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温阳化浊通络方对系统性硬化病患者外周血Th17/Treg细胞平衡的影响 被引量：22
1
作者 卞华 袁敏 +4 位作者 郜中明 毕晓东 韩立 胡久略 毛秉豫 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期975-980,共6页
目的观察温阳化浊通络方对系统性硬化病(systemic scierosis,SSc)阳气亏虚、浊邪阻络证患者外周血辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)及其细胞因子IL-17、IL-10水平的影响。方法将82例SSc患... 目的观察温阳化浊通络方对系统性硬化病(systemic scierosis,SSc)阳气亏虚、浊邪阻络证患者外周血辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)及其细胞因子IL-17、IL-10水平的影响。方法将82例SSc患者按随机数字表分为西医组(对照组)和中西医结合组(治疗组),每组各41例。两组均予甲氨蝶呤片、泼尼松片口服治疗,治疗组加温阳化浊通络方口服,两组均连续治疗6个月。另选择70名健康志愿者作为健康对照组(健康组)。采用流式细胞术检测外周血Th17和Treg细胞数量,采取双抗体夹心E LISA法检测血清IL-17、IL-10、血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、Ⅲ型前胶原氨基端原肽(aminoterminal propeptide of typeⅢprocollagen,PⅢNP)、Ⅰ型胶原羧基交联末肽(cross-linked carboxyterminal telopeptide of typeⅠcollagen,ⅠCTP)水平,采用Pearson相关分析观察Th17/Treg与vWF、PⅢNP、ⅠCTP水平及皮肤积分、疾病活动指数相关性。结果 SSc患者外周血Th17比例、Th17/Treg及血清IL-17含量高于健康组,而Treg比例及血清IL-10含量低于健康组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。两组治疗后Th17比例、Th17/Treg、IL-17含量、vWF及PⅢNP水平均较治疗前降低(P<0.05,P<0.01),Treg比例、IL-10含量升高(P<0.05,P<0.01),治疗组ⅠCTP水平较治疗前升高(P<0.05)。除Th17比例外,治疗组各指标水平改善优于对照组(P<0.05,P<0.01)。SSc患者治疗前后Th17/Treg与vWF、PⅢNP水平及皮肤积分、疾病活动指数呈正相关性(P<0.01),与ⅠCTP水平无明显相关性(P>0.05)。结论温阳化浊通络方能够通过调节SSc患者外周血Th17/Treg细胞失衡、降低vWF和PⅢNP水平、升高ⅠCTP水平而发挥治疗作用。 展开更多
关键词 系统性硬化病 温阳化浊通络方 辅助性T细胞17 调节性T细胞
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温阳化浊通络方对系统性硬皮病成纤维细胞周期和增殖的影响 被引量：22
2
作者 卞华 范永升 +2 位作者 楼兰花 毛秉豫 石景洋 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期936-939,共4页
目的:运用血清药理学方法,探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤维细胞周期和增殖的影响。方法:通过SSc患者制备强的松、青霉胺及温阳化浊通络方含药血清,分别加入皮肤成纤维细胞培养体系中。培养48h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)... 目的:运用血清药理学方法,探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤维细胞周期和增殖的影响。方法:通过SSc患者制备强的松、青霉胺及温阳化浊通络方含药血清,分别加入皮肤成纤维细胞培养体系中。培养48h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别测定细胞增殖和细胞周期。结果:与对照组相比,不同浓度的西药组、中药组、中西医结合组含药血清均能明显抑制正常人和SSc皮损成纤维细胞的增殖(P<0.05或P<0.01)。与西药组相比,20%中西医结合组血清抑制作用更加明显(P<0.01)。不同浓度的中药组血清能显著提高SSc皮损成纤维细胞的G0-G1期细胞比例(P<0.01),降低S期细胞和G2-M期细胞比例(P<0.05或P<0.01)。结论:温阳化浊通络方通过抑制SSc皮损成纤维细胞进入细胞分裂周期,对其增殖具有明显的抑制作用。同时,温阳化浊通络方对体外培养的正常皮肤和SSc皮损成纤维细胞的干预作用不具有选择性。 展开更多
