细胞。目的:从干细胞的分离培养、生物学特性及标志物等方面对各类干细胞的在骨组织工程中的应用进行综述。方法:以英文检索词为"bone tissue engineering,seed cells,stem cell,osteoblast differentiation"及中文检索词为"骨组织工程,种子细胞,干细胞,成骨分化",由第一作者检索1995年至2012年PubMed数据库及中国知网中文科技数据库,查阅近年种子细胞相关文献,最终保留50篇文献,从分离培养方法、基本特性及在骨组织工程中的应用3方面进行综述。结果与结论:文章分别对各类干细胞(包括:胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞、滑膜间充质干细胞、脐带间充质干细胞和脐带血间充质干细胞、外周血来源的多潜能间充质干细胞、脂肪干细胞、子宫内膜基质干细胞、人羊膜基质细胞、牙髓干细胞)的分离方法、生物学特性、标志物等相关实验研究进行了探讨。目前用于分离纯化骨髓间充质干细胞的方法主要有4种:密度梯度离心法、全骨髓贴壁培养法、流式细胞仪分离法和免疫磁珠法。研究证实各类干细胞在特定条件下均有分化成骨的能力。 展开更多

关键词 干细胞 干细胞学术探讨 骨髓间充质干细胞 滑膜间充质干细胞 脐带间充质干细胞 脐血间充质干 细胞 外周血来源的多潜能间充质干细胞 脂肪干细胞 子宫内膜基质干细胞 人羊膜基质细胞 牙髓 干细胞 骨组织工程 种子细胞 成骨分化 省级基金

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脂肪干细胞诱导分化成淋巴管内皮样细胞的初步研究 被引量：9

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作者 陈小虎 李付贵 +5 位作者 杨羿 罗鹏 陈运贤 朱家恺 陈嘉榆 李平 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第1期40-45,共6页

目的探讨利用血管内皮细胞生长因子C（VEGF—C）（156s）等生长因子诱导脂肪干细胞成为淋巴管内皮样细胞的方法。方法取健康成人脂肪组织，胰酶消化法获得脂肪组织来源的间质干细胞（adipose—derivedstemcell），通过流式细胞仪检测其... 目的探讨利用血管内皮细胞生长因子C（VEGF—C）（156s）等生长因子诱导脂肪干细胞成为淋巴管内皮样细胞的方法。方法取健康成人脂肪组织，胰酶消化法获得脂肪组织来源的间质干细胞（adipose—derivedstemcell），通过流式细胞仪检测其表面标记，并进行成脂肪、成骨诱导等体外分化能力鉴定。取生长状态良好的P3代细胞进行诱导实验：设置含VEGF—C156s、bFGF等生长因子的诱导液组为实验组，并设空白对照组（常规L—DMEM培养基）。观察诱导前后两组细胞的形态变化，并于10d后进行LYVE一1免疫荧光的鉴定。结果成功分离纯化脂肪干细胞，流式细胞结果显示，CDl3、CD29、CD44、CDl05高表达，CD31、CD34、CD45、HLA—DR极低表达，具有间充质干细胞特性；体外成脂和成骨能力鉴定也取得成功；在体外成功利用含VEGF—C156S、bFGF等生长因子的诱导液将脂肪干细胞诱导为淋巴管内皮样细胞，实验组LYVE一1免疫荧光显色呈强阳性，而对照组则未见到阳性染色；荧光强度定量结果差异有统计学意义（P〈0．01）。结论利用含有VEGF—C156S的诱导液可以将脂肪干细胞诱导分化为淋巴管内皮样细胞。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 血液内皮细胞生长因子C 淋巴管内皮样细胞 分化能力

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脂肪干细胞向表皮细胞表型转分化的研究 被引量：9

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作者 董晓红 雷永红 +4 位作者 付小兵 王文礼 孙同柱 李海红 梁晶冰 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期151-153,共3页

