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大肠杆菌的耐酸机制及其改造研究进展 被引量:1
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作者 郝雪雁 刘梦晓 +2 位作者 韩紫依 房立霞 曹英秀 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4667-4680,共14页
微生物细胞在自然环境或工业应用中经常受到酸胁迫,严重制约细胞生长性能和产物合成效率。为了在各种酸性环境中生存,耐酸细菌发展出多种保护机制来维持细胞内pH稳态,如氢离子消耗、细胞膜保护、代谢修饰等。因此,深入研究耐酸机制、改... 微生物细胞在自然环境或工业应用中经常受到酸胁迫,严重制约细胞生长性能和产物合成效率。为了在各种酸性环境中生存,耐酸细菌发展出多种保护机制来维持细胞内pH稳态,如氢离子消耗、细胞膜保护、代谢修饰等。因此,深入研究耐酸机制、改进菌株耐酸能力对于利用微生物发酵合成高附加值产品具有重要意义。作为模式微生物,大肠杆菌耐酸机制的研究较为透彻,近年来其耐酸性改造也取得了重大进展。本文主要总结了大肠杆菌的氧化或葡萄糖抑制系统(acid resistance system 1,AR1)、谷氨酸依赖型耐酸系统(acid resistance system 2,AR2)、精氨酸依赖型耐酸系统(acid resistance system 3,AR3)、赖氨酸依赖型耐酸系统(acid resistance system 4,AR4)和鸟氨酸依赖型耐酸系统(acid resistance system 5,AR5)、细胞膜保护以及生物大分子修复等方面的耐酸机制,并概述了利用传统代谢工程、全局转录工程和适应性实验室进化等方法构建大肠杆菌耐酸菌株的研究进展,同时展望了大肠杆菌耐酸机制及其改造的后续研究方向。 展开更多
关键词 大肠杆菌 耐酸系统 细胞膜保护 生物大分子修复 菌株改造
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通过耐酸性改造在昆虫细胞中组装FMDV空衣壳结构 被引量:1
2
作者 曹轶梅 卢曾军 +3 位作者 孙甲川 孙普 郭建宏 刘在新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期1069-1077,共9页
【目的】口蹄疫病毒(FMDV)对酸很敏感,当pH值低于7时,二十面体对称的衣壳结构就会裂解成12S的五聚体。而昆虫细胞培养基的正常pH值在6.3左右,很难应用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中组装天然的FMDV空衣壳结构。本研究旨在通过耐酸性改造... 【目的】口蹄疫病毒(FMDV)对酸很敏感,当pH值低于7时,二十面体对称的衣壳结构就会裂解成12S的五聚体。而昆虫细胞培养基的正常pH值在6.3左右,很难应用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中组装天然的FMDV空衣壳结构。本研究旨在通过耐酸性改造,应用杆状病毒表达载体在昆虫细胞中组装产生AsiaⅠ型FMDV空衣壳结构。【方法】应用定点突变技术改变VP3上的H140和H143为亮氨酸,以提高空衣壳对酸的耐受性。将改造和未改造的P12A基因和3C基因插入带双启动子的杆状病毒转移载体pFastBacTM Dual中,通过在大肠杆菌内转座重组,获得重组杆粒,转染Sf9细胞,获得两株表达FMDV全衣壳蛋白的重组杆状病毒BacmP12A3C和BacP12A3C。重组杆状病毒经增殖后感染High FiveTM细胞,进行目的蛋白的表达。【结果】通过Western blotting检测表明目的基因均获得表达,且衣壳蛋白被3C蛋白酶成功地加工裂解。双抗体夹心ELISA和免疫荧光检测结果表明表达蛋白主要集中在细胞膜上,且具有很好的抗原性。通过电镜观察到P12A基因改造的重组杆状病毒在昆虫细胞内产生了直径为25~30nm的空衣壳结构,而P12A基因未改造的重组杆状病毒观察到很多直径小得多的结构。【结论】本研究首次用电子显微镜在昆虫细胞中观察到FMDV完整的空衣壳结构,为基因工程亚单位疫苗和新型诊断试剂的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 FMDV 耐酸性改造 昆虫细胞 组装 空衣壳结构
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延长耐腐蚀不锈钢泵整机运行寿命的实践 被引量:1
3
作者 余旭 《湖南冶金》 2005年第3期27-29,共3页
通过实践摸索泵的泄漏、振动及泵综合使用性能和关键部件的寿命、底座寿命与整机完好运行时间的内在联系,试图寻找一种合理经济的耐腐蚀不锈钢底座及泵身材质,以期延长ZA200—315A型及HC200—250A型不锈钢耐酸泵的整机运行寿命。实践表... 通过实践摸索泵的泄漏、振动及泵综合使用性能和关键部件的寿命、底座寿命与整机完好运行时间的内在联系,试图寻找一种合理经济的耐腐蚀不锈钢底座及泵身材质,以期延长ZA200—315A型及HC200—250A型不锈钢耐酸泵的整机运行寿命。实践表明,经技术改进后的钢泵,其寿命均有很大程度的提高。 展开更多
关键词 不锈钢耐酸泵 关键部件 底座 改进
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