survivin、XIAP在骨髓增生异常综合征患者及其细胞株MUTZ-1中的表达及意义 被引量：18

1

作者 蔡真 包悍英 +1 位作者 Wolf-Dieter Ludwig Christian Wuchter 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期26-30,共5页

目的　研究骨髓增生异常综合征 (MDS)患者及MDS RAEB细胞株MUTZ 1凋亡蛋白抑制因子survivin、XIAP的表达和高三尖杉酯碱 (HHT)诱导MUTZ 1细胞凋亡的作用机制。方法　以 4 7例初发MDS患者及 15名异基因骨髓移植志愿供者为研究对象 ,应用R... 目的　研究骨髓增生异常综合征 (MDS)患者及MDS RAEB细胞株MUTZ 1凋亡蛋白抑制因子survivin、XIAP的表达和高三尖杉酯碱 (HHT)诱导MUTZ 1细胞凋亡的作用机制。方法　以 4 7例初发MDS患者及 15名异基因骨髓移植志愿供者为研究对象 ,应用RT PCR方法检测survivin、XIAPmRNA表达 ;采用流式细胞术分析MDS RAEB细胞系MUTZ 1细胞凋亡和细胞周期变化 ,RT PCR技术检测survivin、XIAP在MUTZ 1中的表达 ;研究survivin反义寡脱氧核苷酸 (AS ODN)和HHT对细胞增殖、凋亡的影响。结果　MDS患者survivinmRNA总阳性率高于正常对照组 (分别为 38.3%和 0 ,P <0 .0 1) ,高危组 (RAEB、RAEB t、CMML)阳性率高于低危组 (分别为 5 3.6 %和 16 .7% ,P <0 .0 5 )。MDS患者及正常对照均表达XIAP ,但表达水平不同 ,其中低危组XIAPmRNA(0 .74± 0 .2 4 )低于正常对照组 (1.0 1±0 2 8) (P <0 .0 5 ) ,高危组XIAPmRNA表达 (1.5 5± 0 .34)高于低危组及正常对照组 (P值均 <0 .0 1)。HHT能诱导MUTZ 1细胞凋亡 ,凋亡率与作用浓度和时间呈正相关 ,细胞被阻滞在G2 期 ;HHT作用MUTZ 1细胞 6h后细胞内survivin表达下调 ,而XIAP表达无明显变化。survivinAS ODN能明显抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡 ,并提高MUTZ 1细胞对HHT的敏感性。结论　凋亡? 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 MUTZ-1细胞株 细胞凋亡 SURVIVIN基因 xiap基因 三尖杉酯碱 细胞培养

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葛根素对脑缺血诱导神经细胞凋亡的保护作用 被引量：18

2

作者 徐晓虹 陈瑜 郑筱祥 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期1628-1631,共4页

目的探讨葛根素(puerarin,Pur)对脑缺血诱导神经细胞凋亡和凋亡蛋白抑制剂XIAP表达的影响。方法SD大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)的同时ip50,100mg.kg-1Pur,MCAO50min后再灌注24h,用TTC染色法、Annexin-V和PI双荧光标记结合流式细胞检测法、... 目的探讨葛根素(puerarin,Pur)对脑缺血诱导神经细胞凋亡和凋亡蛋白抑制剂XIAP表达的影响。方法SD大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)的同时ip50,100mg.kg-1Pur,MCAO50min后再灌注24h,用TTC染色法、Annexin-V和PI双荧光标记结合流式细胞检测法、半定量RT-PCR等技术分别检测大鼠脑水肿、梗死体积、细胞凋亡和坏死率、caspase-3活性、XIAPmRNA表达。结果Pur(100mg.kg-1)明显缓解缺血引起的脑水肿和神经行为障碍(P<0.05);减少脑梗死体积,以皮层尤其显著(P<0.01)。Pur(100mg.kg-1)还显著降低背外侧皮层的细胞凋亡和坏死率,抑制caspase-3活性,逆转缺血诱导的XIAPmRNA表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论Pur通过调节神经细胞XIAPmRNA表达,抑制细胞凋亡而保护缺血性脑损伤。 展开更多

关键词 葛根素 脑缺血 细胞凋亡 CASPASE-3活性 xiap基因

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PTEN基因对慢性粒细胞白血病Survivin、Xiap、Smac调控的研究 被引量：13

3

作者 成志勇 万建设 +5 位作者 王亚丽 梁丽青 梁文同 穆敬 芦希 潘崚 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第40期2868-2872,共5页

