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c-Myc调控PIK3R3抑制黑色素瘤B16-F10细胞的迁移和侵袭 被引量:6
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作者 杨镓宁 邓菲 潘宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期66-71,共6页
目的:探讨c-Myc调控PIK3R3对黑色素瘤B16-F10细胞的迁移和侵袭的影响。方法:运用免疫组化检测PIK3R3在正常皮肤组织和黑色素瘤组织的表达;检测慢病毒(LV3-c-Myc和LV3-PIK3R3)对c-Myc和PIK3R3基因的沉默效率;使用Ed U增殖实验检测沉默c-... 目的:探讨c-Myc调控PIK3R3对黑色素瘤B16-F10细胞的迁移和侵袭的影响。方法:运用免疫组化检测PIK3R3在正常皮肤组织和黑色素瘤组织的表达;检测慢病毒(LV3-c-Myc和LV3-PIK3R3)对c-Myc和PIK3R3基因的沉默效率;使用Ed U增殖实验检测沉默c-Myc和PIK3R3后黑色素瘤细胞株B16-F10的增殖情况;Transwell侵袭实验检测c-Myc和PIK3R3的表达对黑色素瘤细胞B16-F10的侵袭能力的影响;划痕实验检测c-Myc和PIK3R3的表达对黑色素瘤细胞B16-F10迁移能力的影响;q PCR检测沉默c-Myc和PIK3R3后miR-199a的表达;q PCR检测转染miR-199a mimics和miR-199a inhibitor后c-Myc和PIK3R3的表达;双荧光素酶报告基因系统检测miR-199a对c-Myc和PIK3R3转录活性的影响。结果:和正常皮肤组织比较,PIK3R3在黑色素瘤组织中表达明显增加;沉默c-Myc和PIK3R3基因后,黑色素瘤细胞株B16-F10的增殖、侵袭和转移能力明显降低;沉默c-Myc和PIK3R3基因后,miR-199a表达上调;转染miR-199a mimics后,c-Myc和PIK3R3表达降低;转染miR-199a inhibitor后,c-Myc和PIK3R3表达上调;双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-199a可以直接调控c-Myc和PIK3R3的转录活性。结论:c-Myc可以通过miR-199a调控PIK3R3的表达,从而促进黑色素瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 miR-199a C-MYC 黑色素瘤 WESTERN BLOT TRANSWELL 划痕实验 PIK3R3
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化合物ZWF对A549细胞迁移、细胞周期和凋亡的作用 被引量:6
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作者 江育莹 包旭 +2 位作者 李宏 胡楠 汪宏 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2020年第2期167-170,共4页
目的观察化合物ZWF对人肺癌A549细胞迁移、细胞周期和凋亡的影响。方法用不同浓度ZWF处理A549细胞,通过划痕实验检测细胞的体外迁移能力;采用流式细胞术观察其对细胞周期的影响,利用Hoechst33342荧光染色法和Annexin V/PI双染流式细胞... 目的观察化合物ZWF对人肺癌A549细胞迁移、细胞周期和凋亡的影响。方法用不同浓度ZWF处理A549细胞,通过划痕实验检测细胞的体外迁移能力;采用流式细胞术观察其对细胞周期的影响,利用Hoechst33342荧光染色法和Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 8~64 mg·L-1 ZWF的细胞迁移率均明显小于阴性组。1~12 mg·L-1的ZWF使G1期细胞比例均明显大于阴性组。阴性组细胞Hoechst33342荧光染色呈均匀浅蓝色荧光;ZWF8、16 mg·L-1组细胞核固缩,出现染色不均匀现象;32 mg·L-1组细胞核浓染更明显;64 mg·L-1组细胞大量破裂死亡,可初步判定ZWF能促细胞凋亡作用并呈剂量依耐性。ZWF在8~64 mg·L-1内,细胞凋亡比例均大于阴性组,且32、64 mg·L-1组存在显著性差异。结论 ZWF抗人肺癌A549细胞的作用可通过抑制细胞迁移、阻滞细胞分裂周期和诱导细胞凋亡等方式发生。 展开更多
关键词 ZWF A549细胞 细胞迁移 细胞周期 细胞凋亡 细胞划痕实验 Hoechst 33342染色 流式细胞术
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Lithium promotes proliferation and suppresses migration of Schwann cells 被引量:4
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作者 Xiao-Kun Gu Xin-Rui Li +1 位作者 Mei-Ling Lu Hui Xu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第10期1955-1961,共7页