关键词 系统性硬皮病 温阳化浊通络方 成纤维细胞 增殖 细胞周期
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温阳化浊通络方含药血清对硬皮病成纤维细胞胶原分泌和TGF-β_1表达的影响 被引量：18
3
作者 吕芹 卞华 +2 位作者 陈志国 叶松山 韩迪 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2011年第16期184-187,共4页
目的:运用血清药理学方法,探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤维细胞胶原分泌和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法:对SSc患者分别采用强的松(每日20 mg)和青霉胺(每日0.25 g)(西药组),温阳化浊通络方每日1剂,分早晚2次... 目的:运用血清药理学方法,探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤维细胞胶原分泌和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法:对SSc患者分别采用强的松(每日20 mg)和青霉胺(每日0.25 g)(西药组),温阳化浊通络方每日1剂,分早晚2次服用(中药组),西药加中药(中西药结合组)治疗1个月后,制备含药血清,加入皮肤成纤维细胞培养体系中。培养72 h后,采用比色法和ELISA法分别测定成纤维细胞培养基中羟脯氨酸(Hyp)和TGF-β1含量。结果:与对照组相比,浓度为5%,10%,20%的西药组、中药组、中西药结合组含药血清均能明显抑制正常人和SSc皮肤成纤维细胞胶原分泌(P<0.05或P<0.01);与西药组相比,中西药结合组抑制作用更加明显(P<0.01)。浓度为5%,10%,20%的西药组、中药组、中西药结合组含药血清能显著抑制SSc皮肤成纤维细胞TGF-β1的表达(P<0.01),且中西药结合组比西药组的抑制作用更强(P<0.01)。同时,对照组SSc皮肤成纤维细胞培养基中胶原含量与TGF-β1呈直线正相关性(r=0.895,P<0.05)。结论:温阳化浊通络方能有效减少体外培养的SSc皮肤成纤维细胞胶原和TGF-β1的分泌,可能是其治疗SSc的药理作用机制之一。 展开更多
关键词 系统性硬皮病 温阳化浊通络方 成纤维细胞 胶原蛋白 转化生长因子Β1
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温阳化浊通络方含药血清对系统性硬化病皮肤成纤维细胞TGF-β_1/Smad信号通路的影响 被引量：15
4
作者 卞华 吕芹 +3 位作者 黄显章 胡久略 杨雷 毛秉豫 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1054-1059,共6页
目的探讨温阳化浊通络方含药血清对系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)皮肤成纤维细胞TGF-β_1/Srnad信号通路的影响。方法将36例SSc患者按随机数字表分为中药组、西药组和中西药纽,每组12例,中药组予口服温阳化浊通络方汤剂(每日1... 目的探讨温阳化浊通络方含药血清对系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)皮肤成纤维细胞TGF-β_1/Srnad信号通路的影响。方法将36例SSc患者按随机数字表分为中药组、西药组和中西药纽,每组12例,中药组予口服温阳化浊通络方汤剂(每日1剂),西药组予口服青霉胺片(每次0.125 g,每日2次)和醋酸泼尼松片(每次20 mg,每日1次),中西医组予口服青霉胺片、醋酸泼尼松片及温阳化浊通络方汤剂,治疗1个月制备含药血清;另取10例未治疗的SSc患者血清作为对照组。健康皮肤成纤维细胞来源于2例女性整形外科患者上臂外侧健康皮肤组织。各组血清分别加入SSc患者和健康皮肤成纤维细胞培养体系中。Western blot法测定皮肤成纤维细胞转化生长因子-β_1Ⅰ型受体(transforming growth factorβ_1 receptor typeⅠ,TGF-β_1 RⅠ)、TGF-β_1Ⅱ型受体(TGF-β_1 RⅡ)、p-Smad2/3及Smad7蛋白表达,RT-PCR法检测SSc皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原(Col-Ⅰ、Col-Ⅱ)mRNA的表达,E LISA法测定SSc皮肤成纤维细胞培养上清液中MMP-9及TIMP-1含量。