目的探讨肿瘤抑制基因PTEN对人慢性粒细胞白血病（CML）中生存素（Survivin）、X连锁凋亡抑制蛋白（Xiap）、线粒体促凋亡蛋白（Smae）调控的作用。方法（1）将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-PTEN—GFP）及对照载体腺病毒... 目的探讨肿瘤抑制基因PTEN对人慢性粒细胞白血病（CML）中生存素（Survivin）、X连锁凋亡抑制蛋白（Xiap）、线粒体促凋亡蛋白（Smae）调控的作用。方法（1）将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-PTEN—GFP）及对照载体腺病毒（Ad—GFP）转染人慢性粒细胞白血病细胞系K562，四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞增殖抑制率；流式细胞仪检测转染效率、细胞周期及凋亡率；荧光定量PCR（FQ-PCR）检测PTEN、Survivin、Xiap、Smacm RNA水平变化，Western印迹检测PTEN蛋白表达水平的变化。（2）研究10例慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）、10例慢性粒细胞白血病急变期（CML-BC）及10名健康人（NC）骨髓单个核细胞内PTEN、Survivin、Xiap、Smac mRNA表达水平变化。结果以感染复数（MOI）=200转染K562细胞后，Ad—PTEN-GFP组K562细胞最大增殖抑制率为38．6％，转染3d后Ad—PTEN—GFP组K562细胞内Survivin、Xiap、Smac mRNA表达水平（0．0700±0．0059、0．0089±0．0006、0．0600±0．0039）均明显低于Ad-GPF组（0．4370±0．0790、0．0661±0．0072、0．1580±0．0078）和未转染组（0．4530±0．0810、0．0700±0．0079、0．1770±0．0085）。转染Ad—PTEN—GFP组与转染Ad—GFP相比Survivin mRNA表达水平降低6．14倍、Xiap降低7．44倍，而Smac mRNA降低2．95倍（均P〈0．01）。CML—BC患者中PTEN mRNA表达水平低于CML-CP及健康对照组，而Survivin、Xiap、Smac mRNA在CML—BC患者中均高于CML—CP及健康对照组（均P〈0．01）。结论Survivin、Xiap、Smac基因可能在PTEN介导的慢性粒细胞白血病细胞凋亡通路中参与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 白血病 基因 肿瘤抑制 PTEN基因 SURVIVIN xiap SMAC

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以化脓性脑膜脑炎起病的X连锁淋巴组织增生综合征-2型临床特征及遗传学分析

4

作者 王以琳 孙琪 +4 位作者 钱卓 李京月 梅世月 郑璇 金志鹏 《中国优生与遗传杂志》 2024年第1期125-130,共6页

目的探讨1例以中枢神经系统感染起病的早发型XIAP基因突变患儿临床资料,总结X连锁淋巴组织增生综合征-2型(XLP-2)临床表型及基因变异特征,为类似疾病诊治提供依据。方法收集郑州大学附属儿童医院收治的1例以化脓性脑膜脑炎起病XLP-2患... 目的探讨1例以中枢神经系统感染起病的早发型XIAP基因突变患儿临床资料,总结X连锁淋巴组织增生综合征-2型(XLP-2)临床表型及基因变异特征,为类似疾病诊治提供依据。方法收集郑州大学附属儿童医院收治的1例以化脓性脑膜脑炎起病XLP-2患儿临床资料,采用家系全外显子基因测序,一代测序法进行验证。结合相应文献进行临床及遗传学分析。结果先证者,男,10月10 d,临床特征表现为发热、抽搐,治疗第45天出现高级抗生素难以控制的发热,伴三系低、凝血功能异常、铁蛋白异常升高,NK细胞活性及sCD25升高,骨髓涂片可见噬血现象,诊断噬血细胞性淋巴组织细胞增多症(HLH),全外显子组基因检测结果示患儿XIAP基因存在移码突变c.921_924delAACT(p.T308fs*23),其父母及哥哥均为野生型,该位点为新发突变,国内未见报道。复习相关文献XIAP基因缺陷临床不局限于HLH、炎症性肠病(IBD),也可表现为感染、肝病、发热、低丙种球蛋白血症、HLH非依赖性脾肿大、皮肤表现和自身免疫性疾病等。结论XIAP基因缺陷是本患儿难治性脑膜脑炎、HLH遗传学基础。XLP-2临床特征广泛,无明确表型与基因型相关性,诊断该病的客观标准包括家族史、临床表现以及免疫学和分子遗传学检查,而遗传基因的检查对确诊起着至关重要的作用。 展开更多