Schwann cell proliferation,migration and remyelination of regenerating axons contribute to regeneration after peripheral nervous system injury.Lithium promotes remyelination by Schwann cells and improves peripheral ne... Schwann cell proliferation,migration and remyelination of regenerating axons contribute to regeneration after peripheral nervous system injury.Lithium promotes remyelination by Schwann cells and improves peripheral nerve regeneration.However,whether lithium modulates other phenotypes of Schwann cells,especially their proliferation and migration remains elusive.In the current study,primary Schwann cells from rat sciatic nerve stumps were cultured and exposed to 0,5,10,15,or 30 mM lithium chloride(LiCl)for 24 hours.The effects of LiCl on Schwann cell proliferation and migration were examined using the Cell Counting Kit-8,5-ethynyl-2′-deoxyuridine,Transwell and wound healing assays.Cell Counting Kit-8 and 5-ethynyl-2′-deoxyuridine assays showed that 5,10,15,and 30 mM LiCl significantly increased the viability and proliferation rate of Schwann cells.Transwell-based migration assays and wound healing assays showed that 10,15,and 30 mM LiCl suppressed the migratory ability of Schwann cells.Furthermore,the effects of LiCl on the proliferation and migration phenotypes of Schwann cells were mostly dose-dependent.These data indicate that lithium treatment significantly promotes the proliferation and inhibits the migratory ability of Schwann cells.This conclusion will inform strategies to promote the repair and regeneration of peripheral nerves.All of the animal experiments in this study were ethically approved by the Administration Committee of Experimental Animal Center of Nantong University,China(approval No.20170320-017)on March 2,2017. 展开更多
关键词 5-ethynyl-2′-deoxyuridine Cell Counting Kit-8 cell viability LITHIUM MIGRATION peripheral nerve PROLIFERATION regeneration Schwann cell wound healing assay
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白花香莲解毒方对于乙型肝炎细胞的抑制作用 被引量:4
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作者 林英辉 李明芬 +7 位作者 潘爱萍 杨磊 林洪升 李生 杨德芬 林智敏 陈松林 黄小琪 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期60-63,共4页
本研究旨在探讨白花香莲解毒方对于肝炎细胞的抑制作用。通过使用白花香莲解毒方对乙型肝炎细胞Hep G2.2.15进行干预,通过划痕实验和Transwell实验检测其迁移能力的变化,并在处理后24 h、72 h和120 h用RT-PCR法测定其细胞上清HBV DNA含... 本研究旨在探讨白花香莲解毒方对于肝炎细胞的抑制作用。通过使用白花香莲解毒方对乙型肝炎细胞Hep G2.2.15进行干预,通过划痕实验和Transwell实验检测其迁移能力的变化,并在处理后24 h、72 h和120 h用RT-PCR法测定其细胞上清HBV DNA含量,化学发光法检测乙肝表面抗原Hbs Ag含量。观察组的Hep G2.2.15细胞划痕愈合能力、侵袭能力均降低,差异具有统计学意义(p<0.05);HBV DNA拷贝数及Hbs Ag的分泌明显受到抑制,差异具有统计学意义(p<0.05)。由此说明,白花香莲解毒方对于乙型肝炎细胞具有较强的抑制作用。 展开更多
关键词 白花香莲解毒方 划痕实验 Transwell实验 抑制作用
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PRL-3和RhoC在A549细胞中的表达及意义 被引量:3
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作者 张平 张志培 +4 位作者 李香敏 雷杰 苏凯 李小飞 王小平 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第12期1160-1164,共5页