目的 探讨脂肪干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）跨胚层向表皮细胞表型转分化的可能性。方法 取大鼠脂肪组织，用酶消化法分离、培养ADSCs，用免疫细胞化学法、流式细胞仪法鉴定ADSCs。实验分为皮肤匀浆条件培养基诱导7d组... 目的 探讨脂肪干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）跨胚层向表皮细胞表型转分化的可能性。方法 取大鼠脂肪组织，用酶消化法分离、培养ADSCs，用免疫细胞化学法、流式细胞仪法鉴定ADSCs。实验分为皮肤匀浆条件培养基诱导7d组；皮肤匀浆条件培养基加入EGF（20ng/ml）诱导7d组；皮肤匀浆条件培养基诱导4d，撤条件培养基，改10％FBS／DMEM培养3d组；10％FBS／DMEM为对照组。诱导后经流式细胞仪检测CK19、CK10的表达。结果 ①免疫细胞化学分析表明ADSCs表达CD49d。而不表达CD106、CD34、CK19、CK10；流式细胞仪检测CD49d、CD44的阳性率分别为94．32％、90．38％。②各诱导实验组细胞CK19阳性率分别为45．32％、26．58％、23．37％，CK10阳性率分别为43．56％、25．54％、18．20％，较对照组CK19阳性率18．53％、CK10阳性率2．46％，明显增高（P〈0．01），差异有统计学意义。结论 皮肤匀浆液可以诱导ADSCs向表皮细胞表型转分化。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 细胞培养 转分化

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体外构建抗结核性骨组织工程复合体的实验研究 被引量：8

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作者 梁求真 折胜利 +7 位作者 宋兴华 呼西旦 毕晓娟 罗兰 马艳 蒋岳华 白晶晶 胡玉 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期1789-1796,共8页

[目的]基于兔脂肪干细胞（rabbit adipose-derived stem cells,rADSCs）、利福喷丁聚乳酸微球、同种异体部分脱钙骨支架,初步于体外构建抗结核性骨组织工程复合体。[方法]分离、培养rADSCs,经检测细胞周期、表面抗原CD44及分化诱导鉴定... [目的]基于兔脂肪干细胞（rabbit adipose-derived stem cells,rADSCs）、利福喷丁聚乳酸微球、同种异体部分脱钙骨支架,初步于体外构建抗结核性骨组织工程复合体。[方法]分离、培养rADSCs,经检测细胞周期、表面抗原CD44及分化诱导鉴定干细胞特性。用利福喷丁生长液干预rADSCs,按浓度分为0μg/ml、20μg/ml、40μg/ml及60μg/ml四组,分别绘制细胞生长曲线、检测细胞凋亡及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）含量。制备利福喷丁微球,计算平均直径、载药率及包封率。构建rADSCs-利福喷丁微球二维复合物并成骨诱导。制备骨支架并构建rADSCs-利福喷丁微球-骨支架三维复合物,计算细胞粘附率;扫描电子显微镜及苏木精-伊红（HE）染色观察复合情况;每3 d更换生长液,检测体外释药特性。[结果]rADSCs呈长梭形生长,G0/G1期占（80.3±3.2）%,表面抗原CD44阳性表达。成骨诱导后ALP、茜素红染色,成脂诱导后油红O染色及成软骨诱导后阿利新蓝染色均为阳性。生长曲线示60μg/ml组第4~12 d增殖能力较其他三组弱（P〈0.01）;凋亡检测示60μg/mL组凋亡率高于其他三组（P〈0.01）;ALP检测示第7、14 d 60μg/ml组ALP含量较其他三组少（P〈0.05）;临界浓度为40μg/ml。微球平均直径为（26.4±3.6）μm,载药率为（40.89±0.63）%,包封率为（75.24±0.18）%。二维复合物成骨诱导后茜素红染色阳性。三维复合物细胞粘附率为（96.94±1.24）%;扫描电镜及HE染色观察复合体相容性良好;体外培养第3、6、39 d累积释药量分别达总量的8.54%、20.12%及93.66%,每个时间点检测的释药浓度均低于临界浓度,但高于最低抑菌浓度。[结论]体外构建的抗结核性骨组织工程复合体具有持续缓慢释放药物的性质,且该释药浓度不影响rADSCs的增殖及成骨活性。 展开更多

关键词 骨结核 脂肪干细胞 利福喷丁 骨组织工程

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体外诱导脂肪来源干细胞向黏膜上皮细胞分化的研究 被引量：5

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作者 王程 徐潇 +3 位作者 陈冲 李梁 闫俊灵 汤苏阳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期798-802,共5页