关键词 X连锁淋巴组织增生综合征2型 XLP-2 xiap基因 BIRC4基因 化脓性脑膜脑炎

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siRNA沉默X连锁凋亡抑制蛋白基因逆转人耐紫杉醇卵巢癌细胞耐药性的体内研究 被引量：6

5

作者 李冉红 岳驰 +2 位作者 魏宝宝 刘娟 刘辉 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期320-324,共5页

目的探究小干扰RNA(siRNA)沉默X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因表达对人耐紫杉醇卵巢癌细胞耐药性的逆转。方法36只BALB/C-nu雌性裸鼠皮下接种人耐紫杉醇卵巢癌细胞株A2780/T,建立耐紫杉醇卵巢癌裸鼠移植瘤模型,再随机分为6组(每组6只),A组... 目的探究小干扰RNA(siRNA)沉默X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因表达对人耐紫杉醇卵巢癌细胞耐药性的逆转。方法36只BALB/C-nu雌性裸鼠皮下接种人耐紫杉醇卵巢癌细胞株A2780/T,建立耐紫杉醇卵巢癌裸鼠移植瘤模型,再随机分为6组(每组6只),A组:生理盐水组;B组:紫杉醇组;C组:siRNA-阴性对照(siRNA-NC)+生理盐水组;D组:siRNA-NC+紫杉醇组;E组:siRNA-XIAP+生理盐水组;F组:siRNA-XIAP+紫杉醇组。待接种处形成粟粒大小的移植瘤时,C^F组于瘤体处注射siRNA-XIAP或siRNA-NC,注射剂量为每次每只裸鼠10μg,每3 d注射1次,共注射9次。在D、F组第1次siRNA干扰后开始按裸鼠体质量给予2 mg/kg紫杉醇(C、E组注射生理盐水),每周1次,0.2 mL/次,腹腔内注射,共注射4次。A、B组不给予siRNA干扰,只进行紫杉醇或者生理盐水腹腔注射。siRNA处理27 d后处死裸鼠,取出瘤体测质量,计算抑瘤率;采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测各组移植瘤细胞中XIAP的基因和蛋白表达水平;TUNEL法检测各组移植瘤细胞的凋亡情况。结果转染阴性对照序列的生理盐水治疗(C组)抑瘤率最低、肿瘤质量最高、治疗效果最差,仅使用紫杉醇治疗(B组)、仅转染阴性对照序列的紫杉醇治疗组(D组)、仅沉默XIAP而不使用紫杉醇治疗(E组)三者效果相当,沉默XIAP且使用紫杉醇治疗组(F组)抑瘤率最高,治疗效果最好(P<0.05)。沉默XIAP后,F组与E组XIAP的基因和蛋白表达低于A^D组(P<0.05)。细胞凋亡指数:F组最高,A组及C组最低(P<0.05)。结论XIAP的沉默可逆转人耐紫杉醇卵巢癌细胞的耐药,增强紫杉醇的治疗效果。 展开更多

关键词 xiap基因 移植瘤 卵巢癌 siRNA 紫杉醇耐药

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XIAP基因在慢性髓系白血病中的表达及临床意义 被引量：5

6

作者 王术国 管洪在 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期321-323,共3页

本研究旨在检测慢性髓系白血病(CML)患者XIAP基因mRNA的表达情况,以探讨其在CML病情进展及预后中的意义。应用染色体R显带技术及实时PCR技术对71例CML患者和10名健康者进行染色体核型分析及XIAP mRNA检测。结果表明,XIAP mRNA在CML的加... 本研究旨在检测慢性髓系白血病(CML)患者XIAP基因mRNA的表达情况,以探讨其在CML病情进展及预后中的意义。应用染色体R显带技术及实时PCR技术对71例CML患者和10名健康者进行染色体核型分析及XIAP mRNA检测。结果表明,XIAP mRNA在CML的加速期和急变期的平均表达水平明显高于慢性期(p<0.01)。XIAP基因在不同核型组的平均表达水平无显著性差异。结论:CML患者加速期和急变期XIAP基因表达明显增高,XIAP基因与CML的病情进展密切相关。 展开更多

关键词 慢性髓系白血病 xiap基因 基因表达

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转染XIAP基因对丝裂霉素诱导膀胱癌细胞凋亡的影响 被引量：5