结果与对照组比较,西药组、中药组和中西药组SSc患者和健康皮肤成纤维细胞TGF-β_1 RⅠ、p-Smad2/3蛋白水平降低,Smad7蛋白水平升高(P<0.05,P<0.01),同时中西药组TGF-β_1RⅡ蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);与西药组比较,中药组和中西药组TGF-β_1 RⅠ、p-Smad2/3表达降低,中西药组Smad7蛋白表达升高(P<0.01)。SSc患者皮肤成纤维细胞中,与对照组比较,西药组、中药组和中西药组Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01),且中西药组Col-ⅢmRNA表达水平明显低于西药组(P<0.01)。与对照组比较,西药组、中药组和中西药组MMP-9水平及MMP-g/TIMP-1比值明显升高(P<0.05,P<0.01),而中药组和中西药组TIMP-1表达水平降低(P<0.01);与西药组比较,中西药组MMP-g水平和MMP-9/TIMP-1比值升高,中药组和中西药组TIMP-1水平降低(均P<0.01)。结论温阳化浊通� 展开更多
关键词 系统性硬化病 温阳化浊通络方 含药血清 成纤维细胞 TGF-β_1/Smad信号通路
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温阳化浊通络方对系统性硬化病患者血清BAFF,PⅢ NP等指标的影响 被引量：7
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作者 卞华 郜中明 +4 位作者 韩立 毕晓东 马长新 山书玲 张霄 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第19期146-149,共4页
目的:观察温阳化浊通络方治疗系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)的临床疗效及其可能作用机制。方法:82例SSc患者随机分为两组,对照组(41例)予甲氨蝶呤、泼尼松口服治疗,治疗组(41例)予温阳化浊通络方联合甲氨蝶呤、泼尼松口服治疗,... 目的:观察温阳化浊通络方治疗系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)的临床疗效及其可能作用机制。方法:82例SSc患者随机分为两组,对照组(41例)予甲氨蝶呤、泼尼松口服治疗,治疗组(41例)予温阳化浊通络方联合甲氨蝶呤、泼尼松口服治疗,均连续6个月。分别采取酶联免疫吸附法和免疫散射比浊法检测血清B细胞激活因子(B-cell activating factor,BAFF),Ⅲ型前胶原氨基端原肽(aminoterminal propeptide of typeⅢprocollagen,PⅢNP),Ig G和Ig M水平,同时观察皮肤积分和疾病活动指数等。结果:治疗组疗效优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后BAFF,Ig G,Ig M和PⅢNP水平均较治疗前明显降低(P<0.05,P<0.01),但治疗组对上述指标的改善优于对照组(P<0.05)。同时两组治疗后SSc患者皮肤积分、疾病活动指数亦较治疗前降低(P<0.05,P<0.01),且治疗组改善更明显(P<0.05)。SSc患者治疗前、后BAFF水平与皮肤积分,疾病活动指数,PⅢNP水平呈正相关性(P<0.01)。结论:温阳化浊通络方可以降低皮肤积分、疾病活动指数,改善临床症状,其机制可能与降低SSc患者血清BAFF水平,抑制免疫反应,减少PⅢNP含量有关。 展开更多
关键词 系统性硬化病 温阳化浊通络方 B细胞激活因子 Ⅲ型胶原氨基末端前肽
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温阳化浊通络方对硬皮病小鼠肺微血管损伤的影响
6
作者 陈爽 李凯 +4 位作者 卞博 郭克磊 卞华 刘畅 徐经纬 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1301-1305,共5页