目的探讨在体外诱导脂肪来源干细胞(ADSCs)分化为黏膜上皮细胞的可能性。方法获取成年人皮下脂肪组织,进行ADSCs的分离、培养,扩增至第三代进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。分别采用含10%胎牛血清、8μg/L表皮生长因子(EGF... 目的探讨在体外诱导脂肪来源干细胞(ADSCs)分化为黏膜上皮细胞的可能性。方法获取成年人皮下脂肪组织,进行ADSCs的分离、培养,扩增至第三代进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。分别采用含10%胎牛血清、8μg/L表皮生长因子(EGF)、10%胎牛血清+8μg/L EGF、10%胎牛血清+8μg/L EGF+30%成纤维细胞培养基、10%胎牛血清+30%成纤维细胞培养基的DMEM培养液进行培养,于培养前及培养后7、14d观察各组细胞的光镜特征,采用免疫组织化学染色检测特异性细胞表面标记物的表达以及Western blotting方法检测诱导前后ADSCs中CK-7、CK-14的蛋白表达水平。结果与未加EGF诱导剂培养组比较,经EGF诱导14d后多数ADSCs细胞形态、排列方式发生改变。CK-19免疫组化染色显示呈强阳性。Western blotting检测结果提示诱导后的黏膜上皮细胞特异性蛋白CK7、CK14呈高表达。结论 ADSCs在一定诱导条件下可向黏膜上皮样细胞分化。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 表皮生长因子 上皮样细胞 细胞分化

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脊髓损伤动物模型研究进展 被引量：3

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作者 刘国库 艾宗勇 +1 位作者 牛宝华 李天晴 《药物生物技术》 CAS 2017年第3期279-282,共4页

脊髓损伤(Spina cord injury,SCI)是脊柱损伤最严重的并发症,是一种严重的神经系统功能障碍性疾病,损伤后会导致损伤节段以下肢体发生严重的功能障碍,最典型的表现为损伤部位以下瘫痪,这不仅会给损伤患者本人带来身体与心理上的严重伤害... 脊髓损伤(Spina cord injury,SCI)是脊柱损伤最严重的并发症,是一种严重的神经系统功能障碍性疾病,损伤后会导致损伤节段以下肢体发生严重的功能障碍,最典型的表现为损伤部位以下瘫痪,这不仅会给损伤患者本人带来身体与心理上的严重伤害,还会对家庭以及社会造成巨大的经济负担。然而,目前对于脊髓损伤的研究仍然存在着很多问题,文章总结了近年来有关脊髓损伤动物模型的研究进展,并对于利用干细胞移植治疗脊髓损伤的方法进行综述。 展开更多

关键词 脊髓损伤 脊髓损伤模型 细胞移植 胚胎干细胞 神经干细胞 人脐带血干细胞 骨髓间充质干细 胞 脂肪来源干细胞

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大鼠脂肪干细胞体外诱导为光感受器细胞和视网膜色素上皮细胞 被引量：4

7

作者 许卓再 董方田 +3 位作者 陈连凤 吴婵 戴荣平 于伟泓 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第3期247-253,共7页

目的探讨大鼠的脂肪干细胞（ADSCs）体外诱导为光感受器细胞和视网膜色素上皮（RPE）细胞的方法。方法经贴壁筛选法连续传代纯化细胞,流式细胞仪检测CD45、CD90、CD49d、CD106鉴定ADSCs。用EGF、激活素A、牛磺酸、视黄酸和视网膜细胞提... 目的探讨大鼠的脂肪干细胞（ADSCs）体外诱导为光感受器细胞和视网膜色素上皮（RPE）细胞的方法。方法经贴壁筛选法连续传代纯化细胞,流式细胞仪检测CD45、CD90、CD49d、CD106鉴定ADSCs。用EGF、激活素A、牛磺酸、视黄酸和视网膜细胞提取液单独诱导ADSCs;用EGF＋牛磺酸、EGF＋视黄酸、牛磺酸＋视黄酸、EGF＋牛磺酸＋视黄酸联合诱导,免疫荧光法和流式细胞仪检测细胞的视紫红质、CK和S-100的表达。结果原代ADSCs,CD45阳性率是1.6%,CD90是71.3%,CD49d是7.8%,CD106是3.5%。从传1-5代,CD45阳性率是0.8%-9.3%,CD90是84.7%-94.8%,CD49d是16.8%-31.0%,CD106是8.3%-22.2%。各代ADSCs中,CD49d的阳性率均高于CD106。ADSCs的视紫红质的诱导效应是17.5%-46.0%,CK的诱导效应是19.7%-79.3%,S-100的诱导效应是27.3%-50.7%。结论ADSCs具有向光感受器细胞和RPE细胞分化的潜能。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 分化 光感受器细胞 视网膜色素上皮