7

作者 汪良 曾甫清 +1 位作者 陈方敏 刘迎 《临床泌尿外科杂志》 2004年第4期226-228,共3页

目的 :探讨XIAP基因对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导膀胱癌细胞凋亡的影响。方法 :脂质体介导XIAP基因转染膀胱癌T2 4细胞 3天后 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测XIAP基因的表达 ,用低剂量MMC诱导细胞凋亡启动 ,用MTT比色法分析检测癌... 目的 :探讨XIAP基因对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导膀胱癌细胞凋亡的影响。方法 :脂质体介导XIAP基因转染膀胱癌T2 4细胞 3天后 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测XIAP基因的表达 ,用低剂量MMC诱导细胞凋亡启动 ,用MTT比色法分析检测癌细胞生长活性 ,用 3’末端脱氧核苷酰转移酶介导生物素标记法检测细胞凋亡率。结果 :各组癌细胞在低剂量MMC的诱导下发生凋亡 ,与单用MMC组比较 ,转染XIAP基因的癌细胞组的凋亡率显著降低。结论 :XIAP基因在癌细胞中的过度表达可以明显降低化疗药物诱导的膀胱癌细胞凋亡 ,其可能在膀胱癌多药耐药中起一定作用。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 xiap基因 丝裂霉素C 细胞凋亡

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XIAP基因对食管癌细胞黏附、侵袭和迁移能力的影响 被引量：4

8

作者 杜芳 侯晓东 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第17期2939-2942,共4页

目的:探讨沉默X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因表达对食管癌细胞黏附、侵袭和迁移能力的影响及机制。方法:参照LipofectamineTM2000说明将设计合成的XIAP特异性siRNA(si-XIAP)转染人食管癌EC9706细胞,将转染阴性对照siRNA(NC组)和仅加入脂... 目的:探讨沉默X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因表达对食管癌细胞黏附、侵袭和迁移能力的影响及机制。方法:参照LipofectamineTM2000说明将设计合成的XIAP特异性siRNA(si-XIAP)转染人食管癌EC9706细胞,将转染阴性对照siRNA(NC组)和仅加入脂质体的空白细胞作为两个对照组,siRNA转染48 h,通过Western blotting检测XIAP、AKT、p-AKT、E-cadherin和MMP-2蛋白表达;通过MTT法、Transwell法分别检测细胞黏附、侵袭和迁移能力;MTT法检测转染siRNA后24 h、48 h和72 h的细胞增殖。结果:XIAP特异性siRNA转染后,EC9706细胞XIAP表达明显降低,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,si-XIAP组细胞增殖明显降低,黏附率明显升高,侵袭和迁移能力明显降低,p-AKT和MMP-2表达明显降低,E-cadherin表达明显升高(P<0.05)。结论:沉默XIAP基因可增强食管癌细胞黏附率,抑制侵袭和迁移能力,机制与抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 食管癌 xiap基因 黏附 侵袭迁移 PI3K/AKT信号通路

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凋亡抑制蛋白XIAP的研究进展 被引量：2

9

作者 李庆霞 杨安钢 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期113-115,共3页

XIAP是IAP家族中抑制细胞凋亡的最主要成员,本文总结了近年来对XIAP结构与功能的研究进展,基本明确了XIAP与caspase3、7、9的作用方式及其自身的调节方式,探讨了XIAP的抗凋亡机制,及其信号分子作用和在凋亡相关疾病中潜在的治疗价值。

关键词 xiap 细胞凋亡 基因治疗

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XIAP基因在乳腺癌发生及发展过程中的表达及意义 被引量：2

10

作者 张颖超 王禹 +1 位作者 姜洋 关文曾 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期915-917,共3页

目的:探讨XIAP基因在乳腺癌发生和发展中的作用。方法:采用免疫组化S-P法检测正常乳腺组织(96例)、乳腺囊性增生组织(56例)、乳腺不典型增生组织(12例)及乳腺癌组织(119例)中XIAP蛋白的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果:X... 目的:探讨XIAP基因在乳腺癌发生和发展中的作用。方法:采用免疫组化S-P法检测正常乳腺组织(96例)、乳腺囊性增生组织(56例)、乳腺不典型增生组织(12例)及乳腺癌组织(119例)中XIAP蛋白的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果:XIAP蛋白在正常乳腺组织、乳腺囊性增生组织、乳腺不典型增生组织及癌组织中的阳性率分别为4.2%(4/96)、5.4%(3/56)、42.7%(5/12)和72.2%(86/119),后两者的阳性表达率明显高于前两者(P<0.005);浸润性非特殊型乳腺癌XIAP蛋白阳性率(82.0%,73/89)明显高于浸润性特殊型乳腺癌(45.4%,10/22)和早期浸润性乳腺癌(37.5%,3/8)(P<0.05);XIAP蛋白表达在有淋巴结转移的乳腺癌中有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05)。结论:XIAP蛋白在乳腺癌发生、发展不同阶段呈不同程度的表达,过度表达提示预后不良。 展开更多

