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酿酒酵母类丙酮酸脱羧酶基因缺失对高级醇生成量的影响
被引量：
12
1
作者
郝欣
肖冬光
张翠英
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期1030-1035,共6页
【目的】通过构建酿酒酵母类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失的工程菌株,研究该基因对酿酒酵母浓醪发酵产高级醇特别是异戊醇的影响。【方法】以酿酒酵母工业菌株AY-15的单倍体a-8或α-22的基因组DNA为模板,PCR分别扩增YDL080C上下游非...
【目的】通过构建酿酒酵母类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失的工程菌株,研究该基因对酿酒酵母浓醪发酵产高级醇特别是异戊醇的影响。【方法】以酿酒酵母工业菌株AY-15的单倍体a-8或α-22的基因组DNA为模板,PCR分别扩增YDL080C上下游非编码区片段YA和YB;以pUG6质粒为模板,PCR扩增KanMX抗性基因片段。分别将YA、YB和KanMX片段连入pUC19载体,构建重组质粒pUC-YABK;并以其为模板,PCR扩增YA-KanMX-YB重组盒,分别电转化单倍体a-8和α-22。将转化子和亲本分别进行酒精浓醪发酵,发酵结束后测定其发酵性能和高级醇的生成量。【结果】筛选获得了YDL080C基因缺失突变株。酒精发酵后发酵性能和高级醇测定结果显示,转化子的异戊醇及总高级醇生成量与对应的单倍体亲本相比没有明显变化,但酒精度分别比亲本提高了0.6(%,v/v)和0.4(%,v/v)。【结论】YDL080C基因缺失对降低酿酒酵母发酵产高级醇特别是异戊醇没有明显作用,但会使酒精度有所提高。
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关键词
酿酒酵母
类丙酮酸脱羧酶
类丙酮酸脱羧酶基因(
ydl
080
c
)
高级醇
原文传递
YDL080C和LEU2基因敲除对工业黄酒酵母异戊醇生成量的影响
被引量：
9
2
作者
李童
孙军勇
+3 位作者
吴殿辉
李晓敏
谢广发
陆健
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第15期189-193,共5页
通过敲除生成途径中关键酶的编码基因,对异戊醇在工业黄酒酵母N85中的生成进行了研究。采用融合PCR技术,分别构建类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失组件"YDL080C-URA3-YDL080C"和β-异丙基苹果酸脱氢酶基因(LEU2)缺失组件"...
通过敲除生成途径中关键酶的编码基因,对异戊醇在工业黄酒酵母N85中的生成进行了研究。采用融合PCR技术,分别构建类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失组件"YDL080C-URA3-YDL080C"和β-异丙基苹果酸脱氢酶基因(LEU2)缺失组件"LEU2-URA3-LEU2",转化工业黄酒酵母N85尿嘧啶缺陷型单倍体Na-u(MATa ura3),获得单倍体工程菌Na-y和Na-l。将转化子与亲本分别进行实验室规模的黄酒发酵实验,结果 YDL080C缺失工程菌的异戊醇含量与亲本相比没有明显变化,说明类丙酮酸脱羧酶不是该途径关键酶;LEU2缺失工程菌的异戊醇含量降低16.16%,说明糖代谢途径存在,但只占小部分,而其他理化指标无明显差异。
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关键词
异戊醇
工业黄酒酵母
类丙酮酸脱羧酶基因
β-异丙基苹果酸脱氢酶基因
基因敲除
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职称材料
题名
酿酒酵母类丙酮酸脱羧酶基因缺失对高级醇生成量的影响
被引量：
12
1
作者
郝欣
肖冬光
张翠英
机构
工业微生物教育部重点实验室
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期1030-1035,共6页
基金
国家"863计划"(2006AA020101)
天津科技大学科学研究基金项目(20050412)~~
文摘