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糖尿病对脂肪源性间充质干细胞生物学功能影响的研究进展 被引量：3

8

作者 姚远镇 邓呈亮 王波 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期653-656,共4页

脂肪源性间充质干细胞（ADSC）是存在于脂肪组织中的具有自我更新和多向分化潜能的成体间充质干细胞。ADSC在创面治疗方面已经取得了良好的效果，且因其有来源广泛、体内含量多、免疫原性低、获取对机体创伤小等优势，临床应用前景十分... 脂肪源性间充质干细胞（ADSC）是存在于脂肪组织中的具有自我更新和多向分化潜能的成体间充质干细胞。ADSC在创面治疗方面已经取得了良好的效果，且因其有来源广泛、体内含量多、免疫原性低、获取对机体创伤小等优势，临床应用前景十分广泛。糖尿病创面愈合困难的原因可能与晚期糖基化终末产物增多、长期的慢性炎症反应及外周神经功能障碍密切相关。糖尿病患者异常的体内环境也可影响ADSC的生物学功能，从而影响创面愈合。本文就糖尿病ADSC的一般特性及其分化、增殖、迁移、分泌及促血管生成功能进行综述。 展开更多

关键词 糖尿病 伤口愈合 脂肪源性间充质干细胞

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脂肪间充质干细胞成软骨细胞诱导后的再培养 被引量：2

9

作者 石业华 陈志鹏 +2 位作者 马启奎 鞠瑞华 王启荣 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第12期45-49,共5页

目的探索藻酸盐凝胶中高密度培养脂肪间充质干细胞(ADSCs)成软骨细胞诱导后,利用凝胶释放的细胞再培养形成软骨组织的新方法。方法取大鼠腹股沟脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化得到ADSCs原代培养,传代后采用流式细胞术检测间充质细胞表面CD90、... 目的探索藻酸盐凝胶中高密度培养脂肪间充质干细胞(ADSCs)成软骨细胞诱导后,利用凝胶释放的细胞再培养形成软骨组织的新方法。方法取大鼠腹股沟脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化得到ADSCs原代培养,传代后采用流式细胞术检测间充质细胞表面CD90、CD44表达鉴定细胞。将第6代细胞高密度培养于藻酸钙凝胶中,用软骨诱导培养基诱导培养2周,将细胞放自凝胶中释放并单层培养成软骨诱导2周,观察细胞变化。培养出的组织块经Ⅱ型胶原酶消化后,行免疫细胞化学染色,检测软骨特异性Ⅱ型胶原蛋白的表达。结果 ADSCs原代呈梭形生长,传代后呈规律排列旋涡状生长,间充质干细胞表面CD90、CD44呈阳性。藻酸钙-ADSCs成软骨诱导2周后,释放出的细胞贴壁后逐渐聚集,形成一定体积的质硬组织块,免疫组化检测显示,新生组织块细胞胞质中软骨特异性Ⅱ型胶原蛋白呈阳性表达,表明大鼠ADSCs向软骨细胞分化。结论藻酸盐凝胶中高密度培养大鼠ADSCs成软骨细胞诱导后,利用诱导后的细胞再培养可形成新的软骨组织。 展开更多

关键词 脂肪间充质干细胞 藻酸盐 软骨组织 Ⅱ型胶原蛋白

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慢病毒载体介导的低氧诱导因子-1α在脂肪源性干细胞中的表达 被引量：2

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作者 王巍巍 张金元 王葳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1955-1957,共3页

目的构建携带有增强绿色荧光蛋白（EGFP）和低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的重组慢病毒载体，并感染人脂肪源性干细胞（hADSCs）。方法重组慢病毒载体Lenti—hHIF-1α-EGFP转染293T细胞，进行病毒包装并测定病毒滴度。按照MOI=20将Lenti... 目的构建携带有增强绿色荧光蛋白（EGFP）和低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的重组慢病毒载体，并感染人脂肪源性干细胞（hADSCs）。方法重组慢病毒载体Lenti—hHIF-1α-EGFP转染293T细胞，进行病毒包装并测定病毒滴度。按照MOI=20将Lenti—hHIF-1α-EGFP转染hADSCs，流式细胞仪分选EGFP标记的细胞。对转染后的hADSCs进行多向分化能力鉴定，并检测hADSCs内hHIF-1α的表达。结果病毒滴度为5×10^7pfu／ml。Lenti—hHIF-1α—EGFP转染hADSCs后第3天，荧光镜下观察转染效率70％，经流式细胞仪分选后，98％以上的细胞均有EGFP的表达。转染后的hADSCs茜素红染色及油红O染色阳性，表明hADSCs仍具有多向分化的潜能。hADSCs可以高表达HIF-1α。结论成功构建带有报告基因EGFP和目的基因hHIF-1α的慢病毒表达系统，并以慢病毒为载体将hHIF-1α整合到hADSCs中实现其高效表达。 展开更多