背景与目的在前期研究中,我们发现在非小细胞肺癌中PRL-3和RhoC的表达具有相关性,提示两者可能存在相互作用。本研究通过检测两者在A549细胞迁移中的作用以及是否存在相互作用,为进一步研究它们在肿瘤发生发展中的作用机理提供实验依据... 背景与目的在前期研究中,我们发现在非小细胞肺癌中PRL-3和RhoC的表达具有相关性,提示两者可能存在相互作用。本研究通过检测两者在A549细胞迁移中的作用以及是否存在相互作用,为进一步研究它们在肿瘤发生发展中的作用机理提供实验依据。方法应用PRL-3抗体、RhoC抗体分别阻断A549细胞中PRL-3和RhoC的功能,采用细胞划痕实验检测两者对其迁移能力的影响;应用RT-PCR检测PRL-3和RhoC表达的变化。结果 PRL-3和RhoC功能被阻断后,A549细胞迁移能力明显降低;阻断PRL-3的A549细胞中RhoC表达降低,然而阻断RhoC的A549细胞中PRL-3表达无明显改变。结论 PRL-3和RhoC可能具有促进A549细胞远处转移的功能;PRL-3可能具有上调RhoC表达的功能;PRL-3促进癌细胞远处转移的功能可能是通过RhoC及其下游因子实现的,而RhoC对PRL-3的表达可能无反馈性调节作用。 展开更多
关键词 PRL-3 细胞划痕实验 细胞培养
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Glabridin and Anti-Non-Muscle Myosin IIA Therapy Disrupts Non-Small Cell Lung Carcinoma Motility 被引量:1
6
作者 Marie Kelly-Worden Amy Troesch +2 位作者 Sarah Pruitt Ryan Rhodes Deavin Eviston 《Advances in Lung Cancer》 2021年第2期11-19,共9页
Lung cancer is the leading cause of cancer related death in the United States killing over 130,000 people each year. While a combination of chemo and radiation therapy may be effective, surgery is still required for m... Lung cancer is the leading cause of cancer related death in the United States killing over 130,000 people each year. While a combination of chemo and radiation therapy may be effective, surgery is still required for many patients. Without surgery, the disease may progress and lead to metastases. We sought to determine if treatment with anti-non-muscle myosin IIA antibody would inhibit movement of the cells in the presence and absence of glabridin (an isoflavonoid compound shown to inhibit cell migration by inhibiting myosin). We compared inhibition by glabridin to that of an anti-non-muscle myosin IIA antibody and a combination therapy of both at 12 and 24 hours post wound creation. Cells that took up the anti-non-muscle myosin IIA antibody were greatly inhibited in motility and exhibited no significant change in wound healing. Glabridin treatment resulted in a dramatic increase in wound size within 12 hours and regeneration within 24 hours. The greatest decrease in motility was observed in cells treated with the combination of both glabridin and anti-non-muscle myosin IIA antibody. By 24 hrs, cell migration had halted due to death of the cells resulting from this combination. Further testing needs to be done to determine a safe mode of delivery of the combination therapy to ensure only local distribution. Controlled release drug delivery depot systems have been used as a means to provide local release of drugs intra-tumorally or adjacent to the cancerous tissue after surgical resection and have great potential. 展开更多