【目的】通过构建酿酒酵母类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失的工程菌株,研究该基因对酿酒酵母浓醪发酵产高级醇特别是异戊醇的影响。【方法】以酿酒酵母工业菌株AY-15的单倍体a-8或α-22的基因组DNA为模板,PCR分别扩增YDL080C上下游非编码区片段YA和YB;以pUG6质粒为模板,PCR扩增KanMX抗性基因片段。分别将YA、YB和KanMX片段连入pUC19载体,构建重组质粒pUC-YABK;并以其为模板,PCR扩增YA-KanMX-YB重组盒,分别电转化单倍体a-8和α-22。将转化子和亲本分别进行酒精浓醪发酵,发酵结束后测定其发酵性能和高级醇的生成量。【结果】筛选获得了YDL080C基因缺失突变株。酒精发酵后发酵性能和高级醇测定结果显示,转化子的异戊醇及总高级醇生成量与对应的单倍体亲本相比没有明显变化,但酒精度分别比亲本提高了0.6(%,v/v)和0.4(%,v/v)。【结论】YDL080C基因缺失对降低酿酒酵母发酵产高级醇特别是异戊醇没有明显作用,但会使酒精度有所提高。
关键词
酿酒酵母
类丙酮酸脱羧酶
类丙酮酸脱羧酶基因(
ydl
080
c
)
高级醇
Keywords
Sa
c
c
haromy
c
es
c
erevisiae
pyruvate
de
c
arboxylase-like
enzyme
ydl
080
c
gene
higher
al
c
ohols
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
YDL080C和LEU2基因敲除对工业黄酒酵母异戊醇生成量的影响
被引量：
9
2
作者
李童
孙军勇
吴殿辉
李晓敏
谢广发
陆健
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
江南大学生物工程学院
中国绍兴黄酒集团有限公司国家黄酒工程技术研究中心
宿迁市江南大学产业技术研究院
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第15期189-193,共5页
基金
食品加工过程安全控制的关键科学问题
973项目(2012CB720802)
+7 种基金
工业生物过程高效转化与系统集成的科学基础研究
973项目(2013CB733602)
安全食品精深加工科技创新平台建设(2012B091400030)
食品发酵过程酿酒酵母氮代谢物阻遏效应形成机制及其调控
国家自然科学基金重点项目(31130043)
江苏高校优势学科建设工程资助项目
高等学校学科创新引智计划(111计划)资助项目(111-2-06)
江南大学工业生物技术教育部重点实验室开放课题(KLIB-KF201308)
文摘
通过敲除生成途径中关键酶的编码基因,对异戊醇在工业黄酒酵母N85中的生成进行了研究。采用融合PCR技术,分别构建类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失组件"YDL080C-URA3-YDL080C"和β-异丙基苹果酸脱氢酶基因(LEU2)缺失组件"LEU2-URA3-LEU2",转化工业黄酒酵母N85尿嘧啶缺陷型单倍体Na-u(MATa ura3),获得单倍体工程菌Na-y和Na-l。将转化子与亲本分别进行实验室规模的黄酒发酵实验,结果 YDL080C缺失工程菌的异戊醇含量与亲本相比没有明显变化,说明类丙酮酸脱羧酶不是该途径关键酶;LEU2缺失工程菌的异戊醇含量降低16.16%,说明糖代谢途径存在,但只占小部分,而其他理化指标无明显差异。
关键词
异戊醇
工业黄酒酵母
类丙酮酸脱羧酶基因
β-异丙基苹果酸脱氢酶基因
基因敲除
Keywords
isoamyl
al
c
ohol
industrial
ri
c
e
wine
Sa
c
c
haromy
c
es
c
erevisiae
ydl
080
c
gene
LEU2
gene
gene
kno
c
kout
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
酿酒酵母类丙酮酸脱羧酶基因缺失对高级醇生成量的影响
郝欣
肖冬光
张翠英
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
12
原文传递
2
YDL080C和LEU2基因敲除对工业黄酒酵母异戊醇生成量的影响
李童
孙军勇
吴殿辉
李晓敏
谢广发
陆健
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2015
9
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职称材料
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