关键词 xiap基因 乳腺肿瘤 免疫组织化学

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下调XIAP表达增强化疗药物诱导胃癌细胞凋亡的作用 被引量：2

11

作者 郑丽端 童强松 +2 位作者 汪良 董继华 侯晓华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第29期3067-3073,共7页

目的:观察下调X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因表达对胃癌细胞化疗敏感性的影响.方法:构建XIAP基因反义真核表达载体,稳定转染胃癌细胞株MKN-45,RT-PCR和Western blot法检测癌细胞XIAP基因表达.选用顺铂、丝裂霉素分别处理转染前后的胃癌细... 目的:观察下调X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因表达对胃癌细胞化疗敏感性的影响.方法:构建XIAP基因反义真核表达载体,稳定转染胃癌细胞株MKN-45,RT-PCR和Western blot法检测癌细胞XIAP基因表达.选用顺铂、丝裂霉素分别处理转染前后的胃癌细胞,采用MTT比色法、克隆形成抑制实验检测癌细胞体外生长活性:透射电镜、流式细胞术、TUNEL检测癌细胞凋亡及比率;Western blot和比色法检测细胞内caspase-3蛋白表达和活性水平.结果:RT-PCR和Western blot证实,稳定转染反义XIAP基因的胃癌细胞MKN-45的XIAP mRNA和蛋白表达水平分别降低84.75%(P<0.01)和89.75%(P<0.01),各浓度顺铂、丝裂霉素处理24 h后,转染反义XIAP基因的MKN-45细胞生长抑制率分别增加7.3%-25.3%(P<0.01),12.3%-16.3%(P<0.01).透射电镜下可见部分细胞发生典型的凋亡形态学改变,凋亡率分别为34.12%和32.5%,显著高于未转染对照组MKN-45细胞的凋亡率(14.2%,P<0.05).与MKN-45细胞比较,稳定转染反义XIAP基因的MKN-45细胞内caspase-3表达水平增高2.45倍(P<0.01),活性水平提高3.68倍(P<0.0 1).结论:通过反义RNA技术下调XIAP基因表达,能提高癌细胞中caspase-3的表达和活性,增强化疗药物对癌细胞的诱导凋亡作用. 展开更多

关键词 胃癌 xiap基因 反义RNA 基因表达 细胞凋亡

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MTA1和XIAP的表达与前列腺癌转移及预后的关系 被引量：2

12

作者 赵朋 卢炳新 +1 位作者 白铁男 马成泉 《天津医科大学学报》 2019年第3期260-263,共4页

目的:探讨MTA1和XIAP蛋白表达与前列腺癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用免疫组化技术检测53例前列腺癌(PCa)和20例前列腺增生(BPH)组织中MTA1和XIAP蛋白表达,并结合肿瘤的病理学行为和临床随访资料进行分析。结果:在PCa组织中MTA1... 目的:探讨MTA1和XIAP蛋白表达与前列腺癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用免疫组化技术检测53例前列腺癌(PCa)和20例前列腺增生(BPH)组织中MTA1和XIAP蛋白表达,并结合肿瘤的病理学行为和临床随访资料进行分析。结果:在PCa组织中MTA1和XIAP阳性表达率分别为81.1%、75.5%,均显著高于BPH组织(P<0.05)。MTA1和XIAP表达与肿瘤分化程度、周围淋巴结转移、远处转移、预后密切相关(P<0.05)。MTA1和XIAP蛋白表达呈显著正相关(r=0.369,P=0.004)。结论:MTA1和XIAP蛋白表达与PCa发生、转移和患者生存期密切相关,联合检测可以对PCa的发生、发展、预后及药物治疗提供重要依据。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 癌 基因 MTA1 xiap 免疫组织化学

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儿童噬血细胞性淋巴组织细胞增生症XIAP基因突变筛查 被引量：1

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作者 欧丹艳 罗建明 袁媛 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期255-258,共4页

目的了解X连锁凋亡抑制因子（XIAP）基因突变和序列变异在儿童噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（HLH）中的发生情况。方法应用聚合酶链反应（PCR）结合直接测序方法，对2009年1月至2012年12月诊断为HLH的65例患儿（病例组）及70例健康儿... 目的了解X连锁凋亡抑制因子（XIAP）基因突变和序列变异在儿童噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（HLH）中的发生情况。方法应用聚合酶链反应（PCR）结合直接测序方法，对2009年1月至2012年12月诊断为HLH的65例患儿（病例组）及70例健康儿童（对照组）XIAP基因外显子（1-1、1．2、2-6）编码区进行序列分析。结果在HLH患儿XIAP基因外显子编码区未发现突变；仅在XIAP外显子5发现1个非同义单核苷酸多态性（SNP）位点rs5956583，但此SNP位点的基因型和等位基因频率在病例组和对照组之间的分布差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论由XIAP基因突变导致的儿童HLH可能比较罕见；XIAP基因SNP位点rs5956583可能与儿童HLH发病关系不大。 展开更多