关键词 Anti-Non-Muscle Myosin IIA Antibody Cell Migration GLABRIDIN Non-Small Cell Lung Carcinoma wound healing assay
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BCL2(Ala43Thr)多态对前列腺癌PC3细胞迁移的影响 被引量:2
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作者 蒋心 雷丹青 胡艳玲 《广西医科大学学报》 CAS 2015年第1期1-4,共4页
目的:研究BCL2(Ala43Thr)多态对前列腺癌PC3细胞迁移的影响。方法:选用前列腺癌PC3细胞作为目的细胞,实验分为4组:(1)空白对照组(CON):PC3细胞;(2)阴性对照组(NC):阴性对照病毒感染的PC3细胞组;(3)过表达野生型BCL2基因的PC3细胞组(OE-w... 目的:研究BCL2(Ala43Thr)多态对前列腺癌PC3细胞迁移的影响。方法:选用前列腺癌PC3细胞作为目的细胞,实验分为4组:(1)空白对照组(CON):PC3细胞;(2)阴性对照组(NC):阴性对照病毒感染的PC3细胞组;(3)过表达野生型BCL2基因的PC3细胞组(OE-wt);(4)过表达突变型BCL2基因的PC3细胞组(OE-mu)。通过构建载携带有BCL基因的质粒并转染PC3细胞以后进行细胞划痕实验,在6h和24h分别观察细胞形态学变化,测量每组细胞的迁移距离、计算迁移率,比较各组的迁移率。结果:(1)从形态学上观察,4个组的细胞生长良好,细胞形态没有区别。(2)细胞克隆形成率测定:CON组为30%,NC组为20%,OE-wt组为12%,OE-mu组为14%。(3)在6h时,OE-wt组、OE-mu组与CON组迁移率比较差异有统计学意义(P=0.004,P=0.005),但OE-wt组与OE-mu组相比差异无统计学意义(P>0.05)。24h划痕均愈合,迁移率为1。结论:BCL2(Ala43Thr)过表达的野生型和突变型均对前列腺癌PC3细胞的迁移均无影响。 展开更多
关键词 前列腺癌 BCL2(Ala43Thr) PC3 划痕实验
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不同孔径的纳米多孔氧化铝膜对细胞迁移的影响 被引量:2
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作者 安郁宽 闫鹏 徐艳岩 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第8期1084-1090,共7页
为了研究不同孔径的纳米多孔阳极氧化铝膜对细胞迁移的影响,采用扫描电镜和X射线能谱仪分别检测不同孔径纳米氧化铝膜微观结构与元素组成;将Hela细胞常规培养于激光共聚焦皿内,分为对照组、40~70 nm孔径组和200~300 nm孔径组三组,进行... 为了研究不同孔径的纳米多孔阳极氧化铝膜对细胞迁移的影响,采用扫描电镜和X射线能谱仪分别检测不同孔径纳米氧化铝膜微观结构与元素组成;将Hela细胞常规培养于激光共聚焦皿内,分为对照组、40~70 nm孔径组和200~300 nm孔径组三组,进行划痕实验;将皿放入活细胞工作站随机选取多个观测点,连续观测24 h;从迁移面积、边缘迁移距离和单细胞迁移速度等方面进行细胞迁移分析;用扫描电镜对细胞在两种膜上生长24 h后的情况进行观测。结果显示,40~70 nm孔径组与对照组相比可加快细胞迁移(P<0.05),200~300 nm孔径组与对照组相比可减缓细胞迁移(P<0.05)。该研究结果表明,纳米氧化铝膜的孔径不同对细胞迁移影响不同,这为临床研究中控制细胞行为材料的设计和研发提供了实验依据。 展开更多
关键词 纳米多孔阳极氧化铝膜 活细胞工作站 细胞迁移 划痕实验
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IL-6对肝癌细胞HepG_2浸润迁移能力的影响 被引量:2
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作者 邬善敏 卢超 袁方均 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2012年第7期594-596,共3页
目的观察肝癌细胞系HepG2自身分泌的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对其浸润迁移能力的影响。方法 RNA干扰技术沉默IL-6,同时设空白对照组(不加转染试剂)、正常对照组(转染空脂质体)、无义对照组(转染无义对照siRNA)、实验对照组(转... 目的观察肝癌细胞系HepG2自身分泌的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对其浸润迁移能力的影响。方法 RNA干扰技术沉默IL-6,同时设空白对照组(不加转染试剂)、正常对照组(转染空脂质体)、无义对照组(转染无义对照siRNA)、实验对照组(转染沉默IL-6的siRNA)。进行细胞划痕损伤实验检测细胞的迁移能力。结果 RT-PCR检测各组IL-6 mRNA的表达分别为100±7.87、303±19.95、160±10.95、23±7.02;IL-6在沉默组细胞的浸润迁移能力受到抑制,正常对照组(转染空脂质体)、无义对照组(转染无义对照siRNA)细胞的浸润迁移能力增强。结论 IL-6被沉默能抑制肝癌细胞系HepG2的迁移,肝癌细胞系HepG2IL-6表达增高能促进其自身发生迁移。 展开更多
关键词 白细胞介素-6 划痕实验 肝癌细胞 迁移