关键词 慢病毒载体 低氧诱导因子-1Α 脂肪源性干细胞 转染

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利福平对兔脂肪干细胞增殖、成骨及黏附支架的影响 被引量：1

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作者 梁求真 吐汉.艾买提 +5 位作者 宋兴华 蒋岳华 马艳 毕晓娟 白晶晶 罗兰 《医学研究杂志》 2014年第2期27-31,共5页

目的探讨利福平（rifampicin，RFP）对兔脂肪干细胞（rabbitadipose-derivedstemcells，rADSCs）增殖、成骨及黏附支架的影响，为后期RFP缓释系统与rADSCs的复合奠定实验基础。方法分离培养rADSCs，检测细胞周期及表面抗原CD44，成骨、... 目的探讨利福平（rifampicin，RFP）对兔脂肪干细胞（rabbitadipose-derivedstemcells，rADSCs）增殖、成骨及黏附支架的影响，为后期RFP缓释系统与rADSCs的复合奠定实验基础。方法分离培养rADSCs，检测细胞周期及表面抗原CD44，成骨、成脂诱导后分别行茜素红及油红O染色。用利福平生长液干预rADSCs，按浓度分为0、10、20及30μg／ml4组，分别绘制细胞生长曲线、检测细胞凋亡率及碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）含量。制备同种异体脱钙骨支架，并复合各组rADSCs，计算细胞黏附率，扫描电子显微镜观察复合情况。结果rADSCs呈长梭形生长，G0／G1期占78．3％±4．2％，表面抗原CD44阳性表达。成骨诱导后茜素红染色及成脂诱导后油红O染色均为阳性。生长曲线示30μg／ml组第4-11天增殖能力较其他3组弱（P〈0．01），细胞凋亡示30μg／ml组凋亡率高于其他3组（P〈0．01），ALP检测示成骨诱导后第14天30μg／ml组ALP含量较其他3组少（P〈0．01），细胞黏附率示30μg／ml组较其他3组低（P〈0．01）。扫描电镜观察30μg／ml组黏附的细胞数量少，形态松散。结论不影响rADSCs增殖、成骨及黏附支架的RFP临界浓度约为20μg／ml。 展开更多

关键词 骨结核 脂肪干细胞 利福平

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核心结合因子过表达定向诱导脂肪组织来源干细胞体内、外成骨 被引量：1

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作者 张辛 敖英芳 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1061-1067,共7页

目的:探讨脂肪组织来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)和核心结合因子(Core Binding Factor Alpha 1,Cbfa1)的成骨潜能及其应用于基因增强的骨组织工程临床治疗的可能性。方法:利用重组了Cbfa1的腺病毒载体在ADSCs中过表达Cb... 目的:探讨脂肪组织来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)和核心结合因子(Core Binding Factor Alpha 1,Cbfa1)的成骨潜能及其应用于基因增强的骨组织工程临床治疗的可能性。方法:利用重组了Cbfa1的腺病毒载体在ADSCs中过表达Cbfa1。采用Realtime RT-PCR定量检测成骨特异性基因和成脂特异性基因的表达变化。同时采用Von Kossa染色观察Cbfa1过表达后21天ADSCs内钙盐的沉积情况。在体内实验中,裸鼠右下肢肌肉内注射Cbfa1基因修饰的脂肪来源干细胞,8周后,采用石蜡切片(HE和甲苯胺蓝染色)检测软骨和骨的生成情况。结果:Cbfa1转染后3天,ADSCs中检测到Cbfa1 RNA表达,及骨钙素、骨桥素、I型胶原表达,同时脂蛋白脂酶表达下降。Vocassa染色证明,转染Cbfa1后,ADSCs细胞基质中的钙盐沉积显著增加。体内实验8周后,注射Cbfa1基因修饰的脂肪来源干细胞的肌肉内有明显的软骨和骨组织形成。结论:Cbfa1过表达可定向诱导ADSCs体外钙盐沉积和体内成骨,可作为基因增强的骨组织工程中有潜力的治疗基因和载体细胞。 展开更多

