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牦牛产志贺毒素大肠杆菌主要黏附因子相关基因的分子流行病学调查 被引量：6
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作者 宋定州 于学辉 +2 位作者 汤承 李键 冉丹丹 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期153-157,共5页
为了解中国牦牛产志贺毒素的大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)中主要黏附因子的流行情况,采用PCR方法对来自四川甘孜阿坝等地区健康牦牛的70株STEC的eae、saa、iha3种与黏附相关的毒力基因进行检测,并对部分含有... 为了解中国牦牛产志贺毒素的大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)中主要黏附因子的流行情况,采用PCR方法对来自四川甘孜阿坝等地区健康牦牛的70株STEC的eae、saa、iha3种与黏附相关的毒力基因进行检测,并对部分含有相关黏附因子的阳性分离株的毒力基因进行了克隆及序列分析。结果显示,牦牛STEC中saa、iha的阳性率分别为71.42%(50/70)和78.57%(55/70),无eae基因序列(0/70),saa、iha的测序结果与GenBank上序列的同源性分别为100%和93%～99%。健康牦牛分离的STEC无LEE毒力岛编码eae,其他的一些与黏附相关的主要毒力基因saa、iha的携带率较高。 展开更多
关键词 牦牛 产志贺毒素的大肠杆菌 黏附基因
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体外受精-胚胎移植对早期胎盘黏着斑激酶信号通路的影响
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作者 赵亮 孙丽芳 +7 位作者 郑秀丽 刘静芳 郑蓉 王颖 杨蕊 张蕾 于丽 张晗 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期151-158,共8页
目的:研究辅助生殖中体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)技术对早期胎盘滋养层细胞黏着斑激酶(focal adhension kinase,FAK)信号通路基因表达的影响,探讨IVF-ET技术对早期胎盘发育和功能的影响。方... 目的:研究辅助生殖中体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)技术对早期胎盘滋养层细胞黏着斑激酶(focal adhension kinase,FAK)信号通路基因表达的影响,探讨IVF-ET技术对早期胎盘发育和功能的影响。方法:收集IVF-ET来源的于7～8周经超声引导下减胎获得的胎盘绒毛组织作为研究组,对照组采用自然妊娠双胎7～8周人工流产术中获得的胎盘绒毛组织。利用美国Affymetrix HG-U133 Plus 2. 0基因芯片对两组胎盘绒毛组织进行芯片杂交分析,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证其中8个差异表达基因,选取差异表达基因进行无监督聚类分析和生物信息学分析。结果:获得4例IVF-ET减胎绒毛组织和4例自然妊娠人工流产绒毛组织进行基因芯片检测。与自然妊娠组相比,IVF-ET组FAK信号通路中有32个基因差异表达,差异表达倍数≥2,其中12个基因上调,20个基因下调。经qRT-PCR验证,IVF-ET与自然妊娠早期胎盘绒毛中的8个FAK信号通路基因表达确实存在差异,与基因芯片检测结果一致。FAK信号通路基因定位显示,IVF-ET来源胎盘绒毛组织FAK信号通路上游基因表达受到影响,胎盘滋养层细胞通过基因表达代偿维持FAK信号通路功能基本正常。结论:IVF-ET来源和自然妊娠来源的早期胎盘FAK信号通路存在基因表达差异,差异表达基因涉及多种FAK信号通路关键功能,影响IVF-ET胎盘绒毛早期发育和功能,同时胎盘滋养层细胞通过改变相关基因表达来代偿IVF-ET技术本身的干扰,以维持FAK信号通路正常功能,满足胎盘绒毛和胎儿发育需要。 展开更多
关键词 受精 体外 胚胎移植 滋养层 黏着斑激酶 基因表达
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神经细胞黏附因子L1结构与功能的关系
3
作者 潘新 王丽梅 +2 位作者 李静 路长林 耿美玉 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第2期149-155,共7页
目的获得重组神经细胞黏附因子L1(L1),研究其结构与功能的关系。方法通过RT-PCR方法,扩增出L1cDNA;构建原核表达pET28a+和真核表达pcDNA3.0载体;并构建L1胞外域不同结构基序的原核表达载体;将pET L1s转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株... 目的获得重组神经细胞黏附因子L1(L1),研究其结构与功能的关系。方法通过RT-PCR方法,扩增出L1cDNA;构建原核表达pET28a+和真核表达pcDNA3.0载体;并构建L1胞外域不同结构基序的原核表达载体;将pET L1s转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株BLL1s;将pcDNA3.0-L1真核表达质粒转染入PC12细胞中,筛选稳定表达L1的基因工程细胞株PC12-L;用原核表达的L1胞外不同结构域蛋白刺激PC12L1基因工程细胞,观察其分化情况。结果IgI-FN5胞外域I、g(Ⅰ-Ⅵ)免疫球蛋白样结构域和FN(1-5)纤连蛋白型Ⅲ重复序列均可明显促进PC12-L1细胞突起生长,具有生物学活性;Ig(Ⅴ-Ⅵ)也可促进PC12-L1细胞突起生长,但生物活性显著降低;FN(3-5)不能促进PC12-L1细胞突起生长,没有生物活性。结论L1分子胞外至少有2个结构域Ig(Ⅰ-Ⅵ)和FN(1-5)可显著促进PC12-L1细胞的突起生长,对L1分子生物活性的维持必不可少;胞外免疫球蛋白结构域Ig(Ⅴ-Ⅵ)对维持L1分子的生物活性不十分重要;纤连蛋白型Ⅲ重复序列结构域FN(3-5)对维持L1分子的生物活性不重要。 展开更多
关键词 神经细胞黏附因子L1 基因表达 细胞转染 PC12细胞
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人细胞间粘附分子1基因功能区Ⅰ、Ⅱ的克隆及高效表达
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作者 孔红 董震 +6 位作者 杨占泉 卜国铉 孟锐奇 朱平 刘晓明 姚湘燕 柳增善 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期257-259,共3页
用ＰＣＲ聚合酶链反应技术从人细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）ｃＤＮＡ中获取了其编码细胞外氨基端功能区Ⅰ、Ⅱ１８５个氨基酸的ＤＮＡ序列，构建了重组质粒ｐＥＴ／ｒｓＩＣＡＭ１。经转化宿主菌，通过ＳＤＳＰＡＧＥ，薄层扫描和Ｗ... 用ＰＣＲ聚合酶链反应技术从人细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）ｃＤＮＡ中获取了其编码细胞外氨基端功能区Ⅰ、Ⅱ１８５个氨基酸的ＤＮＡ序列，构建了重组质粒ｐＥＴ／ｒｓＩＣＡＭ１。经转化宿主菌，通过ＳＤＳＰＡＧＥ，薄层扫描和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ。 展开更多
关键词 细胞间粘附分子 克隆 基因表达 ICAM-1
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