目的研究温阳化浊通络方基于线粒体自噬对硬皮病小鼠肺微血管损伤的影响。方法将50只小鼠随机分为空白对照组(0.9%NaCl,灌胃)、对照组(0.9%NaCl,灌胃)、模型组(0.9%NaCl,灌胃)、温阳化浊通络方组(47 mg·kg^(-1)·d^(-1)温阳化... 目的研究温阳化浊通络方基于线粒体自噬对硬皮病小鼠肺微血管损伤的影响。方法将50只小鼠随机分为空白对照组(0.9%NaCl,灌胃)、对照组(0.9%NaCl,灌胃)、模型组(0.9%NaCl,灌胃)、温阳化浊通络方组(47 mg·kg^(-1)·d^(-1)温阳化浊通络方,灌胃)、阳性对照组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)KC7F2溶解于磷酸盐缓冲液,腹腔注射),持续给药4周。以免疫组化法检测肺组织线粒体外膜易位酶20(TOMM20)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、B细胞淋巴瘤-2/腺病毒E1B-19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)、PTEN诱导性肌酶蛋白1(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)的表达水平;以蛋白质印迹(Western blot,WB)法检测肺组织微血管内皮细胞线粒体自噬相关蛋白TOMM20、LC3B及HIF-1α/BNIP3/PINK1/Parkin通路蛋白表达水平。结果对照组、模型组、温阳化浊通络方组和阳性对照组小鼠肺组织微血管内皮细胞HIF-1α相对含量分别为0.17±0.02、0.98±0.01、0.66±0.03和0.48±0.01,BNIP3相对含量分别为0.40±0.02、0.74±0.01、0.56±0.01和0.60±0.02,PINK1相对含量分别为0.26±0.04、0.88±0.01、0.65±0.02和0.67±0.02,Parkin相对含量为分别为0.33±0.02、0.89±0.01、0.65±0.02和0.77±0.02,TOMM20相对含量分别为1.10±0.02、0.58±0.01、1.02±0.01和0.98±0.03,LC3B-Ⅰ/LC3B-Ⅱ相对含量分别为0.24±0.01、0.80±0.01、0.53±0.02和0.70±0.02。模型组中HIF-1α、BNIP3、PINK1、Parkin、LC3B-Ⅰ/LC3B-Ⅱ蛋白含量高于对照组,温阳化浊通络方可有效降低其含量;模型组中TOMM20含量低于对照组,温阳化浊通络方可有效提高其含量。结论温阳化浊通络方可能通过增加TOMM20和抑制LC3B及HIF-1α/BNIP3/PINK1/Parkin信号通路的蛋白表达,进而抑制线粒体自噬,改善SSc肺微血管损伤。 展开更多
关键词 温阳化浊通络方 硬皮病 线粒体自噬 缺氧诱导因子-1α B细胞淋巴瘤-2/腺病毒E1B-19 kDa相互作用蛋白3 PTEN诱导性肌酶蛋白1 E3泛素连接酶
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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨温阳化浊通络方干预系统性硬化病纤维化的作用机制 被引量：5
7
作者 王倩 丁生晨 +2 位作者 张超云 叶松山 卞华 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第2期234-237,共4页
目的:实验通过温阳化浊通络方含药血清处理皮肤成纤维细胞研究其抗纤维化机制,进而探讨其在治疗系统性硬化病纤维化的作用机制。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的温阳化浊通络方含药血清与人系统性硬化病皮肤成纤维细胞共同孵育,并... 目的:实验通过温阳化浊通络方含药血清处理皮肤成纤维细胞研究其抗纤维化机制,进而探讨其在治疗系统性硬化病纤维化的作用机制。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的温阳化浊通络方含药血清与人系统性硬化病皮肤成纤维细胞共同孵育,并与空白血清对照。研究温阳化浊通络方含药血清对体外皮肤成纤维细胞中Wnt/β-catenin信号通路及纤维化相关标志物的影响。结果:与空白血清组相比,温阳化浊通络方含药血清能够显著抑制β-catenin、c-myc、Fn1、Collagen I和CTGF的mRNA和蛋白表达水平,以及TOP/FOP flash双荧光素酶报告基因活性,并且随着温阳化浊通络方含药血清浓度的提高,其抑制作用增强。更加重要的是,温阳化浊通络方含药血清能够抑制β-catenin/TCF4转录调控复合物的形成,其抑制作用与温阳化浊通络方含药血清浓度呈正相关。结论:温阳化浊通络方含药血清对体外皮肤成纤维细胞中Wnt/β-catenin信号通路及纤维化相关标志物有明显的抑制作用,为温阳化浊通络方抗系统性硬化病纤维化提供了科学依据。 展开更多
关键词 温阳化浊通络方 皮肤成纤维细胞 系统性硬化病 WNT/Β-CATENIN信号通路
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