关键词 脂肪组织来源干细胞 核心结合因子 成骨 CBFA1

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脂肪干细胞与碱性成纤维细胞生长因子在颗粒脂肪移植中应用的研究进展 被引量：8

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作者 孙哲 蒋爱梅 《医学综述》 2012年第15期2401-2403,共3页

自体移植颗粒脂肪的成活率受到再血管化及组织细胞分化不足等问题的影响,对脂肪组织来源干细胞(ASCs)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在自体颗粒脂肪移植中应用的研究中发现,两者能明显提高自体颗粒脂肪移植后的成活率。现广泛查阅近年A... 自体移植颗粒脂肪的成活率受到再血管化及组织细胞分化不足等问题的影响,对脂肪组织来源干细胞(ASCs)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在自体颗粒脂肪移植中应用的研究中发现,两者能明显提高自体颗粒脂肪移植后的成活率。现广泛查阅近年ASCs和bFGF在颗粒脂肪移植中作用的相关文献,并进行综合分析,探讨ASCs和bFGF在颗粒脂肪移植中的研究进展。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 碱性成纤维细胞生长因子 颗粒脂肪移植

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血管基质片段细胞携血管内皮生长因子对移植颗粒脂肪血管化的影响 被引量：7

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作者 李力群 高建华 +4 位作者 鲁峰 郑君达 何秋香 倪彬婷 潘盛盛 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期122-126,共5页

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）复合血管基质片段细胞（stromal vascular fraction cells，SVFs）细胞疗法对移植颗粒脂肪组织血管化的影响，寻找一种安全、有效、简单的细胞辅助脂肪移植术式... 目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）复合血管基质片段细胞（stromal vascular fraction cells，SVFs）细胞疗法对移植颗粒脂肪组织血管化的影响，寻找一种安全、有效、简单的细胞辅助脂肪移植术式。方法取患者植皮术后废弃的皮下脂肪，提取SVFs。用DiI染色观察SVFs染色标记情况，锥虫蓝染色观察SVFs活性。将0．3ml待移植的脂肪颗粒分别与0．2ml下列细胞混合：①复合有VEGF的SVFs（A组）；②SVFs（B组）；③DMEM完全培养基（c组）。按照随机化原则将3组脂肪组织混合物分别注射移植于裸鼠背部皮下，每只裸鼠背上注射3个点（共12只）。观察移植物外形、成活情况、湿重、直径，HE染色及CD31染色镜下观察并计数毛细血管密度。使用SPSS16．0进行方差分析检验。结果新鲜提取的SVFs可被Dil标记染色，加用VEGF仍能保持较好的细胞活性，移植术后2个月3组移植脂肪的湿重为：A组（191．90±9．81）mg、B组（177：01±10．50）mg、C组（92．05±8．30）mg，A组〉B组〉C组（P〈0．01）。移植物直径为：A组（0．49±0．24）cm、B组（0．40±0．26）cm、C组（0．32±-0．28）cm，A组〉B组〉C组（P〈0．01）。CD31染色镜下，每高倍镜视野微血管密度：A组（14．58±2．06）个、B组（11．55±2．18）个、C组（7．87±1．55）个，与B组和C组比较，A组较少见纤维结缔组织增生及坏死凋亡细胞。结论结合VEGF因子的SVFs辅助脂肪移植是一种临床可操作性强、简便可行的较理想的细胞疗法，比单纯SVFs更能有效地促进移植脂肪血管化。 展开更多

关键词 血管基质片段细胞 脂肪来源干细胞 脂肪移植 血管形成

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自体脂肪干细胞移植治疗2型糖尿病的安全性及有效性 被引量：7

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作者 张新 周玉红 白云 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1137-1141,共5页