关键词 噬血细胞性淋巴组织细胞增生症 xiap基因 基因突变 儿童

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人XIAP基因多克隆抗体的快速制备方法研究 被引量：1

14

作者 张婷婷 周光现 +1 位作者 王昕 张智英 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第9期7-12,共6页

【目的】探索快速制备高品质X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)多克隆抗体的方法,为研究XIAP基因的功能及XIAP蛋白在肿瘤组织中的表达量检测提供参考。【方法】通过RT-PCR方法获得人XIAP基因的CDs区序列,与pET151/D-TOPO载体连接,构建XIAP基因的... 【目的】探索快速制备高品质X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)多克隆抗体的方法,为研究XIAP基因的功能及XIAP蛋白在肿瘤组织中的表达量检测提供参考。【方法】通过RT-PCR方法获得人XIAP基因的CDs区序列,与pET151/D-TOPO载体连接,构建XIAP基因的原核表达载体;考察细胞密度(OD600)、IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对XIAP重组蛋白表达量的影响,以确定XIAP重组蛋白的最佳诱导条件,并用Ni-NTA亲和层析柱法纯化XIAP重组蛋白;用纯化的XIAP重组蛋白对2只成年新西兰白兔进行常规免疫后,再对其中1只进行耳静脉注射加强免疫,连续3d,每天免疫1次,用ELISA检测抗体效价,Western blot检测抗体特异性。【结果】①通过RT-PCR方法获得人XIAP基因的CDs区序列,与pET151/D-TOPO载体连接,构建XIAP基因的原核表达载体,测序后,与GenBank中序列的的相似度为97%。②XIAP重组蛋白的最佳诱导条件为:温度30℃,初始诱导细胞密度(OD600)为0.6,IPTG浓度0.5mmol/L,诱导时间4h。在此条件下,XIAP重组蛋白多以包涵体的形式存在于细胞沉淀中。③利用Ni-NTA亲和层析柱法,在pH为5.9和4.5的洗脱液中均可获得质量浓度为600μg/mL的XIAP重组蛋白。④耳静脉连续加强免疫是刺激动物机体快速产生抗体的有效方法(31d)。ELISA和Western blot检测结果表明,耳静脉连续加强免疫产生的XIAP抗体的效价和特异性均明显高于常规免疫所产生的抗体。【结论】耳静脉连续加强免疫能够显著提高XIAP抗体的效价,且能有效缩短多克隆抗体的制备时间。 展开更多

关键词 重组蛋白表达 多克隆抗体 xiap基因 耳静脉连续加强免疫

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动脉栓塞化疗宫颈癌患者近期疗效差异的HSPA1A基因多态性及影响因素分析

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作者 刘俊晓 张沛 +1 位作者 王孟丽 岳青芬 《临床医学研究与实践》 2021年第27期11-13,72,共4页

目的探讨动脉栓塞化疗宫颈癌患者近期疗效差异的HSPA1A基因多态性及影响因素。方法随机选取187例宫颈癌患者(Ⅰb~Ⅲb期)作为宫颈癌组,再根据化疗效果分为疗效好组(n=142)和疗效差组(n=45);随机选取同时期体检正常的女性106例作为对照组... 目的探讨动脉栓塞化疗宫颈癌患者近期疗效差异的HSPA1A基因多态性及影响因素。方法随机选取187例宫颈癌患者(Ⅰb~Ⅲb期)作为宫颈癌组,再根据化疗效果分为疗效好组(n=142)和疗效差组(n=45);随机选取同时期体检正常的女性106例作为对照组。采用TaqMan探针基因分型法研究HSPA1A基因SNP位点rs1008438(G>T)的等位基因、基因型的分布频率;采用荧光定量PCR法检测XIAP和Smac基因的相对表达量。结果rs1008438位点等位基因G和T在疗效好组和对照组、疗效好组和疗效差组中的分布频率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。动脉栓塞化疗后,疗效好组XIAP基因的相对表达量降低,凋亡细胞数增加(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,患者动脉栓塞化疗前的XIAP基因表达量、凋亡细胞数、宫颈病灶大小评分、宫旁受侵质地评分及总分与化疗后疗效差异相关(P<0.05)。结论针对宫颈癌化疗疗效差的患者,要综合考虑宫颈局部病灶和宫旁受侵组织的情况,进一步改进治疗方案。 展开更多