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塞来昔布抑制宫颈癌细胞株Hela体外迁移效应的研究
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作者 刘利波 程青 +1 位作者 唐忠志 陈书琴 《实用临床医药杂志》 CAS 2011年第19期114-116,共3页
目的观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布(Celecoxib)抑制宫颈癌细胞株Hela体外迁移的效应。方法选用宫颈癌细胞株Hela作为研究对象。选择适当浓度的Celecoxib,设置对照组(C)、药物组(D)、单纯照射组(R)和药物+照射组(R+D),细胞划痕试验观察H... 目的观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布(Celecoxib)抑制宫颈癌细胞株Hela体外迁移的效应。方法选用宫颈癌细胞株Hela作为研究对象。选择适当浓度的Celecoxib,设置对照组(C)、药物组(D)、单纯照射组(R)和药物+照射组(R+D),细胞划痕试验观察Hela细胞的体外迁移力,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2的含量。结果 D组较C组,D+R组较R组的细胞迁移力均明显下降,且随药物浓度增加,抑制细胞迁移力增强,R组较C组的细胞迁移力无明显改变;ELISA检测发现细胞培养上清液中MMP-2的含量D组较C组、R+D组较R组均明显下降(P<0.05),但R组与C组对细胞分泌MMP-2的抑制效应并无明显统计学差异。结论塞来昔布可能通过抑制宫颈癌细胞株Hela分泌MMP-2,从而抑制细胞体外迁移力。 展开更多
关键词 塞来昔布 划痕试验 MMP-2 宫颈癌细胞株HELA
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间质作用因子1通过正调控窖蛋白1抑制FBJ-S1-H的迁移性
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作者 黄澄澄 姜嘉慧 +1 位作者 吴英良 山形达也 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期976-984,共9页
目的证明间质作用因子(stromal interaction molecule1,Stim1)在FBJ诱导的小鼠骨肉瘤细胞中的抑癌作用。方法在Stim1高表达的FBJ-S1-H细胞采用Stim1以siRNA干扰技术得到Stim1沉默的几株S1-H单克隆细胞株,通过细胞行为学方法和RT-PCR技... 目的证明间质作用因子(stromal interaction molecule1,Stim1)在FBJ诱导的小鼠骨肉瘤细胞中的抑癌作用。方法在Stim1高表达的FBJ-S1-H细胞采用Stim1以siRNA干扰技术得到Stim1沉默的几株S1-H单克隆细胞株,通过细胞行为学方法和RT-PCR技术对其mRNA进行研究,通过明胶酶谱法对细胞基质金属酶活性进行研究。结果通过细胞行为学方法证明,Stim1的沉默提高了细胞的迁移性,通过对mRNA表达的研究发现,Stim1沉默引起了多种基因表达的变化,其中包括基质金属酶9(matrix mexalloprotelnase 9,MMP-9)的升高,窖蛋白(caveolinl,Cav1),甾醇调控因子Srebf1的降低等,提高单克隆细胞中的Cav1含量可以使细胞迁移性降低。结论实验结果证明在FBJ-S1-H细胞中,Stim1能够抑制细胞的移动性,沉默Stim1的表达能够提高细胞的迁移性。 展开更多
关键词 间质作用因子1 窖蛋白1 基质金属蛋白酶-9 甾醇调控因子1 伤痕愈合试验 肿瘤细胞的迁移性
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斑点型锌指结构蛋白在体外负性调控HepG2细胞的转移
12
作者 梁少华 王志强 纪丕友 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期304-309,共6页
目的探索斑点型锌指结构蛋白(SPOP)在体外对HepG2细胞迁移和侵袭的影响。方法利用质粒过表达和shRNA技术构建稳定过表达和敲低SPOP的稳定转染细胞,Western blotting检测SPOP过表达和敲低效果,然后利用体外Transwell实验检测SPOP对HepG2... 目的探索斑点型锌指结构蛋白(SPOP)在体外对HepG2细胞迁移和侵袭的影响。方法利用质粒过表达和shRNA技术构建稳定过表达和敲低SPOP的稳定转染细胞,Western blotting检测SPOP过表达和敲低效果,然后利用体外Transwell实验检测SPOP对HepG2细胞的迁移和侵袭能力的影响,最后利用划痕实验再次检测SPOP对HepG2细胞迁移能力的影响。结果稳定转染HepG2中SPOP过表达和敲低效果明显;Transwell实验结果显示,过表达SPOP后HepG2细胞的迁移和侵袭能力明显下降,敲低后其迁移和侵袭能力明显上升。划痕实验结果显示,SPOP对HepG2细胞的迁移能力影响与Transwell实验一致。结论 SPOP在体外可以负性调控HepG2细胞的转移能力。 展开更多
关键词 斑点型锌指结构蛋白 HEPG2细胞 转移 免疫印迹法 划痕实验
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TGF-β1对口腔癌相关成纤维细胞迁移特性的影响 被引量:6
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作者 孟文霞 刘传霞 +3 位作者 高庆红 李小玉 刘豫荣 周红梅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2013年第8期707-709,共3页