目的探讨自体脂肪干细胞(ADSCs)移植治疗2型糖尿病的安全性和有效性。方法培养自体ADSCs,并进行鉴定。将2型糖尿病患者48例分为2组:A组(n=24)行ADSCs移植联合常规治疗,B组(n=24)行常规治疗。随访观察15个月,分析2组患者治疗时和治疗后3... 目的探讨自体脂肪干细胞(ADSCs)移植治疗2型糖尿病的安全性和有效性。方法培养自体ADSCs,并进行鉴定。将2型糖尿病患者48例分为2组:A组(n=24)行ADSCs移植联合常规治疗,B组(n=24)行常规治疗。随访观察15个月,分析2组患者治疗时和治疗后3、6、12、15个月的空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2h-PGh)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、空腹C肽(FC-P)、C肽曲线下面积(AUCC)、胰岛素剂量、不良反应的情况。结果培养的ADSCs符合自体临床应用标准。与治疗前相比,2组患者FPG、2h-PGh和Hb A1c都有明显降低,且A组降低更显著;A组在FC-P、AUCC和胰岛素用量方面的改善明显优于B组。在干细胞治疗过程中无明显不良反应。结论采用自体ADSCs移植可以安全有效地治疗2型糖尿病。 展开更多

关键词 2型糖尿病 自体脂肪干细胞 移植 安全性和有效性

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自体细胞辅助脂肪注射隆乳的手术配合 被引量：5

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作者 黄海玲 何金爱 +3 位作者 刘宏伟 佘文莉 刘晖 曹凤 《护士进修杂志》 2013年第8期742-744,共3页

由于假体隆乳手感差，取出率高，奥美定事件也给人们造成了很大伤害，作为软组织填充材料，具有生物相容性好，获取方便，来源丰富，不存在异体填充物或移植物可能引发的副作用和潜在的风险，成为目前较理想的注射充填材料。

关键词 脂肪移植 脂肪源性干细胞 抽脂术 护理

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不同方法诱导脂肪干细胞分化为类施万细胞 被引量：3

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作者 高嵩涛 邓展生 +2 位作者 郭晓柠 李宝军 张胜利 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期2966-2970,共5页

目的寻求一种有效的方法将脂肪干细胞在体外诱导分化为类施万细胞。方法采用2种不同的诱导剂使用方法诱导大鼠脂肪干细胞,从形态学、抗S-100、抗GFAP免疫细胞化学染色阳性率、染色灰度值,MTT法细胞活性测定来比较其效果的不同。结果2种... 目的寻求一种有效的方法将脂肪干细胞在体外诱导分化为类施万细胞。方法采用2种不同的诱导剂使用方法诱导大鼠脂肪干细胞,从形态学、抗S-100、抗GFAP免疫细胞化学染色阳性率、染色灰度值,MTT法细胞活性测定来比较其效果的不同。结果2种方法均可有效地诱导大鼠脂肪干细胞分化为类施万细胞,改良法诱导的细胞在形态上更接近施万细胞,抗S-100、抗GFAP阳性率、染色灰度值均优于传统法;MTT细胞活性测定显示改良法对细胞活性影响较小。结论改良法体外诱导大鼠脂肪干细胞的效果优于传统法。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 类施万细胞 MTT法

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脐血造血干/祖细胞与脂肪干细胞共培养的作用距离研究 被引量：1

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作者 宋克东 刘天庆 +7 位作者 武爽 郭文华 郝永杰 方美云 石芳鑫 朱丽丽 马学虎 崔占峰 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期809-815,共7页

设计了一种细胞间距可调的trans well共培养方法，以研究脐带血来源的造血干／祖细胞（HS／PCs）和人脂肪干细胞（human-adipose derived stem cells，h-ADSCs）体外共培养时细胞间作用距离对造血干细胞扩增能力和脂肪干细胞在共培养后... 设计了一种细胞间距可调的trans well共培养方法，以研究脐带血来源的造血干／祖细胞（HS／PCs）和人脂肪干细胞（human-adipose derived stem cells，h-ADSCs）体外共培养时细胞间作用距离对造血干细胞扩增能力和脂肪干细胞在共培养后干细胞特性的影响。采用不同规格的砂纸打磨孔板的上壁面，经高精度游标卡尺测量，使两种细胞之间的有效接触间距为10--450μm不等。然后以h-ADSCs为基质细胞，分别考察HS／PCs和h-ADSCs在不同的作用距离下的共培养情况。其间每24小时对细胞进行计数，观察细胞形态。培养7天后对MNCs表面抗原CD34＋、CFU-GM集落扩增倍数进行了检测；同时也对h．ADSCs表面抗原（CD13、CD29、CD34、CD44、CIM5、CD73、CD105、CD166、HLA-DR）及其多向分化潜能（成骨、成软骨、成脂肪）进行分析以鉴定其干细胞性能。结果表明，通过transwell共培养，细胞之间在作用距离为350gm时HS／PCs的扩增效果最好，其中造血MNCs扩增了15．1±0．2倍，CD34＋扩增了5．0±0．1倍：扩增的h-ADSCs表达CD29、CD44、CD166，而不表达CD34、CD45，且在适当诱导条件下可以向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 造血干 祖细胞 TRANSWELL 共培养 脐带血