关键词 动脉栓塞化疗 宫颈癌 近期疗效 HSPA1A基因 xiap基因

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消瘤1号通过影响XIAP表达诱导MCF-7人乳腺癌细胞凋亡

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作者 秦宗玲 王旭慧 袁易 《中南药学》 CAS 2017年第1期36-38,共3页

目的探讨中成药消瘤1号诱导MCF-7人乳腺癌细胞的凋亡作用,并通过分析其作用后的MCF-7细胞XIAP蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法采用细胞培养技术,用不同浓度药物处理MCF-7细胞24、48、72 h,用CCK-8法检测药物对... 目的探讨中成药消瘤1号诱导MCF-7人乳腺癌细胞的凋亡作用,并通过分析其作用后的MCF-7细胞XIAP蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法采用细胞培养技术,用不同浓度药物处理MCF-7细胞24、48、72 h,用CCK-8法检测药物对细胞增殖的影响;用HE染色细胞,观察细胞形态变化;采用Western blot法检测XIAP和caspase-3表达。结果消瘤1号处理MCF-7细胞24 h,随着药物浓度增加,作用时间延长,细胞增殖速度减慢;细胞经染色后,与对照组相比,经药物处理后的细胞核出现皱缩,细胞膜褶皱、卷曲和破碎,提示凋亡细胞的增多。Western blot检测结果表明,消瘤1号通过下调XIAP,上调caspase-3蛋白表达诱导乳腺癌细胞的凋亡,并且呈浓度依赖性。结论消瘤1号能够通过XIAP直接抑制凋亡效应分子caspase-3的活性,促进MCF-7细胞凋亡,抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 消瘤1号 MCF-7细胞 细胞凋亡 基因xiap CASPASE-3蛋白

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凋亡抑制基因XIAP在前列腺癌细胞中的表达及与临床病理特征的关系 被引量：5

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作者 刘建河 李鸣 夏术阶 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第11期832-835,共4页

目的 :研究XIAP基因在前列腺癌细胞系和前列腺癌组织的表达情况 ,及其与前列腺癌临床病理特征的关系。　方法 :应用RT PCR检测前列腺癌组织、正常前列腺组织和前列腺癌细胞株PC 3,DU 14 5 ,LNCaP细胞XIAP基因的表达 ,并通过免疫组化SP... 目的 :研究XIAP基因在前列腺癌细胞系和前列腺癌组织的表达情况 ,及其与前列腺癌临床病理特征的关系。　方法 :应用RT PCR检测前列腺癌组织、正常前列腺组织和前列腺癌细胞株PC 3,DU 14 5 ,LNCaP细胞XIAP基因的表达 ,并通过免疫组化SP法检测 5 6例前列腺癌组织标本XIAP蛋白的表达情况。　结果 :XIAP基因在前列腺癌组织和前列腺癌细胞株PC 3,DU 14 5 ,LNCaP细胞高表达 ,正常前列腺组织无表达。在前列腺癌组织和癌旁组织中 ,XIAP蛋白阳性检出率分别为 5 3.6 % (30 / 5 6 )和 2 1.5 % (12 / 5 6 ) (P <0 .0 1) ;不同分期、分级组XIAP阳性检出率相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。　结论 :凋亡抑制基因XIAP与前列腺癌相关 ,在前列腺癌发生过程中具有重要的作用 ,有可能成为前列腺癌治疗的靶标。 展开更多

关键词 前列腺癌 xiap基因 凋亡抑制基因

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X-连锁凋亡抑制蛋白在鼻咽癌中的表达及其意义 被引量：4

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作者 夏春波 蒋常文 +3 位作者 周思 刘源劼 兰羚元 张幸 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第17期2646-2649,共4页