目的:采用细胞划痕实验,研究外源性TGF-β1(transforming growth factor beta)细胞因子对体外分离培养的原代癌相关成纤维细胞(CAFs)迁移特性的影响,探讨TGF-β1细胞因子对CAFs生物学性能的影响。方法:以口腔正常成纤维细胞(NFs)和未经... 目的:采用细胞划痕实验,研究外源性TGF-β1(transforming growth factor beta)细胞因子对体外分离培养的原代癌相关成纤维细胞(CAFs)迁移特性的影响,探讨TGF-β1细胞因子对CAFs生物学性能的影响。方法:以口腔正常成纤维细胞(NFs)和未经处理的CAFs细胞为对照组,采用细胞划痕实验观察一定浓度的TGF-β1在不同时间作用后对CAFs迁移特性的影响。结果:与NFs组和未处理组CAFs相比,10μg/L的TGF-β1在不同时间点能够明显促进CAFs的迁移。结论:TGF-β1细胞因子能够明显促进CAFs的迁移,对CAFs的生物学性能具有重要影响。 展开更多
关键词 癌相关成纤维细胞 细胞划痕实验 迁移 TGF-β1细胞因子
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过表达PKM2增加卵巢癌细胞的增殖和迁移 被引量:4
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作者 刘芳芳 曾丽 黄俏佳 《医学分子生物学杂志》 CAS 2018年第1期1-7,共7页
目的探究人M2型丙酮酸激酶(pyruvatekinasetypeM2,PKM2)对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移的影响。方法将PKM2cDNA以XhoI和NotI位点克隆入pLVX—Neo—IRES.ZsGreenlvector慢病毒载体中,得到的重组载体及空载体分别与慢病毒包装质粒psPAX... 目的探究人M2型丙酮酸激酶(pyruvatekinasetypeM2,PKM2)对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移的影响。方法将PKM2cDNA以XhoI和NotI位点克隆入pLVX—Neo—IRES.ZsGreenlvector慢病毒载体中,得到的重组载体及空载体分别与慢病毒包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染入293T包装细胞.以得到PKM2过表达的慢病毒表达载体;将其转导入SKOV3细胞后用G418筛选稳定转染的细胞,分别测定PKM2过表达前后SKOV3细胞的增殖和迁移的改变。结果测序鉴定表明PKM2重组慢病毒表达载体正确无误。Western印迹检测结果显示转导PKM2慢病毒表达载体可增加SKOV3细胞中PKM2的表达。MTT测定和细胞划痕实验结果表明过表达PKM2可增加SKOV3的增殖和迁移。结论PKM2过表达可增加卵巢癌SKOV3细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 PKM2慢病毒过表达载体 SKOV3卵巢癌细胞 MTY实验 细胞划痕实验
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没食子水提取物对人牙龈上皮角质形成细胞的体外影响 被引量:3
15
作者 徐娜 李恺 +2 位作者 高鹏 张若冰 艾林 《中国药业》 CAS 2022年第9期60-64,共5页
目的探讨没食子水提取物对脂多糖诱导的人牙龈上皮角质形成细胞(HGEK)的抗炎作用,以及对细胞组织伤口愈合作用的影响。方法选取中国人民解放军空军军医大学第九八六医院口腔科2020年6月至12月收治的10例牙冠延长术患者的健康牙龈,体外培... 目的探讨没食子水提取物对脂多糖诱导的人牙龈上皮角质形成细胞(HGEK)的抗炎作用,以及对细胞组织伤口愈合作用的影响。方法选取中国人民解放军空军军医大学第九八六医院口腔科2020年6月至12月收治的10例牙冠延长术患者的健康牙龈,体外培养HGEK细胞,使用第3~5代细胞。分为阴性对照组(A组,PBS),脂多糖组(B组,质量浓度为1μg/mL),低、中、高没食子水提取物组(分别为C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组,没食子酸质量浓度分别为1,5,10 mg/mL),氯己定组(D组,蒸馏水调整20%葡萄糖酸氯己定质量分数至0.2%)。采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法测定细胞活力;采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因和蛋白表达的水平;采用划痕愈合实验观察没食子水提取物对细胞迁移的影响;采用蛋白免疫印迹法测定核因子E2相关因子(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)基因和蛋白表达水平。两组间定量资料采用Bonferroni检验,多组间定量资料比较采用方差分析(ANOVA)。结果与A组比较,C_(2)组、C_(3)组细胞活力显著增强(P<0.05)。与B组比较,C_(2)组、C_(3)组IL-1β,IL-6,TNF-α基因和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),C_(3)组细胞迁移率显著增加(P<0.05);与A组比较,C_(3)组Nrf2和HO-1基因和蛋白的表达水平显著增强(P<0.05)。结论没食子水提取物可下调炎性细胞因子水平,减轻脂多糖诱导的HGEK的炎性反应,具有作为口服口腔抗炎药的可能性。 展开更多
关键词 没食子水提取物 人牙龈上皮角质形成细胞 脂多糖 炎性细胞因子 抗炎作用 作用机制 划痕伤口愈合实验
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