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不同培养条件对人脂肪源性干细胞生长状态的影响 被引量：1

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作者 王鹏基 周六化 +3 位作者 陈赟 邱雪峰 杨斌 戴玉田 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1698-1700,共3页

目的观察不同培养条件对人脂肪源性干细胞（hADSCs）体外生长状态的影响。方法取腹部手术患者皮下脂肪组织，用0．1％的I型胶原酶消化法分离出hADSCs，将获得的细胞分别在以下3组培养条件下培养：高糖DMEM培养基、高糖DMEM培养基＋碱性... 目的观察不同培养条件对人脂肪源性干细胞（hADSCs）体外生长状态的影响。方法取腹部手术患者皮下脂肪组织，用0．1％的I型胶原酶消化法分离出hADSCs，将获得的细胞分别在以下3组培养条件下培养：高糖DMEM培养基、高糖DMEM培养基＋碱性成纤维生长因子（bFGF）、间充质干细胞培养基（MSCM）。取第2代或者第3代细胞进行以下实验：细胞免疫荧光及流式细胞仪行细胞表面标志物CD31、CD34和Stro-1鉴定；绘制细胞生长曲线观察3组细胞的生长状态；采用不同的培养条件对3组细胞进行体外培养，观察细胞的增殖。结果通过胶原酶消化法可成功地分离出hADSCs。流式细胞仪检测DMEM组CD31、CD34、Stro-1阳性率分别为0．9％、2．9％、56．7％；DMEM＋bFGF组CD31、CD34、Stro．1阳性率分别为1．3％、2．5％、73．5％；MSCM组CD31、CD34、Stro-1阳性率分别为0．7％、2．4％、84．5％。采用不同的培养条件对hADSCs进行培养，DMEM组、DMEM＋bFGF组、MSCM组细胞的倍增时间分别为93．7、64．5、49．1h，差异有统计学意义（P〈0．01）。此外，各组中所培养的细胞在MSCM和高糖DMEM＋bFGF的培养条件下的增殖速率明显高于高糖DMEM培养条件（P〈0．05）。结论采用MSCM培养hADSCs可以在短期内获得大量细胞，在传统的高糖DMEM培养基中加入bFGF后也可以获得相似的效果，可以满足组织工程研究的种子细胞数量的要求。 展开更多

关键词 脂肪源性干细胞 培养 组织工程

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过表达klotho基因的脂肪干细胞对糖尿病肾病大鼠肾脏的修复作用 被引量：1

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作者 王丹 倪伟民 房艳 《解剖科学进展》 2017年第3期297-300,共4页

目的探讨过表达Klotho基因的脂肪干细胞(ADMSCs)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的修复治疗作用。方法原代培养SD大鼠ADMSCs,Klotho过表达载体慢病毒感染ADMSCs,嘌呤霉素筛选,获得ADMSCs(Kl+),检测干细胞抗原表达特性。将细胞经尾静脉注射入D... 目的探讨过表达Klotho基因的脂肪干细胞(ADMSCs)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的修复治疗作用。方法原代培养SD大鼠ADMSCs,Klotho过表达载体慢病毒感染ADMSCs,嘌呤霉素筛选,获得ADMSCs(Kl+),检测干细胞抗原表达特性。将细胞经尾静脉注射入DN大鼠体内,移植6周检测指标:计算肌酐清除率和24 h尿蛋白量测定肾功,HE染色观察肾组织病理学变化,Western blotting检测肾脏Klotho及α-SMA,Vimentin,Collagen I纤维化蛋白的表达。结果ADMSCs(Kl+)具有间充质干细胞的形态和特性,注射入DN大鼠体内,肾脏功能明显改善,病理改变减轻,Klotho及α-SMA,Vimentin,Collagen I纤维化相关蛋白表达量明显下降,治疗效果明显优于单纯ADMSCs治疗组。结论过表达Klotho基因的ADMSCs对DN大鼠肾脏具有修复治疗作用,与下调纤维化相关蛋白表达相关。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 KLOTHO 糖尿病肾病 SD大鼠

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