目的探讨X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达在鼻咽癌发生发展过程中的作用,以及XIAP表达与鼻咽癌分化程度和淋巴转移的关系。方法应用RT-PCR法检测45例鼻咽癌组织、17例正常鼻咽组织和鼻咽癌细胞株5-8F、CNE-2中XIAP mRNA的表达,并通过免疫... 目的探讨X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达在鼻咽癌发生发展过程中的作用,以及XIAP表达与鼻咽癌分化程度和淋巴转移的关系。方法应用RT-PCR法检测45例鼻咽癌组织、17例正常鼻咽组织和鼻咽癌细胞株5-8F、CNE-2中XIAP mRNA的表达,并通过免疫组化SP法检测鼻咽癌组织及癌旁组织XIAP蛋白的表达情况。结果 XIAP mRNA在5-8F、CNE-2和鼻咽癌组织中呈高表达,正常鼻咽组织不表达或低表达;鼻咽癌组织和正常鼻咽组织XIAP mRNA阳性检出率分别为86.67%(39/45)和35.29%(6/17)(P<0.01);在鼻咽癌组织和癌旁组织中,XIAP蛋白阳性检出率分别为82.22%(37/45)和24.44%(11/45)(P<0.01);鼻咽癌组织XIAP蛋白表达与肿瘤分级和淋巴转移无关(P>0.05)。结论 XIAP在鼻咽癌中高表达,可能在鼻咽癌发生过程中具有重要的作用。 展开更多

关键词 鼻咽癌 xiap基因 凋亡抑制基因

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莪术油对鼻咽癌细胞X-连锁凋亡抑制蛋白mRNA表达的影响 被引量：3

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作者 夏春波 蒋常文 +3 位作者 秦小云 郑楚 门楠 孙婧霞 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2011年第5期204-206,共3页

目的:研究莪术油对鼻咽癌细胞X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)mRNA表达的影响及其作用机制。方法:体外培养鼻咽癌CNE-2细胞,MTT(噻唑蓝)法观察莪术油(400,300,200,100 mg·L-1)对CNE-2细胞的抑... 目的:研究莪术油对鼻咽癌细胞X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)mRNA表达的影响及其作用机制。方法:体外培养鼻咽癌CNE-2细胞,MTT(噻唑蓝)法观察莪术油(400,300,200,100 mg·L-1)对CNE-2细胞的抑制作用,RT-PCR法检测莪术油对CNE-2细胞XIAPmRNA表达的影响。结果:MTT法结果显示,莪术油对CNE-2细胞的抑制率呈时间-剂量依赖性(P<0.01)。与对照组相比,莪术油139.41 mg·L-1组XIAPmRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论:莪术油能明显抑制鼻咽癌CNE-2细胞生长,其机制可能是通过抑制XIAP基因的表达。 展开更多

关键词 莪术油 鼻咽癌细胞 xiap基因 凋亡抑制基因

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XIAP修饰的脂肪间充质干细胞在心肌梗死治疗中的作用 被引量：4

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作者 李博 陈庆良 +2 位作者 陈晓波 赵鸿铭 刘建实 《中华胸心血管外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第2期91-95,共5页

目的探讨XIAP修饰的脂肪间充质干细胞（ADMSCs）是否具有更强的活力，能否更好地恢复心功能，及基因修饰干细胞治疗模式的可行性。方法10周的雄性SD大鼠，体质量200—300g，取其腹股沟处脂肪组织，提取脂肪间充质干细胞行体外培养扩增... 目的探讨XIAP修饰的脂肪间充质干细胞（ADMSCs）是否具有更强的活力，能否更好地恢复心功能，及基因修饰干细胞治疗模式的可行性。方法10周的雄性SD大鼠，体质量200—300g，取其腹股沟处脂肪组织，提取脂肪间充质干细胞行体外培养扩增。应用电转染的方法将XIAP表达质粒导入脂肪干细胞内，进行基因修饰。另取61只sD大鼠，年龄和体质量同前，顺序编号，按照随机数字表法完全随机分为对照组（18只）、ADMSCs组（18只）、XIAP修饰ADMSCs组（18只）和未处理组（7只）。结扎大鼠冠状动脉左前降支，选取梗死中央及边缘区共5个注射点，按分组每点注射生理盐水、ADMSCs悬液或经XIAP修饰的ADMSCs悬液或不做任何处理。结果注射4周后，同对照组相比，ADMSCs组的左心室射血分数明显改善[（0．57±0．05）对（0．53±0．03），P〈0．05]，心肌梗死面积百分比显著减小[（5．17±2．03）对（10．62±3．50），P〈0．05]；与ADMSCs组相比，XIAP修饰的ADMSCs对心肌梗死的治疗作用更为明显，射血分数0．64±0．03，心肌梗死面积百分比3．26±0．95，P〈0．05。结论ADMSCs能有效恢复梗死后心功能；XIAP修饰的ADMSCs在移植区的生存效率更高，能更好的恢复心功能。 展开更多

关键词 干细胞 心肌梗死 干细胞移植 xiap抗凋亡蛋白 基因修饰

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